DOSAGE DES TRANSAMINASES ET DE LA GAMMA GT CHEZ LES PV/VIH SOUS TRAITEMENT AU CHD MONO COUFFO DE LOKOSSA

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REPUBLIQUE DU BENIN

MINISTERE DE L’ENSEIGNEMENT SUPERIEUR ET DE LA RECHERCHE SCIENTIFIQUE (MESRS)

UNIVERSITE D’ABOMEY-CALAVI (UAC) ECOLE POLYTECHNIQUE D’ABOMEY-CALAVI (EPAC)

DEPARTEMENT DE GENIE DE BIOLOGIE HUMAINE (GBH) Option : Analyses Biomédicales

POUR L’OBTENTION DU DIPLOME DE LICENCE PROFESSIONNELLE THEME

Lionel Francis Olatounde A. CHOGNIKA

Membre du jury :

Président : Dr. AGBANGNAN Pascal, Enseignant-chercheur à l’EPAC/UAC

Examinateur : Dr. TCHOGOU Pascal, Enseigneur-chercheur à l’ENSBBA/UNSTIM Superviseur : Prof. ANAGO Eugenie, Enseignant-chercheur à l’EPAC/UAC

Sous la direction de

Tuteur : superviseur : M. Ishola BELLO Prof. Eugénie ANAGO

Ingénieur des travaux en Analyse Enseignant de biochimie au département Biomédicales de GBH EPAC/UAC

ANNEE ACADEMIQUE 2017-2018 11^ème Promotion

RAPPORT DE STAGE DE FIN DE FORMATION DU PREMIER CYCLE

DOSAGE DES TRANSAMINASES ET DE LA GAMMA GT CHEZ LES PV/VIH SOUS TRAITEMENT AU CHD MONO COUFFO DE LOKOSSA

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Dosage des transaminases et de la gamma gt chez les PV/VIH sous traitement au CHD MONO COUFFO de LOKOSSA

REPUBLIQUE DU BENIN ********

MINISTERE DE L’ENSEIGNEMENT SUPERIEUR ET DE LA RECHERCHE SCIENTIFIQUE

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UNIVERSITE D’ABOMEY-CALAVI

*******

ECOLE POLYTECHNIQUE D’ABOMEY-CALAVI

DIRECTEUR :

Professeur Guy Alain ALITONOU

DIRECTEUR ADJOINT :

Professeur

François-Xavier FIFATIN

CHEF DE DEPARTEMENT : Professeur

Eugénie Anago

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Réalisé et présenté par Lionel Francis Olatounde Akandé CHOGNIKA ii

N° Noms et Prénoms Matières enseignées

1 ABLEY Sylvestre Déontologie médicale

2 ADOMOU Alain Physique

3 AGBANGLA Clément Génétique moléculaire

4 AGOSSOU Gilles Législation et droit du travail

5 AHOYO Théodora Angèle Microbiologie/ Santé Publique et Hygiène Hospitalière 6 AKAKPO B. Huguette Education physique et sportive

7 AKPOVI D. Casimir Biologie cellulaire/ Physiologie humaine/ Biochimie clinique 8 ALITONOU Alain Guy Chimie générale/ Chimie organique

9 ANAGO Eugénie Biochimie structurale / Biochimie clinique 10 ANAGONOU Sylvère Education physique et sportive

11 ATCHADE Pascal Parasitologie / Mycologie

12 BANKOLE Honoré Bactériologie / Virologie

13 DESSOUASSI Noel Biophysique

14 DOSSEVI Lordson Techniques instrumentales

15 DOSSOU Cyriaque Techniques d’Expression et Méthodes de communication 16 DOUGNON T. Victorien Microbiologie/ Méthodologie de la Recherche

17 HOUNNON Hyppolite Mathématiques

20 KOFFI Aristide Justin Anglais

18 KOUDANDE Marlène Hématologie générale

19 KOUNASSO Gabriel Informatique général

21 LOKOSSOU Gatien Immunologie générale/ Immuno-pathologie 22 LOZES Evelyne Immunologie générale/ Immuno-pathologie

23 MASLOKONON Vincent Histologie Générale

24 OGOUDIKPE Nicarette Informatique médicale

25 SECLONDE Hospice Transfusion sanguine

26 SEGBO Julien Biologie moléculaire/ Biochimie clinique 27 SENOU Maximin Histologie Générale/ Histologie appliquée

28 SOEDE Casimir Anglais

29 TOHOYESSOU Zoé Soins infirmiers

30 TOPANOU Adolphe Hématologie/ Hémostase

31 YOVO K.S. Paulin Pharmacologie/ Toxicologie

LISTE DES ENSEIGNANTS DU DEPARTEMENT DE GENIE DE BIOLOGIE HUMAINE

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DEDICACE

A mes parents qui œuvrent depuis ma naissance pour m’assurer un avenir certain ; voyez en ce travail la consécration de tous leurs efforts consentis à mon égard. Que Dieu vous bénisse à jamais et vous garde auprès de moi encore longtemps, chers parents.

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Réalisé et présenté par Lionel Francis Olatounde Akandé CHOGNIKA iv

❖ A DIEU tout puissant, père du cosmos, Merci pour tout !

❖ Au Prof Eugénie ANAGO, non seulement vous avez cru en moi en me confiant ce travail, mais aussi, vous l’avez dirigé malgré vos multiples occupations. Vos qualités humaines et scientifiques forcent mon admiration et resteront pour moi de précieux exemples.

❖ A mon père M. Jean CHOGNIKA, qui s’est toujours soucié de mon éducation et qui a énormément contribué à mon éducation morale : merci pour tout ton soutien moral, matériel et financier et trouve en ce travail, un hommage très mérité.

❖ A ma mère Mme Delphine KPHEHOUNTON, la femme à qui je dois tout l’appui financier, tout le courage et toute la force qu’a nécessité ce travail.

❖ A mes frères et sœurs, qui ont su me prodiguer les conseils qu’il fallait pour la réussite de mes études et de ce travail.

❖ A mon tuteur de stage, M. Bello ISHOLA pour avoir accepté m’encadrer durant cette étude, et pour vos conseils qui m’ont orienté dans le choix la méthodologie à adopter pour le bon déroulement de ce travail.

❖ A Mme Laetitia DOSSOU, pour vos conseils, et pour m’avoir orienté dans le choix de mon thème de recherche.

❖ A tout le personnel du laboratoire du CHD Mono Couffo de LOKOSSA, spécialement à M. Dagnon SOSSA et tous les biotechnologistes de la section Biochimie pour votre accueil et vos conseils.

❖ A tous les enseignants et encadreurs du département de Génie de Biologie Humaine, pour m’avoir transmis toutes ces connaissances m’ayant permis de réaliser de travail.

❖ A Tous ceux et toutes celles qui, de près ou de loin, ont contribué à la réalisation de ce travail !

❖ Soyez-en remerciés.

REMERCIEMENTS

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✓ A son Excellence Monsieur le Président du Jury

C’est un grand honneur que vous nous faites en acceptant de présider ce jury de soutenance.

Permettez-nous d’exprimer notre grande considération à votre endroit. Nous tiendrons compte de vos remarques pour améliorer la qualité de ce travail.

Respectueux hommages !

✓ Aux Honorables Membres du Jury

Pour avoir accepté de siéger dans ce jury et de juger ce rapport, hommages à vous. Nous serons ravis de recevoir vos critiques qui contribueront à parfaire la présentation de ce travail. Veuillez trouver ici, l’expression de notre profonde gratitude et de notre sincère considération.

HOMMAGES

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Réalisé et présenté par Lionel Francis Olatounde Akandé CHOGNIKA vi

ADN : Acide Désoxyribonucléique

AgHBs : Antigène de surface de l’Hépatite B ALAT : Alanine Amino-Transférase

ARN : Acide Ribonucléique ARV : Antirétroviraux

CHD/M-C : Centre Hospitalier Départemental du Mono-Couffo CiPEC : Centre intégré de Prise En Charge

CD : Class of Differenciation

EPAC : Ecole Polytechnique d’Abomey-Calavi GBH : Génie de Biologie Humaine

HCV : Hepatite C Virus (Hépatite C)

L : Litre

LDH : Lactate Déshydrogénase mg : Milligramme

OMD : Objectifs du Millénaire pour le Développement PV-VIH : Personnes Vivant avec le VIH

PCR : Polymerase Chain Reaction

PNLS : Programme National de Lutte contre le SIDA SIDA : Syndrome de l’Immunodéficience Acquise TAR : Traitement Anti Rétroviral

UI : Unité Internationale

VIH : Virus de l’Immunodéficience Humaine

LISTE DES SIGLES ET ABREVIATIONS

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Tableau I : Mode opératoire du dosage de l’ALAT Tableau II : Mode opératoire du dosage L’ASAT

Tableau III : Mode opératoire du dosage de la Gamma GT

Tableau IV : Répartition de l’ALAT en fonction de la durée du traitement Tableau V : Répartition de l’ASAT en fonction de la durée du traitement Tableau VI : Répartition des gamma GT en fonction de la durée du traitement

Tableau VII : Répartition de la population en fonction des cas d’activité enzymatique élevée LISTE DES TABLEAUX

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Réalisé et présenté par Lionel Francis Olatounde Akandé CHOGNIKA viii

Figure 1 : Structure schématique du VIH Figure 2 : Cycle de réplication du VIH

Figure 3 : Cycle de réplication du VIH et cibles des ARV Figure 4 : Répartition de la population suivant le sexe Figure 5 : Répartition de la population suivant l’âge.

Figure 6 : Répartition de la population suivant la nature du bilan.

LISTE DES FIGURES

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Le traitement antirétroviral est aujourd’hui le moyen le plus répandu de lutte contre le SIDA dont l’humanité dispose. Cependant, les combinaisons d’antirétroviraux ont des conséquences sur les organes vitaux des personnes vivant avec le VIH (PV-VIH) sous traitement antirétroviral. L’objectif général de ce travail est de montrer l’importance de la surveillance des fonctions hépatiques dans le suivi des PV-VIH sous traitement antirétroviral.

Une étude prospective, analytique et comparative a été réalisée du 23 Juillet au 14 Octobre 2018, au CHD MONO COUFFO de LOKOSSA portant sur une population incluant 32 sujets sous ARV (antirétroviraux) et 18 en phase pré thérapeutique. Le matériel biologique utiliser est le sang prélevé par ponction veineuse et les paramètres à évaluer sont la Gamma GT et les transaminases. La population d’étude est majoritairement composée de sujet de sexe féminin (soit 60%). Les PV-VIH déjà sous traitement antirétroviral représentaient 90% des sujets contre 10% en phase pré-thérapeutique. Notre population d’étude à un âge moyen de 49,12 ± 13,6 ans et est constitué majoritairement de sexe féminin (60%). Les PV-VIH déjà sous traitement antirétroviral au moment de l’étude étaient plus nombreux que ceux en phase pré-thérapeutique.

Pour le cas de l’ALAT, 16 sujets présentaient une hypertransaminasemie, dont 06 en phase pré- thérapeutique, 02 sous traitement depuis moins de 02 ans et 08 sous traitement depuis plus de 02 ans. Douze avait une activité d’ASAT supérieur à la normal. Au nombre de ces 12 sujets, 04 étaient sous traitement depuis moins de 02 ans et 08 sont sous traitement depuis plus de 02 ans.

Concernant le cas de la GAMMA GT, 25 sujets présentaient un taux de Gamma GT élevé. Au nombre de ces 25 sujets, 5 sont en phase pré-thérapeutiques, 08 sont sous traitements depuis moins de 2 ans et 12 depuis plus de 2 ans. Les ARV sont associés à une élévation significative de l’activité de des transaminases ainsi qu’à celui des GAMMA GT.

Mots clés : PV-VIH, traitement antirétroviral, ALAT, ASAT, GAMMA GT RESUME

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Réalisé et présenté par Lionel Francis Olatounde Akandé CHOGNIKA x

Antiretroviral treatment is today the most widespread means of fighting AIDS that humanity has. However, combinations of antiretrovirals have consequences for the vital organs of people living with HIV (HIV-VV) on antiretroviral therapy. The overall goal of this work is to demonstrate the importance of liver function monitoring in the monitoring of HIV-VVs on antiretroviral therapy. A prospective, analytical and comparative study was conducted from 23 July to 14 October 2018, at the CHD MONO COUFFO of LOKOSSA concerning a population including 32 subjects on ARVs (antiretrovirals) and 18 in the pre-therapeutic phase. The biological material to be used is the blood collected by venipuncture and the parameters to be evaluated are Gamma GT and transaminases. The study population is mainly made up of female subjects (60%). PV-HIV already on antiretroviral treatment accounted for 90% of the subjects against 10% in the pre-treatment phase. Our study population at an average age of 49.12 ± 13.6 years and is predominantly female (60%). HIV-infected persons who were already on antiretroviral treatment at the time of the study were more numerous than those in the pre- treatment phase. In the case of ALAT, 16 subjects had hypertransaminasemia, including 06 in the pre-therapeutic phase, 02 under treatment for less than 02 years and 08 under treatment for more than 02 years. Twelve had a higher ASAT activity than normal. Of these 12 subjects, 04 had been on treatment for less than 02 years and 08 had been on treatment for more than 02 years. In the case of the GAMMA GT, 25 subjects had a high level of Gamma GT. Of these 25 subjects, 5 are in the pre-therapeutic phase, 08 have been on treatment for less than 2 years and 12 for more than 2 years. ARVs are associated with significant elevation of transaminase activity as well as that of GAMMA GT.

Key words: PV-HIV, antiretroviral therapy, ALAT, ASAT, GAMMA GT ABSTRACT

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INTRODUCTION

1. Généralités

2. Cadre, matériel et méthodes

3. Résultats et discussion

CONCLUSION

SOMMAIRE

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Le Syndrome d’Immunodéficience Acquise, est causé par un virus désigné VIH (Virus de l’Immunodéficience Humaine). Cette infection a atteint des proportions épidémiques partout dans le monde. En effet, l'Organisation Mondiale de la Santé (OMS) estime à 35 millions le nombre de décès causés par ce virus dans le monde entier depuis sa découverte (OMS, 2017).

Les chiffres français 2017 du VIH, annoncés par Santé publique France, sont inquiétant : En 2016, 6003 personnes ont découvert leur séropositivité. Selon l’OMS en 2017, 21,7 millions de personnes vivant avec le VIH étaient sous traitement antirétroviral, ce qui correspond à un taux de couverture mondiale des adultes et des enfants de 59% (OMS, 2017).

En outre, l’utilisation des antirétroviraux (ARV) chez les patients infectés par le VIH a profondément modifié le cours évolutif de cette maladie. Toutefois, ce traitement peut être à l’origine d’effets indésirables potentiellement grave. Malgré des médicaments antirétroviraux (ARV) toujours plus performants et des efforts notables en terme d'allégement thérapeutique, les effets secondaires liés aux ARV font toujours partie du quotidien des personnes vivant avec le VIH (PVVIH)( Marilou, 2016). . Grâce au traitement antirétroviral (TAR), les PV- VIH ont une qualité de vie et une espérance de vie bien meilleures. Le développement de la résistance virale aux ARV entraine l’inefficacité de la monothérapie antirétrovirale pour contrôler la maladie et induire une amélioration durable du statut immunitaire des malades et donc de leur état de santé. En effet, des études cliniques (essais thérapeutiques) ont montré qu'une efficacité durable et majeure ne pouvait être obtenue que par l'association d'au moins trois antirétroviraux (Germanaud, 2009). Ceci a conduit à l’instauration de la trithérapie antirétrovirale qui a entraîné des changements importants dans l'épidémiologie de l’infection à VIH.

Cependant, l’utilisation des antirétroviraux n’a pas que des effets positifs pour les personnes sous traitement ; elle provoque souvent des effets indésirables chez les patients.

Malgré l'utilisation répandue de la thérapie antirétrovirale, l'infection au VIH reste associée à un risque accru d’affections du rein (Scherzer et al., 2012) liées soit au virus (maladie de HIVAN) soit à la toxicité de certains antirétroviraux dont le Ténofovir qui dans la littérature est associé à un dysfonctionnement rénal (Patel et al., 2010 ; Crum-Cianflone et al., 2010 ;

Réalisé et présenté par Lionel Francis Olatounde Akandé CHOGNIKA

INTRODUCTION

1

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Nishijima et al., 2011). De même, Depuis l’avènement des traitements ARV, l'insuffisance hépatique en phase terminale constitue une cause importante d'hospitalisation et de mortalité.

La principale cause d'hépatomégalie chez les personnes infectées par le VIH est l'hépatite virale chronique due au virus de l’hépatite B et/ou C. D'autres types de troubles hépatiques ont été observés chez ces personnes tels que les métastases hépatiques non liées au SIDA, la stéatose hépatique et les lésions hépatiques dues aux traitements ARV (Wilcox, 2008).

Nous nous sommes proposés de réaliser la présente étude intitulée : « Dosage des transaminases et de la Gamma GT chez les PV/VIH sous traitement au CHD Mono Couffo de Lokossa » dont l’objectif sera d’évaluer l’influence des antirétroviraux sur les valeurs de certains paramètres biochimiques tels que les transaminases et les gamma GT.

Spécifiquement, il s’agira de :

➢ Déterminer les différents taux de transaminases et de gamma GT chez les PV/VIH sous ARV et chez les PV/VIH en phase pré-thérapeutique ;

➢ Comparer les valeurs obtenues chez les PV/VIH sous ARV et chez les PV/VIH en phase pré-thérapeutique ;

➢ Etablir une relation entre l’utilisation des antirétroviraux et les paramètres hépatiques évalués.

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Réalisé et présenté par Lionel Francis Olatounde Akandé CHOGNIKA 3

SYNTHESE BIBLIOGRAPHIQUE

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1.1. Définition du virus

Un virus peut être défini par 3 caractères fondamentaux :

Un virus ne contient qu’un seul type d’acide nucléique : ADN ou ARN.

C’est un parasite obligatoire d’une cellule vivante

Une structure acellulaire : on parle de particule virale, qui est de petite taille (˂ 0,3 µm) (André, 1953)

Cette structure conditionne les propriétés biologiques et le pouvoir pathogène des virus.

Le VIH est un virus à ARN de la famille des Retroviridae, mesurant environ 0,1 µm et appartenant à l’espèce Oncornavirus lentivirus. Deux sérotypes sont actuellement connus :

VIH-1 de répartition mondiale,

VIH-2 surtout présent en Afrique de l’Ouest.

Les virus VIH-1 sont actuellement classés en trois groupes : le groupe M (responsable de la pandémie), le groupe O (outlier) et le groupe N (non-M non- O). Le groupe M est lui-même subdivisé en 9 sous-types (A, B, C, D, F, G, H, J, K) et il existe 37 formes recombinantes (CRF01 à CRF37). Le sous-type A comprend 4 subdivisions (A1, A2 et de découverte plus récente A3 et A4) et le sous-type F est subdivisé en 2 sous-sous-types F1 et F2. En ce qui concerne le VIH-2, sept sous-types ont été répertoriés à ce jour (de A à H), A et B représentant les sous-types majoritaires. (Martine, 2008)

1.2 Structure du virus

Le VIH est un virus sphérique constitué d'une enveloppe, d'une nucléocapside formée de protéines internes et contenant le génome viral (ARN) auquel sont associées des enzymes virales.

L'enveloppe virale est formée d'une bicouche lipidique. Elle est hérissée de spicules formés

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trouve l'ARN viral diploïde associé à des enzymes virales : la transcriptase inverse, l'intégrase et la protéase (ONUSIDA, 2013).

Figure 1 : Structure schématique du VIH (ONUSIDA, 2013).

1.3. Le traitement antirétroviral

1.3.1 Mécanismes d’action des ARV(Antirétroviraux)

Le VIH est un virus à ARN qui pour se reproduire doit pénétrer dans une cellule CD4. Il y subit une série de transformation pour donner naissance à de nouveaux virus. Les ARV bloquent l’une des étapes du cycle de multiplication du VIH. Les principaux ARV utilisés aujourd’hui bloquent l’action de deux enzymes : la transcriptase inverse et la protéase virale. Des molécules capables de bloquer l’intégrase et l’entrée du virus dans les cellules CD4 (anti corécepteurs) sont aujourd’hui disponibles.

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Figure 3 : Cycle de réplication du VIH et cibles des ARV (Furtado M., 1999)

1.3.2. Les différentes classes d’antirétroviraux

Les antirétroviraux sont des molécules de synthèses de différentes natures chimiques regroupées en trois grandes classes selon leur mode d'action : deux classes d'inhibiteurs de la transcriptase inverse et une d'inhibiteurs de protéase.

1.4. La mesure des transaminases et des Gamma GT

Transaminases

Les transaminases sont des enzymes présentes à l'intérieur des cellules, particulièrement au niveau du foie et des muscles. Ce sont des bons marqueurs de certaines maladies du cœur et du foie, d'où l'importance de surveiller leur taux. Chez les personnes à risque de problèmes

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➢ Les transaminases ASAT (aspartate-aminotransférase ou SGOT, sérum glutamooxaloacétate transférase) qui se trouvent essentiellement dans les cellules des muscles striés (squelettique et cardiaque), les globules rouges et les cellules du foie.

Le taux de transaminases varie en fonction du sexe, de l'âge, de la température du corps et de l'indice de masse corporelle (IMC). Leur augmentation peut indiquer une inflammation du foie qui, dans certains cas, peut être liée à une hépatite, à la maladie du foie gras, ou encore à une cirrhose. Un infarctus du myocarde peut aussi entraîner des taux élevés de transaminases.

Le taux d'ALAT est considéré comme normal s'il se situe entre 8 et 35 unités internationales par litre de sang chez les hommes, entre 6 et 25 UI/L chez les femmes. Le taux d'ASAT doit osciller entre 8 et 30 UI/L chez les hommes, entre 6 et 25 UI/L chez les femmes.

Un dosage des transaminases peut être prescrit chez les PVVIH à risque de problèmes hépatiques ou en cas de suspicions de certaines maladies du foie ou du cœur.

Gamma GT

La gamma-GT (γ-GT ou gamma glutamyl-transpeptidase ou gamma glutamyl- transférase) est une enzyme qui existe au niveau de la membrane cellulaire de nombreux organes comme les reins ou le pancréas. Mais son activité dans le sang est essentiellement d’origine hépatique. Son taux augmente en cas de consommation excessive d’alcool par exemple. Son dosage permet aussi de détecter d’autres affections hépatobiliaires ou des tumeurs hépatiques (Annabelle Iglesias, 2017).

Pour un adulte, le taux de gamma-GT ne devrait pas dépasser 55 UI/L (unités internationales par litre). On considère ainsi que la valeur normale de la concentration en GGT doit être comprise entre : 15 et 55 UI/L pour un homme ; 10 et 40 UI/L pour une femme.

Un dosage de la GGT peut être prescrit chez les PVVIH à risque de problèmes hépatiques ou en cas de suspicions de certaines maladies du foie ou du cœur.

Il est nécessaire alors de doser ces paramètres pour suivre l’évolution de l’état du foie chez les personnes vivant avec le VIH.

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DEUXIEME PARTIE :

CADRE, MATERIEL ET METHODES

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2.1. Cadre d’étude

2.1.1. Cadre institutionnel

L’Ecole Polytechnique d’Abomey-Calavi qui, à l’origine était nommée Collège Polytechnique Universitaire (CPU), est créée en Février 1977 pour répondre à un besoin de formation technique au niveau de l’enseignement supérieur. Les domaines de compétences de l’EPAC sont répartis en deux (02) secteurs à travers onze (11) départements d’enseignement.

Le secteur industriel (SI) comporte cinq (06) départements qui sont le Génie Civil (GC), le Génie Electrique (GE), le Génie Informatique et Télécommunication (GIT), le Génie Mécanique et Energétique (GME), Génie de la Maintenance Biomédicale et Hospitalière (GMBH) et Génie Chimique-Procédés (GC-P). Le secteur biologique (SB) est divisé en cinq (05) départements à savoir le Génie de l’Imagerie Médicale et Radiologique (GIMR), le Génie de l’environnement (GEn), le Génie de la Technologie Alimentaire (GTA) le département de Production et Santé Animales (PSA) et le Génie de la Biologie Humaine (GBH) où se sont déroulées nos trois années de formation.

2.1.2. Cadre Technique

2.1.2.1 Brève historique du centre Hospitalier Départemental Mono- Couffo/Lokossa.

Crée en 1997, le centre est le fruit d’une coopération entre le Bénin et la Chine. Ce centre bénéficie depuis son ouverture d’une assistance particulière de la Mission Médicale Chinoise.

Le CHD/MC est dirigé dès sa création par un médecin et par la suite par des administrations depuis 1998.

2.1.2.1.1. Situation géographique

Situé dans la ville de Lokossa, plus précisément au quartier Guinkomè, deuxième rue à gauche en quittant la mairie vers l’Institut Universitaire de Technologie (IUT), le CHD MONO- COUFFO se situe entre la Direction Départementale des Enseignements Maternels et Primaires (DDEMP) et la Direction Départementale Habitat (DDH).

2.1.2.1.2. Organigramme

Il est formé de bâtiments entièrement construits et aménagés abritant tous les bureaux et services.

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Les services de soins

• Service d’Oto-rhino-laryngologie : Médecins Spécialistes, Technicien Supérieur ;

• Service d’Ophtalmologie : Médecin Spécialiste, Techniciens Supérieurs ;

• Service de Stomatologie : Médecins Spécialistes, Technicien Supérieur ;

• Service de Laboratoire : Techniciens ;

• *Biochimie-Bactériologie-Parasitologie-Hématologie-Sérologie

• Service de la Banque de Sang :

• Imagerie Médicale : Spécialistes ;

• Electrocardiogramme (ECG) : Médecin Spécialiste ;

• Service de médecine : Médecins Généralistes ;

• Service de Pédiatrie : Médecins Pédiatres et Médecin Généraliste ;

• Service de Maternité : Médecins Gynéco-Obstétriciens ;

• Service du Bloc-Opératoire : Chirurgiens, Traumatologue ; Instrumentistes ; Techniciens Supérieurs en Chirurgie, Anesthésistes ;

• Service des Urgences Chirurgicales : Chirurgiens, Médecins Généralistes, Urgentistes ;

• Service de Kinésithérapie : Techniciens Supérieurs en Kinésithérapie ;

• Service de Morgue.

Les services administratifs du CHD Mono/Couffo :

• La direction assurée par M. Oscar AMOUSSOU est composée de :

• Service des affaires administratives et économiques (SAAE) ;

• Service des affaires financières (SAF) ;

• Service du secrétariat administratif (SA) ;

• Service du Chef Personnel (CP) ;

• Service de la statistique ;

Les travailleurs en collaboration avec la Direction du CHD-Mono/Couffo assurent à la

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du CHD Mono-Couffo dans le premier couloir à gauche après la caisse principale de l’hôpital, qui se situe entre le service d’Imagerie Médicale et celle de l’ophtalmologie et fait dos au service de stérilisation. Il est dirigé par Monsieur SOSSA Dagnon qui coordonne la bonne marche des différentes activités déroulées dans le laboratoire avec ses collègues et un aide chargé de faire le nettoyage du service de laboratoire.

Le service de laboratoire du CHD MONO-COUFFO est constitué d’une salle d’accueil et de prélèvement ; d’une section d’Hématologie et de Parasitologie ; d’une section de Bactériologie ; d’une section de Sérologie et de Biochimie ; d’une salle de garde ; d’une laverie et d’une toilette. Toutes ces sections occupent chacune une salle. Pour le reste des examens sérologique, le CiPEC (Centre intégré de Prise En Charge) et la banque de sang disposent d’un laboratoire leur permettant de les effectuer. Chaque section du laboratoire est dirigée par un ingénieur des travaux qui est chargé de gérer le personnel et veiller à la bonne exécution de l’ensemble des prestations de la section. Au laboratoire du CHD la permanence est assurée du lundi au vendredi, de 8 heures à 16 heures et la garde de 16 heures au lendemain à 8 heures. Les jours fériés, les gardes se font de 8 heures au lendemain à 8 heures et seuls les prélèvements d’urgence venant des différents services sont analysés. Un technicien assure la garde par jour.

Les prélèvements se font tous les jours ouvrables de 8 heures à 10 heures et les analyses des échantillons commencent à partir de 10 heures. Les résultats sont disponibles à partir de 16 heures.

2.1.2.3. Les différents examens praticables dans le laboratoire

La bactériologie

Les examens qui se font dans cette section sont entre autres : Spermogramme ; Spermoculture ; Prélèvement vaginal ; PV+ATB ; Prélèvement urétral ; PU+ATB ; Examen cytobactériologique des pus ; ECB du PUS+ATB ; Examen Cytobactériologique des Urines (ECBU) ; ECBU+ Antibiogramme ; Examen cytobactériologique du liquide céphalorachidien.

La sérologie,

En sérologie les examens réalisés sont : CRP (protéine C réactive) Pour la recherche de la protéine C réactive, ASLO (Antistreptolysine O), HIV (virus de l’immunodéficience humaine) pour le diagnostic du Syndrome de l’Immunodéficience Acquise, etc.

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L’hématologie et la parasitologie

Dans cette section se font les examens suivants : Vitesse de sédimentation (VS), Temps de coagulation (TC), Temps de saignement (TS), Numération formule sanguine (NFS), Recherche d’Amibes Kystes Œufs de Parasites (AKOP), Frottis Sanguins, Gouttes Epaisses et Densité Parasitaire pour le diagnostic du paludisme.

La biochimie.

Les examens qui y sont effectués sont entre autres : Glycémie, Uricémie, Calcémie, Magnésémie, Urémie, Créatininémie, Transaminase (TGO et TGP), Triglycérides, Cholestérol HDL et Total, Protidémie, Bilirubine Conjuguée et Total, Ionogramme.

2.2. MATERIEL D’ETUDE 2.2.1. Matériel biologique

Le matériel biologique est constitué essentiellement de sang veineux prélevés dans des tubes secs stériles chez PV-VIH.

2.2.2. Equipements

Un spectrophotomètre LABIOQUICK (SINOMEDICA), un congélateur Haier.

2.2.3. Consommable

Le consommable utilisé regroupe les tubes secs stériles, aliquotes, portoirs, poubelles, cônes et micropipettes.

2.2.4. Réactif

Les réactifs de dosages utilisés sont essentiellement le kit pour le dosage de L’ALAT (BIOLABO), L’ASAT (BIOLABO) et le coffret pour le dosage du GAMMA GT (BIOLABO).

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ALAT

LHD

Il s’agit d’une étude prospective, transversale analytique et comparative qui s’est effectuée du 22 Juillet au 14 Octobre 2018.

2.3.2. Echantillonnage 2.3.2.1. Population d’étude

L’étude porte sur une population de 50 sujets séropositif incluant 32 sujets sous ARV (antirétroviraux) et 18 en phase pré thérapeutique retenus dans le centre hospitalier ou envoyées par le CiPEC.

2.3.2.2. Choix des sujets 2.3.2.2.1. Critères d’inclusion

Sont incluses dans cette étude les PV-VIH ayant un suivi régulier 2.3.2.2.2. Critères d’exclusion

Sont exclues de l’étude les PV-VIH déclarés positifs à d’autres tests sérologiques dont AgHBS, HCV, ou autres.

2.3.3. Phase pré-analytique

Les échantillons prélevés sur tube sec après enregistrement du patient (nom et prénom, sexe, âge et motif de l’analyse) sont centrifugés pendant 5 min à 3000 tours.

2.3.4 Phase analytique

Dosage de L’ALAT (Méthode cinétique) Principe

La détermination de l’activité enzymatique de l’ALAT est basée sur le principe suivant :

Alanine + α-cétoglutarate Pyruvate + Glutamate

Pyruvate + NADH + H+ Lactate + NAD+

(26)

ASAT

MDH

Ainsi, la densité optique lue au spectrophotomètre à 340 nm permet la détermination de la vitesse de disparition du NADH qui est proportionnelle à l’activité enzymatique de l’ALAT.

Tableau I : Mode opératoire du dosage de l’ALAT

Réactif Sérum contrôle Echantillons

Contrôle 1000 µL 100 µL

Dosage 1000 µL 100 µL

Mélanger et lire immédiatement (2 à 5 secondes) au spectrophotomètre à 505 nm.

Dosage de l’ASAT (Méthode cinétique) Principe

L'aspartate aminotransférase (ASAT) catalyse la transformation de l'aspartate en oxaloacétate. L'oxaloacétate formé est réduit en malate en présence d'une quantité connue de coenzyme NADH'H+ et du malate déshydrogénase (MDH). La cinétique de cette dernière réaction est déterminée par les mesures successives de l'absorbance du coenzyme NADH'H+ à 340 nm. De cette cinétique est déduite la concentration de l'aspartate aminotransférase (ASAT).

ASATAspartate + α-cetoglutarate Oxaloacétate + Glutamate

Oxaloacetate +NADH + H⁺ L-Malate+ NAD⁺

Tableau II : Mode opératoire du dosage de l’ASAT

Réactif Sérum contrôle Echantillons

(27)

Principe

GGT

L-G-Glutamyl-3-Carboxy-4-nitroanilid + glycylglycine L-G-Glutamyl-glycylglycine + p- nitroaniline

La vitesse de formation du p- nitroaniline, directement proportionnelle à l’activité GGT dans le spécimen, est mesurée à 405 nm

Tableau III : Mode opératoire du dosage du Gamma GT Ramener les rectifs et échantillons à température ambiante

Introduire dans une cuve thermostatée de 1 cm de trajet optique

Réactif 1 mL

Laisser la température s’équilibrer à 37°C (30°C) puis ajouter

Spécimen ou calibrant 50 µL

Mélanger. Après 30 s, lie l’absorbance à 405 nm toutes les minutes pendant 3 minutes.

Calculer la moyenne des variations d’absorbance par minute ∆Abs/min

2.3.5. Phase post-analytique

Une fois les analyses terminées, les différentes valeurs de contrôle prise ont été consignées dans le cahier de paillasses. Les réactifs sont aussi rangés, le matériel décontaminé et rangé, les gants retirés et mis dans la poubelle adéquate, les résultats enregistrés.

2.3.6. Analyses statistiques

Une base de données a été créée avec le logiciel EpiData, les tests statistiques ont été effectués avec les logiciels STATA 11. Le tableau Excel 2013 a servi aux calculs. Les différences et la corrélation sont jugées significatives à p< 0,05.

(28)

(29)

3. Résultats et discussion 3.1. Résultats

3.1.1 Caractéristiques sociodémographiques de la population d’étude.

Répartition de la population d’étude suivant le sexe

La population d’étude comprend 32 sujets sous ARV et 18 en phase pré thérapeutique ; ce qui correspond respectivement à 90% et 10%. La population d’étude est majoritairement composée de sujet de sexe féminin avec un pourcentage de 60%.

Figure 4 : Répartition de la population suivant le sexe.

3.1.2. Répartition de la population suivant l’âge

Figure 5 : Répartition de la population suivant l’âge.

40%

60%

(30)

L’âge moyen de la population d’étude est de 49,12 ± 13,6 ans. Notre population d’étude était dominée par les sujets de la tranche d’âge de 50 à 60 ans (26%). Les sujets âgés de 70 à 80 ans étaient les moins représentés. La moyenne d’âge chez les hommes est légèrement inférieure à celle chez les femmes : 48,53 ± 13,03 ans (chez les hommes) contre 49,75 ± 14,18 (chez les femmes).

3.1.3. Fréquence des troubles hépatiques au sein de la population d’étude.

Répartition de l’ALAT suivant la durée du traitement

Tableau IV : Répartition de l’ALAT en fonction de la durée du traitement

Durée de traitemen t (en année)

ALAT

Moyenne ± ecart type (UI/L)

Minimum (UI/L) Maximum

(UI/L) Sujets pré-

thérapeutique 0 34,90 ± 15,27 12,78 56,75

]0-1] 13,58 ± 3,67 9,18 19,4

Sujet sous ARV ]1-2] 24,36 ± 8,21 16,16 38,45

]2-3] 26,33 ± 5,42 20,88 36,52

]3-4] 45,84 ± 13,09 18,37 67,27

L’analyse de ce tableau nous montre que, chez les sujets sous ARV, au fur et à mesure que la durée de traitement augmente, l’activité de l’ALAT accroit (P < 0,0001). Cependant, jusqu’à trois ans de traitement, la valeur moyenne chez les sujets sous ARV est toujours inférieure à celle chez les sujets en phase pré thérapeutique.

(31)

Répartition de l’ASAT suivant la durée du traitement

Tableau V : Répartition de l’ASAT en fonction de la durée du traitement

Durée de traitement (en année)

ASAT

Moyenne ± ecart type

(UI/L) Minimum (UI/L) Maximum (UI/L)

Sujets pré-

thérapeutique 0 20,73 ± 7,86 8,87 40,54

]0-1] 35,69 ± 18,27 18,21 55,80

]1-2] 32,73 ± 8,77 21,42 45,49

Sujet sous ARV ]2-3] 44,49 ± 19,58 19,33 73,51

]3-4] 40,33 ± 12,57 24,45 67,34

La valeur moyenne de l’activité enzymatique de l’ASAT chez les sujets en phase pré thérapeutique est inférieure aux valeurs moyennes des sujets sous ARV quel que soit la durée du traitement. Chez ces derniers, on ne remarque aucune influence de la durée de traitement sur l’activité enzymatique.

Répartition des gamma GT suivant la durée du traitement

Tableau VI : Répartition des gamma GT en fonction de la durée du traitement

Durée de traitement (en année)

GAMMA GT

Moyenne ± ecart type

(UI/L) Minimum (UI/L) Maximum (UI/L) Sujets pré-

thérapeutique 0 37,89 ± 37,17 8,35 175,02

]0-1] 44,02 ± 37,46 20,69 55,80

]1-2] 52,13 ± 25,04 20,67 45,49

Sujet sous ARV ]2-3] 102,88 ± 104,46 20,95 73,51

]3-4] 63,28 ± 41,56 24,41 67,34

Les sujets en phase pré thérapeutique ont une valeur moyenne faible de l’activité des gamma GT par rapport aux sujets sous ARV. Chez ces derniers, la valeur moyenne augmente de un à trois ans et baissent au-delà.

(32)

3.1.4. Association de l’élévation de l’activité des enzymes à la durée du traitement Tableau VII : Répartition de la population en fonction des cas d’activité enzymatique élevée.

Durée de traitement

(en année) Effectif

Hypertransaminasémie (cas d’ALAT)

Hypertransaminasémie

(cas d’ASAT) Hypergammaglobulinémie

Sujets pré- thérapeutique

0 18 06 00

05

Sujets sous ARV ]0-1] 5 01 02 02

]1-2] 9 01 02 06

]2-3] 8 03 04 05

]3-4] 10 05 04 07

Le tableau ci-dessous montre le plus grand nombre de cas d’ALAT supérieure à 48 UI/L et de Gamma GT supérieure 40 UI/L se trouve respectivement chez les sujets sous aucun traitement et sous traitement ARV depuis plus de trois ans. Le nombre de cas d’activité enzymatique de l’ASAT supérieure à 42 UI/L se répartit équitablement d’une part chez les sujets sous ARV depuis 0 à 1an et 1 an à 2 ans (2 cas) et d’autre part chez les sujets sous ARV depuis 2 ans à 3 ans et plus de 3 ans (4 cas). Pour le cas de l’ALAT 06 sujets en phase pré thérapeutique présentent une activité enzymatique supérieur à la normale. En ce qui concerne les patients sous ARVN, nous remarquons que le nombre de cas augmente avec la durée du traitement.

Avec un nombre moyen de 5, les activités enzymatiques les plus représenté dans notre population d’étude sont celles des gammaglobulines. Aussi nous notons une répartition aléatoire de cas de Gamma GT élevé dans notre population d’étude.

(33)

3.2. Discussion

La présente étude a permis de montrer l’impact du traitement antirétroviral sur la Gamma GT et les activités de l’ALAT et l’ASAT. Elle a porté sur une population d’étude constituée majoritairement de sujets ayant entre 50 à 60 ans (26%). Cette observation est une preuve que le VIH atteint beaucoup plus les personnes âgées. Tout comme pour les travaux réalisés par Fokunang et al. en 2010, la gente féminine prédomine dans la population d’étude (Fokunang et al., 2010). Cette prédominance pourrait être justifie par la vulnérabilité du sexe féminin face au VIH.

A l’issue de cette étude, nous avons enregistré 20 cas de cas de Gamma GT élevé pour les sujets sous antirétroviraux soit 40% de la population d’étude. Ces résultats concordent avec ceux des travaux de Vince Rodrigue (49,5%) réalisés en 2009 sur les sujets sous antirétroviraux (Vince, 2009). Cette fréquence des cas hyper hypergammaglobulinémie suggère que les ARV ont un impact significatif sur les fonctions du foie. Cependant, on note une variation significative (p˂0,0001) entre les valeurs moyennes de l’ALAT chez les patients sous ARV depuis plus de de 2 ans et chez ceux dont le traitement dure moins de 2 ans. Seuls les sujets sous ARV depuis plus 3 ans présentent une valeur moyenne supérieur à celle des sujets en phase pré thérapeutique. Ainsi l’activité de l’ALAT augmente suivant la durée de traitement dans notre population d’étude. La valeur moyenne d’ASAT dans la population d’étude chez les sujets en phase pré thérapeutique est inférieur à celle chez les sujets sous ARV. Chez ces derniers elle augmente jusqu’à 3 ans et baise au-delà. Cette évolution de l’activité de l’ASAT montre que le traitement antirétroviral est donc la cause d’élévation de l’activité de l’ASAT chez les PV-VIH.

En 2008, les résultats des travaux de Wilkin et Gulick ont révélé une plus faible proportion (2 à 14%) de l’hépatotoxicité chez les PV-VIH sous traitement antirétroviral (Wilkin et Gulick, 2008). L’ASAT et l'ALAT contenues dans le sérum proviennent majoritairement du foie mais sont aussi sécrétées par le cœur. L’évolution des activités de l’ALAT et de l’ASAT, associée à l’hépatotoxicité serait une cause de la plus grande fréquence des cas d’atteinte hépatique chez les PV-VIH sous ARV de la présente étude. Nos résultats montrent que plus la durée du traitement est grande, plus les fonctions hépatiques sont affectées. L’évolution des

(34)

activités de l’ALAT et de l’ASAT, associée à l’hépatotoxicité serait une cause de la plus grande fréquence des cas d’atteinte hépatique chez les PV-VIH sous ARV de la présente étude.

L’évolution des activités de l’ALAT et de l’ASAT, associée à l’hépatotoxicité serait une cause de la plus grande fréquence des cas d’atteinte hépatique chez les PV-VIH sous ARV de la présente étude.

(35)

Au terme de notre étude portant sur le dosage des transaminases et de la Gamma GT chez les PV/VIH sous traitement au CHD Mono Couffo, Les prévalences des transaminases et des Gamma GT étant élevées chez les PVVIH enquêtées, une bonne prise en charge, la non- consommation d’alcool, du tabac et un contrôle régulier des paramètres biologiques tels que les dosages des enzymes hépatiques, le sérodiagnostic des hépatites B et C pourraient réduire les effets hépatotoxiques auprès de nos PVVIH.

Ce taux élevé touche majoritairement ceux sous traitement antirétroviral depuis plus de 2 ans.

Les antirétroviraux ont donc un impact significatif sur la fonction hépatique.

Cette étude peut s’élargir à une taille d’échantillon plus grande, et même s’étendre sur plusieurs années avec beaucoup plus de suivi dans l’évolution des divers paramètres biochimiques chez les sujets sous traitement antirétroviral afin d’avoir une précision sur l’impact des ARV sur le foie.

CONCLUSION

(36)

A l’issu de notre étude, nous suggérons :

• A la Direction du PNLS :

De doter les laboratoires d’analyses biomédicales de matériel analytique performant et fiable permettant de déterminer tous les paramètres intervenant dans le suivi biologique des porteurs du VIH.

• Aux prescripteurs :

De tenir compte des impacts des ARV sur le foie et les reins, lors la prescription des examens de routine réalisés pour le suivi des PV-VIH sous traitement. Nous leur proposons donc d’inclure d’autres paramètres permettant d’évaluer les fonctions hépatiques et rénales dans les bilans de suivi des porteurs du VIH, sous traitement antirétroviral.

• Aux chercheurs :

D’approfondir cet axe de recherche en utilisant des marqueurs plus spécifiques et des techniques plus précises telles que les méthodes moléculaires. La PCR quantitative en temps réel par exemple, permettra de déterminer la charge virale exacte afin de la comparer à la durée du traitement et aux divers paramètres biologiques. On pourra donc évaluer non seulement l’efficacité du traitement, mais aussi le fonctionnement des organes vitaux.

SUGGESTIONS

(37)

Ammari L. 2013. Antirétroviraux : Classification, Mécanisme d’action. Tunis 32p. disponible sur : : http:// www. infectiologie.org.tn/ pdf/ cmi/ 09012013/ mecanismes ammari. pdf

Benhamou JP. 2002. Traité d’hépatologie clinique. Éditions Flammarion. Médecine- Sciences 134-64.

Chang CY, Schiano TD. 2007. Drug hepatotoxicity Aliment Pharmacol Ther ; 25 :1135-51.

Crum-Cianflone N, Ganesan A, Teneza-Mora N, Riddle M, Medina S, Barahona I et al. 2010 Prevalence and Factors Associated with Renal Dysfunction Among HIV-Infected Patients.

AIDS Patient Care STDS. Juin ; 24(6) : 353– 60.

Fokunang C. N., Banin A. N., Kouanfack C. and Ngogang J. Y. 2010. Evaluation of hepatotoxicity and nephrotoxicity in HIV patients on highly active antiretroviral therapy.

Journal of AIDS and HIV Research. March ; pp. 048- 057 Germanaud D. 2009. Disponible sur www.snv.jussieu.fr

Nishijima T, Komatsu H, Gatanaga H, Aoki T, Watanabe K, Kinai E, Honda H et al. 2011 Impact of small body weight on tenofovir-associated renal dysfunction in HIV-infected patients : a retrospective cohort study of Japanese patients. PLoS One. 6(7) : e22661.

ONUSIDA. 2013. Rapport l’épidémie mondiale du SIDA. Genève : 2013. 274p.

Patel KK, Patel AK, Ranjan RR, Patel AR, Patel JK. 2010. Tenofovir-associated renal dysfunction in clinical practice : An observational cohort from western India. Indian J Sex Transm Dis. Jan-Juin ; 31(1): 30–4.

Scherzer R, Estrella M, Li Y, Deeks SG, Grunfeld C, Shlipak MG. 2012. Association of Tenofovir Exposure with Kidney Disease Risk in HIV Infection. AIDS. Apr 24; 26(7): 867–75.

Wilcox CM. 2008. Evaluation of the HIV-infected patient with hepatobiliary complaints. In:

UpToDate, Post TW (Ed), UpToDate, Waltham, MA.

Wilkin TJ, Gulick RM 2008. When to start antiretroviral therapy Clin. Infect. Dis. 15 : 1580- 1586.

REFERENCES

(38)

LISTE DES ENSEIGNANTS DU DEPARTEMENT DE GENIE DE BIOLOGIE

HUMAINE ...ii

DEDICACE ... iii

REMERCIEMENTS ... iv

HOMMAGES ... v

LISTE DES SIGLES ET ABREVIATIONS ... vi

LISTE DES TABLEAUX... vii

LISTE DES FIGURES ... viii

RESUME ... ix

ABSTRACT ...x

SOMMAIRE ... xi

INTRODUCTION ... 1

SYNTHESE BIBLIOGRAPHIQUE ... 3

1.1 Définition du virus ... 4

1.2 Structure du virus ... 4

1.3 Le traitement antirétroviral... 5

1.3.1 Mécanismes d’action des ARV(Antirétroviraux) ... 5

1.3.2 Les différentes classes d’antirétroviraux ... 6

1.4 La mesure des transaminases et des Gamma GT... 6

II. DEUXIEME PARTIE : CADRE, MATERIEL ET METHODES ... 8

2.1 Cadre d’étude... 9 TABLE DES MATIERES

(39)

2.2.2. Equipements ... 12

2.2.3. Consommable ... 12

2.2.4. Réactif ... 12

2.3. METHODES D’ETUDE ... 12

2.3.1. Type d’étude ... 12

2.3.2. Echantillonnage ... 12

2.3.3. Phase pré-analytique ... 13

2.3.4 Phase analytique ... 13

2.3.5. Phase post analytique ... 14

2.3.6. Analyses statistiques ... 15

TROISIEME PARTIE : RESULTATS ET DISCUSSION ... 16

4. Résultats et discussion ... 17

4.1. Résultats ... 17

4.2. Discussion... 21

CONCLUSION ... 23

SUGGESTIONS... 24

REFERENCES ... 25

TABLE DES MATIERES ... 26

ANNEXE ... 28

(40)

ÉCHANTILLONNAGE

ASAT ALAT SEXE AGE

16,16 25,11 F 57

42,15 30,24 F 41

12,78 26,95 M 62

50,86 37,77 M 68

31,97 76,67 M 52

53,44 18,87 F 45

12,81 12,15 F 61

36,47 64,24 M 57

40,38 60,49 F 59

39,25 18,25 F 57

19,83 50,58 M 49

23,45 30,63 F 33

20,78 80,72 F 57

56,75 42,97 M 47

27,38 51,24 M 42

48,37 171,37 F 19

52,41 8,35 F 59

13,21 20,69 F 35

13,34 109,52 M 38

20,36 19,62 M 39

43,46 34,33 M 49

19,4 40,76 F 33

20,88 234,58 M 57

36,52 299,9 M 47

19,9 34,99 M 57

41,42 52,49 F 41

22,57 34,1 F 62

20,18 175,02 M 68

28,14 34,52 F 51

ANNEXE

(41)

22,07 20,95 M 45

21,88 13,52 F 16

49,51 58,41 F 45

25,35 67,34 M 29

67,27 37,77 M 20

45,12 76,67 F 67

20,45 18,87 F 85

34,45 45,78 F 59

18,37 64,24 M 24

56,35 60,49 M 18

38,45 87,45 M 56

12,78 50,58 F 78

50,86 30,63 M 67

31,97 80,72 M 88