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MINISTERE DE L’ENSEIGNEMENT SUPERIEUR ET DE LA RECHERCHE SCIENTIFIQUE
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UNIVERSITE D’ABOMEY-CALAVI
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ECOLE POLYTECHNIQUE D’ABOMEY-CALAVI
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DEPARTEMENT DE GENIE DE BIOLOGIE HUMAINE
Option: ANALYSES BIOMEDICALES THEME
Présenté et soutenu par : Michèle Sylvie Gloria MIDJROKAN
Devant le jury :
Président : Prof AKPOVI D.Casmir Membre 1 : Dr SEGBO Julien Membre 2 : Dr AIKOU Nicolas
Sous la direction de :
Année académique 2015-2016 9ème Promotion
Tuteur de stage M. Rodrigue BEBADA Technicien de laboratoire RAPPORT DE STAGE DE FIN DE FORMATION POUR L’OBTENTION DU
DIPLOME DE LICENCE PROFESSIONNELLE
EXPLORATION DE LA FONCTION HEPATIQUE CHEZ LES PERSONNES VIVANT AVEC LE VIH PRISES EN CHARGE PAR L’ONG ARC-EN-CIEL
Maitre de mémoire Dr. Nicolas AIKOU
Enseignant chercheur à l’université de Parakou Maitre-assistant des CAMES
REPUBLIQUE DU BENIN
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MINISTERE DE L’ENSEIGNEMENT SUPERIEUR ET DE LA RECHERCHE SCIENTIFIQUE
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UNIVERSITE D’ABOMEY-CALAVI
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ECOLE POLYTECHNIQUE D’ABOMEY-CALAVI
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DEPARTEMENT DE GENIE DE BIOLOGIE HUMAINE
DIRECTEUR:
Professeur Mohamed M.SOUMANOU
DIRECTEUR –ADJOINT:
Professeur Clément AHOUANNOU
CHEF DU DEPARTEMENT:
Docteur Pascal ATCHADE
LISTE DES ENSEIGNANTS DU DEPARTEMENT DE GENIE DE BIOLOGIE HUMAINE (GBH)
01 ABLEY Sylvestre Déontologie Médicale
02 ADOMOU Alain Physique
03 AGBANGLA Clément Génétique Moléculaire
04 AGOUA Jean Informatique
05 AHOYO Théodora Angèle Microbiologie/Santé Publique et Hygiène Hospitalière 06 AKAKPO B. Huguette Education Physique et Sportive
07 AKOGBETO Martin Entomologie Médicale
08 AKPOVI D. Casimir Biologie Cellulaire /Physiologie Humaine /Biochimie métabolique
09 ALITONOU Alain Guy Chimie Générale/Chimie Organique
10 ANAGO Eugénie Biochimie Structurale /Biochimie Clinique /Biologie Moléculaire
11 ANAGONOU Sylvère Education Physique et Sportive 12 ATCHADE Pascal Parasitologie / Mycologie
13 AVLESSI Félicien Chimie Générale/ Chimie Organique 14 BANKOLE Honoré Bactériologie / Virologie
15 DARBOUX Raphael Histologie Appliquée
16 DESSOUASSI Noël Biophysique
17 DOSSEVI Lordson Techniques Instrumentales
18 DOSSSOU Cyriaque Techniques d’Expression et Méthodes de Communication
19 DOUGNON T. Victorien Microbiologie / Méthodologie de la Recherche
20 HOUNNON Hyppolyte Mathématiques
21 HOUNSOSSOU Hubert Bio statistique et Epidémiologie
iv 22 LALLY Armel Législation et Droit du Travail
23 LOKO Frédéric Biochimie Clinique
24 LOKOSSOU Gatien Immunologie / Immuno- Pathologie
25 LOZES Evelyne Immunologie / Immuno -Pathologie /Equipements Biomédicaux
26 MASSOULOKONON Vincent Histologie Générale 27 OGOUDIKPE Nicarette Informatique Médicale
28 SECLONDE Hospice Transfusion Sanguine
29 SEGBO Julien Biochimie / Biologie Moléculaire
30 SENOU Maximin Histologie Appliquée
31 TOPANOU Adolphe Hématologie / Hémostase et Pharmacologie
32 SOEDE Casimir Anglais
33 YOVO K. S. Paulin Pharmacologie / Toxicologie
34 TOHOYESSOU Zoé Soins Infirmiers
Dédicace
A mes chers parents qui se sont sacrifiés pour mon éducation ; Merci !
vi
REMERCIEMENTs
A DIEU Tout Puissant maître du savoir
Pour son amour, sa grâce et sa miséricorde infinie dans nos vies ;
A mon père, MIDJROKAN Martin
Homme vertueux et humble, sans qui je ne serais jamais parvenu à ces fins. Le moment est venu de vous remercier pour vos soutiens financiers et moraux ;
A ma mère, Mme MIDJROKAN Victoria TOLI
Pour votre amour et vos soutiens indéfectibles ! Mille fois merci pour les nombreux sacrifices et supplices subis afin de m’inculquer des valeurs éducatives saines ;
A toute ma famille, en particulier mes frères Honoré, Roméo et ma sœur Marlène Puisse Dieu nous unir davantage ;
Au Dr AIKOU Nicolas!
Pour avoir accepté de nous accueillir dans votre laboratoire et de superviser notre travail ; vous n’avez cessé de sacrifier votre précieux temps afin de nous venir en aide. Nous vous en savons gré. Sincères merci, pour tous vos apports. Que le Seigneur Dieu Tout- Puissant vous le rend au centuple ;
A notre tuteur de stage M. Daheou Rodrigue BEBADA, pour votre disponibilité et votre attention à notre égard, puisse Dieu vous accorde santé et paix ;
A tout le personnel du laboratoire SPACE-LABM/UNION pour votre
disponibilité, vos multiples conseils et l’ambiance cordiale qui a régné lors de notre stage.
A mes camarades de promotion en particulier : Malvine, Pauldès, Anne Marie, Cynthia, Jessica, Waris, Imelda, Cédric et Gildas. Merci pour votre soutien et les moments de joie passés en votre compagnie.
Merci
HOMMAGES
A son Excellence Monsieur le Président du Jury
Nous sommes honorés quand vous avez accepté de présider le jury de soutenance de ce rapport. Permettez-nous d’exprimer notre grande considération à votre endroit. Vos observations seront les bienvenus et contribuerons à l’amélioration de ce document.
Respectueux hommages !
Aux Honorables Membres du Jury
Pour avoir accepté de siéger dans ce jury et de juger ce rapport à sa juste valeur, nos hommages à vous. Veuillez trouver ici, l’expression de notre profonde gratitude et de notre sincère considération.
Respectueux hommages !
viii LISTE DES TABLEAUX
Tableau I : Protocole de dosage d’ASAT Tableau II : Protocole de dosage d’ALAT
Tableau III : Protocole de dosage de la gamma GT Tableau IV : Répartition selon la profession
Tableau V : Association entre les marqueurs du fonctionnement hépatique chez les PVVIH LISTE DES FIGURES
Figure 1 : Structure schématique du VIH Figure 2 : Cycle de réplication du VIH
Figure 3 : Répartition de la population d’étude suivant le sexe Figure 4 : Répartition de la population d’étude suivant l’âge Figure 5 : Répartition selon la durée de déclaration(DDD) Figure 6 : Répartition de la population selon le type de VIH Figure 7 : Répartition selon l’infection à l’hépatite B et C LISTE DES SIGLES ET ABBREVIATIONS
Ɣ-GT : Gammaglutamyl-transférases ou glutamyl-transpeptidases ADN : Acide Désoxyribonucléique
AgHBs : Antigène de surface de l’Hépatite virale B ALAT : Alanine Amino-Transférase
ARN : Acide Ribonucléique ARV : Anti Rétroviral
ASAT : Aspartate Amino-Transférase
LISTES DES TABLEAUX, FIGURES,
SCHEMAS, SIGLES ET ABREVIATIONS
DDD : Durée de déclaration
EDS : Etude démographique de santé GGT : Gammaglutamyl-transférases IO : Infections Opportunistes
MDH : Malate déshydrogénase
ONG : Organisation non gouvernementale ONU : Organisation des nations unies
ONUSIDA : programme commun des nations unies sur le VIH SIDA ORL : Onto- Rhino- Laryngologie
PNLS : Programme National de Lutte contre le Sida PVVIH : Personnes vivantes avec le VIH
SIDA : Syndrome d’Immunodéficience Acquise
SPACE- LABM : Laboratoire d’Analyse Bio Médicales SPACE TAR : Traitement Anti Rétroviral
UNAIDS: United Nations programmed on AIDS/HIV VHB : Virus de l’Hépatite B
VHC : Virus de l’Hépatite C
VIH : Virus de l’Immunodéficience Humaine
x
RESUME
Le virus de l'immunodéficience humaine (VIH) est à l’origine d’une infection chronique, elle- même responsable du développement du syndrome d'immunodéficience acquise (SIDA), un état de grande vulnérabilité.
L’objectif de cette étude est d’apprécier le fonctionnement hépatique des personnes vivant avec le Virus de l’Immunodéficience Humaine (PVVIH). Il s’agit d’une étude prospective et analytique réalisée du 20 Juin au 20 Septembre 2016 à l’ONG Arc-en-ciel. Les paramètres suivants ASAT, ALAT et de gamma GT ont été dosés et des tests d’hépatite B et C ont été réalisés chez 105 personnes vivantes avec VIH.
Il ressort de notre étude que tous les patients ont le VIH de type 1. Parmi ceux-ci, 21 % ont un taux d’ASAT supérieur à la normale, 19 % ont un taux d’ALAT supérieur à la normale et 53 % ont un taux de gamma GT supérieur à la normale. De même, 2,8 % ont une co-infection VIH/VHB et 6,8 % ont une co-infection VIH/VHC.
Au terme de cette étude nous constatons qu’il a un risque de développer une hépatite tant médicamenteuse que virale chez ces derniers.
Mots clés : Transaminases, gamma GT, hépatite, PV-VIH
ABSTRACT
The human immunodeficiency virus (HIV) is at the origin of a chronic infection, herself responsible of the development of the acquired immune deficiency syndrome (AIDS), a state of big vulnerability.
The objective of this survey is to appreciate the hepatic working of people living with the Virus of the Human immunodeficiency (PLHIV). It is about a prospective and analytic survey achieved from June 20 to September 20, 2016 to the NGO Rainbow. The parameters ASAT next one, ALAT and GT gamma have been measured out and the tests of B hepatitis and C have been achieved at 105 living people with HIV.
He/it is evident from our survey that all patients have the HIV of type 1. Among these, 21%
have a rate of ASAT superior to the normal, 19% have a rate of ALAT superior to the normal and 53% have a rate of gamma GT superior to the normal. In the same way, 2, 8% have a co- infection VIH/VHB and 6, 8% have a co-infection VIH/VHC.
To the term of this survey we note that he/it has a risk to develop a hepatitis so much medicinal that viral at these last.
Keywords: Transaminases, GT gamma, hepatitis, PL-HIV,
xii
SOMMAIRE
INTRODUCTION
PREMIERE PARTIE : GENERALITES
DEUXIEME PARTIE : CADRE, MATERIEL ET METHODES TROISIEME PARTIE : RESULTATS ET DISCUSSION CONCLUSION ET SUGGESTION
REFERENCE BIBLIOGRAPHIQUE .
Le virus de l’immunodéficience humaine(VIH) est un fléau sans égal dans l’histoire, qui déborde les frontières des Etats et qui constitue actuellement un véritable problème de santé publique dans le monde. En Afrique, sa prévalence a augmenté rapidement, depuis ces dix dernières années. En 2006, le SIDA est à l’origine du décès de deux virgule neuf (2,9) millions de personnes dans le monde entier (ONUSIDA, 2006).
Le Bénin a enregistré son premier cas de SIDA en 1985. Deux ans plus tard, et à l’instar des autres pays de la sous-région, les autorités ont mis en place un système de veille épidémique dont l’objectif était d’évaluer la situation sur le territoire et d’infléchir la courbe de tendance de la maladie (Etude Démographique de Santé, 2011-2012). Des années après le Bénin compte encore quelques 63.000 personnes vivant avec le VIH pour une prévalence de 1,2%
au sein de la population générale (Educ’action, 2013). En dépit des nombreux efforts fournis par les gouvernants, les partenaires au développement et la société civile, l’idéal auquel invite l’ONUSIDA : « Zéro nouvelle infection à VIH, zéro discrimination, zéro décès lié au sida » est encore loin d’être une réalité au Bénin (ONUSIDA ,2011-2015).
La réponse nationale est essentiellement orientée dans trois directions : la prévention sous toutes ses formes, la prise en charge des personnes infectées et/ou affectées par le VIH et le soutien des malades. Le traitement du VIH nécessite une prise d’anti rétroviral et son métabolisme dans l’organisme nécessite l’intervention du foie. Le foie est de part ses fonctions l’un des organes les plus important de l’organisme. Il est en charge de détoxifier le corps en métabolisant les médicaments …C’est donc la principale cible de leurs effets indésirables. Dès lors l’exploration de la fonction hépatique fait partie des préoccupations médicales au cours du suivi des malades du SIDA. C’est ce que vise la présente étude intitulée :
EXPLORATION DE LA FONCTION HEPATIQUE CHEZ LES PERSONNES VIVANT AVEC LE VIH
Objectif général
Apprécier le fonctionnement hépatique des personnes vivantes avec le VIH.
INTRODUCTION
2 Objectif spécifiques :
Doser les transaminases et la gamma GT
Réaliser les tests d’hépatites B et C
Hypothèse
Les personnes vivant avec le VIH ont une atteinte hépatique caractérisée par l’élévation des taux de transaminase et de gamma GT.
1.) Virus de l’immunodéficience humaine
1.1) Taxonomie
Le Virus de Immunodéficience Humaine (VIH) appartient
A la famille des « Retroviridae », vaste famille de virus à ARN équipés d’une enzyme structurale appelée transcriptase inverse ou reverse transcriptase (RT).
Classé dans le genre des «Lentivirus » qui a pour caractéristique d’entraîner des infections virales lentes.
De l’espèce Human Immunodéficiency virus 1 et 2.
Deux sérotypes sont actuellement connus :
VIH-1 de répartition mondiale comprenant 3 groupes : groupe M (majeur) Sous types de A à K, groupe O (outlier), groupe N (non O non M)
VIH 2: principalement en Afrique de l’Ouest:6 sous types (Chouikha, 2010) 1.2) Structure du virus
Figure 1 : Structure schématique du VIH (ONUSIDA, 2010)
Virus sphérique est constitué d'une enveloppe, d'une nucléocapside formée des protéines internes, et contenant associé au génome viral et d'un génome constitué d'un ARN diploïde.
PREMIERE PARTIE :
GENERALITES
4 La particule virale est composée d’une l'enveloppe virale formée d'une bicouche lipidique.
Elle est hérissée de spicules formés de deux glycoprotéines virales, les gp120 et gp41. La gp120 est l'élément viral qui viendra reconnaître le CD4 lors de l'attachement du virus. La face interne de l'enveloppe est tapissée de protéines de matrice. La capside est formée de protéine p24, une protéine sécrétée dans le sang, au cours de l'infection. A l'intérieur de la capside, on trouve l'ARN viral diploïde associé à des enzymes virales : la transcriptase inverse, l'intégrase et la protéase. (Goffard ,2012)
1.3) Différentes étapes du cycle de réplication du VIH Les principales étapes du cycle de réplication sont :
La pénétration du virus au niveau de la membrane du CD4 (par fusion avec l’aide de corécepteurs).
La transformation de l’ARN viral en ADN sous l’impulsion d’une enzyme : la réverse transcriptase.
L’intégration de l’ADN ainsi formé à l’ADN du noyau du CD4 sous l’action d’une enzyme : l’intégrase.
La libération d’ARN viral « fils » à partir de l’ADN.
L’assemblage de nouveaux virus à partir de cet ARN et de protéines synthétisées dans le CD4 sous l’influence de la protéase.
La libération des particules ainsi reconstituées (ONUSIDA, 2013).
Figure 2 : Cycle de réplication du VIH (ONUSIDA, 2013)
2.) Le foie
2.1) Anatomie du foie
Le Foie est l'organe le plus volumineux de l'organisme humain. Il appartient au système digestif et assure des fonctions nombreuses, vitales à l’organisme (O. Ciacio et Castaing, 2015). Organe glandulaire impair et asymétrique, logé chez l’homme dans l’hypochondre droit, la loge sous phrénique droit, la partie supérieure du creux épigastrique qu’il occupe en totalité sans dépasser le rebord chondro-costal. Formé de 2 lobes : le droit est très
volumineux, le gauche plus petit, séparés par le ligament falciforme. C’est le plus volumineux des viscères humains (deux pourcent du poids corporel), soit une moyenne de 1500 grammes.
Le foie sécrète la bile qui s’écoule des voies biliaires intra- hépatiques jusqu’au duodénum. Il assure trois fonctions vitales : une fonction d’épuration, une fonction de synthèse et une fonction de stockage. C’est l’organe du corps humain qui effectue le plus grand nombre de transformations chimiques (Vulgrain ,2011).
6 2.2) Physiopathologie du foie
Aminotransférase ou transaminases
Ces enzymes catalysent le passage des groupes aminés des acides aminés vers les acides cétoniques, processus très général de dégradation et de synthèse des acides aminés. Ce sont l’aspartate aminotransférase (ASAT) ou transaminase glutamo-oxaloacétique (GOT), et l’alanine aminotransférase (ALAT) ou transaminase glutamo- pyruvique (GPT). Elles sont normalement présentes en faible quantité dans le plasma ou le sérum. Leur activité est élevée dans certains tissus, en particulier le foie (GPT, ou GOT à un degré moindre), le cœur et le muscle (principalement GOT). En cas de nécrose de ces tissus, les enzymes sont libérées dans la circulation et leur activité sérique augmente. L’élévation, particulièrement de l’ALAT ou GPT, indique une nécrose hépatocellulaire (cytolyse), aiguë ou chronique.
Normes : Ils varient d’un fabriquant à un autre (d’un réactif a un autre) Femme Homme
ASAT ≤ 31 ≤ 37
ALAT ≤ 31 ≤ 41
Gammaglutamyl-transférases ou gamma GT:
La gammaglutamyl-transférases ou glutamyl-transpeptidases, est une peptidase membranaire, présente principalement au niveau des reins ; du pancréas, du foie et de la prostate. Cette enzyme joue un rôle important dans le métabolisme du glutathion et participe aux transferts des acides aminés vers la cellule. L’augmentation de l’activité des ɣ-GT, souvent isolée est l’un des indicateurs les plus sensibles d’une affection du foie ou des voies biliaires. Les augmentations les plus fortes s’observent lors des obstructions biliaires intra hépatique et post hépatique, des néoplasmes primaires et secondaires, des troubles pancréatiques. Des taux plus modérés sont observés lors d’hépatite infectieuse, de cirrhose et de stéatose hépatique.
L’alcool en ingestion chronique, certains médicaments peuvent augmenter le taux sérique de gamma GT (Scherwin, 2003 ; Henderson et al, 2001).
Normes : Ils varient d’un laboratoire à un autre Femme 7-32 U/L
Homme 11-50U/L
L’hépatite B : est une maladie infectieuse du foie causée par un virus du même nom.
Le VIH aggrave le pronostic de l’hépatite B. La co-infection VIH-VHB semble
accélérer la vitesse de progression vers la cirrhose comparativement aux sujets infectés par le VHB seul, cela en fonction de l’activité histologique. (Colin et al, 1999)
L’hépatite C : Le virus de l’hépatite C est un virus à ARN qui s’attaque aux cellules du foie et qui entraine une inflammation de ce dernier En cas de co-infection VIH- VHC, les modifications de la charge virale VHC ne sont pas toujours expliquées par la restauration de la réponse immune induite par les antirétroviraux. En effet, après contrôle de la charge virale VIH, la charge virale VHC peut soit augmenter ou diminuer (Torre et al, 2002).Certains malades qui présentent une augmentation de la virémie VHC ont aussi une augmentation de leur cytolyse hépatique
(Cooper et al, 2002).
3.) Les antirétroviraux
Les antirétroviraux utilisés sont des molécules virostatiques inhibant la réplication virale à différentes étapes du cycle du VIH. Le but du traitement ARV est d'améliorer durablement la santé et la qualité de vie des patients en bloquant la réplication du VIH de façon à rendre indétectable la charge virale (quantité de virus) dans le sang le plus longtemps possible ; en restaurant un nombre de lymphocytes CD4 normal (reconstitution immunitaire) et de réduire la transmission du VIH.Ce sont des molécules de synthèses de différentes natures chimiques regroupées en trois grandes classes selon leur mode d'action : deux classes d'inhibiteurs de la transcriptase inverse et une d'inhibiteurs de protéase. Une quatrième classe d'inhibiteurs de la fusion est actuellement en cours de développement (Germanaud, 2015). Certains
antirétroviraux peuvent provoquer des lésions hépatiques (hépato toxicité) empêchant le foie de fonctionner correctement. D’autres facteurs peuvent également provoquer des lésions hépatiques.
8 4) Cadre de l’étude
4.1) Présentation du cadre institutionnel : EPAC
L’Ecole Polytechnique d’Abomey- Calavi ex CPU, est un établissement public à caractère scientifique. Il comporte dix (10) départements répartis en deux secteurs :
Le secteur industriel
-Département de Génie Electrique
-Département de Génie Mécanique et Energétique -Département de Génie Civil
-Département de Génie Informatique et Télécommunication
Le secteur biologique
-Département de Génie de la Biologie Humaine -Département de Génie de l’Environnement
-Département de Génie de l’Imagerie Médicale et de la Radiologie -Département de Production de Santé Animale
-Département de Génie de la Technologie Alimentaire -Département de la Maintenance Bio-Hospitalière 4.2) Présentation du cadre technique
Clinique de l’Union (stage)
La clinique de l’Union de Cotonou est situé dans le département de l’atlantique dans la ville de Cotonou précisément à Vodjè non loin de l’échangeur juste devant l’église protestante en face des rails.
Deuxieme PARTIE : Cadre, MATERIEL ET
METHODES
Clinique privée dirigé par le Dr AIHOUNZOUNON Lucien en association et en partenariat avec le laboratoire SPACE-LABM du Dr Nicolas AÏKOU, qui est le responsable du
laboratoire de la dite clinique.
A l’entrée du centre, nous avons l’accueil et la comptabilité. Ce centre comporte les services et salles à savoir :
Une salle d’hospitalisation, un bloc opératoire, une salle de soins, un service d’ophtalmologie, un service de gynécologie, un service d’ORL, un service de pédiatrie, un service de
dermatologie et un service de cardiologie Laboratoire associé : SPACE-LABM
ONG Arc-en-ciel (échantillonnage)
L’ONG Arc-en-ciel est une organisation non gouvernementale à but non lucratif et apolitique sise à Cotonou (BENIN) quartier Ste RITA, carré Numéro1533 K. Ayant pour objectif général d’assurer la prise en charge des séropositifs au VIH et contribuer à la prévention du SIDA.
Et plus spécifiquement
Accompagner les malades et leurs familles
Aider les malades à se soigner
Défendre leurs droits et leur liberté contre la discrimination, la peur et le rejet
Assister les veuves et les orphelins du SIDA
Participer activement à l’information du public, des élèves, des apprentis avec l’aide du programme national de lutte contre le SIDA (PNLS)
4.3) Matériel d’étude
Les Prélèvements sanguins sont faits sur des tubes secs.
Le matériel ayants servir au prélèvement :aiguilles, corps Vacutainer, garrot, coton,
désinfectant, gants, marqueur, stylo, accumulateur, Centrifugeuse, Micropipettes, Aliquotes, cônes, portoir, incubateur, compresses, poubelles pour cônes, tubes secs, marqueurs, cahiers de paillasse, réactifs. Les différents dosages sont effectués sur un spectrophotomètre
« AP3000M ».
10 Réactifs :
Transaminases « ACCUREX » ; Ɣ-GT « CYPRESS » ; Hépatite « MICROPOINT » 4.4) Echantillonnage
Il s’agit d’une étude prospective et analytique réalisée sur « 105 » échantillons. Sur chaque échantillon nous avons dosés les transaminases, la gamma GT et réalisés les tests d’hépatite B et C.
Critères d’inclusion
Sont inclus dans l’étude les personnes vivantes avec le VIH prise en charge à l’ONG ‘’arc en ciel’’
Critères d’exclusion Sont exclus de notre étude : Les PV-VIH hospitalisés Les PV-VIH diabétique
Les PV-VIH ayant fait un accès palustre (cycle hépatobiliaire) 4.5) Méthodes
Procédure
Les échantillons sont centrifugés pendant 5min à 3000 tours par minute par une
centrifugeuse. Une évaluation qualitative de l’aspect du sérum a été également effectuée après centrifugation dans le but de détecter toute interférence macroscopique (turbidité, hémolyse) Le sérum servira à faire les dosages ci – après :
4.5.1) Dosage d’ASAT (Méthode cinétique) Principe
Détermination de l’ASAT basée sur les recommandations de l’IF CC L-aspartate+ α cétoglutarate → oxaloacétate + l- glutamate
Oxaloacétate + NADH +H+ → NAD+ + malate Lecture à 340nm
Tableau I : Protocole de dosage d’ASAT
DOSAGE Solution de travail (R1) 800µl Solution de travail (R2) 200µl Echantillon - - 100 µl
4.5.2) Dosage d’ALAT (Méthode cinétique) Principe
Détermination de l’ALAT basée sur les recommandations de l’IF CC L-Alanine + α cétoglutarate → acide pyruvique + L- glutamate Acide pyruvique + NADH +H+ → NAD+ + Lactate
LDH = lactate déshydrogénase Lecture à 340nm
Tableau II : Protocole de dosage d’ALAT
DOSAGE SOLUTION DE TRAVAIL (R1) 800µL SOLUTION DE TRAVAIL (R2) 200µL ECHANTILLON 100µL
4.5.3) Dosage gamma GT (cinétique enzymatique) Principe
GPNA+Glycylglycine →L-ɣ-Glutamyl-Glycylglycine +p-Nitroaniline Tableau III : Protocole de dosage de la gamma GT
Préparer au préalable la solution de travail. Prélevé 4 volumes du réactifs R1 pour 1 volume de R2.
12 DOSAGE
SOLUTION DE TRAVAIL (R1+R2) 1000µL ECHANTILLON (SERUM) 100µL
Lecture à 405nm
5.) Résultats
5.1) Répartition de la population d’étude suivant le sexe
Figure 3: Répartition des patients suivant le sexe.
La population d’étude est constituée de 31 sujets de sexe masculin contre 74 sujets de sexe féminin correspondant respectivement à 30% et 70 % avec un sexe ratio égal à 0,42 pour une population totale de 105sujets.
71%
29%
0%
10%
20%
30%
40%
50%
60%
70%
80%
Féminin Masculin
Fréquence en %
Sexe
Troisieme PARTIE :
Resultats et discussion
14 5.2) Répartition de population d’étude suivant l’âge
Figure 4 : Répartition des patients suivant l’âge.
La tranche d’âge la plus représentée est celle de 35-45 (37%). La majorité des patients étaient constituée de sujets jeunes dans la tranche de 15-45(58%). Les sujets âgés de 65ans et plus ne représentaient que 5% de la taille de notre population d’étude.
5.3) Répartition suivant la durée de déclaration
Figure 5 : Répartition des patients suivant la durée de déclaration
La durée de déclaration la plus représenté est celle de 1-5 ans soit 44% de la population d’étude. Ont en déduis que la plupart des sujets ce sont récemment infectés.
4%
12%
37%
31%
11%
5%
0%
5%
10%
15%
20%
25%
30%
35%
40%
[15-25[ [25-35[ [35-45[ [45-55[ [55-65[ [65-75[
Fréauence en%
Classe d'âge
8%
44%
40%
5% 3%
0%
5%
10%
15%
20%
25%
30%
35%
40%
45%
50%
F réquence
DDD
<1ans 1-5ans 6-10ans 11-15ans 16-20ans
5.4) Répartition selon le type de VIH
Figure 6 : Répartition selon le type de VIH
Nous n’avons pas eu de patients porteur du VIH 2, ni du type 1 et 2 à la fois.
5.5) Répartition selon la profession
Tableau IV : Distribution des patients selon leur profession
Profession Effectifs Fréquences
Vendeurs (es) 45 43%
Ménagères 23 22%
Artisans (es) 25 24%
Elève 11 10,5%
Total 105 100%
Les professions la plus exposés dans notre étude sont les vendeurs(es) ambulants(es) ou stables et les artisans(es) qui ont certainement un niveau de vie économique et intellectuel bas.
0%
20%
40%
60%
80%
100%
VIH 1 VIH 2
100%
0%
Fréquence en pourcentage
Type de VIH
fréquence en %
16 5.6) Répartition selon l’infection à l’hépatite B et C
Figure 7 : répartition selon l’infection à hépatite C et B
Notre population d’étude est constitué de 105 patients porteurs du VIH1 soit 100%. Dans cette population 2,8% ont une co-infection VIH/VHB et 6,8%VIH/VHC.
5.7) Répartition des patients selon les paramètres dosés
Tableau V: Association entre les marqueurs du fonctionnement hépatique chez les PVVIH Taux
Paramètre
Taux normal Taux élevé Total
Homme Femme Homme Femme
ASAT 22,0% 57,1% 7,6% 13,3% 100%
ALAT 24,8% 56,2% 4,8% 14,2% 100%
Gamma GT 19,0% 27,5% 10,5% 43,0% 100%
Dans la population d’étude 21% ont un taux d’ASAT Supérieure à la normale, 19% ont un taux d’ALAT supérieure à la normale et 53% ont un taux de gamma GT supérieure à la normale.
2,80% 6,80%
90,40%
0,00%
10,00%
20,00%
30,00%
40,00%
50,00%
60,00%
70,00%
80,00%
90,00%
100,00%
VIH/VHB VIH/VHC Normales
6.) DISCUSSION
Cette étude réalisée à l’ONG ‘’Arc-en-ciel’ ’de Cotonou a permis d’apprécier l’état du foie des PV-VIH. Notre population d’étude est constituée à 60% de sujets jeunes dans la tranche d’âges de 15 à 45 ans. Ce phénomène s’expliquera par le fait que les jeunes sont les plus sexuellement actifs et par conséquent les plus exposés à l’infection par le VIH. C’est alors la tranche d’âge qui faut la plus sensibilisés. La prédominance du sexe féminin dans la population d’étude a été rapporté dans la plupart des études menées sur le VIH, notamment celle Karakodjo et al réalisé en 2011 au Mali (73,2% avec un sexe ratio de 0,37). Ceci peut s’expliquer par la prédominance du sexe féminin dans la population béninoise, par la grande surface de contact génital et les infections récurrentes qui rendent les femmes plus vulnérables à cette infection. La profession la plus touchée dans notre étude est celle des vendeurs(es) et artisans(es) suivie de la profession ménagères contrairement à l’étude de Hama et al réalisée en 2009-2010 ou la profession ménagère est plus représenté. Notre population d’étude est constitué essentiellement de patients porteurs du VIH de type 1(100%).Cette prédominance du VIH-1 s’explique par le fait que c’est le virus le plus répandu dans le monde Okome Nkoumou et al au Gabon en 2007 dans son études a eu 99,6 % de patients porteurs du VIH de type 1. Le taux des ALAT était normal dans 81% des cas. Toutefois on a pu observer 19%
de cas de cytolyse hépatique Dicko et al en 2006-2008 avait trouvé 95,7% des cas et Hama 84,8%. Le taux des ASAT était normal dans 79% des cas et 21% avait un taux élevés. Le taux de gamma GT était élevé dans 53% des cas. Dans notre étude 2,8% une co- infectionVIH/VHB .Ces résultats sont contraire à ceux Dovonou et al en 2015 au Bénin ou la prévalence au VIH/VHB est de 16,9%.nous avons également eu 6,8% de co-infection VIH/VHC ; Ilboudo et al, 2000 ; Serme et al en 2005), ont eu respectivement 5,8% 8,5 %.
La fréquence de patients ayant le taux de transaminases et de gamma GT élevé est de 7 ,62%.
Donc le risque dans notre population d’étude pour présenter une insuffisance hépatique est de 7,62%.
18
Conclusion
Au terme de notre étude prospective portant sur l’exploration de la fonction hépatique chez les PV-VIH prises en charge par l’ONG ‘’Arc en ciel’’ nous constatons qu’il a un risque de développer une hépatite chez ces dernier. Le dosage des transaminases, de la gamma GT et la réalisation des test d’hépatite s’avère donc nécessaire pour une meilleur exploration de la fonction hépatique et doit être trimestriellement réalisé.
Cependant, cette étude peut s’élargir à une taille d’échantillon plus grande, voire même s’étendre sur plusieurs années avec des marqueurs de la fonction hépatique plus spécifiques tout en tenant compte des hépatites médicamenteuse en vue d’avoir une idée plus précise sur le fonctionnement hépatique chez les PVVIH.
SUGGESTIONS
A l'issue de notre étude nous suggérons:
- A l’endroit de l’ EPAC
De promouvoir ce type d'étude par un appui financier.
-Aux autorités sanitaires
- Renforcement des campagnes de prévention de l’infection par le VIH au niveau de toutes les couches d’âge.
- Demander de manière systématique le dosage simultané des transaminases (ALAT et ASAT) et de la gamma GT chez tous les PV-VIH sous ARV.
CONCLUSION ET
SUGGESTIONS
Références bibliographiques
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med.uniy-rennes 1. Fr consulté le 24/10/ 2016
TABLE DES MATIERES
LISTE DES ENSEIGNANTS DU DEPARTEMENT DE GBH... iii
DEDICACE... v
REMERCIEMENTS... vi
HOMMAGES... vii
LISTE DES TABLEAUX, FIGURES, SIGLES ET ABBREVIATIONS... viii
RESUME... xi
ABSTRACT... xii
SOMMAIRE... xiii
INTRODUCTION... 1
PREMIERE PARTIE : GENERALITES... 3
1-) Le virus de l’immunodéficience humaine ... 3
1.1) Taxonomie ... 4
1.2 ) Structure du virus ... 4
1.3 ) Les différentes étapes du cycle de réplication ……… 5
2.) Le foie... 5
2.1 anatomie du foie ... 6
2.2 Physiologie du foie... 6
3) Les ARV 7 DEUXIEME PARTIE/ CADRE, MATERIEL ET METHODES... 8
4.) Cadre de l’étude ... 8
4.1) Présentation du cadre institutionnel : EPAC ... 8
4-2 Présentation du cadre technique………... 9
4.3) Matériel de travail... 10
4-4) Echantillonage... 10
4.5) Méthodes... 10
4.5.1) Dosage d’ASAT... 11
4.5.2) Dosage d’ALAT... 11
4.5.3) Dosage de gamma GT... 12
TROIXIEME PARTIE : RESULTATS ET DISCUSSION : ... 13
5-) Résultats... 13
5.1) Répartition de la population d’étude suivant le sexe ... 13
5.2) Répartition de la population d’étude suivant l’âge... 14
22
5.3) Répartition suivant la durée de durée de déclaration... 14
5.4) Répartition selon le type de VIH... 15
5.5) Répartition selon la profession ... 15
5.6) Répartition selon l’infection à l’hépatite B et C... 16
5.7) Répartition selon les paramètres dosés ………. 16
DISCUSSION... 17
CONCLUSION ET SUGGESTIONS ... 18 REFERENCES... 19-20
