Analyse génétique d'isolats naturels de Leishmania du Pérou et d'Équateur montrant de possibles phénomènes de recombinaison

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Submitted on 1 Jan 1994

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Analyse génétique d’isolats naturels de Leishmania du

Pérou et d’Équateur montrant de possibles phénomènes

de recombinaison

Al Bañuls, F Guerrini, F Le Pont, M Tibayrenc

To cite this version:

tion entre les 2 séries

_{indépendantes}

de marqueurs

génétiques, isoenzymes

et RAPD. Quant à la

chimiosensibilité,

il exis-tait une différence hautement

_{significative}

(P

<

10-

4

)

des valeurs de DL50 entre les stocks

_appartenant

au _{groupe 19/20} d’une

part

et ceux

_appartenant

au _{groupe 32/39}

d’autre

_part.

De

_plus,

les différences de

sen-sibilité étaient corrélées aux distances

géné-tiques séparant

les stocks

_pris

2 à 2. Ces résultats sont donc en faveur de

_{l’hypothèse}

que la variabilité

_génétique

de T cruzi a une

influence

_majeure

sur la chimiosensibilité du

_parasite.

Références

Tibayrenc M, Carriou ML, Solignac M, Carlier Y ₍₁₉₈₁₎

Arguments génétiques contre l’existence d’une

sexua-lité actuelle chez Trypanosoma cruzi : implications taxonomiques. CR Acad Sci Paris 293, 207-209

Tbayrenc M, Ward P, Moya A, Ayala FJ (1986) Natural

populations of Trypanosoma cruzi. the _agent of Cha-gas disease, have a _complex multiclonal structure. Proc Natl Acad Sci USA 83, 115-119 9

Analyse

génétique

d’isolats naturels de Leishmania du Pérou et

_{d’Équateur}

mon-trant de

_{possibles phénomènes}

de recombinaison. AL

AL Ba&ntilde;uls,

Ba&ntilde;uls,

F F

Guerrini,

Guerrini,

FF Le

Pont,

M

_{Tibayrenc (UMH}

GNHS-UH5-TOM

9926,

laboratoire de

_génétique

molé-culaire des

_parasites

et des

vecteurs ,

ORS-TOM,

BP

5045,

34032

_Montpellier

cedex

01,

France)

À

l’heure

actuelle,

le mode de

_reproduction

des Leishmania fait

_l’objet

de controverses. D’une

_part,

Bastien et al en 1992 ont

_publié

des données

_suggérant

des

_phénomènes

sexués

_fréquents

dans les

_populations

natu-relles de

Leishmanies ;

d’autre

_part,

Tibay-renc

_{et al,}

en

_1990,

ont

_postulé

que les Leishmania avaient une structure clonale. Le modèle clonal n’exclut

_cependant

_pas l’existance

_{d’échanges}

_génétiques

occa-sionnels. Dans ce

cadre,

il était donc inté-ressant d’étudier dans les

_populations

natu-relles le statut de certains variants

génétiques

recombinants

_(souches

hybrides).

En

effet,

2

_{précédentes}

études ont

_suspecté

l’existence de

_phénomènes

sexués pour 2 séries de leishmanies du Pérou et

d’Équateur

_par une

_analyse

du

caryotype

en

_{champ pulsé (Dujardin}

et

al,

1993)

et par une

_{analyse isoenzymatique}

(Guerrini, 1993).

Le

_présent

travail visait à tester cette

hypothèse

par une

_{analyse isoenzymatique}

complémentaire (16

loci)

et _{par la}

_technique

d’amplication

de l’ADN par amorces aléa-toires

_(RAPD)

sur ces 2 séries de Leish-mania.

La

_première

série concernant 30 stocks du Pérou semblait

_comprendre

des

géno-types parentaux

et des

_génotypes

recom-binants

_{d’après l’analyse}

du

_caryotype

en

champ

pulsé. L’analyse isoenzymatique

multiloci

et

_{l’amplification}

_{de l’ADN par}

amorces aléatoires

_(RAPD)

ne corroboraient pas cette

_hypothèse.

Le statut de

_génotypes

parentaux

et recombinants inféré par

l’ana-lyse

en

_{champ pulsé}

est

_incompatible

avec nos résultats. Les variabilités révélées _par

champ pulsé

d’une

_part,

_isoenzymes

et RAPD d’autre

_part,

ont montré des résul-tats

_{profondément divergents. Cependant,}

cette étude a

_permis

_i)

d’observer une bonne corrélation entre _{les résultats obtenus par}

l’analyse

isoenzymatique

et

RAPD,

et

_ii)

d’apporter

des informations

complémen-taires sur la structure des

_populations

en

révélant une _{microvariabilité par les RAPD.}

Par

ailleurs,

les

_espèces

L

_guyanensis

et L

peruviana

ont pu être facilement discrimi-nées en RAPD. L’utilisation des RAPD

_peut

donc être

_envisagée

comme _marqueur

dia-gnostique d’espèce.

La deuxième série concernait 5 stocks

d’Équateur

déterminés par

l’analyse

isoen-zymatique

et

_{l’électrophorèse}

en

_champ

pulsé

comme étant des

_hybrides

entre L

panamensis

et L braziliensis. Les résultats RAPD sur 4 de ces stocks étaient tout à fait

en accord avec cette

_hypothèse.

Dans ce

tech-niques

concordaient. En

_effet,

les

_profils

RAPD des

_hybrides

_{correspondaient}

à l’association des bandes

_parentales,

mais

ces

_profils

n’étaient _pas

_toujours

une

com-binaison

_parfaite

des 2

_profils

_parentaux.

Cela

_suggère

que les

profils

obtenus n’étaient pas le résultat d’un

_mélange

de

stocks,

et _{que les}

_{phénomènes impliqués}

ne _{suivent pas} un schéma mendélien

clas-sique.

Cette dernière étude montre

_cependant

bien l’existence

_{d’échanges génétiques}

dans les

_populations

naturelles de Leishmania. Une véritable

_approche

de

_génétique

des

populations

permettra

d’évaluer

_l’impact

réel de ces

_{échanges génétiques,}

et donc de déterminer leur

_fréquence.

Références

Bastien P, Blaineau C, Pagès M (1992) Leishmania: sex, lies and _karyotype. Parasitoi Today 8, 178-181

Dujardin JC, Gajendra N, Arevalo J et al (1993) Karyo-type polymorphism and conserved characters in the Leishmania (Viannia) braziliensis complex explored

with chromosome-derived probes. Ann Soc Belge MM Trop 73. 101-118 8

Guerrini F _{(1993) Génétique} des _populations et phylo-génie des Leishmania du Nouveau Monde. Thèse de doctorat d’université, université des Sciences et

Techniques du _Languedoc

Tibayrenc M, Kjeilberg F, Ayala FJ (1990) A clonal theory

of _{parasitic protozoa:} the population structures of

Entamoeba, Leishmania, Naegleria, Plasmodium, Trichomonas, and Trypanosoma and their medical and taxonomical consequences. Proc Natl Acad Sci USA 87, 2414-2418 8

Comparaisons

entre la

_morphologie

et les

_isoenzymes

chez les

_espèces

du genre Rhodnius. P P SolanoSolano

₁

_,

J

J Pereira

_Pereira

₂

_,

JP

_Dujardin

M

_Tibayrenc

₍₁

CRTAl CIRDES

_01,

BP

454,

Bobo Dioulasso

01,

Burkina

_{Faso ;}

2_{Universidad de la}

Repu-blica, Montevideo,

Uruguay ;

3

Instituto

Boliviano de

_Biologia

de Altura

_(IBBA),

La

Paz,

Bolivia;

4

UMR

CNRS-ORSTOM

9926,

laboratoire de

_génétique

moléculaire des

_parasites

et des

vecteurs,

ORSTOM,

BP

5045,

34032

_Montpellier

cedex

_1,

France)

Le genre Rhodnius contient 12

_espèces,

dont 3

_jouent

un rôle vecteur

_important

de la maladie de

_Chagas

dans le nord de

l’Amé-rique

latine

_(Amérique

du Sud et

_Amérique

centrale) (Rhodain

and

_Perez,

_1985).

Le

plus important,

Rhodnius

_{prolixus, présent}

au

_Venezuela,

en

Colombie,

et dans

quelques

régions

d’Amérique centrale,

est

morphologiquement

très

_proche

d’autres

espèces

à rôle vecteur moindre comme R

neglectus,

confiné au

Brésil,

et R

robustus,

dont l’aire de

_{répartition géographique}

est vaste. Des confusions sont ainsi

_possibles,

et

_jettent

des doutes sur la

_répartition

géo-graphique

de

_{R prolixus,}

_{ainsi que} sur son

écologie

(Harry,

1992 ;

Diotaiutii

et al,

1984 ;

Dujardin

et al,

1991

).

Une

_population

de R

ecuadoriensis,

cap-turée sur un

_palmier

en

Équateur,

a été

éga-lement étudiée. Cette

_espèce,

morphologi-quement

bien différenciée des 3

autres,

joue

un rôle vecteur

_important

dans cette

_région

d’Amérique

du Sud.

Nous avons utilisé

_{l’électrophorèse}

des

isoenzymes

en tant

qu’outil diagnostique

dans le genre

Rhodnius,

et nous avons

observé les résultats suivants :

-

sur un

_{échantillonnage}

_allopatrique

de R

neglectus

et R

_prolixus,

2

_espèces

mor-phologiquement

semblables,

6 loci

dia-gnostiques

ont été trouvés sur 17

_analysés,

et les distances de Nei variaient de

0,44

à

0,51 ;

ces résultats confirment les résultats

d’expériences

de croisements

_qui

avaient montré une stérilité

_complète

entre ces 2

espèces ;

le même niveau de

_divergence

génétique

a été observé entre

_{R prolixus et}

R ecuasoriensis

₍₉

loci

_{diagnostiques) ;}

-

R

_prolixus

et R robustus différeraient très

légèrement morphologiquement,

mais ne

présentaient

aucune différence fixée sur les 17 loci

étudiés ;

cette ressemblance

géné-tique

était

_appuyée

par une fertilité