UNIVERSITE MOHAMMED V
FACULTE DE MEDECINE ET DE
ANNEE : 2019
LE SANG DE CORDON
OBTENTION ET APPLICATIONS
Présentée et soutenue publiquement le
Pour l'Obtention du Diplôme de
Docteur en Médecine
MOTS CLES : Sang de cordon, cellules souches, isolement, conservation, applications.
Mme S. BENKIRANE
Professeur d’Hématologie Biologique Mr A. MASRAR
Professeur d’Hématolog Mme M. NAZIH
Professeur d’Hématologie Biologique Mr A. JEAIDI
Professeur d’Hématologie Biologique
UNIVERSITE MOHAMMED V-RABAT FACULTE DE MEDECINE ET DE PHARMACIE RABAT THESE N°:
LE SANG DE CORDON
OBTENTION ET APPLICATIONS
THESE
Présentée et soutenue publiquement le : ……….
PAR
Mlle Lina HAJJI
Née le 30/04/1993 à TangerPour l'Obtention du Diplôme de
Docteur en Médecine
Sang de cordon, cellules souches, isolement, conservation,
E PRESIDENT d’Hématologie Biologique RAPPORTEUR d’Hématologie Biologique d’Hématologie Biologique d’Hématologie Biologique JUGES THESE N°: 399
OBTENTION ET APPLICATIONS
: ……….
Sang de cordon, cellules souches, isolement, conservation, PRESIDENTE RAPPORTEUR
DOYENS HONORAIRES :
1962 – 1969 : ProfesseurAbdelmalek FARAJ 1969 – 1974 : Professeur Abdellatif BERBICH 1974 – 1981 : Professeur Bachir LAZRAK 1981 – 1989 : Professeur Taieb CHKILI
1989 – 1997 : Professeur Mohamed Tahar ALAOUI 1997 – 2003 : Professeur AbdelmajidBELMAHI 2003 – 2013 : Professeur Najia HAJJAJ – HASSOUNI
ADMINISTRATION :
Doyen
Professeur Mohamed ADNAOUI
Vice Doyen chargé des Affaires Académiques et estudiantines
Professeur Brahim LEKEHAL
Vice Doyen chargé de la Recherche et de la Coopération
Professeur Taoufiq DAKKA
Vice Doyen chargé des Affaires Spécifiques à la Pharmacie
Professeur Jamal TAOUFIK
Secrétaire Général
Mr. Mohamed KARRA
UNIVERSITE MOHAMMED V
FACULTE DE MEDECINE ET DE PHARMACIE RABAT
1-
ENSEIGNANTS-CHERCHEURS MEDECINS ET PHARMACIENSPROFESSEURS :
Décembre 1984
Pr. MAAOUNI Abdelaziz Médecine Interne – Clinique Royale
Pr. MAAZOUZI Ahmed Wajdi Anesthésie -Réanimation
Pr. SETTAF Abdellatif pathologie Chirurgicale
Novembre et Décembre 1985
Pr. BENSAID Younes Pathologie Chirurgicale
Janvier, Février et Décembre 1987
Pr. LACHKAR Hassan Médecine Interne
Pr. YAHYAOUI Mohamed Neurologie
Décembre 1989
Pr. ADNAOUI Mohamed Médecine Interne –Doyen de la FMPR
Pr. OUAZZANI Taïbi Mohamed Réda Neurologie Janvier et Novembre 1990
Pr. HACHIM Mohammed* Médecine-Interne
Pr. KHARBACH Aîcha Gynécologie -Obstétrique
Pr. TAZI Saoud Anas Anesthésie Réanimation
Février Avril Juillet et Décembre 1991
Pr. AZZOUZI Abderrahim Anesthésie Réanimation –Doyen de la FMPO
Pr. BAYAHIA Rabéa Néphrologie
Pr. BELKOUCHI Abdelkader Chirurgie Générale
Pr. BENCHEKROUN Belabbes Abdellatif Chirurgie Générale
Pr. BENSOUDA Yahia Pharmacie galénique
Pr. BERRAHO Amina Ophtalmologie
Pr. BEZZAD Rachid Gynécologie ObstétriqueMéd Chef Maternité des Orangers
Pr. CHERRAH Yahia Pharmacologie
Pr. CHOKAIRI Omar Histologie Embryologie
Pr. KHATTAB Mohamed Pédiatrie
Pr. SOULAYMANI Rachida Pharmacologie – Dir. du Centre National PV Rabat
Pr. TAOUFIK Jamal Chimie thérapeutique V.D à la pharmacie+Dir
duCEDOC+Directeur du Médicament
Décembre 1992
Pr. AHALLAT Mohamed Chirurgie Générale Doyen de FMPT
Pr. BENSOUDA Adil Anesthésie Réanimation
Pr. CHAHED OUAZZANI Laaziza Gastro-Entérologie
Pr. CHRAIBI Chafiq Gynécologie Obstétrique
Pr. FELLAT Rokaya Cardiologie
Pr. GHAFIR Driss* Médecine Interne
Pr. JIDDANE Mohamed Anatomie
Pr. TAGHY Ahmed Chirurgie Générale
Pr. ZOUHDI Mimoun Microbiologie
Mars 1994
Pr. BENJAAFAR Noureddine Radiothérapie
Pr. BEN RAIS Nozha Biophysique
Pr. CAOUI Malika Biophysique
Pr. CHRAIBI Abdelmjid Endocrinologie et Maladies Métaboliques
Doyen de la FMPA
Pr. EL AMRANI Sabah Gynécologie Obstétrique
Pr. EL BARDOUNI Ahmed Traumato-Orthopédie
Pr. EL HASSANI My Rachid Radiologie
Pr. ERROUGANI Abdelkader Chirurgie Générale- Directeur CHIS -Rabat
Pr. ESSAKALI Malika Immunologie
Pr. ETTAYEBI Fouad Chirurgie Pédiatrique
Pr. HASSAM Badredine Dermatologie
Pr. IFRINE Lahssan Chirurgie Générale
Pr. MAHFOUD Mustapha Traumatologie – Orthopédie
Pr. RHRAB Brahim Gynécologie –Obstétrique
Pr. SENOUCI Karima Dermatologie
Mars 1994
Pr. ABBAR Mohamed* Urologie Directeur Hôpital My Ismail Meknès
Pr. ABDELHAK M’barek Chirurgie – Pédiatrique
Pr. BENTAHILA Abdelali Pédiatrie
Pr. BENYAHIA Mohammed Ali Gynécologie – Obstétrique Pr. BERRADA Mohamed Saleh Traumatologie – Orthopédie
Pr. CHERKAOUI LallaOuafae Ophtalmologie
Pr. LAKHDAR Amina Gynécologie Obstétrique
Pr. MOUANE Nezha Pédiatrie
Mars 1995
Pr. ABOUQUAL Redouane Réanimation Médicale
Pr. AMRAOUI Mohamed Chirurgie Générale
Pr. BAIDADA Abdelaziz Gynécologie Obstétrique
Pr. BARGACH Samir Gynécologie Obstétrique
Pr. DRISSI KAMILI Med Nordine* Anesthésie Réanimation
Pr. EL MESNAOUI Abbes Chirurgie Générale
Pr. ESSAKALI HOUSSYNI Leila Oto-Rhino-Laryngologie
Pr. HDA Abdelhamid* Cardiologie -Directeur du Service de Santé des FAR
Pr. IBEN ATTYA ANDALOUSSI Ahmed Urologie
Pr. OUAZZANI CHAHDI Bahia Ophtalmologie
Décembre 1996
Pr. AMIL Touriya* Radiologie
Pr. BELKACEM Rachid Chirurgie Pédiatrie
Pr. BOULANOUAR Abdelkrim Ophtalmologie
Pr. EL ALAMI EL FARICHA EL Hassan Chirurgie Générale
Pr. GAOUZI Ahmed Pédiatrie
Pr. MAHFOUDI M’barek* Radiologie
Pr. OUZEDDOUN Naima Néphrologie
Pr. ZBIR EL Mehdi* Cardiologie DirecteurHôp. Mil.d’Instruction Med V Rabat
Novembre 1997
Pr. ALAMI Mohamed Hassan Gynécologie-Obstétrique
Pr. BEN SLIMANE Lounis Urologie
Pr. BIROUK Nazha Neurologie
Pr. ERREIMI Naima Pédiatrie
Pr. FELLAT Nadia Cardiologie
Pr. KADDOURI Noureddine Chirurgie Pédiatrique
Pr. KOUTANI Abdellatif Urologie
Pr. LAHLOU Mohamed Khalid Chirurgie Générale
Pr. MAHRAOUI CHAFIQ Pédiatrie
Pr. TAOUFIQ Jallal Psychiatrie Directeur Hôp. Arrazi Salé
Pr. YOUSFI MALKI Mounia Gynécologie Obstétrique
Novembre 1998
Pr. BENOMAR ALI Neurologie – Doyen de la FMP Abulcassis
Pr. BOUGTAB Abdesslam Chirurgie Générale
Pr. ER RIHANI Hassan Oncologie Médicale
Pr. BENKIRANE Majid* Hématologie
Janvier 2000
Pr. ABID Ahmed* Pneumophtisiologie
Pr. AIT OUMAR Hassan Pédiatrie
Pr. BENJELLOUN DakhamaBadr.Sououd Pédiatrie
Pr. BOURKADI Jamal-Eddine Pneumo-phtisiologie Directeur Hôp. My Youssef
Pr. CHARIF CHEFCHAOUNI Al Montacer Chirurgie Générale
Pr. ECHARRAB El Mahjoub Chirurgie Générale
Pr. EL FTOUH Mustapha Pneumo-phtisiologie
Pr. EL MOSTARCHID Brahim* Neurochirurgie
Pr. MAHMOUDI Abdelkrim* Anesthésie-Réanimation
Pr. TACHINANTE Rajae Anesthésie-Réanimation
Pr. TAZI MEZALEK Zoubida Médecine Interne
Novembre 2000
Pr. AIDI Saadia Neurologie
Pr. AJANA Fatima Zohra Gastro-Entérologie
Pr. BENAMR Said Chirurgie Générale
Pr. ECH-CHERIF EL KETTANI Selma Anesthésie-Réanimation
Pr. EL HASSANI Amine Pédiatrie Directeur Hôp. ChekikhZaied
Pr. EL KHADER Khalid Urologie
Pr. EL MAGHRAOUI Abdellah* Rhumatologie
Pr. GHARBI Mohamed El Hassan Endocrinologie et Maladies Métaboliques
Pr. MDAGHRI ALAOUI Asmae Pédiatrie
Pr. ROUIMI Abdelhadi* Neurologie
Décembre 2000
Pr. ZOHAIR ABDELAH* ORL
Décembre 2001
Pr. BALKHI Hicham* Anesthésie-Réanimation
Pr. BENABDELJLIL Maria Neurologie
Pr. BENAMAR Loubna Néphrologie
Pr. BENAMOR Jouda Pneumo-phtisiologie
Pr. BENELBARHDADI Imane Gastro-Entérologie
Pr. BENNANI Rajae Cardiologie
Pr. BENOUACHANE Thami Pédiatrie
Pr. BEZZA Ahmed* Rhumatologie
Pr. BOUCHIKHI IDRISSI Med Larbi Anatomie
Pr. BOUMDIN El Hassane* Radiologie
Pr. CHAT Latifa Radiologie
Pr. DAALI Mustapha* Chirurgie Générale
Pr. DRISSI Sidi Mourad* Radiologie
Pr. EL HIJRI Ahmed Anesthésie-Réanimation
Pr. EL MAAQILI Moulay Rachid Neuro-Chirurgie
Pr. EL MADHI Tarik Chirurgie-Pédiatrique
Pr. EL OUNANI Mohamed Chirurgie Générale
Pr. ETTAIR Said Pédiatrie Directeur. Hôp.d’Enfants Rabat
Pr. GAZZAZ Miloudi* Neuro-Chirurgie
Pr. HRORA Abdelmalek Chirurgie Générale
Pr. KABBAJ Saad Anesthésie-Réanimation
Pr. KABIRI EL Hassane* Chirurgie Thoracique
Pr. LAMRANI Moulay Omar Traumatologie Orthopédie
Pr. LEKEHAL Brahim Chirurgie Vasculaire Périphérique
Pr. MAHASSIN Fattouma* Médecine Interne
Pr. MEDARHRI Jalil Chirurgie Générale
Pr. MIKDAME Mohammed* Hématologie Clinique
Pr. MOHSINE Raouf Chirurgie Générale
Pr. NOUINI Yassine Urologie Directeur Hôpital Ibn Sina
Pr. SABBAH Farid Chirurgie Générale
Pr. SEFIANI Yasser Chirurgie Vasculaire Périphérique
Décembre 2002
Pr. AL BOUZIDI Abderrahmane* Anatomie Pathologique
Pr. AMEUR Ahmed * Urologie
Pr. AMRI Rachida Cardiologie
Pr. AOURARH Aziz* Gastro-Entérologie
Pr. BAMOU Youssef * Biochimie-Chimie
Pr. BELMEJDOUB Ghizlene* Endocrinologie et Maladies Métaboliques
Pr. BENZEKRI Laila Dermatologie
Pr. BENZZOUBEIR Nadia Gastro-Entérologie
Pr. BERNOUSSI Zakiya Anatomie Pathologique
Pr. BICHRA Mohamed Zakariya* Psychiatrie
Pr. CHOHO Abdelkrim * Chirurgie Générale
Pr. CHKIRATE Bouchra Pédiatrie
Pr. EL ALAMI EL FELLOUS Sidi Zouhair Chirurgie Pédiatrique
Pr. EL HAOURI Mohamed * Dermatologie
Pr. FILALI ADIB Abdelhai Gynécologie Obstétrique
Pr. HAJJI Zakia Ophtalmologie
Pr. IKEN Ali Urologie
Pr. JAAFAR Abdeloihab* Traumatologie Orthopédie
Pr. KRIOUILE Yamina Pédiatrie
Pr. MABROUK Hfid* Traumatologie Orthopédie
Pr. MOUSSAOUI RAHALI Driss* Gynécologie Obstétrique
Pr. OUJILAL Abdelilah Oto-Rhino-Laryngologie
Pr. RACHID Khalid * Traumatologie Orthopédie
Pr. RAISS Mohamed Chirurgie Générale
Pr. RGUIBI IDRISSI Sidi Mustapha* Pneumophtisiologie
Pr. RHOU Hakima Néphrologie
Pr. SIAH Samir * Anesthésie Réanimation
Pr. THIMOU Amal Pédiatrie
Pr. ZENTAR Aziz* Chirurgie Générale
Janvier 2004
Pr. ABDELLAH El Hassan Ophtalmologie
Pr. AMRANI Mariam Anatomie Pathologique
Pr. BENBOUZID Mohammed Anas Oto-Rhino-Laryngologie
Pr. BENKIRANE Ahmed* Gastro-Entérologie
Pr. BOUGHALEM Mohamed* Anesthésie Réanimation
Pr. BOULAADAS Malik Stomatologie et Chirurgie Maxillo-faciale
Pr. BOURAZZA Ahmed* Neurologie
Pr. CHAGAR Belkacem* Traumatologie Orthopédie
Pr. CHERRADI Nadia Anatomie Pathologique
Pr. EL FENNI Jamal* Radiologie
Pr. EL HANCHI ZAKI Gynécologie Obstétrique
Pr. HACHI Hafid Chirurgie Générale
Pr. JABOUIRIK Fatima Pédiatrie
Pr. KHARMAZ Mohamed Traumatologie Orthopédie
Pr. MOUGHIL Said Chirurgie Cardio-Vasculaire
Pr. OUBAAZ Abdelbarre* Ophtalmologie
Pr. TARIB Abdelilah* Pharmacie Clinique
Pr. TIJAMI Fouad Chirurgie Générale
Pr. ZARZUR Jamila Cardiologie
Janvier 2005
Pr. ABBASSI Abdellah Chirurgie Réparatrice et Plastique
Pr. AL KANDRY Sif Eddine* Chirurgie Générale
Pr. ALLALI Fadoua Rhumatologie
Pr. AMAZOUZI Abdellah Ophtalmologie
Pr. AZIZ Noureddine* Radiologie
Pr. BAHIRI Rachid Rhumatologie Directeur. Hôp. Al Ayachi Salé
Pr. BARKAT Amina Pédiatrie
Pr. BENYASS Aatif Cardiologie
Pr. DOUDOUH Abderrahim* Biophysique
Pr. EL HAMZAOUI Sakina* Microbiologie
Pr. HAJJI Leila Cardiologie (mise en disponibilité)
Pr. HESSISSEN Leila Pédiatrie
Pr. JIDAL Mohamed* Radiologie
Pr. LAAROUSSI Mohamed Chirurgie Cardio-vasculaire
Pr. LYAGOUBI Mohammed Parasitologie
Pr. RAGALA Abdelhak Gynécologie Obstétrique
Pr. SBIHI Souad Histo-Embryologie Cytogénétique
Pr. ZERAIDI Najia Gynécologie Obstétrique
Avril 2006
Pr. ACHEMLAL Lahsen* Rhumatologie
Pr. AKJOUJ Said* Radiologie
Pr. BELMEKKI Abdelkader* Hématologie
Pr. BENCHEIKH Razika O.R.L
Pr. BIYI Abdelhamid* Biophysique
Pr. BOUHAFS Mohamed El Amine Chirurgie - Pédiatrique Pr. BOULAHYA Abdellatif* Chirurgie Cardio – Vasculaire Pr. CHENGUETI ANSARI Anas Gynécologie Obstétrique
Pr. DOGHMI Nawal Cardiologie
Pr. FELLAT Ibtissam Cardiologie
Pr. FAROUDY Mamoun Anesthésie Réanimation
Pr. HARMOUCHE Hicham Médecine Interne
Pr. HANAFI Sidi Mohamed* Anesthésie Réanimation
Pr. IDRISS LAHLOU Amine* Microbiologie
Pr. KILI Amina Pédiatrie
Pr. KISRA Hassan Psychiatrie
Pr. KISRA Mounir Chirurgie – Pédiatrique
Pr. LAATIRIS Abdelkader* Pharmacie Galénique
Pr. LMIMOUNI Badreddine* Parasitologie
Pr. MANSOURI Hamid* Radiothérapie
Pr. OUANASS Abderrazzak Psychiatrie
Pr. SAFI Soumaya* Endocrinologie
Pr. SEKKAT Fatima Zahra Psychiatrie
Pr. SOUALHI Mouna Pneumo – Phtisiologie
Pr. TELLAL Saida* Biochimie
Pr. ZAHRAOUI Rachida Pneumo – Phtisiologie
Decembre 2006
Pr SAIR Khalid Chirurgie générale Dir. Hôp.Av.Marrakech
Octobre 2007
Pr. ABIDI Khalid Réanimation médicale
Pr. ACHACHI Leila Pneumo phtisiologie
Pr. ACHOUR Abdessamad* Chirurgie générale
Pr. AIT HOUSSA Mahdi* Chirurgie cardio vasculaire
Pr. AMHAJJI Larbi* Traumatologie orthopédie
Pr. AOUFI Sarra Parasitologie
Pr. BAITE Abdelouahed* Anesthésie réanimation Directeur ERSSM
Pr. BALOUCH Lhousaine* Biochimie-chimie
Pr. BENZIANE Hamid* Pharmacie clinique
Pr. BOUTIMZINE Nourdine Ophtalmologie
Pr. CHARKAOUI Naoual* Pharmacie galénique
Pr. EHIRCHIOU Abdelkader* Chirurgie générale Pr. EL BEKKALI Youssef * Chirurgie cardio-vasculaire
Pr. ELABSI Mohamed Chirurgie générale
Pr. EL MOUSSAOUI Rachid Anesthésie réanimation
Pr. EL OMARI Fatima Psychiatrie
Pr. GHARIB Noureddine Chirurgie plastique et réparatrice
Pr. HADADI Khalid* Radiothérapie
Pr. ICHOU Mohamed* Oncologie médicale
Pr. ISMAILI Nadia Dermatologie
Pr. KEBDANI Tayeb Radiothérapie
Pr. LALAOUI SALIM Jaafar* Anesthésie réanimation
Pr. LOUZI Lhoussain* Microbiologie
Pr. MADANI Naoufel Réanimation médicale
Pr. MAHI Mohamed* Radiologie
Pr. MARC Karima Pneumo phtisiologie
Pr. MASRAR Azlarab Hématologie biologique
Pr. RABHI Monsef* Médecine interne
Pr. RADOUANE Bouchaib* Radiologie
Pr. SEFFAR Myriame Microbiologie
Pr. SEKHSOKH Yessine* Microbiologie
Pr. SIFAT Hassan* Radiothérapie
Pr. TABERKANET Mustafa* Chirurgie vasculaire périphérique
Pr. TACHFOUTI Samira Ophtalmologie
Pr. TAJDINE Mohammed Tariq* Chirurgie générale
Pr. TANANE Mansour* Traumatologie orthopédie
Pr. TLIGUI Houssain Parasitologie
Pr. TOUATI Zakia Cardiologie
Décembre 2008
Pr TAHIRI My El Hassan* Chirurgie Générale
Mars 2009
Pr. ABOUZAHIR Ali* Médecine interne
Pr. AGDR Aomar* Pédiatre
Pr. AIT ALI Abdelmounaim* Chirurgie Générale
Pr. AIT BENHADDOU El hachmia Neurologie
Pr. AKHADDAR Ali* Neuro-chirurgie
Pr. ALLALI Nazik Radiologie
Pr. AMINE Bouchra Rhumatologie
Pr. ARKHA Yassir Neuro-chirurgieDirecteur Hôp.des Spécialités
Pr. BELYAMANI Lahcen* Anesthésie Réanimation
Pr. BJIJOU Younes Anatomie
Pr. BOUHSAIN Sanae* Biochimie-chimie
Pr. BOUI Mohammed* Dermatologie
Pr. BOUNAIM Ahmed* Chirurgie Générale
Pr. BOUSSOUGA Mostapha* Traumatologie orthopédique
Pr. CHTATA Hassan Toufik* Chirurgie vasculaire périphérique
Pr. DOGHMI Kamal* Hématologie clinique
Pr. EL MALKI Hadj Omar Chirurgie Générale
Pr. EL OUENNASS Mostapha* Microbiologie
Pr. ENNIBI Khalid* Médecine interne
Pr. FATHI Khalid Gynécologie obstétrique
Pr. HASSIKOU Hasna * Rhumatologie
Pr. KABBAJ Nawal Gastro-entérologie
Pr. KABIRI Meryem Pédiatrie
Pr. KARBOUBI Lamya Pédiatrie
Pr. LAMSAOURI Jamal* Chimie Thérapeutique
Pr. MARMADE Lahcen Chirurgie Cardio-vasculaire
Pr. MESKINI Toufik Pédiatrie
Pr. NASSAR Ittimade Radiologie
Pr. OUKERRAJ Latifa Cardiologie
Pr. RHORFI Ismail Abderrahmani * Pneumo-phtisiologie Octobre 2010
Pr. ALILOU Mustapha Anesthésie réanimation
Pr. AMEZIANE Taoufiq* Médecine interne
Pr. BELAGUID Abdelaziz Physiologie
Pr. CHADLI Mariama* Microbiologie
Pr. CHEMSI Mohamed* Médecine aéronautique
Pr. DAMI Abdellah* Biochimie chimie
Pr. DARBI Abdellatif* Radiologie
Pr. DENDANE Mohammed Anouar Chirurgie pédiatrique
Pr. EL HAFIDI Naima Pédiatrie
Pr. EL KHARRAS Abdennasser* Radiologie
Pr. EL MAZOUZ Samir Chirurgie plastique et réparatrice
Pr. EL SAYEGH Hachem Urologie
Pr. ERRABIH Ikram Gastro entérologie
Pr. LAMALMI Najat Anatomie pathologique
Pr. MOSADIK Ahlam Anesthésie Réanimation
Pr. MOUJAHID Mountassir* Chirurgie générale
Pr. NAZIH Mouna* Hématologie biologique
Pr. ZOUAIDIA Fouad Anatomie pathologique
Decembre 2010
Pr.ZNATIKaoutar Anatomie Pathologique Mai 2012
Pr. AMRANI Abdelouahed Chirurgie Pédiatrique
Pr. ABOUELALAA Khalil* Anesthésie Réanimation
Pr. BENCHEBBA Driss* Traumatologie Orthopédique
Pr. DRISSI Mohamed* Anesthésie Réanimation
Pr. EL ALAOUI MHAMDI Mouna Chirurgie Générale Pr. EL KHATTABI Abdessadek* Médecine Interne
Pr. EL OUAZZANI Hanane* Pneumophtisiologie
Pr. ER-RAJI Mounir Chirurgie Pédiatrique
Pr. JAHID Ahmed Anatomie pathologique
Pr. MEHSSANI Jamal* Psychiatrie
Pr. RAISSOUNI Maha* Cardiologie
*Enseignants Militaires
Février 2013
Pr. AIT EL CADI Mina Toxicologie
Pr. AMRANI HANCHI Laila Gastro-Entérologie
Pr. AMOUR Mourad Anesthésie Réanimation
Pr. AWAB Almahdi Anesthésie Réanimation
Pr. BELAYACHI Jihane Réanimation Médicale
Pr. BELKHADIR Zakaria Houssain Anesthésie Réanimation
Pr. BENCHEKROUN Laila Biochimie-Chimie
Pr. BENKIRANE Souad Hématologie biologique
Pr. BENNANA Ahmed* Informatique Pharmaceutique
Pr. BENSGHIR Mustapha* Anesthésie Réanimation
Pr. BENYAHIA Mohammed* Néphrologie
Pr. BOUATIA Mustapha Chimie Analytique et Bromatologie
Pr. BOUABID Ahmed Salim* Traumatologie Orthopédie
Pr. BOUTARBOUCH Mahjouba Anatomie
Pr. CHAIB Ali* Cardiologie
Pr. DENDANE Tarek Réanimation Médicale
Pr. DINI Nouzha* Pédiatrie
Pr. ECH-CHERIF EL KETTANI Mohamed Ali Anesthésie Réanimation Pr. ECH-CHERIF EL KETTANI Najwa Radiologie
Pr. ELFATEMI Nizare Neuro-Chirurgie
Pr. EL GUERROUJ Hasnae Médecine Nucléaire
Pr. EL HARTI Jaouad Chimie Thérapeutique
Pr. EL JOUDI Rachid* Toxicologie
Pr. EL KABABRI Maria Pédiatrie
Pr. EL KHANNOUSSI Basma Anatomie Pathologie
Pr. EL KHLOUFI Samir Anatomie
Pr. EL KORAICHI Alae Anesthésie Réanimation
Pr. EN-NOUALI Hassane* Radiologie
Pr. ERRGUIG Laila Physiologie
Pr. FIKRI Meryim Radiologie
Pr. GHFIR Imade Médecine Nucléaire
Pr. IMANE Zineb Pédiatrie
Pr. IRAQI Hind Endocrinologie et maladies métaboliques
Pr. KABBAJ Hakima Microbiologie
Pr. KADIRI Mohamed* Psychiatrie
Pr. LATIB Rachida Radiologie
Pr. MAAMAR Mouna Fatima Zahra Médecine Interne
Pr. MEDDAH Bouchra Pharmacologie
Pr. MELHAOUI Adyl Neuro-chirurgie
Pr. MRABTI Hind Oncologie Médicale
Pr. NEJJARI Rachid Pharmacognosie
Pr. OUBEJJA Houda Chirurgie Pédiatrique
Pr. OUKABLI Mohamed* Anatomie Pathologique
Pr. RAHMANI Mounia Neurologie
Pr. REDA Karim* Ophtalmologie
Pr. REGRAGUI Wafa Neurologie
Pr. RKAIN Hanan Physiologie
Pr. ROSTOM Samira Rhumatologie
Pr. ROUAS Lamiaa Anatomie Pathologique
Pr. ROUIBAA Fedoua* Gastro-Entérologie
Pr. SALIHOUN Mouna Gastro-Entérologie
Pr. SAYAH Rochde Chirurgie Cardio-Vasculaire
Pr. SEDDIK Hassan* Gastro-Entérologie
Pr. ZERHOUNI Hicham Chirurgie Pédiatrique
Pr. ZINE Ali* Traumatologie Orthopédie
Avril 2013
Pr. EL KHATIB Mohamed Karim* Stomatologie et Chirurgie Maxillo-faciale MAI 2013
Pr.BOUSLIMAN Yassir Toxicologie
MARS 2014
Pr. ACHIR Abdellah Chirurgie Thoracique
Pr. BENCHAKROUN Mohammed * Traumatologie- Orthopédie
Pr. BOUCHIKH Mohammed Chirurgie Thoracique
Pr. EL KABBAJ Driss * Néphrologie
Pr. EL MACHTANI IDRISSI Samira * Biochimie-Chimie
Pr. HARDIZI Houyam Histologie- Embryologie-Cytogénétique
Pr. HASSANI Amale * Pédiatrie
Pr. HERRAK Laila Pneumologie
Pr. JANANE Abdellah * Urologie
Pr. JEAIDI Anass * Hématologie Biologique
Pr. KOUACH Jaouad* Génycologie-Obstétrique
Pr. LEMNOUER Abdelhay* Microbiologie
Pr. MAKRAM Sanaa * Pharmacologie
Pr. OULAHYANE Rachid* Chirurgie Pédiatrique
Pr. RHISSASSI Mohamed Jaafar CCV
Pr. SABRY Mohamed* Cardiologie
Pr. SEKKACH Youssef* Médecine Interne
Pr. TAZI MOUKHA Zakia Génécologie-Obstétrique
AVRIL 2014
PROFESSEURS AGREGES :
DECEMBRE 2014
Pr. ABILKASSEM Rachid* Pédiatrie
Pr. AIT BOUGHIMA Fadila Médecine Légale
Pr. BEKKALI Hicham * Anesthésie-Réanimation Pr. BENAZZOU Salma Chirurgie Maxillo-Faciale
Pr. BOUABDELLAH Mounya Biochimie-Chimie
Pr. BOUCHRIK Mourad* Parasitologie Pr. DERRAJI Soufiane* Pharmacie Clinique Pr. DOBLALI Taoufik* Microbiologie Pr. EL AYOUBI EL IDRISSI Ali Anatomie
Pr. EL GHADBANE AbdedaimHatim* Anesthésie-Réanimation Pr. EL MARJANY Mohammed* Radiothérapie
Pr. FEJJAL Nawfal Chirurgie Réparatrice et Plastique
Pr. JAHIDI Mohamed* O.R.L Pr. LAKHAL Zouhair* Cardiologie
Pr. OUDGHIRI Nezha Anesthésie-Réanimation
Pr. RAMI Mohamed Chirurgie Pédiatrique
Pr. SABIR Maria Psychiatrie
Pr. SBAI IDRISSI Karim* Médecine préventive, santé publique et Hyg. AOUT 2015
Pr. MEZIANE Meryem Dermatologie Pr. TAHRI Latifa Rhumatologie JANVIER 2016
Pr. BENKABBOU Amine Chirurgie Générale Pr. EL ASRI Fouad* Ophtalmologie Pr. ERRAMI Noureddine* O.R.L
Pr. NITASSI Sophia O.R.L JUIN 2017
Pr. ABI Rachid* Microbiologie Pr. ASFALOU Ilyasse* Cardiologie
Pr. BOUAYTI El Arbi* Médecine préventive, santé publique et Hyg.
Pr. BOUTAYEB Saber Oncologie Médicale
Pr. EL GHISSASSI Ibrahim Oncologie Médicale Pr. OURAINI Saloua* O.R.L
Pr. RAZINE Rachid Médecine préventive, santé publique et Hyg. Pr. ZRARA Abdelhamid* Immunologie
2- ENSEIGNANTS – CHERCHEURS SCIENTIFIQUES
PROFESSEURS / PRs. HABILITES
Pr. ABOUDRAR Saadia Physiologie
Pr. ALAMI OUHABI Naima Biochimie – chimie
Pr. ALAOUI Katim Pharmacologie
Pr. ALAOUI SLIMANI Lalla Naïma Histologie-Embryologie
Pr. ANSAR M’hammed Chimie Organique et Pharmacie Chimique
Pr. BARKIYOU Malika Histologie-Embryologie
Pr. BOUHOUCHE Ahmed Génétique Humaine
Pr. BOUKLOUZE Abdelaziz Applications Pharmaceutiques Pr. CHAHED OUAZZANI LallaChadia Biochimie – chimie
Pr. DAKKA Taoufiq Physiologie
Pr. FAOUZI Moulay El Abbes Pharmacologie
Pr. IBRAHIMI Azeddine Biologie moléculaire/Biotechnologie Pr. KHANFRI Jamal Eddine Biologie
Pr. OULAD BOUYAHYA IDRISSI Med Chimie Organique
Pr. REDHA Ahlam Chimie
Pr. TOUATI Driss Pharmacognosie Pr. ZAHIDI Ahmed Pharmacologie
Mise à jour le 10/10/2018 Khaled Abdellah
A mon père,
T’aimer, est une évidence, même si on ne se le dit pas, et qu’on ne
se le montre pas assez souvent.
Tu es mon premier amour , mon papa. Un père présent, de la
vieille école, un homme comme on n’en fait plus, avec des
principes à l’ancienne et des valeurs.
Des valeurs que tu as su me transmettre afin que je devienne une
adulte indépendante et débrouillarde.
J’ai eu peur pendant des années de ne pas être à la hauteur de ta
force, de tes attentes, je me suis sentie souvent incomprise face à
ton pragmatisme. Papa, j’espère qu’à présent, tu es fier de moi.
Je sais que peu importe les problèmes auxquels je serai
confrontés, toi papa, mon essentiel, tu seras toujours là pour moi
à m’abriter des tempêtes de la vie.
En
espérant que cette thèse puisse être à la hauteur de tout ce
que tu as fait pour moi.
Papa, je t’aime.
A ma mère,
J’ai avec toi une relation peu commune.
Tu es ma confidente, mon alliée et sans toi, j'aurais certainement
manqué de repères, je n'aurais pas su sur qui m'appuyer lorsque
tout allait de travers, je n'aurais pas eu la certitude que
quelqu'un m'aimerait quoi que je fasse, sans conditions.
Je sais que plus souvent qu’autrement tu t’es oubliée pour moi,
pour nous. Mais si seulement tu pouvais te voir avec mes yeux :
Tu pourrais voir une femme remplie de passion et d’amour et qui
aime d’une seule façon soit à cent milles à l’heure.
Tu pourrais voir comment à partir de rien tu fais énormément.
Tu verrais toute l’admiration que j’ai pour toi.
Et surtout tu verrais comment je suis fier de pouvoir dire que tu
es ma maman, ma meilleure amie, mon idole.
Alors merci maman, d'être celle que tu es, de m'avoir épaulé et
soutenue dans chaque moment de mon existence, de m'avoir
appris les valeurs fondamentales de la vie.
Je ne prendrai jamais assez le temps de te le dire.
A mon frère Yassir
Je sais que tu te cherches, je sais que ca n’a pas été toujours
facile pour toi et je sais que tu n’es pas l’homme le plus
exemplaire dans toutes les sphères de ta vie, mais je t’admire. Je
t’admire d’être patient face à mes caprices , et d’être courageux
d’affronter les difficultés de la vie avec un sourire étampé sur le
visage, d’être authentique, et d’être le frère qui m’a toujours
tendu la main et ouvert son cœur.
Je t’ai vu grandir et c’est pour ca que je sais que tu es capable
de réaliser toutes tes aspirations.
Merci d’être la personne sur laquelle je peux toujours compter .Je
t'adore au delà des liens du sang et à jamais .
A mon petit frère Youssef
Je me demande bien souvent ce qui se passe dans ta tête de petit
garçon de dix ans. Je sens que tu comprends beaucoup plus de
choses que je ne peux l'imaginer. Je te vois grandir, évoluer et je
suis extrêmement fière de ce que tu accomplis, non pas comme
une sœur, mais plutôt comme une véritable deuxième maman .
Saches que tu seras toujours l’espoir de mon cœur, mon unique et
seul protégé.
A ma famille Talidi
A l’âme de mon grand-père abdelkadder Talidi, je sais que tu
veilles sur nous de là-haut mais j’aurais tellement de choses à te
raconter si tu étais là, de conseils à te demander et de bras dans
lesquels me consoler quand je ne sais plus vers qui me tourner.
A ma chère grand-mère Zohra kehil , ma bouffée d’oxygène qui
ne cesse d’égayer ma vie de ses mots les plus doux, et de ses gestes
d’affection.
A ma tante Loubna, ma deuxième maman,
Tu m’as offert des instants de bonheur simple. Peut être n’en es
tu pas consciente, mais tu m’as transmis des principes qui ont
forgé ma personnalité au fil des années. Il y a tant de souvenirs
qui me reviennent à l’esprit qu’il me faudrait des pages entières
pour tous les énumérer . Dans les pires moments de ma vie, j'ai
toujours pu compter sur toi. Je voulais que tu saches à quel point
ton soutien a été d'une grande aide pour moi.
Alors du fond du cœur...merci pour ton amour inconditionnel
A mon oncle Khalid , tu es à la fois mon protecteur et mon
complice , et il n’ya que toi pour créer cet équilibre. J’ai toujours
admiré ta subtilité , ton sens d’aventure et ta finesse à résoudre
les problèmes . Et c’est peut être de toi que j’ai appris à saisir
mon courage à deux mains .Saches qu’aucun des mots ne saura
exprimer mon respect envers toi .
A mon oncle Mohammed , le moindre que l’on puisse dire, c’est
que ta joie de vivre est contagieuse. Tu es véritablement l’eau
qui désaltère cette famille et le soleil qui la réchauffe .Tu as su
m’inculquer la valeur de l’optimisme , et c’est peut-être grâce a
toi, si j’arrive à voir la moitié pleine du verre .Merci de m’avoir
épaulé, et soutenu tout au long de mon cursus scolaire et
universitaire. Que le bon Dieu préserve Hamza et Ali , et qu’il
A ma famille Hajji
A l’âme de mon grand-père Bouazza Hajji, que je n’ai
malheureusement pas eu la chance de connaitre dans la vraie vie,
je sais qu’on se serait tellement bien entendus .
A ma grand-mère Fatima Elkaid
, pour ses encouragements, ses
prières et l’enthousiasme qu’elle exprimait toujours de la même
ferveur à chaque fois que je réussissais mon année d’étude.
A mes tantes
qui ont toujours su m’épauler.
A mon oncle Simohammed Hajji
qui m’a appris les bases de la
médecine, qui m’a longtemps soutenu durant mon cursus
universitaire, et qui m’a réconforté dans les moments les plus
difficiles , merci pour ta présence
A mon oncle Khalid
, mon deuxième papa, sais-tu qu’entre une
nièce et son oncle, l’amour ne s’explique pas, c’est sans doute
pour cela que j’ai du mal à l’exprimer par des mots. C’est si
instinctif qu’on le ressent, c’est un amour inné qui se matérialise
jour après jour pendant toute une vie pour nous construire des
souvenirs à partir de nombreuses expériences qu’on a vécu . Tu as
toujours été là pour m’accompagner, me prendre la main, me
soutenir, m’encourager, et surtout me féliciter. Mon enfance,
mon adolescence, mes premiers pas dans la vie adulte. Toutes les
étapes de mon existence, je les ai traversées, sous ton regard
protecteur.
A ma belle-famille Hadri
Je vous remercie de m’avoir considérée comme votre propre fille,
et de m’avoir si bien accueillie dans votre famille.
A présent, vous faites partie de ma vie et j’en suis fière et
heureuse. Tout le monde n’a pas la chance de si bien s’entendre
avec sa belle-famille et je me trouve chanceuse d’avoir trouvé en
même temps l’amour, et une seconde famille.
Vous êtes pour moi, un modèle de générosité, de force et de
rigueur et j’espère réussir à fonder avec Nawfel une famille
aussi solide et remplie d’amour que la vôtre.
A mon fiancé Nawfel
Même si nous prenons encore le temps de nous apprivoiser, je sais
que si la vie t’a mis sur mon chemin, ce n’est ni un hasard ni une
coïncidence, mais une évidence. Tant de choses n’ont pris de sens
que parce que tu es entré dans ma vie. Tu as réveillé en moi les
rêves que j’avais décidé d’ignorer, tu m’as réconcilié avec mes
sentiments et tu m’as poussé à donner le meilleur de moi-même
.
Et c’est pour cela que je ne doute pas un seul instant de ta
sincérité à mon égard, de ton amour pour moi, et de ta confiance
en notre union
.
Cette symbiose qui va au-delà de la simple
complicité et cette alchimie des cœurs prouvent , qu’on a dans le
présent des motifs de désirer l’avenir. Nawfel, lorsque mes
cheveux vireront au blanc, et lorsque mes pas se feront à l’aide
d’une canne, je veux que tu sois toujours à mes cotés.
Tu seras à jamais ma providence.
A mes meilleures amies
Nouralhouda Hajji
Je ne te le dirai jamais assez, ta présence dans ma vie est une
réelle bénédiction
.
J'ai passé de si beau moment avec toi : on a
rigolé et pleuré ensemble, on a vécu des choses que peu de
personnes pourrait comprendre, tu as toujours été la pour moi,
lorsque j'ai eu des moments difficiles .Tu es et tu resteras le
visage familier qui m'apaise quand je ne vois autour de moi que
le mépris, l'indifférence et l’hypocrisie. Même dans un état
second, tu seras toujours dans mon esprit, tu es entré pour ne
plus jamais en ressortir.
Nouralhouda, notre amitié ne s'explique pas, notre amitié se
ressent.
Nada Yerrou
J'ai souvent eu besoin de ton aide et de ton soutien : et comme
un ange gardien, tu as su à chaque fois répondre présent. Bien
souvent, je me demande d’où est ce que tu puise cette énergie et
ce courage que j’admire tant. Tu es LA personne qui me connait
par cœur, celle sur qui je peux toujours compter. Tu es surtout la
personne avec qui je peux parler de tout et de rien, la personne
qui m'écoute et ne me juge pas. J’espère que le tourbillon de la vie
ne nous emportera pas et qu’on restera à jamais les meilleures
Imane mosseddek
Celle qui me comprend plus que tout au monde, saches que tu es
exceptionnelle et que ta présence dans ma vie m’est primordiale.
Complicité , est le mot qui me vient à l’esprit quand je pense à
nous, à tous les souvenirs qu’on a partagé , à cette enfance
précieuse qu’on a vécue ensemble .
A mes amis
Sara Haddi la magnifique et belle maman que je chéris
énormément, Asma Cherif ma tunisienne adorée , Ahmed
Lasheen qui a toujours su me motiver , et à Sohaib Haj Thami
pour son amitié si sincère envers moi ;
A mes amies d’enfance Sara Barakate , Myriam Elmerchani,
sachez que je me sens chanceuse de vous avoir dans ma vie.
À Notre Maître, Présidente du jury
Madame la Professeure BENKIRANE Souad
Professeur d’hématologie biologique
Pour avoir accepté d’être la présidente du jury de ce mémoire.
Vous m’honorez de votre présence et de l’intérêt que vous
portez à ce travail .
Cette thèse sera indubitablement enrichie
par vos remarques et
votre savoir faire .
À notre rapporteur de thèse
Monsieur le Professeur MASRAR Azlarab
Professeur d’’hématologie biologique
Pour m’avoir encadré, avec patience et passion .
Vous avez énormément contribué , par vos remarques et vos
directives à l’aboutissement de ce travail .
Merci d’avoir été toujours disponible pour m’orienter et
d’avoir porté de l’intérêt à l’avancée de cette thèse.
La version finale de ce mémoire a bénéficié de votre lecture
très attentive et de vos remarques précieuses.
Veuillez trouver ici, cher Maître, l’expression de ma
respectueuse considération.
À Nos Maîtres et Juges de thèse
Madame la professeure NAZIH Mona
Professeur d’hématologie biologique
Monsieur le professeur JEAIDI Anass
Professeur d’hématologie biologique
Pour nous avoir honoré de leur présence et de leur
contribution à l’évaluation de ce travail de fin d’étude.
Votre apport à ce travail est d’une très grande valeur.
Veuillez accepter mon respect, mon admiration et
remerciements envers votre compétence et votre qualité
SOMMAIR
SOMMAIRE
INTRODUCTION ... 1 I- ASPECTS CELLULAIRES FONDAMENTAUX ... 7
I.1.LES CELLULES SOUCHES ... 7 I.1.1. Définition ... 7 I. 1.2. Auto renouvellement ... 7 I.1.3 Différentiation ... 7 I.2 .LES CELLULES SOUCHES TOTIPOTENTES ... 9 I.3 LES CELLULES SOUCHES PLURIPOTENTES ... 9 (pluri = ... 9 I.3.1. Les cellules souches embryonnaires (CSE) ... 9 I.3.2. Les cellules souches pluripotentes induites iPS ... 12 I.4. LES CELLULES SOUCHES MULTIPOTENTES ... 14 I.4. 1. Les cellules souches fœtales ... 14 I. 4.1.1 Les cellules somatiques ... 14 I.4. 1.2 Les cellules germinales EG ... 15 I.4. 2. Les cellules souches hématopoïétiques ... 15 I.4. 3. Les cellules souches adultes ... 16 I.4.4. Les cellules souches mésenchymateuses ... 16 I.5. LES CELLULES SOUCHES OLIGOPOTENTES ... 16 I.6. LES CELLULES SOUCHES UNIPOTENTES ... 17 II- LES CELLULES DU SANG DE CORDON ... 17
II.1. ORIGINE DES CELLULES SOUCHES DU CORDON OMBILICAL ... 17 II.2. LES CELLULES HEMATOPOÏETIQUES ... 19 II.3. LES CELLULES SOUCHES MESENCHYMATEUSES ... 22 II.4. LES CELLULES ENDOTHELIALES ... 24 II.5. LES AUTRES CELLULES DU SANG DE CORDON OMBILICAL 25 III. LA COLLECTE DE SANG DE CORDON ... 26 III.1. AVANT LE PRELEVEMENT ... 26 III.1.1. Information pré-don ... 26
III.1.2 .Recueil du consentement écrit ... 26 III.1.3.Critères d’exclusion ... 27 III.1.3.1. Contre indications liées à la mère ... 27 III.1.3.2.Contre indications liées au père ... 28 III.1.3.3. Contre indications liées au nouveau-né ... 29 III.1.3.4.Contre indications liées à la fratrie ... 29 III.1.3.5. Cas des hémoglobinopathies ... 30 III.2. LES TECHNIQUES DE PRELEVEMENT ... 32 III. 3 . LA QUALIFICATION DE L’UNITE DE L’USC ... 33 III.3. 1. Le volume ... 34 III.3. 2. La qualification cellulaire ... 35 III.3.2.1. La numération cellulaire ... 37 III.3. 2.3. Test clonogénique des progéniteurs CFU-GM ... 38 III.3.3. La qualification immunologique... 38 III.3. 3.1 Le typage HLA ... 38 III. 3.3.2. Le groupage ABO ... 39 III.3.4. Qualification microbiologique ... 40 III.3.5. Le dépistage des hémoglobinopathies ... 41 III.4. LA CONSERVATION ... 41 III.4.1.Entreposage ... 41 III.4.2.Congélation ... 42 III.4.2.1. Réduction de volume ... 43 III.4.2.2 La cryoconservation ... 46 III.5. LA DECONGELATION ... 51 III.5.1. Décongélation au laboratoire ... 52 II1.5.2. Décongélation au lit du patient ... 52 III.6. LE CONTROLE DE QUALITE DES USC ... 53 III.6.1. A la réception de l’USC ... 53 III.6.2. Avant la cryoconservation ... 54 IV. ISOLEMENT ET CARACTERISATION DES CELLULES DE
L’USC ... 55 IV.1. LES CELLULES SOUCHES HEMATOPOÏETIQUES ... 55
IV.1.2. Les tests fonctionnels... 63 IV.1.2.1. In vitro ... 63 IV.1.2.2. In vivo ... 65 IV.1.3.Amplification ... 65 IV.2. LES CELLULES SOUCHES MESENCHYMATEUSES ... 67 IV.2.1. Isolement et caractérisation ... 67 IV.2.1.1. Capacité à adhérer au plastique et proliférer en culture ... 69 IV.2.1.2. Morphotype et phénotype membranaire particulier ... 69 IV.2.1.3. Potentiel de différenciation in vitro en types cellulaires issus du mésoderme ... 70 IV.2.2. Amplification et contrôle de qualité ... 74 IV.3. LES CELLULES ENDOTHELIALES PROGENITRICES ... 75 IV.3.1. Isolement ... 75 IV.3.2. Caractérisation immunologique ... 76 IV.3. 3.Culture cellulaire ... 78 IV.3.3.1. PEC précoces ... 78 IV.3.3.2. PEC tardifs... 79 IV.4. LES CELLULES SOUCHES EMBRYONNAIRES ... 81 IV.4.1. Isolement ... 81 IV. 4.2. Caractérisation ... 81 V. OPTIMISATION DES GREFFES DE SANG DE CORDON
OMBILICAL ... 82 V.1. Les doubles transplantations de sang de cordon ombilical ... 82 V.2. Expansion ex vivo ... 84 V.2.1.. Récepteurs Notch ... 84 V.2.2 .Molécule Copper ... 86 V.2.3 .Molécule UM171 ... 86 V.2.4. Optimisation du homing des CSH ... 89 I-LES BANQUES DU SANG DE CORDON OMBILICAL ... 92 I.1. LES BANQUES PUBLIQUES ... 93 I.2. LES BANQUES PRIVEES ... 93 I.3. LE STATUT JURIDIQUE DU SANG DE CORDON OMBILICAL ET DES BSP ... 95
I.4.QUESTIONNEMENT ETHIQUE SUR L’UTILISATION DU SANG DE CORDON OMBILICAL ... 98
I.4.1.Recrutement de donneurs et consentement éclairé ... 98 I.4.2. Identité du donneur ... 99 I.4.3. Les prélèvements ... 99 I.4.4. La nature des banques de conservation ... 99 I.5. SITUATION AU MAROC ... 100 II- LA TRANSPLANTATION DES CELLULES DU SANG DE
CORDON ... 101 II.1. INDICATIONS DU DON DE SANG DE CORDON OMBILICAL 101 II.1. 1. Don philanthropique ... 101 II.1.2. Dons dirigés au sein de familles à risque ... 102 II.1.3. Don autologue de sang de cordon ombilical ... 102 II.2. LES CRITERES DE CHOIX ... 103 II.2.1. Greffe simple et double greffe de sang du cordon ... 103 II.2.2. Selon la maladie sous-jacente ... 104 II.3.1.Les autogreffes ... 105 II.3.2. Greffe syngénique ... 106 II.3.3. Les allogreffes ... 106 II.4. LES COMPLICATIONS ... 110 II.4.1. Rejet ... 110 II.4.2. Maladie du greffon contre l’hôte ... 110 II.4.3. Complications infectieuses ... 112 III-APPLICATIONS EN MEDECINE REGENERATIVE ... 114 III.1. L’UTILISATION HEMATOPOIETIQUE ... 115 III.1.1. Dans les hémopathies malignes ... 117 III.1.1.1..Leucémies aigues ... 118 III.1.1.2. Lymphomes non Hodgkiniens ... 119 III.1.1.3. Maladie de Hodgkin ... 121 III.1.1.4. Myélome ... 121 III.1.1.5. Leucémie lymphoïde chronique LLC ... 122 III.1.2. Dans les pathologies hématologiques bénignes ... 122
III.1.2.2. Les thalassémies ... 122 III.1.2.3. La porphyrie érythropoïétique ... 123 III.1.2.4.Anémie de Fanconi ... 123 III.2. THERAPIE CELLULAIRE NON HEMATOPOEITIQUE ... 123 III.2.1. La reconstitution ostéo-articulaire ... 123 III.2.2. La reconstitution pulmonaire ... 125 III.2.2.1. La dysplasie broncho-pulmonaire ... 126 III.2.2.2. Fibrose interstitielle ... 127 III.2.3. La reconstitution neurologique ... 127 III.2.3.1. Les maladies neuro-dégénératives ... 128 III.2.3.2.Lésions aigues ... 129 III.2.4. Reconstitution hépatique ... 131 III.2.5.Reconstitution myocardique ... 133 III.2.5.1.Infarctus du myocarde ... 133 III.2.5.2. L’angiogenèse périphérique ... 134 II.2.6.Maladies auto-immunes ... 135 III.2.6.1. La sclérose en plaque ... 136 III .2.6.2. La sclérodermie ... 137 III.2.6.3. Le lupus érythémateux systémique ... 138 III.2.6.4. La maladie de Crohn ... 138 III.3. THERAPIE CELLULAIRE METABOLIQUE ... 139 III.3.1. Le diabète ... 139 III.3.1.1. Diabète type 1 ... 139 III.3.1.2. Diabète de type 2 ... 140 III.3.2. Syndrome de Hurler ... 141 III.4.THERAPIE CELLULAIRE EPITHELIALE ... 142 III.4.1. La reconstitution de la peau ... 142 III.4.1.1.Brulures cutanées ... 142 III.4.1.2.Psoriasis ... 143 III.4.2. La reconstruction de la cornée ... 144 IV. NOUVEAUTES THERAPEUTIQUES ... 145 IV.1.Les synéchies utérines ne poseront-ils plus de problèmes d’infertilité ? ... 145
IV.2. Dysfonction érectile : une alternative à la pilule bleue ?... 146 IV.3. Incontinence urinaire : l’espoir des cellules souches ? ... 147 IV.4.Les CSM retrouveront-ils place dans le traitement du sepsis sévère ? ... 148 IV.4. Où en sommes-nous aujourd'hui dans la thérapie cellulaire de
l’insuffisance cardiaque ?... 149
CONCLUSION ... 152 RESUMES ... 155 REFERENCES... 159 BIBLIOGRAPHIQUES ... 160
LISTE DES ABREVIATIONS
7-AAD: 7-Aminoactinomycin D
AABB: American Association of Blood Banks
ACOG: American College of Obstetricians and Gynecologists ALDH: aldéhyde désydrogénase
APACHE II :Systemic outcomes included daily Acute Physiology and Chronic Health Evaluation II
ASBMT: American Society of Bone Marrow and Blood Transplantation AVC: Accident Vasculaire Cérébral
AXP: Autoxpress
BFU-E: Burst Forming Unit-Erythroid BMDW: Bone Marrow Donors Wilde Wolrd BPF: Bonne Pratique de Fabrication
CAC
:
cirulating angiogenic cellsCFU : Colony Forming Unit
CFU-GEMM: Colony Forming Unit-Granulocyte, Erythrocyte,
Monocyte/macrophage, Megakaryocyte
CFU-Hill: Unité Formant Colonie-Hill CH: Cellules Hématopoïétiques
CIBMTR: Center for International Blood and Marrow Transplant Research CMN: Cellules Mononuclées
CMH : Complexe majeur d’histocompatibilité CML : cellules musculaires lisses
CMV : Cytomégalovirus
CNT : Cellules Nuclées Totales
CS: Cellules Souches
CSE : Cellules embryonnaires souches CSH: Cellules Souches Hématopoïétiques CSM : Cellules Souches Mésenchymateuses DMSO: Diméthylsulfoxyde
DT1: Diabète Type 1 DT2: Diabète Type 2 dUCBTx: Double UCBTx
EBMT: European Blood and Marrow Transplantation Group EBV: Epstein - Barr Virus
ECFC: Endothelial Colony-Forming Cells EGM-2: Endothelial Cell Growth Media -2 eNOS: Oxyde Nitrique Synthase Endothéliale FACS: Fluorescence Activated Cell Sorting
FACT: Foundation for Accreditation of Cellular Therapy FCS: Fetal Calf Serum
FDA: Food and Drug Administration FGF-β: Fibroblaste Growth Factor- β
G-CSF: granulocyte colony-stimulating factor
GEE: Groupe d’union européenne d'éthique GVHD : Graft-versus-host disease
GVL: Graft-versus- leukaemia HES: Hydroxyéthyle d'amidon HLA: Human Leukocyte Antigen HTLV: Virus Lymphotrophe Humain T ICM
:
masse cellulaire interneISCT: International Society for Cellular Therapy
ISHAGE: International Society for Hematotherapy and Graft Engineering iPS : induced pluripotent stem cells
KDR: Kinase Tyrosine Réceptor Type III LIF: leukemia inhibitory factor
LTC-IC: Long Term Culture-Initiating Cell LT-HSCs: long term hematopoeitic stem cells MO: Moelle Osseuse
NAD: adénine dinucléotide NAM: nicotinamide
NGF: Nerve Growth Factor
NMDP: National Marrow Donor Program NOD: No Obese Diabetic
NSE :Neuron-specific enolase
Netcord-FACT : Netcord-Foundation for the Accreditation of Cellular Therapy PBS: Tampon Phosphate Salin
PCR inverse-SSOP: PCR using Sequence Specific Oligonucleotides PCR-SSP: PCR using Sequence Specific Primer
Rh: Rhodamine-123
RT-PCR: Reverse transcriptase PCR
SCF: Stem Cell Factor
SCID: Severe Combined Immunodeficiency
SFGM-TC : la société francophone de greffe de moelle et de thérapie cellulaire
SLA: Sclérose Latérale Amyotrophique SO: Groupement Sulfoxyde
SOFA: Sequential Organ Failure Assessment score
TRA: Tumor Rejection Antigens Treg: Cellules T Régulatrices
TRF: Telomere Restriction Fragment USC: unite de sang de cordon
UCBTx: Umbilical Cord Blood Transplantation UEA-1: Ulex Europaeus Agglutinine
uPA: Urokinase Plasminogen Activator USSC: Unrestricted Somatic Stem Cells VEGF: Vascular Endothelial Growth Factor VHB: Virus de l’hépatite B
LISTE DES FIGURES
Figure 1 :Evolution des sources de CSH utilisées dans les transplantations entre 1990 À 2013 aux Etats-Unis.
Figure 2 : Cellules souches : origine et potentiel de différenciation.
Figure 3 : Schéma d’un embryon au 5e jour après la fécondation (Blastocystes). Figure 4 : Les voies de différenciation des cellules souches embryonnaires.
Figure 5 : La production de cellules pluripotentes induites. Figure 6 : Annexes embryonnaires
Figure 7 : La structure du cordon ombilical humain.
Figure 8:Schéma de la génération de cellules hématopoïétiques.
Figure 9 :Propriétés de différenciation de cellules souches mésenchymateuses.
Figure 10 : Différenciation des CSM selon différents milieux.
Figure11 : Document de consentement pour le prélèvement de sang placentaire en France
Figure12 : Un prélèvement du sang de cordon in utero
.
Figure 13 : Hôte à flux laminaire.Figure 14 : Séparateur Sepax
Figure15 : Connexions des tubulures du séparateur Sepax Figure 16 : Dispositif Bioarchives .
Figure17 : Stockage des poches de l’USC
Figure 18 : Unité de sang de cordon prête à être cryoconservée Figure19 : Technique d’isolement des CMN
Figure 20 : Principe de fonctionnement de la fluoro-cytométrie Figure 21 : De la cellule souche vers les lignées hématopoïétiques
Figure 23 : Analyse immunocytochimique des CSM dérivées du sang de cordon ombilical qui expriment des marqueurs hépatiques
.
Figure 24 : Principales méthodes d’obtention des PEC en culture et caractéristiques phénotypiques.
Figure 25 : Nombre de greffes de sang de cordon simples et doubles non apparentées chez les adultes (1990-2017) .
Figure 26 : Rôle de la voie de signalisation Notch dans l’expansion in vitro des cellules souches.
Figure 27 : L'UM171 retarde la différenciation cellulaire et favorise l'expansion ex vivo des CSH .
Figure 28 : Homing des CSH vers la MO. Figure 29 : Signes cliniques de la GVHD.
Figure 30 : Différentes applications futuristes de la thérapie personnalisée par cellules Figure 31 : Indications thérapeutiques de la greffe des CSH issues du sang de cordon ombilical chez l’enfant (1988-2017).
Figure 32 : Indications thérapeutiques de la greffe des CSH issues du sang de cordon ombilical chez l’adulte (1988-2017).
Figure 33 : Survie sans leucémie à 5 ans, d’enfants atteints de leucémie aiguë, greffés avec des CSH du sang de cordons ombilicaux ou avec de la moelle osseuse, ajusté pour le stade de la maladie, par compatibilité HLA et par nombre de cellules dans le greffon
Figure 34 : Mécanismes de régénération tissulaire induits par les cellules souches mésenchymateuses (CSM).
Figure 35 : CSM dérivées du cordon ombilical accèlerent la rémission chez des patients présentant une cirrhose décompensée (ascite)
Figure 36 : Propriétés de différentiation d’une cellule souche dans la dysfonction érectile
Figure 37: Injection de CSH au niveau de la zone infarcie et de la zone de pénombre au cours d’un pontage coronarien .
LISTE DES TABLEAUX
Tableau 1 : Tableau comparatif des avantages et des inconvénients entre les cellules souches provenant du cordon ombilical et celles provenant de la moelle osseuse d’un donneur adulte non apparenté.
Tableau 2 : Ensemble des prélèvements effectués sur l’USC et leurs volumes correspondants.
Tableau 3 : Caractéristiques des greffes enregistrées dans la base du registre Eurocord (1988-2017).
Tableau 4 : Ensemble des essais cliniques, en cours de réalisation, utilisant des CSM issues de SC dans le traitement de lésions cartilagineuses.
Tableau 5 : Nombre d'autogreffes de CSH pour MAI rapportées en France de 1996 à 2017
INTRODUCTION
INTRODUCTION
Hippocrate, il y a près de 2000 ans, estimait que « le corps contient le pouvoir de rééquilibrer les humeurs et de se guérir lui-même ».
On peut considérer qu’il s’agissait de la première définition de la thérapie cellulaire, discipline par laquelle on peut prévenir, traiter ou atténuer une maladie ou encore réparer un tissu lésé à partir de cellules dites cellules souches. Ainsi les cellules souches sont étudiées depuis des décennies pour leur formidable capacité à se renouveler mais aussi à donner accès en quantité virtuellement illimitée, à des types cellulaires jusque là inaccessibles pour l’étude in vitro (neurones, cellules pancréatiques, cardiomyocytes… etc.).
Par ailleurs, ces cellules peuvent être développées pour porter des défauts génétiques associés à des pathologies pour lesquelles peu de modèles cellulaires sont disponibles, elles peuvent être notamment utilisées comme alternative aux études animales pour évaluer le risque mutagène d’une substance sur les différentes cellules [1].
Une source non négligeable de cellules souches est constituée par le cordon ombilical . Ainsi la création en septembre 2009, de la société internationale de cellules souches du placenta (IPLASS) témoigne de l’importance accordée aux annexes embryonnaires, longtemps considérés comme déchets biologiques [2].
Le sang de cordon ombilical constitue donc une source accessible de cellules souches, lesquelles sont de plus en plus utilisées, à titre de solution de rechange à la moelle osseuse MO ou aux cellules souches périphériques, pour la greffe visant la prise en charge de pathologies malignes et bénignes chez les enfants et les adultes (figure 1). Ceci est expliqué par les nombreux avantages que présente le sang de cordon ombilical : une grande disponibilité, une baisse
l’hôte (GVHD), ainsi qu’un prélèvement facile entraînant peu de risques pour la mère et le nouveau-né (tableau 1).
Enfin les premiers projets de thérapie cellulaire utilisant les cellules souches multipotentes issues du sang de cordon ont vu le jour, et les essais cliniques dont le retentissement thérapeutique est important, ont démarré pour la médecine régénérative du cœur, de la peau, de l’œil et bien d’autres organes.
Si en France, les unités de sang placentaire sont collectées dans un réseau de plus de 70 maternités et rattachées à 11 banques publiques affiliées au Réseau français de sang placentaire, au Maroc, les premières banques de sang de cordon restent un projet en cours d’évaluation.
Notre travail a pour but de faire un point sur l’état d’avancement des connaissances des différents types de cellules souches retrouvées dans le sang de cordon ombilical , de dégager les problématiques fondamentales, et d’orienter les possibilités thérapeutiques .
Dans la première partie de notre étude nous allons identifier les différentes cellules souches retrouvées dans le sang de cordon ombilical candidates à la thérapie cellulaire.
Dans la deuxième partie nous étudierons les différentes méthodes de collecte, d’isolement et d’optimisation des cellules du sang de cordon ombilical. Dans la troisième partie de notre travail nous mettrons la lumière sur l’émergence des banques du sang de cordon ombilical, ainsi que sur les aspects juridique, éthique et religieux liés à l’utilisation des cellules souches.
Nous aborderons en dernier lieu les différents domaines d’utilisation des cellules souches issues du cordon ombilical en médecine régénérative.
Figure 1 : Evolution des sourc aux Etats-Unis
Evolution des sources de CSH utilisées dans les transplantations entre 1990 Unis selon le National Marrow Donor Program.
es de CSH utilisées dans les transplantations entre 1990 à 2013
Cellules souches de la MO d’un
donneur adulte non apparenté Cordon ombilical Don sous anesthésie générale ou après
injection de facteurs de croissance Aucun risque pour la maman ou le nouveau né Quantité de cellules souches
importante
Prise de greffe rapide
Quantité de cellules souches faible, prise de greffe lente, aplasie prolongée Durée de recherche pour identifier un
donneur et organiser une greffe: 3–4 mois
Mise à disposition rapide des cellules étant déjà cryoconservées
Nombre moyen de cellules CD34+ : 2,8 .106
/ kg de poids du patient
Nombre moyen de lymphocytes T : 2,2. 107/ kg de poids du patient
Nombre moyen de cellules CD34+ : 0,2 .106
/ kg de poids du patient
Nombre moyen de lymphocytes T : 0,4. 107 / kg de poids du patient
Le donneur peut donner une deuxième fois des cellules souches ou des lymphocytes
T pour immunothérapie adoptive
Pas de deuxième don possible
Après récolte des CSH, organisation méticuleuse de transport et de
transplantation
Les CSH peuvent rester cryoconservées pour une durée de plus de 10 ans
Besoin de compatibilité de 9/10 voir 10/10 allèles HLA-A, B, C, DR, DQ
Une compatibilité HLA élevée est moins Importante
Haplotypes HLA rares peu fréquents Haplotypes HLA rares fréquents (ciblage facile de minorités ethniques)
Tableau 2: Tableau comparatif des Avantages et des inconvénients entre les cellules souches provenant du cordon ombilical et celles provenant de la moelle osseuse d’un donneur adulte
I- ASPECTS CELLULAIRES FONDAMENTAUX
I.1. LES CELLULES SOUCHES
I.1.1. Définition
Les cellules souches sont des cellules indifférenciées, capables d’auto- renouvellement et de différenciation en cellules spécialisées (figure 2).
I. 1.2. Auto renouvellement
L’auto-renouvellement est le processus où, par l’entremise de la mitose, une cellule souche se divise pourproduire au moins une cellule fille qui demeure une cellule souche indifférenciée.
On peut alors élargir ou maintenir une population de cellules souches tout au long de la vie d’un organisme. Ainsi, la division d'une cellule souche produit une nouvelle cellule souche : cellule de « réserve » et une cellule s'engageant dans un processus de différenciation qui la conduira à remplir une fonction précise [2]
.
I.1.3 Différentiation
En plus de pouvoir s’auto-renouveler, une cellule souche doit aussi pouvoir se différencier. De ce fait, les cellules souches sont divisées en plusieurs catégories en fonction de leur potentiel de différenciation, on distingue :
• Les cellules souches totipotentes
• Les cellules souches pluripotentes
• Les cellules souches multipotentes
• Les cellules souches oligopotentes
Figure 2 : Cellules souches : origine et potentiel de différenciation.Cellules souches : origine et potentiel de différenciation.Université Claude Bernard Lyon 1
I.2 .LES CELLULES SOUCHES TOTIPOTENTES
(toti = tout, potentes puissantes)Qualifiées de totipotentes car elles possèdent le potentiel de se différencier en n'importe quel type de cellules nécessaires à la croissance et au développement d'un organisme y compris les cellules extra-embryonnaires[3] . Elles sont issues des premières divisions de l’œuf fécondé jusqu’au stade de la morula (4ème jour suivant la fécondation) où l’embryon est constitué de 8 à 16 cellules [4]. Néanmoins l’utilisation expérimentale et le transfert en clinique de ces cellules posent plusieurs problèmes [5], premièrement d’ordre éthique et deuxièmement dû à leur fort pouvoir mitogène et tumorigène [6].
I.3 LES CELLULES SOUCHES PLURIPOTENTES
(pluri = plusieurs, potentes = puissantes)Ce sont des précurseurs des feuillets cellulaires embryonnaires (ectoderme, mésoderme et endoderme) et peuvent donner naissance à plus de 200 types de tissus, hormis les tissus de soutien extra embryonnaire (placenta et membrane vitelline).
Elles sont présentes du 5e au 7e jour suivant la fécondation et se développent à partir de cellules souches totipotentes. Pour ces raisons, ces cellules souches sont souvent appelées cellules souches embryonnaires.
Il existe plusieurs sources de CS pluripotentes humaines [7] [9], on distingue
:
I.3.1. Les cellules souches embryonnaires (CSE)
Initialement, la dérivation de CSE murines a été décrite par deux groupes de scientifiques en 1981 [10] [11], et ce n’est qu’en 1998 que, pour la première
fois, l’équipe de J. Thomson a réussit à isoler, à multiplier et à maintenir en culture à l’état indifférencié des CES humaines [7].
Les cellules souches embryonnaires proviennent de la masse cellulaire interne ou embryoblaste du blastocyste préimplantatoire de fécondation in vitro (figure 3).
Une fois le blastocyste dissocié, les CSE qui en sont extraites ont perdu toute possibilité de se développer ultérieurement en un embryon. Cependant, elles peuvent être cultivées au laboratoire à l’infini tout en conservant leur caractère pluripotent (même après plus de 300 passages) et en gardant un caryotype normal [11] [12] .
Les CSE humaines ont montré une aptitude à se différencier en de multiples types cellulaires [11] [13] notamment musculaire [7] chondrogénique [15], endothélial [16] ou cardomyocytaire, neuronal, hepatocytaire et cellules pancréatiques [17] [18] [19] [20] (figure 4 ) .
Cependant, il est nécessaire de distinguer les cellules embryonnaires souches, des cellules souches de l’embryon précoce. D’une part les cellules souches embryonnaires n’existent que de façon transitoire et se différencient pendant le développement, d’autre part les cellules ES peuvent être cultivées in vitro indéfiniment sans différenciation.
Les cellules ES sont alors considérées comme une adaptation en culture des cellules souches existantes dans l’embryon précoce .
Figure 3 : Schéma d’un embryon au 5e jour après la fécondation (Blastocyste).
1 : blastocèle ; 2 : trophoblaste, 3
Schéma d’un embryon au 5e jour après la fécondation (Blastocyste). : trophoblaste, 3 : membrane pellucide ,4 : embryoblaste. Selon
Blastocyste d'après GFDL allemand
Schéma d’un embryon au 5e jour après la fécondation (Blastocyste). Selon Berichard
-Figure 4 : Les voies de différenciation des cellules souches embryonnaires. Les cellules de la masse cellulaire interne (ICM), mises en culture, forment des sphères caractéristiques, et peuvent se
différencier en types cellulaires dérivés des trois feuillets embryonnaires primaires.
I.3.2. Les cellules souches pluripot
En 2012, le prix Nobel en médecine reconnaît deux scientifiques, John B. Gurdon et Shinya Yamanaka qui ont pu obtenir des cellules souches pluripotentes à partir de la reprogrammation des cellules somatiques.
Les iPS ont été obtenues par reprogrammation d
à la surexpression, par transduction virale, de 4 facteurs de transcription essentiels à l’état d’indifférenciation et de pluripotence : Oct3/4 (Pou5f1), Klf4, Sox2 et c-Myc (figure 5) [21]
Les voies de différenciation des cellules souches embryonnaires. Les cellules de la interne (ICM), mises en culture, forment des sphères caractéristiques, et peuvent se différencier en types cellulaires dérivés des trois feuillets embryonnaires primaires.
Source Doss et al. (2004).
I.3.2. Les cellules souches pluripotentes induites
En 2012, le prix Nobel en médecine reconnaît deux scientifiques, John B. Gurdon et Shinya Yamanaka qui ont pu obtenir des cellules souches pluripotentes à partir de la reprogrammation des cellules somatiques.
Les iPS ont été obtenues par reprogrammation de cellules somatiques suite à la surexpression, par transduction virale, de 4 facteurs de transcription essentiels à l’état d’indifférenciation et de pluripotence : Oct3/4 (Pou5f1), Klf4,
[21] [22].
Les voies de différenciation des cellules souches embryonnaires. Les cellules de la interne (ICM), mises en culture, forment des sphères caractéristiques, et peuvent se différencier en types cellulaires dérivés des trois feuillets embryonnaires primaires.
iPS
En 2012, le prix Nobel en médecine reconnaît deux scientifiques, John B. Gurdon et Shinya Yamanaka qui ont pu obtenir des cellules souches pluripotentes à partir de la reprogrammation des cellules somatiques.
e cellules somatiques suite à la surexpression, par transduction virale, de 4 facteurs de transcription essentiels à l’état d’indifférenciation et de pluripotence : Oct3/4 (Pou5f1), Klf4,
