OPTIMISATION DES GREFFES DE SANG DE CORDON OMBILICAL

Malgré tous les avantages des cellules de sang de cordon ombilical, il existe un inconvénient majeur à leur utilisation: le faible nombre de cellules présentes dans le sang de cordon. On y retrouve beaucoup moins de CSH que dans la moelle osseuse et le sang périphérique. Or, plusieurs études ont démontré que le facteur déterminant pour une prise de greffe rapide est la dose de cellules injectées [202][203]. Il a aussi été démontré que la dose de cellules greffées est directement reliée à la reprise des neutrophiles et des plaquettes; la dose minimale de cellules étant de 3x10⁷ cellules totales nucléées (CNT) / kg [204] [205]. Les faibles doses de cellules du sang de cordon ombilical limitent donc l’utilisation des dons de sang de cordon, puisqu’il est rare de pouvoir greffer des patients de plus de 50kg. Cette limite empêche la plupart des patients adultes d’avoir recours au sang de cordon, particulièrement en Amérique du Nord, où le poids moyen d’un adulte est de plus de 80kg [206].

Le défit que relèvent actuellement les scientifiques reste d’élaborer des approches pour remédier au problème de la faible dose de cellules des dons de sang de cordon.

V.1. Les doubles transplantations de sang de cordon

ombilical

Le registre international Eurocord a pu recensé entre 1988 et 2010 dans 400 centres , 7235 cas de greffe de sang de cordon non apparentées réalisées , dont 1152 avec deux unités de sang de cordon (figure 25) .

transplantation de sang de cordon , devient une nécessité

sécurité de l’approche ont été démontrées au début des années 2000, lorsqu’un groupe de l’Université du Minnesota a utilisé une stratégie mêlant des régimes de conditionnement à intensité réduite à la double transplantation,

but de traiter des patients adultes qui n’avaient pas accès à des dons de sang de cordon avec suffisamment de ce

Depuis, la double transplantation est devenue un moyen de greffer des patients adultes n’ayant pas

périphérique .Chez les patients adultes, les patients recevant une double transplantation sont maintenant plus nombreux que

unité de sang de cordon [210]

Figure 25 : Nombre de greffes de sang de c apparentées chez les adultes

transplantation de sang de cordon , devient une nécessité . La faisabilité et la sécurité de l’approche ont été démontrées au début des années 2000, lorsqu’un té du Minnesota a utilisé une stratégie mêlant des régimes de conditionnement à intensité réduite à la double transplantation,

traiter des patients adultes qui n’avaient pas accès à des dons de sang de cordon avec suffisamment de cellules [207] [208] [209].

s, la double transplantation est devenue un moyen de greffer des patients adultes n’ayant pas accès à des donneurs de MO

hez les patients adultes, les patients recevant une double transplantation sont maintenant plus nombreux que ceux recevant une seule

[210].

Nombre de greffes de sang de cordon simples et doubles non apparentées chez les adultes (1990-2017). Registre Eurocord.

. La faisabilité et la sécurité de l’approche ont été démontrées au début des années 2000, lorsqu’un té du Minnesota a utilisé une stratégie mêlant des régimes de conditionnement à intensité réduite à la double transplantation, et ce , dans le traiter des patients adultes qui n’avaient pas accès à des dons de sang de s, la double transplantation est devenue un moyen de greffer des accès à des donneurs de MO ou de sang hez les patients adultes, les patients recevant une double ceux recevant une seule

V.2. Expansion ex vivo

Beaucoup d’efforts ont été investis pour tenter d’accroître la quantité de CSH dans le sang de cordon comme nous l’avons cité dans les chapitres précédents. Ainsi, différentes combinaisons de cytokines permettent d’augmenter le nombre de progéniteurs hématopoïétiques, notamment via des voies de signalisation moléculaire et des facteurs de transcription

.

V.2.1.. Récepteurs Notch

Les récepteurs Notch et leurs ligands (Jagged-1 et 2, et Delta-like 1, 3 et 4) jouent un rôle important dans une grande variété de processus biologiques. Des études portant sur les CSH ont démontré la présence du gène Notch1 chez les cellules CD34+ [211]. Depuis, cette voie de signalisation a été utilisée dans le but d’accroître la quantité de CSH de sang de cordon.

Les travaux de Varnum-Finney et Delaney, entre autres, ont permis d’obtenir des expansions des cellules CD34+ de plus de 10 fois, en exposant les cellules à une forme immobilisée du ligand Delta-1 [212] (figure 26).

Après plusieurs études pré-cliniques démontrant une reconstitution myéloïde rapide chez les souris avec cette approche, l’équipe de Delaney a décidé de tester sa technique d’expansion avec une étude clinique de phase I. Chacun des 10 patients a reçu une USC non manipulée, et une unité mise en culture de la façon détaillée ci-dessus. Après 16 jours de culture, l’expansion moyenne des cellules CD34+ était de 164 fois, permettant ainsi au patient de recevoir une dose de 6x10⁶ CD34/kg [213] . La sécurité du protocole a été démontrée par l’absence d’effets négatifs pouvant être observés chez les patients. Le temps médian pour la prise de greffe était de 16 jours, soit 10 jours de moins que ce qu’on peut observer chez les patients recevant une thérapie

conventionnelle avec deux

prise de greffe à long terme a montré que la reconstitution hématopoïétique a été atteinte avec les cellules de l’unité manipulée chez seulement 2 patients, laissant croire que l’expansion des cellules n’était pas une expansion des « vraies » cellules souches à long terme, c’est

Figure 26 : Le rôle de la voie de signalisation Notch dans l’expansion in vitro des cellules souches. Avant la greffe

immobilisée du ligand Delta

ligand, IL-6, thrombopoïétine et IL Delaney, C et al 1 Notch

conventionnelle avec deux USC non manipulées. Toutefois, l’analyse de la se de greffe à long terme a montré que la reconstitution hématopoïétique a été atteinte avec les cellules de l’unité manipulée chez seulement 2 patients, laissant croire que l’expansion des cellules n’était pas une expansion des « vraies »

à long terme, c’est-à-dire les LT-HSC.

de la voie de signalisation Notch dans l’expansion in vitro Avant la greffe et en exposant les CSH à une forme immobilisée du ligand Delta-1 et à un cocktail de cytokines contenant SCF, Flt3

6, thrombopoïétine et IL-3, le temps de prise de greffe est Delaney, C et al 1 Notch-mediated Expansion of Human Cord Bloo

non manipulées. Toutefois, l’analyse de la se de greffe à long terme a montré que la reconstitution hématopoïétique a été atteinte avec les cellules de l’unité manipulée chez seulement 2 patients, laissant croire que l’expansion des cellules n’était pas une expansion des « vraies »

de la voie de signalisation Notch dans l’expansion in vitro et en exposant les CSH à une forme ytokines contenant SCF, Flt3 3, le temps de prise de greffe est moindre.