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Whole Genome DNA Methylation (Methylome) Analysis and Role of Dam DNA Methyltransferase in the life‐cycle of an Entomopathogenic Bacterium

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Academic year: 2022

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Texte intégral

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HAL Id: hal-02265509

https://hal.archives-ouvertes.fr/hal-02265509

Submitted on 2 Jun 2020

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Whole Genome DNA Methylation (Methylome) Analysis and Role of Dam DNA Methyltransferase in

the life-cycle of an Entomopathogenic Bacterium

Amaury Payelleville, Ludovic Legrand, Anne Lanois-Nouri, Sylvie Pages, Jean-Claude Ogier, Dana Blackburn, David J Clarke, Alain Givaudan, Julien

Brillard

To cite this version:

Amaury Payelleville, Ludovic Legrand, Anne Lanois-Nouri, Sylvie Pages, Jean-Claude Ogier, et al..

Whole Genome DNA Methylation (Methylome) Analysis and Role of Dam DNA Methyltransferase in the life-cycle of an Entomopathogenic Bacterium. FEMS Congress of European Microbiologists 2019, Jul 2019, Glasgow, France. �hal-02265509�

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Abstract Fems2019  250 mots 

Whole Genome DNA Methylation (Methylome) Analysis and Role of Dam DNA Methyltransferase  in the life‐cycle of an Entomopathogenic Bacterium 

Amaury Payelleville1, Ludovic Legrand2, Anne Lanois1, Sylvie Pages1, Jean‐Claude Ogier1, Dana Blackburn3, David Clarke3 Alain Givaudan1, Julien Brillard

(1) DGIMI, INRA, Univ. Montpellier, Montpellier, France. (2) LIPM, Université de Toulouse, INRA, CNRS, Castanet‐Tolosan, France. 

(3) Department of Microbiology, University College Cork, Cork, Ireland. 

Background:  DNA methylation is an epigenetic mechanism involved in the pathogenicity of several  major bacterial pathogens. It can decrease the affinity of some transcriptional regulators to their  binding site, leading to sub‐populations expressing or not various genes, depending on the DNA  methylation state. Dam DNA methyltransferase is widespread in Gammaproteobacteria and  methylates the adenine of GATC sites.  

Objectives: The role of Dam was investigated in Photorhabdus luminescens during its symbiosis with  a soil nematode and during its pathogenic stage in insects. 

Methods:  SMRT sequencing (PacBio), which allows identification of the DNA methylation of the  whole genome (methylome), RNAseq and phenotypic analysis were performed in a P. luminescens  strain overexpressing Dam. 

Results: Dam overexpression caused a decrease in motility whereas it increased biofilm formation. 

While symbiosis ability of the Dam overexpressing strain was not significantly different from that of a  control strain, the nemato‐bacterial complex displayed an impaired pathogenicity in insect, as also  observed after direct insect injection of the bacteria alone. Transcriptomic analysis revealed that the  observed phenotypes were related to differences at the transcriptional level. More than 99% of the  GATC sites of the genome were found methylated and DNA methylation levels did not change over  growth kinetics. However, the Dam‐overexpressing strain displayed more methylated GATC sites  than the control and most of these sites were located in promoter regions. These sites may be  involved in the observed differences in phenotypes and gene expression and provide clues to  understand the involvement of Dam DNA methylation in P. luminescens life‐cycle. 

 

Key words: Epigenetics, DNA methylation ; Gene regulation   

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