Mise en contact de nymphes d’Ixodes ricinus avec des souris

immunisées par riris.

Les souris sont injectées à trois reprises avec trois semaines d’intervalle par 20 pg de

riris purifiée, en présence d’adjuvant de Freund complet et incomplet.

Au jour 56 (15 jours après la troisième injection), 5 souris immunisées avec riris et 5

injectées avec du PBS on été mises en contact avec 15 nymphes d’/. ricinus par souris. Les

tiques sont restées en contact avec les souris jusqu’à complétion naturelle du repas sanguin.

Durant la phase de mise en contact, les tiques ont été comptées chaque jour et pesées

dé

c

ro

c

hé

e

Animaux immunisés Animaux contrôles

Nymphes nourries sur souris

Mortalité (%)

Durée du repas sanguin (j)

Poids - 1er pic (mg)

Poids - 2nd pic (mg)

Mue (%)

4.9 (±4.5)

4.25 (±0.54)

2.93 (±0.51)

4.85 (±0.32)

97.6 (±4.3)

0.0 (±0.0)

4.13 (± 0.44)

3.05 (± 0.56)

4.93 (± 0.46)

99.1 (± 1.5)

Nymphes nourries sur lapins

Mortalité (%)

Durée du repas sanguin (j)

Poids - 1er pic (mg)

Poids - 2nd pic (mg)

Mue (%)

33.6 (±8.3) *

3.73 (±0.23)

2.73 (±0.37) **

4.60 (±0.44) **

92.2 (±8.1)

7.2 (±2.9)

3.93 (±0.48)

3.08 (± 0.35)

5.37 (±0.41)

94.9 (±7.4)

Tableau 8 ; Effets de l’immunisation par riris sur des nymphes nourries sur des souris et des lapins. Les résultats

sont exprimés par la moyeime (±écart-type.) pour chaque groupe. Le groupe contrôle a été immunisé avec du PBS. *

P < 0.001 comparé au contrôle (test du x9 ** P < 0.001 comparé au contrôle (Student's test).

lapins immunisés

lapins contrôles

poids (mg)

Fleure 39 : la vaccination par riris diminue la prise de poids des nymphes. Des nymphes ont été nourries sur des

lapins vaccinés ou sur des lapins contrôles. Les tiques ses ont décrochés entre le jour 3 et le jour 5 après infestation. Les

nymphes gorgées vivantes sont ensuite pesées. Le pourcentage du nombre total de nymphes décrochées est répertoriés

par tranche de 0,5 mg.

lorsqu’elles se sont décrochées naturellement. Comme cela est indiqué dans le tableau 8, que

ce soit au niveau de la mortalité des nymphes, de la prise de poids, de la durée du repas

sanguin ou de la mue, aucune différence n’a été observée entre les souris immunisées ou non.

8.2.2. Mise en contact de nymphes d’Ixodes ricinus avec des lapins

immunisés par rlris.

Les lapins sont injectés à trois reprises avec trois semaines d’intervalle par 50 pg de

rlris purifiée, en présence d’adjuvant de Freund complet et incomplet.

Nous avons également testé ces mêmes paramètres lors de l’infestation de lapins

immunisés par des nymphes. Au jour 56 (15 jours après la troisième injection), 4 lapins

immunisés avec rlris et 5 lapins injectés avec du PBS on été mis en contact avec 50 nymphes

d’7. ricinus par lapins. Les valeurs proviennent de deux expériences indépendantes incluant

chacune deux lapins par conditions testées.

Les résultats sont indiqués dans le tableau 8. Nous avons tout d’abord mesuré le taux

de fixation des tiques sur les oreilles de lapins au cours des 24 premières heures du repas

sanguin. Aucune différence n’a été observée entre les nymphes nourries sur les lapins

immunisés et sur les lapins contrôles. Les nymphes ont accompli leur repas sur une durée

variant de 3 à 6 jours sur tous les lapins, immunisés ou non.

Cependant, une hausse de mortalité des nymphes a été observée sur les lapins

immunisés, à savoir 32,5 % contre 4,2 % sur les lapins contrôles. Ce calcul tient en compte les

tiques mortes sur le lapin ou les tiques nourries mortes sans avoir pu muer. Ces nymphes

présentent un aspect « sec ». De plus, plusieurs tiques survivantes collectées sur les lapins

immunisés par rlris paraissent « ffippées », ce qui n’est pas le cas pour les nymphes nourries

sur les lapins contrôles.

Toutes les nymphes survivantes ont été pesées. Les poids sont distribués d’une

manière bimodale comme cela avait été décrit précédemment (Mbow et al., 1994). Le pic

correspondant aux poids les plus faibles correspond à la population des nymphes amenées à

devenir des adultes mâles (Mbow étal., 1994). Les poids des nymphes nourries sur les lapins

contrôles sont en accord avec les valeurs obtenues auparavant pour la colonie de tiques que

nous avons utilisée (Mbow et al., 1994). En ce qui concerne les nymphes nourries sur les

lapins immunisés, un déplacement des pics de poids (des futurs mâles et femelles) vers des

valeurs plus faibles a été observé (figure 39). Comme indiqué dans le tableau 8, ces

déplacements correspondent, respectivement, à des diminutions moyennes significatives de

femelles nourries sur

lapins immunisés

femelles nourries sur

lapins contrôles

Mortalité (%) 32.5 (± 3.9) *

Durée du repas sanguin (j) 8.99 (± 0.64) **

Tiques décrochées après le jour 10 (%) 21.62 (+4.08) ***

Poids (mg) 227.2 (±57.9)

Oviposition (%) 95.2 (±5.1)

4.2 (±4.7)

7.63 (±0.41)

1.02 (±0.11)

268.8 (±38.5)

91.7 (±7.3)

Tableau 9 : Effets de l’immunisation par riris sur des nymphes nourries sur des lapin. Les résultats sont exprimés

par la moyenne (± écart-type.) pour chaque groupe. Le groupe contrôle a été immunisé avec du PBS. * P < 0.001

comparé au contrôle (test du ** P < 0.02 comparé au contrôle (Student's test). *** P < 0.02 comparé au contrôle

(test du x^)

Fleure 40 : Exemples typiques de femelles nourries sur des lapins immunisés ou sur des lapins contrôles. Les

femelles en photo ont effectué un repas de 8 jours. A, femelle adulte nourrie sur un lapin contrôle ; B, femelle adulte

asséchée, nourrie sur un lapin immunisé avec riris ; C, femelle adulte « frippée », nourrie sur un lapin immunisé avec

riris.

0,3 et 0,8 mg (p<0,001). Ces résultats ont été reproduits avec un lapin immunisé suivant le

même protocole, mais en utilisant comme adjuvant l’Alum. Les valeurs mesurées sont de 25

% pour la mortalité, des diminutions du poids de 0,3 et 0,8 mg, alors qu’aucune différence n’a

été observée sur le taux de mue des survivantes. Cependant, dans ce cas, les nymphes ont

besoin d’une plus grande période pour se nourrir (+ 0,7 jour).

Ces résultats indiquent que la vaccination avec riris provoque une mortalité d’environ

30 % chez les nymphes. De plus, les tiques survivantes ont conservé la capacité de muer en

dépit d’une diminution de la prise de poids.

8.2.3. Mise en contact de femelles d’Ixodes ricinus avec des lapins immunisés

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