Chapitre 2 : La communication cellulaire de type quorum-sensing 17
2. Le QS chez les bactéries à Gram positif 18
2.1 Détection extracellulaire des peptides autoinducteurs 18
2.1.2 La virulence chez Staphylococcus aureus : le système agrBDCA 19
Após o sorteio aleatório dos dentes, o corte das coroas e a padronização da smear layer, cada frasco com três dentes representava um grupo de tratamento da pesquisa, totalizando sete grupos de trabalho os quais foram denominados de : GI, GII, GIII, GIV , GV, GVI e GVII, e receberam os seguintes tratamentos de superfície:
Grupo-1 (GI)
Este grupo foi denominado grupo controle, sendo que durante o processo para a confecção da coroa de resina composta a superfície dentinária não sofreu nenhum tipo de contaminação em nenhuma etapa. Foi realizado o condicionamento ácido da dentina por 15 segundos com ácido fosfórico a 32% de concentração seguida de lavagem abundante com água pelo mesmo período de tempo e secagem com papel absorvente, tendo sempre a preocupação de manter a dentina úmida e com aspecto brilhante. Em seguida foi aplicado o sistema adesivo One-
Step, seguindo as recomendações do protocolo para trabalhos “in vitro”
fornecido pelo fabricante e fotopolimerizando pelo período de tempo de 40 segundos com o auxílio de um aparelho fotopolimerizador modelo (Optilux 360-Demetron-Kerr Corporation), previamente calibrado em radiómetro de modo que a intensidade de luz gerada foi sempre superior a 400w/cm e
com ponta ativa o mais próximo possível da superfície. Esse mesmo aparelho obedecendo sempre essas especificações descritas foi usado em todos os grupos de tratamento.
Grupo 2 (GII)
Os dentes pertencentes a esse grupo após sofrerem o condicionamento ácido da dentina por 15 segundos com ácido fosfórico a 32% de concentração seguida de lavagem abundante com água pelo mesmo período de tempo e secagem com papel absorvente, tendo sempre a preocupação de manter a dentina úmida e com aspecto brilhante, foram contaminados com saliva humana fresca, sendo a saliva colocada sobre a dentina condicionada pelo período de tempo de 10 segundos e mantida sem lavar, sendo somente limpa com jato de ar por 10 segundos. A seguir foi aplicado o sistema adesivo One-Step, seguindo as recomendações do protocolo para trabalhos “in vitro” fornecido pelo fabricante e fotopolimerizando-o pelo período de tempo de 40 segundos com o auxílio de um aparelho fotopolimerizador modelo (Optilux 360- Demetron-Kerr Corporation), previamente calibrado em radiómetro de modo que a intensidade de luz gerada foi sempre superior a 400w/cm e com ponta ativa o mais próximo possível da superfície.
Grupo 3 (GIII)
Nesse grupo os dentes foram submetidos ao condicionamento dentinário por 15 segundos com ácido fosfórico a 32% de concentração
(Uni-Etch Bisco) seguida de lavagem abundante com água pelo mesmo período de tempo e secagem com papel absorvente, tendo sempre a preocupação de manter a dentina úmida e com aspecto brilhante, após esse condicionamento os dentes foram contaminados com saliva humana que foi colocada na dentina pelo período de tempo de 10 segundos sendo logo em seguida lavado com jato de ar e água por 10 segundos e secados com papel absorvente tendo a preocupação de manter a dentina úmida e com aspecto brilhante para a aplicação do sistema adesivo One-
Step , seguindo as recomendações do protocolo para trabalhos “in vitro”
fornecido pelo fabricante e fotopolimerizando pelo período de tempo de 40 segundos com o auxílio de um aparelho fotopolimerizador modelo (Optilux 360-Demetron-Kerr Corporation), previamente calibrado em radiómetro de modo que a intensidade de luz gerada foi sempre superior a 400w/cm e com ponta ativa o mais próximo possível da superfície.
Grupo 4 (GIV)
Os dentes desse grupo foram submetidos ao condicionamento com ácido fosfórico 32%(Uni-Etch Bisco) por 15 segundos e lavados pelo mesmo período de tempo sendo em seguida secos com papel absorvente mantendo o aspecto úmido e brilhante da dentina, em seguida foram contaminados com saliva humana que foi colocada na dentina por 10 segundos sendo lavada e recondicionada com ácido fosfórico 32% (Bisco) por 10 segundos e novamente lavado pelo mesmo período de tempo e
seco com papel absorvente tomando o cuidado de manter o aspecto úmido e brilhante da dentina, após isso foi aplicado o sistema adesivo sobre a superfície recondicionada seguindo os mesmos protocolos de aplicação e fotopolimerização utilizados nos outros grupos.
Grupo 5 (GV)
Os dentes pertencentes a esse grupo após sofrerem o condicionamento ácido da dentina por 15 segundos com ácido fosfórico a 32% de concentração seguida de lavagem abundante com água pelo mesmo período de tempo e secagem com papel absorvente, tendo sempre a preocupação de manter a dentina úmida e com aspecto brilhante, foram contaminados com sangue fresco, sendo o sangue colocado sobre a dentina condicionada pelo período de tempo de 10 segundos e mantido sem lavar, sendo somente limpo com jato de ar por 10 segundos. A seguir foi aplicado o sistema adesivo One-Step, seguindo as recomendações do protocolo para trabalhos “in vitro” fornecido pelo fabricante e fotopolimerizando-o pelo período de tempo de 40 segundos com o auxílio de um aparelho fotopolimerizador modelo (Optilux 360- Demetron-Kerr Corporation), previamente calibrado em radiómetro de modo que a intensidade de luz gerada foi sempre superior a 400w/cm e com ponta ativa o mais próximo possível da superfície.
Grupo 6 (GVI)
Nesse grupo os dentes foram submetidos ao condicionamento dentinário por 15 segundos com ácido fosfórico a 32% de concentração (Uni-Etch Bisco) seguida de lavagem abundante com água pelo mesmo período de tempo e secagem com papel absorvente, tendo sempre a preocupação de manter a dentina úmida e com aspecto brilhante, após esse condicionamento os dentes foram contaminados com sangue fresco que foi colocado sobre a dentina pelo período de tempo de 10 segundos sendo logo em seguida lavado com jato de ar e água por 10 segundos e secados com papel absorvente tendo a preocupação de manter a dentina úmida e com aspecto brilhante para a aplicação do sistema adesivo One-
Step , seguindo as recomendações do protocolo para trabalhos “in vitro”
fornecido pelo fabricante e fotopolimerizando pelo período de tempo de 40 segundos com o auxílio de um aparelho fotopolimerizador modelo (Optilux 360-Demetron-Kerr Corporation), previamente calibrado em radiómetro de modo que a intensidade de luz gerada foi sempre superior a 400w/cm e com ponta ativa o mais próximo possível da superfície.
Grupo 7 (GVII)
Os dentes desse grupo foram submetidos ao condicionamento com ácido fosfórico 32%(Uni-Etch Bisco) por 15 segundos e lavados pelo mesmo período de tempo sendo em seguida secos com papel absorvente mantendo o aspecto úmido e brilhante da dentina, em seguida foram
contaminados com sangue fresco que foi colocado na dentina por 10 segundos sendo a mesma lavada e recondicionada com ácido fosfórico 32% (Bisco) por 10 segundos e novamente lavada pelo mesmo período de tempo e seco com papel absorvente tomando o cuidado de manter o aspecto úmido e brilhante da dentina, após isso foi aplicado o sistema adesivo sobre a superfície recondicionada seguindo os mesmos protocolos de aplicação e fotopolimerização utilizados nos grupos anteriores.