REMARQUES GENERALES

La pureté de chaque produit a été vérifiée soit par chromato­ graphie en phase gazeuse (appareil de Perkin-Elmer modèle F 11) soit par chromatographie sur couche mince (le gel de silice G pour cou­ ches minces de la compagnie Merck a été utilisé). Les rendements indiqués se réfèrent à des produits purifiés et ne tiennent généra­ lement pas compte des quantités récupérables des produits de départ.

Pour chacune des réactions décrites ci-après, l’expression ’’on isole de la façon habituelle” ou ”1’isolation se poursuit de la façon habituelle” signifie que la phase organique contenant les produits de la réaction est lavée avec une solution de chlorure de sodium jusqu’à neutralité des eaux de lavage, ce qu’on vérifie à l’aide d’un papier pH Accutint (pH 1-12), qu’elle est ensuite séchée sur des granules de sulfate de sodium anhydre, et qu’enfin le solvant est évaporé com­ plètement sous pression réduite.

Les points de fusion ne sont pas corrigés; ils ont été déterminés à l’aide d’un appareil ’’Electrothermal” dans des tubes capillaires ouverts. On a fait usage, tout au long de cette partie, des abrévia­ tions suivantes : F pour "point de fusion”, déc. pour "décomposi­ tion", et Eb pour "point d ' ébullition”.

Les spectres ultraviolets ont été pris à l’aide d’un appareil Beckman DK-1A. Le solvant utilisé est l’éthanol à 95%. La valeur d’e est donnée entre parenthèses.

82

Les spectres infrarouges du premier chapitre de ce travail ont été enregistrés par un spectrophotomêtre Beckman modèle IR-4. Ceux de l'autre chapitre l'on été à l'aide du spectrophotomêtre â réseaux numéro 457 de Perkin-Elmer.

Les spectres de résonance magnétique nucléaire ont été enregis­ trés par un spectromètre Varian A-60, en prenant comme origine

(0.00 6 ) les protons du tétraméthylsilane utilisé en référence inter­ ne. Dans 1'explication des spectres, les abréviations suivantes ont été employées : s pour singulet, d pour doublet, t pour triplet, q pour quatuor et m pour multiplet.

Les spectres de masse ont été effectués â l'aide de l'appareil M-66 de Varian.

Les analyses élémentaires sont dues au travail du Dr Franz Pascher à Bonn (Allemagne) et de Réjean Dulude â 1'Université Laval.

CHAPITRE I

84

Extraction des bases brutes

Un échantillon de feuilles séchées (4.2 kg) du Buxus wallichiana Baill. a été réduit en poudre grossière et soumis à une percolation exhaustive dans le méthanol à température de la pièce. Après évapo­ ration du méthanol, le résidu fut trituré en plusieurs portions dans douze litres d'acide chlorhydrique à 2.5%. La solution acide a été extraite au chloroforme de manière â éliminer la majeure partie des substances neutres puis, après basification à 1'ammoniaque elle fut extraite de nouveau au chloroforme pour donner cette fois 41 g de substances basiques. On a cependant constaté plus tard que la frac­ tion dite basique contenait encore une quantité appréciable de pro­ duits neutres.

Les bases brutes furent alors soumises â une distribution à contre- courant entre une phase stationnaire faite de chloroforme et un tam­ pon acétate â pH 5.6, ce qui eut pour résultat de diviser les bases

en trois fractions: une première (9.0 g) contenant les bases fortes, une seconde (6.7 g) contenant des substances de basicité moyenne, et une troisième (18.6 g) contenant surtout des produits neutres.

Grâce â des chromatographies répétées sur alumine basique Woelm (activité III) on a pu isoler et purifier de la fraction des bases fortes trois substances : la cyclovirobuxine-D (4), la cyclobuxine-D

(7) et la cycloprotobuxine-C (8). De la fraction des bases intermé­ diaires, on a isolé deux bases dont une seule a été identifiée: la buxtauine (10) .

Cyclovirobuxine-D (4)

La cyclovirobuxine-D (360 mg) a été recristaIllsêe de l'acétone F = 219-220° déc. (littérature ^: F = 221-224° déc.)

vmax (KBr) : 3285 cm™1 (-0H) , 3135 cm™1 QNH) , 1372 et 1328 cm™1 (méthyles géminaux).

5 (CDCl^) : 0.41 q AB (méthylène du cyclopropyle) J = 4 Hz (po­ sition de H^: 0.29, position de H^: 0.54), 0.73, 0.94, 0.96, 1.12 s (-CH^ tertiaires), 1.08 d (méthyle secon­ daire attaché à C2Q) J = 5 Hz, 2.43 s (les deux

N-CH ), 4.12 m (-CH0H-) .

Spectre de masse :

402 m/e pic parent, 387 m/e (perte de -CHg), 372 m/e (perte de deux -CH^), 346, 70 m/e [c ^H2=CH-CH=NH- CH3]+, 58 m/e [CH^-C^H^NH-CH^T pic de base, 57 m/e

[

Analyse pour C26H^6ON2:

Calculé

%

Trouvé : 77.8 11.4 4.1 7.0

Tous ces résultats concordent avec ceux trouvés dans la litté­ rature. Un échantillon authentique de la cyclovirobuxine-D a per­ mis de constater l'identité des spectres infrarouges ; aucune dépres­

86

Cyclovirobuxine-A (5)

On porte à reflux pendant quatre heures sur bain de cire 50 mg de cyclovirobuxine-D, 0.5 ml d’acide formique et 0.5 ml de formal­ déhyde â 40% dans l’eau. On refroidit et on ajoute 20 ml d’eau, on basifie avec du carbonate de sodium solide (dégagement de gaz carbo­ nique) et on extrait au chlorure de méthylène. L’isolation se pour­ suit de la façon habituelle. Le produit brut est cristallisé dans le methanol. On obtient 23 mg de produit pur F = 228-230° déc.

(littérature ®: F = 240-241° déc.).

v max (KBr) : 3400 cm-*- (-0H) , 1375 et 1355 cm-*" (méthyles géminaux) .

6 (CDCl^) : 0.41 q AB (méthylène du cyclopropyle) J = 4 Hz (posi­ tion de 0.27, position de : 0.54), 0.80 s

(-CHg tertiaire), 0.87 d (méthyle secondaire attaché à C£q) J = 6 Hz, 0.97 s (deux -CH^ tertiaires), 1.13 s

(-CHg tertiaire), 2.25 et 2.29 s (deux -N (CH^) 2) , 4.10 m (-CH0H-) , 4.52 s (-CH0H-) s ’échange avec D^O.

430 m/e pic parent, 415 m/e (perte de -CH^) , 370, 359 m/e pic de base , 84 m/e ["C ^H2=CH-CH=N (CHg) 2] , 72 m/e [cH^-O H=N(CHg)g]\ 71 m/e [cH^C^H-N

58 m/e [c^H^=N(CH^) Spectre de masse

Cyclobuxine-D (7)

La cyclobuxine-D (500 mg) a été recristallisêe du benzène F = 239-240 déc. (littérature ^: F = 245-247 ).

vmax (KBr) : 3295 cm™1 (-0H) , 3140 cm™1 QNH) , 1635 et 888 cm

()C=CH^).

6 (CDClg) : 0.30 d partie B d’un quatuor AB (méthylène du cyclo- propyle) J = 4.5 Hz, 0.98 s (-CH^ tertiaire), 1.09 d

(méthyle secondaire attaché à C^q) J = 5 Hz, 1.15 s (-CH tertiaire), 2.46 s (>N-CH^), 2.51 s ()N-CHg) , 4.15 m (-ÇH0H-) , 4.75 q AB (^C=CH.) J = 1.4 Hz (posi­ tion de H : 4.64, position de H^: 4.87).

Spectre de masse:

386 m/e pic parent, 371 m/e (perte de -CH^), 356 m/e (perte de deux -CH^), 58 m/e [CH^-C ^^H=NHCH^] pic de base, 44 m/e |^CH^-NH=C Analyse pour C25H42°N2: Calculé

%

v

La cycloprotobuxine-C (104 mg) a été cristallisée de l’acétone 191-192° (littérature ^: F = 200-202°).

(KBr) : 3450 cm"1 ()N-H) . max

88

6 (pyridine) : 0.87 d (méthyle secondaire attaché â C ) J = 6.5 Hz, 0.87, 0.99, 1.02 et 1.07 s (-CH tertiaires), 2.21 s

(-N(CHg)^), 2.48 s ()N-CHg).

ô(CDCl^) : Dans ce solvant les -CH^ tertiaires sont mal séparés. 0.42 q AB (méthylène du cyclopropyle) J = 4.5 Hz

(position de H^: 0.30, position de Hg: 0.55) .

Spectre de masse :

400 m/e pic parent, 385 m/e (perte de -CH^) , 256 , 72 m/e £CH3~C ^H=N(CH3)2] pic de base, 70 m/e [C ^H2=CH-CH=NHCH3]+ , 57 m/e [CH2=C^H-NHCHg]\

Cycloprotobuxine-A (9)

On porte à reflux pendant six heures sur bain de cire 43 mg de cycloprotobuxine-C, 0.5 ml d'acide formique, et 0.5 ml de formal­ déhyde à 40%. Après refroidissement on ajoute 20 ml d'eau, on basi- fie avec du carbonate de sodium solide (dégagement de gaz carbonique) et on extrait au chlorure de méthylène. Le reste de 1'isolation se fait de la façon habituelle. Le produit brut (37 mg) est recristal­ lisé de l'acétone F = 205-206° (littérature

^:

6 (CDClg) : La séparation des -CH^ tertiaires est mauvaise.

0.42 q AB (méthylène du cyclopropyle) J = 4 Hz (po­ sition de H^: 0.30, position de Hg: 0.55) , 2.23 et 2.31 s (deux -N(CHg)2) .

89

Spectre de masse :

4-14 m/e pic parent, 399 m/e (perte de -CH^) 342, 84 m/e[c H^=CH-CH=N(CH^)^] \ 72 m/e [CH^-C^^H=

N(CH3)2] + pie de base, 71 m/e [CH^C H-NfCH^] +, 58 m/e [c^H^N(CH^)^] + .

Analyse pour C28H50N2:

Calculé

%

Trouvé : 81.0 12.0

Buxtauine (10)

La buxtauine (456 mg) a été recristallisée de 1'acétone F = 179-180° (littérature 13 : F = 178-181°). : 203 nm (6200) . : 3600 cm-1 (-0H) , 3290 cm"1 (>N-H) , 3097 cm"1 &C=CH), 1705 cm"1 (C=0) , 1652 et 895 cm"1 (>C=CH2) , 1352 cm'1 (-C0-CH ) . 3 : 0.33 q AB (méthylène du cyclopropyle) J = 4.5 Hz seule la partie B du quatuor est visible, 0.93 et 1.23 s (-CH^ tertiaires), 2.16 s (-CO-CH^) , 2.50 s

ON-CH ) , 3.07 d (>ÇH-C0-CH3) J = 7 Hz, 4.62 s et 4.85 m (>C=CH ), 4.85 m (-ÇH0H-) .

Spectre de masse :

371 m/e pic parent, 356 m/e (perte d'un -CH ) pic max

"max (KM

6 (CDClg)

N 6.8

90

de base, 328, 70 m/e [CH^-CH-CH-NHCH^J , 57 m/e [CH^=C H-NHCH^] +, 44 m/e [C(3)H2=NHCH3]+ .

Analyse pour C24H37°2N:

Calculé

%

Trouvé : 77.6 10.2 8.6 3.8

O, N-Dia c ét y lbuxtauine (11)

A 50 mg de buxtauine en solution dans 5 ml de pyridine, on