L’huile essentielle d’Asarum glabrum

III.1. Description botanique

Asarum glabrum Merrill est une plante herbacée vivace d’environ 20-30 cm de haut

(Figure II.8). Elle pousse sur des sols humides (humus) dans les forêts sempervirentes,

denses et humides du Vietnam, à des altitudes supérieures à 1000 m (provinces de Hà Giang et Vĩnh Phúc, nord du Vietnam). La floraison se produit généralement vers mai-juin, les feuilles en forme de cœur sont alternes. A. glabrum est répertoriée dans le « Vietnam’s Red Data Book » et citée par le Décret Gouvernemental 32/2006/NÐ/CP parmi les espèces vulnérables.

Figure II.8 : (a) Feuilles d’A. glabrum ; (b) Fleurs d’A. glabrum (Source :

www.flickriver.com ; photos : Johannes Lundberg)

(a)

(b)

En médecine traditionnelle, les feuilles et les racines d’A. glabrum sont, tout comme celles d’A. cordifolium, utilisées en décoction pour soigner la dyspepsie et les douleurs abdominales. Cette décoction est également utilisée comme boisson tonique.

III.2. Etude de la composition chimique de l’huile essentielle

L’huile essentielle, de couleur jaune, a été obtenue par hydrodistillation de l’intégralité de la plante (feuilles, tiges, fleurs et racines) durant 3 heures. Son rendement, calculé par rapport à la masse de végétal sec, est de 0,12 % (m/m).

L’échantillon a dans un premier temps été analysé par CPG(Ir) et RMN 13C, ce qui nous a permis d’identifier 22 composés, principalement des composés oxygénés (9 phénylpropanoïdes, 6 monoterpènes oxygénés, 5 monoterpènes hydrocarbonés et 2 sesquiterpènes oxygénés) (Tableau II.7). Le composé majoritaire de cette huile essentielle est le safrole (41,9 %), accompagné de plusieurs autres composés appartenant également à la famille des phénylpropanoïdes. Il s’agit de l’apiole parsley (8,2 %), du méthyleugénol (6,9 %), de la (E)-asarone (5,3 %), de la γ-asarone (4,7 %), de la myristicine (4,3 %), du 4-méthoxysafrole (3,2 %), de l’apiole dill (3,0 %) et de l’élémicine (1,6 %). Le sesquicinéole (2,6 %) est le seul sesquiterpène oxygéné dont la teneur dépasse 1 %.

Nous avons souhaité compléter l’identification des composés minoritaires en analysant cet échantillon par CPG-SM. Nous avons ainsi identifié 14 composés supplémentaires, dont 9 monoterpènes hydrocarbonés, 3 sesquiterpènes hydrocarbonés, 1 monoterpène oxygéné et 1 phénylpropanoïde. Parmi les 12 composés déjà identifiés par CPG(Ir) et RMN ¹³C, seuls le 4-méthoxysafrole et la (E)-asarone n’ont pas été identifiés en spectrométrie de masse. En effet, pour un même pic en CPG, chacun de ces deux composés est suggéré avec un score faible, aux côtés d’autres molécules (squelettes proches) proposées avec des scores similaires voire meilleurs. Même si les indices de rétention de ces dernières ne coïncident pas avec l’ordre d’élution, il reste difficile d’affirmer avec certitude l’identification du 4-méthoxysafrole et de la (E)-asarone. Ainsi, dans ce cas là, la RMN ¹³C constitue une technique de choix pour identifier avec certitude ces deux composés. De la même façon, l’α-bisabolol (0,4 %) a été suggéré par la SM mais la stéréochimie relative des deux carbones asymétriques ne peut être assurément déterminée que par RMN. En effet, l’α-bisabolol et l’α-épi-bisabolol présentent des spectres de masses similaires et leurs indices de rétention sur colonnes polaire et apolaire ne différent que de quelques points (Ir^a/Ir^p = 1675/2210 et 1677/2214, respectivement). En revanche, les spectres de RMN ¹³C des deux diastéréoisomères sont différents.

Au total, 36 composés représentant 93,7 % de la composition globale de l’huile essentielle d’Asarum glabrum ont été identifiés. Il s’agit très majoritairement de phénylpropanoïdes (79,3 %, 10 composés) (Tableau II.7 et Figure II.9 p.96).

En raison de sa forte teneur en safrole (composé majoritaire, 41,9 %), cette huile essentielle d’Asarum glabrum doit être utilisée avec précaution. En effet, suite à la découverte de sa cancérogénécité chez les rats, le safrole qui était autrefois utilisé comme additif alimentaire et comme arôme dans les médicaments, a été banni en 1960 par la Food and Drug Administration (FDA). Même si sa cancérogénécité chez l’homme reste encore à prouver, il est aujourd’hui considéré comme génotoxique et carcinogène par la Direction Générale de la Santé et de la Protection des Consommateurs de l’Union Européenne. Le safrole est également utilisé pour synthétiser la 3,4-méthylenedioxyméthamphétamine (MDMA), drogue illicite également connue sous le nom d’ecstasy. Aussi, il est classé parmi les précurseurs sous contrôle de la Catégorie I No 273/2004 de la Communauté Européenne et au sein des substances chimiques de la Liste I des Etats Unis. C’est aussi un précurseur dans la synthèse du butoxyde pipéronilique, composé synergisant utilisé dans un grand nombre d’insecticides pour accroître les propriétés pesticides des ingrédients actifs. Ainsi, présent en petites

quantités dans les végétaux, le safrole les protège de l’attaque de certains insectes. Enfin, depuis 1976, l’International Fragrance Association (IFRA) limite la teneur en safrole dans certains savons et parfums à 0,01% (National Toxicology Program, 2011).

Tableau II.7 : Composition chimique de l’huile essentielle d’Asarum glabrum.

Composés Ir^a Ir^p HE % Identification α-Thujène 924 1028 1,2 Ir, SM, RMN ¹³C α-Pinène 932 1026 0,4 Ir, SM, RMN ¹³C Camphène 945 1071 0,2 Ir, SM Sabinène 966 1124 0,1 Ir, SM β-Pinène 972 1114 1,0 Ir, SM, RMN 13C Myrcène 981 1162 0,3 Ir, SM α-Phellandrène 998 1168 tr Ir, SM α-Terpinène 1010 1183 0,3 Ir, SM p-Cymène 1013 1273 0,8 Ir, SM, RMN ¹³C Limonène * 1022 1203 0,3 Ir, SM 1,8-Cinéole* 1022 1211 0,3 Ir, SM (Z)-β-Ocimène 1026 1234 0,2 Ir, SM (E)-β-Ocimène 1037 1251 0,1 Ir, SM γ-Terpinène 1049 1247 0,9 Ir, SM, RMN ¹³C

trans-hydrate de sabinène 1053 1460 0,4 Ir, SM, RMN 13C

Terpinolène 1079 1285 0,1 Ir, SM Linalol 1083 1543 0,9 Ir, SM, RMN ¹³C Bornéol 1150 1696 0,4 Ir, SM, RMN ¹³C Terpinèn-4-ol 1162 1598 1,1 Ir, SM, RMN ¹³C α-Terpinéol 1172 1691 0,6 Ir, SM, RMN ¹³C Safrole 1265 1873 41,9 Ir, SM, RMN ¹³C Eugénol 1328 2175 0,2 Ir, SM

Acétate d’α-terpinyle 1332 1693 1,4 Ir, SM, RMN ¹³C Méthyleugénol 1370 2008 6,9 Ir, SM, RMN ¹³C

β-Elémène 1388 1593 0,1 Ir, SM

4-Méthoxysafrole (sarisan) 1463 2211 3,2 Ir, RMN ¹³C

α-Curcumène 1470 1771 0,2 Ir, SM γ-Curcumène 1472 1689 0,1 Ir, SM Myristicine 1487 2280 4,3 Ir, SM, RMN ¹³C Sesquicinéole 1503 1740 2,6 Ir, SM, RMN ¹³C Elémicine 1516 2242 1,6 Ir, SM, RMN ¹³C γ-Asarone 1536 2277 4,7 Ir, SM, RMN ¹³C

Apiole dill 1590 2360 3,0 Ir, SM, RMN ¹³C

(E)-Asarone 1639 2452 5,3 Ir, RMN ¹³C Apiole parsley 1645 2476 8,2 Ir, SM, RMN ¹³C

α-Bisabolol 1666 2229 0,4 Ir, SM, RMN ¹³C

Total 93,7

L’ordre d’élution et les pourcentages sont donnés sur colonne apolaire, excepté pour les composés suivis d’un astérisque (colonne polaire). Ira et Irp : indices de rétention mesurés respectivement sur colonnes apolaire (BP-1) et polaire (BP-20).

Ainsi, à l’image d’autres espèces du même genre, Asarum glabrum produit une huile essentielle caractérisée par une grande variété de phénylpropanoïdes qui constituent près de 80 % de sa composition chimique totale. Celle-ci possède une composition très proche de celle décrite par Thai et al. (2010), toutes deux originaires du Vietnam et renfermant majoritairement du safrole (41,9 % dans notre échantillon et 42,24 % dans celui de la littérature). Néanmoins, la teneur en apiole est nettement plus élevée dans l’échantillon de la littérature (27,11 %) que dans notre huile essentielle (8,2 %). Par ailleurs, notre échantillon se distingue par la présence d’un plus grand nombre de phénylpropanoïdes à des teneurs non négligeables (1,6 % à 6,9 %) ainsi que d’un sesquiterpène oxygéné (sesquicinéole, 2,6 %). Concernant l’huile essentielle d’A. cordifolium, sa composition chimique est similaire à celle décrite par Thai et al. (2013a) et remarquable par sa forte teneur en élémicine (plus de 80 %).