Les résultats présentés dans cette thèse nous permettent de mieux apprécier la complexité de la modulation de l’ARNm αENaC en condition inflammatoire. Néanmoins, il serait judicieux d’approfondir la modulation de la stabilité de l’ARNm αENaC par les protéines liant l’ARN. L’activation des voies de signalisation par la cycloheximide suggère l’implication de MAPKAPK en aval. L’identification de ces voies de signalisation permettrait de mieux cibler les acteurs impliqués dans la stabilité de l’ARNm αENaC et tester si ces voies de signalisation peuvent phosphoryler ou changer la localisation cellulaire des protéines liant l’ARN que nous avons identifiées.
Le développement du modèle Tet-Off pour mesurer la demi-vie de l’ARNm αENaC remet en question les résultats observés jusqu’à ce jour lorsque la stabilité des transcrits est mesurée en présence d’actinomycine D et montre que la demi-vie du messager est beaucoup plus courte que ce que nous avions mesuré auparavant. De plus, ce système montre que des conditions pro-inflammatoires peuvent moduler à la baisse la stabilité du transcrit rappelant la chute rapide des transcrits ENaC observés lors d’une transplantation pulmonaire qui entraîne une sécrétion de cytokines pro-inflammatoires (Sugita et al., 2003b). Ce modèle sera très utile pour étudier plus en détail les modulations post-transcriptionnelles du transcrit αENaC sous différentes conditions. La caractérisation du 3’UTR αENaC a également permis d’identifier différentes régions impliquées dans la stabilité de l’ARNm αENaC et montré que le 3’UTR était impliqué aussi bien dans la stabilisation du messager que dans la déstabilisation de celui- ci. Une mutagenèse dirigée pourra être envisagée afin d’observer le rôle précis des différentes régions consensus identifiées pour permettre de mieux cartographier le rôle des différentes régions du 3’UTR dans la modulation de la stabilité du transcrit et identifier de nouveaux domaines susceptibles de moduler celle-ci. Il sera également intéressant de déterminer quelles régions du 3’UTR jouent un rôle dans la modulation à la baisse de l’ARNm αENaC en condition pro-inflammatoire dans les poumons.
L’observation d’un plateau dans la dégradation des ARNm αENaC suggère l’existence de différentes populations d’ARNm αENaC. Un pool de messager serait susceptible d’être dégradé alors qu’un autre pool semble être protégé. La nature des protéines liant l’ARN détectées avec le 3’UTR αENaC, ainsi que la littérature nous suggèrent que les ARNm αENaC
pourraient être localisés dans les granules de stress et les P-bodies. C’est donc un nouveau champ d’investigation qui s’ouvre à nous avec ces observations et il serait intéressant de détecter la présence du messager αENaC dans ces granules, ainsi que confirmer par immunodétection la présence de DHX36 et Tial1 dans ces compartiments. En outre, pour continuer notre étude il sera important de montrer par immunoprécipitations que ces deux protéines sont bien associées au messager αENaC. Par ailleurs, la nature des différentes protéines identifiées suggère également un rôle dans la modulation traductionnelle de αENaC. Il serait donc intéressant d’investiguer leur rôle à ce niveau.
Enfin, à un niveau pathophysiologique, il serait intéressant de confirmer par co- immunoprécipitation à partir de tissu pulmonaire si des protéines liant l'ARN peuvent interagir avec l'ARNm αENaC et modifier de façon post-traductionnelle son niveau d'expression. Cette investigation pourrait se faire dans le cadre de conditions pathologiques inflammatoires pour les poumons, lors d’une transplantation pulmonaire par exemple ou dans le contexte d’un SDRA.
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