Conclusion et Perspectives

Les rôles du facteur de transcription UBF dans le remodelage de la chromatine des gènes d'ARNr, dans l'établissement d'une population active des gènes d’ARNr, dans la formation du PIC et dans l'élongation de la transcription font qu'UBF est le facteur central dans le processus de la transcription ribosomale ainsi que dans sa régulation. Son lien avec les grandes voies de signalisation cellulaire régulatrices de la prolifération cellulaire ainsi qu'avec les suppresseurs de tumeurs et proto-oncogènes prouvent l'importance du facteur pour la prolifération cellulaire ainsi que pour sa régulation.

UBF est le facteur qui permet de former le site de la biosynthèse des ribosomes, le nucléole. Son rôle central dans la première étape du processus de la biosynthèse des ribosomes en fait le facteur qui joue le rôle d'intermédiaire entre la demande en ribosome et les voies de signalisation cellulaires qui régulent la prolifération ou la différenciation cellulaire. On peut comprendre pourquoi le facteur UBF est si conservé au sein de l'évolution chez différentes espèces. On peut également comprendre pourquoi la présence de ce facteur est essentielle aussi précocément dans le développement embryonnaire

À partir de notre modèle de souris conditionnel pour la mutation du gène Ubf, le croisement avec des souris qui expriment une recombinase Cre qui est tissu-spécifique et inductible permettrait d'avoir un modèle d'inactivation d'Ubf in vivo dans un tissu précis. Cela permettrait d'éviter la létalité précoce des souris et d'évaluer l'importance du facteur pour la prolifération et la différenciation des cellules. Des études (Ge et al., 2010; Volarevic et al., 2000) ont porté sur l'analyse de l'inactivation des gènes qui codent pour la protéine ribosomale S6 et pour la protéine Dyskérine, qui intervient dans la maturation des ARNr, ceci spécifiquement dans le foie. Dans les deux études, il a été observé une altération dans la prolifération des cellules du foie après utilisation d'une variante Albumin-Cre (Alb-Cre) de la recombinase Cre, qui est spécifiquement exprimée dans le foie. L'expression spécifique de cette recombinase dans le foie est attribuable au fait de sa fusion avec la région du promoteur/enhancer du gène Albumine (Alb), lui-même spécifiquement exprimé dans le foie (Postic and Magnuson, 2000). L'importance d'UBF1 et d'UBF2 et de leurs modifications post-traductionnelles n'a jamais été étudiée in

vivo. Les études qui ont porté sur la régulation de la transcription par les variants d'épissages UBF1 et

UBF2 (Kuhn et al., 1994; Stefanovsky and Moss, 2008), sur l'effet des mutations des sites de phosphorylations localisés sur les boîtes HMG 1 et 2 d'UBF (Stefanovsky et al., 2001b) ou sur l'effet de la mutation de la région N-terminale d'UBF (Stefanovsky et al., 2001a) ont été entreprises in vitro. L'utilisation de notre système d'inactivation du gène Ubf permettrait d'étudier la réelle importance d'UBF1 et d'UBF2 ainsi que de ses modifications post-traductionnelles, en exprimant par exemple uniquement UBF2 ou des mutants non-phosphorylable ou non-acétylable après inactivation d'Ubf dans des expériences de restauration, ce qui pourrait par la même occasion aider à la compréhension de la régulation de la transcription ribosomale par la voie de signalisation des facteurs de croissance. UBF et TIFIA ont été proposés comme les intermédiaires de cette régulation. Donc après expression d'un mutant d'UBF non-phosphorylable, il pourrait être étudié si TIFIA est suffisant pour effectuer cette régulation.

La perte d'UBF dans les embryons précoces a également entraîné la perte de la structure nucléolaire zygotique et le regroupement des protéines RPI et FIB dans un corps nucléaire. Il serait intéressant d'étudier si RPI et FIB sont présentes ou non sur les NORs ou si cette structure est un corps protéique indépendant. Il pourrait être effectué des expériences de FISH-3D Fluorescence In Situ Hybridization-

3D, en utilisant des sondes dirigées contre les régions centromériques centriques et péricentriques et

également dirigées contres les NORs, couplées à des immunofluorescences pour immunolocaliser les facteurs de la transcription ribosomale. De cette manière, l'organisation des centromères et de l'hétérochromatine ainsi que des gènes d’ARNr durant le développement embryonnaire précoce et durant la nucléologenèse pourrait être analysée plus précisément, ce qui nous donnera plus

d'information sur la dynamique de localisation des facteurs de la transcription ribosomale, des régions centromériques et des NORs aboutissant à la formation du nucléole.

Dans notre étude présentée dans le Chapitre 3, le fait que la perte du gène Ubf entraine la mort cellulaire uniquement dans les cellules ayant subi une transformation oncogénique et de manière indépendante de p53 est de toute importance. On peut supposer qu'UBF pourrait constituer une cible thérapeutique dans les cas de cancers qui résultent d'une hyper-activation oncogénique. Le ciblage des cellules tumorales par un inhibiteur qui déstabilise la fixation d'SL1 aux gènes d’ARNr semble prometteur et est actuellement en phase clinique (Bywater et al., 2012). À partir de nos observations liées à la perte du gène Ubf et de ses conséquences drastiques sur les cellules, et sachant qu'UBF est fortement impliqué dans la biogenèse ribosomale et dans la prolifération des cellules, on pourrait penser qu'un inhibiteur le ciblant aurait un effet drastique sur les cellules cancéreuses.

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