Contribution à l'étude des cires de tourbes et d'acides humiques

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Jean-Claude Wilhelm

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Jean-Claude Wilhelm. Contribution à l’étude des cires de tourbes et d’acides humiques. Chimie analytique. Université Paul Verlaine - Metz, 1974. Français. �NNT : 1974METZ003S�. �tel-01775535�

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THÈSE

présentée

A L'+}.+- R, JISCIENGES +XACT€S +r NATURETTES" DE L,UNIVERSITÉ DE MElz

pour obtenir le grade de

DOCTEUR

oe spÉctRutÉ

_{1til' cycte)}

Mention Chimie Analytique

par

Jean-Glaude WILHEIM

Licencié ès-Sciences Physiques

Assistant à la Faculté des Sciences de Metz

CONTRIBUTION A

DE TOURBES ET

L'ÉTUDE

D'ACIDES

DES CIRES

HUMIQUES

Soutenue le 1.' mars 1974 devant la commission d'examen

Président: Monsieur J.-M. BLOCH, Professeur

Examinateur: Madame D. CAGNANT, Professeur

)57Qol5S

PROFESSEI]RS : M. LONCHAMP J.P. M. BARO R. T . 1 . P . P h y s i q u e T . P h y s i q u e lûne CAGNIAI,IT D. M. tElAY J. M. BLOCH J.}I. M. KI,EIM R. M. CHARLIER A. M. TAVARD C. M . P E L T J.M. TIAITPGS DE CONFERENCES : M. CERTIER M . W E B E R J . D . M. !ÛENDIING E. II. BAI]DEI,ET B. M. CARABATOS C. M. FALLER P. 14. JOUANY J.M. U . R H I N G . lhe SEC A. M. MORIN B. M . D A X J . P .

UAÎTRE DE CONTERENCES ASSOCIE

M . YUEN P. CIIARGE D'ENSEIGNEMENT : Itne SCHWARTZBROD J. P . S . C . C h i m i e P . S . C . P h y s i q u e T . C h i m i e P . S . C . P h y s i q u e P . S . C . P h y s i q u e P . S . C . P h y s i q u e T B i o l o g i e v é g é t a l e P h y s i q u e M é c a n i q u e C h i m i e P h y s i q u e P h y s i q u e C h i m i e T o x i c o l o g i e M a t h é m a t i q u e s M a t h é m a t i q u e s M a t h é m a t i q u e s M a t h é m a t i q u e s M a t h é r o a t iq u e s M i c r o b i o l o g i e MARS t974

I t a p p u i e t l e s c o n s e i l s

Je Ëiens à remercier ÈIadane D. caGNrAlitT, professeur, qtri a bien v o u l u j u g e r ce t,ravail et qui mra apporté ses conseils précieux dans

I r e x é c u t i o n d e c e t r a v a i l .

Je remercie égalenent Monsieur J.U. JOUANY, Maître de Conférences,

q u i m r a fait _{l t h o n n e u r de faire partie de ce jury.}

L e s coupositions centésimales ont été déter:rninées par le service

d e m i c r o a n a l y s e du laboratoire _{d e c h i n i e organique dirigé par Madame}

D . C A G N I A N I . Qutelle en solt remerciée, ainsi que le personnel technique p o u r son obligeance. Q u t i l m e s o i t , p e n u i s d e l e r e m e r c i e r p o u r q u ' i 1 m ' â tbujours p-odigùés. L e s spectres de masse G . T E L L E R , dans Ie laboraÈoire P r o f e s s e u r R . I 0 L F F . Qurils en b o n s c o n s e i l s .

o n t été établis par les soins de Monsieur

de Spectrographle _{de Masse de tlonsieur le}

s o i e n t ici remerciés, ainsi que pour leurs

J e r e r u e r c i e vivement Monsieur A. THIL pour la qualité des figures. Je remercie égalernent, tous rnes collègues du laboraËoire de Ghinie

M i n é r a l e p o u r leur æicale collaboration, _{a i n s l q u e Mademoiselle BIEHLMANN}

p o u r son aide technique.

J e r e m e r c i e le personnel adminisÈraÈif pour la qualité de la d a c t y l o g r a p h i e et de lrimpression de ceÈte Èhèse.

INTRODUCTION

I - D é f i n i t i o n s

II. .But de nos recherches

CHAPITRE I E t u d e b i b l i o g r a p h i q u e p r é l i m i n a i r e I - _{S u b s t a n c e s c i r e u s e s t r o u v é e s d a n s l e s s o l s e t l e s t o u r b e s} I I - _{E x i s t e n c e d e c i r e s d a n s l e s a c i d e s h u m i q u e s e t f u l v i q u e s} I l T - t h é o r i e s r e l a t i v e s à l e u r o r i g i n e C H A P I Î R E I I E t u d e p h y s i c o - c h i m i q u e p r é l i m i n a i r e I - E x t r a c Ë i o n - S o l u b i l i t é I I - S a p o n i f i c a t i o n I I I - C a r a c t é r i s t i q u e s c h i m i q u e s 1 o C o m p o s i t i o n 2 o M a s s e m o l a i r e 3 0 I n d i c e d r i o d e 4 o I n d i c e d e m é t h o x y l e 5 o A c i d i t é 6 o F o n c t i o n s h y d r o x y l e e t . c a r b o n y l e I V - E t u d e d e f i n s a p o n i f i a b l e 1 o R é a c t i o n s q u a l i t a t i v e s d e s s t é r o l s 2 o R e c h e r c h e d e p o l y o l s 4 9 1 1 t 6 L I 1 8 1 9 t 9 2 0 1 3 t 4 1 5

2r

22

CHAPITRX III A n a L y s e c h r c m a t o g r a p h i q u e _{d e l a e i r e a c i d e .} I d e n t i f i c a t i o n d r a c i d e s g r a s . I - I d e n t i f i c a t i o n _{d r a c i d e s g r a s p a r c h r a n a t o g r a p h i e e n} p h a s e g a z e u s e 1 o G é n é r a l i t é s 2 0 A n a l y s e p a r C P V à t e m p é r a t u r e d e c o l o n n e c o n s t . a n È e 3 o A n a l . y s e q u a n t , i t a t i v e _{d e s a c i d e s g r a s} 4 0 r d e n t i f i c a t i o n _{d t a L c o o l - s g r a s d a n s l r i n s a p o n i f i a b l e} r r - c h r c n r a t o g r a p h i e d t a d s o r p t i o n _{d e l a c i r e s u r g e l d e s i l i c e} 1 o M o d e o p é r a t o i r e 2 o R é s u l t a t s I I I - C o n c l - u s i o n CHAPITRE IV r d e n t i f i c a t i o n _{d e s c o n s t i t u a n t s d e s c i r e s p a r u t i l i s a t i o n c o u p l é e}

d e 1 a c h r c r n a t o g r a p h i e en phase gazeuse et de 1a spectrcmétrie d e m a s s e r - _{E t u d e b i b L i o g r a p h i q u e d e l a f r a g m e n t a t i o n d e s e s t e r s} m é t h y l i q u e s d f a c i d e s g r a s e n s p e c t r c m é t r i e d e m a s s e I I - _{R é s u l t a t s o b t e n u s a v e c n o s p r o d u i È s} 1 o l d e n t i f i c a t i o n _{d e s e s t e r s m é t h y l i q u e s d r a c i d e s g r a s} c o n t e n u s d a n s la cire 3 0 3 1 4 L 4 6 4 7 4 8 5 2 54 5 6

I V - C o n c l u s i o n s CHAPITRX V

E t u d e des produits de dégradation de la cire

I - _{D é g r a d a t i o n s oxydatives}

1 o O z o n o l y s e

2 0 A c t i o n drun periodate en présence de 3 o H y d r o x y l a t i o n p a r l r a c i d e p e r a c é t i q u e 40 Ccrmnentaires I 1 - _{H y d r o g é n a t i o n de la cire brute et de la} 1 o B u t recherché 2 0 R é d u c t i o n par LiâlH4 3 o H y d r o g é n o l y s e de dérivés iodés 4 0 Méthode universelle d e B e r t h e l o t I I I - _{R é d u c t l o n d e 1 r é 1 u a t B p a r H I} I V - _{S p e c t r c m é t r i e de masse} V - C o n c l u s i o n

CONCTUS IOI{S GENERALES

ANNEXES BIBLIOGRAPHTE Kl{nOO c i r e acide 6 2 8 5 8 6 8 7 8 8 89 89 90 9 1 9 3 9 5 9 5 9 7 t02 107

L e t e r e r r c i r e s r r srapplique dans un sens restreint à des esters d r a c i d e s g r a s e t d r a l c o o l s g r a s à l o n g u e c h a î n e ( c é r i d e s ) . D a n s u n s e n s p l u s l a r g e r o n p e u t I t a p p l i q u e r à u n e g r a n d e v a r i é t é d e s u b s È a n c e s o r g a -n i q u e s : c é r i d e s e s t é r i d e s , a c i d e s g r a s , a l c o o l s g r a s o u s È é r o I s l i b r e s , h y d r o c a r b u r e s , cét,ones à longue chaîne, etc, qui accompagnent les cérides e u c o u r s d e l e u r e x t r a c t i o n ( 1 , p . 5 8 1 ) .

G é n é r a l e r n e n t l e s a u È e u r s u t i l i s e n t l e t,erme rrbitumestt pour

d é s i g n e r l r e n s e m b l e d e s s u b s t a n c e s o b t e n u e s p a r e x t r a c t i o n d t u n s o l ( t o u r b e , l i g n i t e r s o l d e j a r d i n s , e t c ) à l t a i d e d r u n s o l v a n t n e u t r e b o u i l l a n È , s o u s l a p r e s s i o n n o r m a l e r p â r e x e m p l e 1 t é t h e r d e p é t r o l e o u e n c o r e u n m é l a n g e b e n z è n e - é t h a n o l . L e s b i t u m e s s o n t d i v i s é s a r b i t , r a i r e m e n t e n r r c i r e s t f , r r r é s i n e s r r e t r r a s p h a l È e s r r . C e t È e È e r m i n o l o g i e e s t e m p r u n t é e à l f i n d u s t r i e d e s c i r e s d e l i g n i t , e , ( l { o n t a n W a x ) , l e s c i r e s d e t o u r b e é t a n t u t i l i s é e s p a r f o i s e n r e m p l a c e r a e n t d e s c i r e s d e l i g n i t e d a n s l a f a b r i c a t i o n d e c i r a g e s , é r n u l s i o n s , e t c . L e s d é f i n i È i o n s d e c e s f r a c t i o n s , b a s é e s s u r d e s d i f f é r e n c e s

d e s o l u b i l i t é , v a r i e n t l a r g e m e n È suivant les auteurs.

C o m e e x e m p l e d o n n o n s l a d é f t n i t i o n u t i l i s é e p a r IKAI.I et coll. ( ù : A s p h a l t e s : f r a c t i o n d e s b i t u m e s i n s o l u b l e à c h a u d d a n s G i r e s 1 t é t h a n o l . f r a c t i o n s o l u b l e à c h a u d m a i s q u i p r é c i p i t e d a n s 1 t é t h a n o l r e f r o i d i . f r a c t i o n s o l u b l e à f r o i d . R é s i n e s

a s p h a l t e s . P o u r n o t r e p a r t n o u s a v o n s c h o i s i 1 ' é t h e r é t h y l i q u e c o r t r n e s o l v a n t d r e x t , r a c t i o n . B o n s o l v a n t d e s g r a i s s e s e t d e s c o m p o s é s à l o n g u e c h a î n e , i l e x È r a i t d a v a n t a g e d e s u b s t a n c e s q u e l e n - h e x a n e , q u e n o u s a v i o n s i n i t i a l e m e n t u t . i l i s é _{p o u r " d é g r a i s s e r t r l r a c i d e h u m i q u e . N o u s} c o n v i e n d r o n s d r u t i l i s e r l e t . e r m e I t c i r e s t r p o u r d é s i g n e r l r e n s e m b l e d e s s u b s t a n c e s s o l u b l e s d a n s 1 r é t h e r é t h v l i q u e b o u i l l a n t , e x t r a i t e s d t u n e t o u r b e v e n d u e d a n s l e c o r n n e r c e s o u s l t a p p e l l a t i o n ' r F l o r a t o r f r r ( t o u r b i è r e d t A l l e m a g n e d u N o r d , h o r i z o n A o ) . C e s c i r e s s e t r o u v e n t é g a l e m e n t d a n s l t a c i d e h u m i q u e ( H H n ) p r o v e n a n t d e c e t t e t o u r b e . C e l u i - c i f a i s a n t l t o b j e t d r a u t r e s t r a v a u x d a n s n o È r e l a b o r a t , o i r é , n o u s e n d o n n o n s s i m p l e m e n t u n e d é f i n i t i o n s u c c i n c t e : l r a c i d e h u m i q u e p e u t ê t r e d é f i n i c o r u n e u n e s u b s È a n c e o r g a n i q u e d e s s o l s ( e n p a r t i c u l i e r d e t o u r b e s ) s o l u b l e d a n s d e s s o l u t i o n s a q u e u s e s d e b a s e s ( s o u d e , a r u n o n i a q u e ) ; a p r è s a c i d i f i c a t i o n p a r u n a c i d e f o r t , 1 e s a c i d e s h u m i q u e s p r é c i p i È e n È , l a i s s a n t e n s o l u t , i o n l e s ' r a c i d e s f u l v i q u e s t ' ( v o i r a n n e x e I ) . L e s t r a v a u x r é c e n t s d e n o t r e l a b o r a t o i r e c o n c e r n a n t _{H f t n ( 3 , 4, 5),} o n t m i s e n é v i d e n c e u n m o t i f é l é m e n t a i r e r é s u l t a n t d e l a c o n d e n s a t i o n d e g l u c i d e s e t d r a m i n o - a c i d e s . S i x s u c r e s ( a r a b i n o s e , r h a n n o s e , x y l o s e , g a l a c t . o s e , g l u c o s e , m e n n o s e ) e t a u m o i n s s i x a m i n o - a c i d e s ( v a l i n e , l e u -c i n e , g l y -c i n e , s é r i n e , a l a n i n e , a c i d e g l u t a n i q u e ) o n t é t é i d e n t i f i é s . L a c i r e f a i s a n t l r o b j e t d u p r é s e n t t r a v a i l p e u t ê t r e , s o i t a d s o r b é e p a r I t e n s e m b l e d e s m o t i f s b i o l o g i q u e s d é c r i t s c i - d e s s u s , s o i t 1 i é e à c e u x - c i p a r l i a i s o n c h i m i q u e , ( p a r e x e m p l e e s t e r ) c a r l a d é g r a d a t i o n d e l r a c i d e

C e t È e é t u d e a é t ê e n t r e p r i s e d a n s u n d o u b l e b u t : a ) I d e n t i f i c a t i o n d e l a f r a c t i o n c i r e u s e p r é s e n t e d a n s l e s c o l l o i d e s o r g a n i q u e s d u s o l : c e t t e f r a c t i o n e s t s u s c e p È i b l e d e f i x e r d e s c o m p o s é s l i p o s o l u b l e s t e l s q u e l e s p e s t , i c i d e s c h l o r é s o u o r g a n o p h o s -p h o r é s . b ) O t a u t r e p a r t l t o r i g i n e d e l r a c i d e h u m i q u e e s t e n c o r e m a l c o n n u e e t p l u s i e u r s h y p o t h è s e s à c e s u j e t f o n t l r o b j e t d e c o n t r o v e r s e s :

i l p o u r r a i t p r o v e n i r de la dégradaÈion de la lignine ou au contraire

s e r a i t s y n t h é t i s é a u x d é p e n s d e l a c e l l u l o s e p a r d i v e r s m i c r o o r g a n i s m e s . L e s c i r e s p o u r r a i e n t r é v é l e r u n e a c t i v i t é b a c È é r i e n n e o u f o n g i q u e g é n é -r a t -r i c e d t a c i d e h u m i q u e . A v a n È d r e x p o s e r n o s r é s u l t a t s , n o u s d o n n o n s u n a p e r ç u d e s r e c h e r -c h e s e n t r e p r i s e s à -c e j o u r s u r l e s -c i r e s o u l e s b i t u m e s e x t r a i t s d e È o u r b e g L a p l u p a r t d e c e s t r a v a u x c o n d u i s e n t à I t i d e n t i f i c a t i o n d e q u e l -q u e s s u b s t a n c e s p r é s e n t e s e n f a i b l e -q u a n t i t é o u d t u n e c l a s s e d e c o m p o s é s ( a c i d e s g r a s , p a r e x e m p l e ) . L t a n a l y s e s y s t é m a t i q u e d e s c i r e s a u s s i b i e n q u a l i t a t i v e q u e q u a n È i t a È i v e a r a r e m e n È été tentée. En particulier, l e s s u b s t a n c e s i n c o n n u e s , q u i c o n s t i È u e n È 1 a g r o s s e m a j o r i t é d e s c i r e s e x t r a i t , e s d e s d i v e r s e s t o u r b e s , n r o n t r e ç u q u e p e u d r a t t e n t i o n , c e r È a i n e m e n È e n r a i s o n d e l e u r r é s i s t a n c e à l f a n a l y s e p a r c h r o m a t o g r a p h i e e n p h a s e g É r z e u s e ê È r à n o t r e c o n n a i s s a n c e , a u c u n e t , e n t a t i v e n r a é t é e f f e c t u é e p o u r t e n t e r d r é l u c i d e r l e u r s t r u c t u r e à l t a i d e d e m é t h o d e s d r a n a l y s e c h i m i q u e ( o * y -d a È i o n , r é -d u c t i o n , d é g r a d a t i o n ) .

E T U D E B I B L I O G R A P H I Q U E P R E L I M I N A I R E

I - SUBSTA}ICES CIREUSES ÎROTIyEES DAT{S LES SOLS EÎ LES TOURBES

Les ouvrages de BREGER (6) et de EGLIIiIION et MURPHY (1) fonÈ le

p o i n t sur les connaissances acËue1les en géochimie.

L a p r é s e n c e d t h y d r o c a r b u r e s dans la matière fossile e s t q u a s i

u n i v e r s e l l e . O n t r o u v e p r i n c i p a l e m e n t des n-alcanes, des stérar΀s et

d e s hydrocarbures à structure isoprénique. Les hydrocarbures aromatiques, m o i n s r é p a n d u s , d é r i v e n t p e u t - ê t r e de stéro1s ou de Èerpénofdes. Les

h y d r o c a r b u r e s l n s a t u r é s ( p r i n c i p a l e m e n t d e s È e r p è n e s ) r très répandus dans

l e r è g n e vivanÈ, sont, t,rès rares dans la matière fossile (6, chap. L2 ; L , c h a p . 1 3 ) .

Les acides gras se trouvenÈ dans de nombreux séCiments, même Ërès a n c i e n s ( 5 o o m i l l i o n s d t a n n é e s ) . E n m a j o r i t é i 1 s t a g i t d t a c i d e s g r a s n o r -m a u x , -m a i s égale-menÈ dt acides -mono ou polysubstiÈués par des groupe-ments m é t h y l e s ( a c i d e s i s o , a n t é i s o o u à s È r u c t u r e i s o p r é n i q u e ) . L e s a c i d e s i n s a t u r é s , l e s d i a c i d e s g r a s e È 1 e s a l c o o l s g r a s s o n t a s s e z t a r e s ( 6 , chap. L2 ; !, chap. L4).

c H " - c H - ( c H " )

- c o o H

J _I Z î cHg A c i d e i s o

c% -

T

- (cnr)r -

T

- (cï2)3 -

T

- (cH2)3

-

T

- crr2

- cooH

GH3 CH3 Crb cH3

Acide à strucÈure isoprénique : acide phyÊanique

L e s t e r p é n o i d e s e t l e s s t é r o l d e s o n t é t é i s o l é s p r i n c i p a l e m e n g

à p a r t i r _{d e l i g n i È e s e t d e t o u r b e s ( 6 , c h a p . 1 2 3 L, chap. 16).}

L e s a u t e u r s o n t également trouvé des pentoses, des hexoses, des p o l y h o l o s i d e s , a i n s i q u e d e s a c i d e s a m i n é s , l i b r e s . o u c o m b i n é s , d a n s 1 e s

f o s s i l e s , _{l e s s é d i r n e n t s , l e s r o c h e s e t l e s s o l s ( 6 , c h a p . 1 0 e t 1 1 ,}

I , c h a p . 1 5 e t 1 8 ) .

Dès 1909, RYAIiI et DILLON (Z) étudient une cire conrrnerciale appelée

r l M o n t a n a l{axtr, probablement obtenue à partir de _{l o u r b e . P a r s a p o n i f i c a È i o n}

e t p r é c i p i È a È i o n , i l s p e n s e n È a v o i r o b t e n u d e l r a c i d e m o n È a n i q u e (C Z g H 5 6 0 2 ) .

T I T O I I ( t g l Z ) ( 8 ) étudie les biÈumes exrrairs drune rourbe de

s p h a i g n e p r o v e n a n t drURSS. Dans 1r insaponifiable, i l n o t e l a p r é s e n c e des

h y d r o c a r b u r e s e n c z s H l z e È c a 3 H u , e t d e l r a l c o o L c z t H s o o . P a r d i s È i l

-l a t i o n fractionnée sous vide de -la fraction s a p o n i f i a b l e d e s b i t u m e s s o u s

f o r m e s d r e s t e r s é t h y l i q u e s , i l p e n s e a v o i r i s o l é l e s a c i d e s e n G - H S O O Z

"t

c27 Hs4 oz'

RâKOI|SKI et EDELSTEIN (9) trouvent les acide" C26 H52 02, e27 HS4 02,

czg uso o, dans

( uRss)

.

En 1936, ROCINSK.âilA _{(tO) sfgnale la pr&ence des acide" C27 H54 02,} Cæ HSg O, et Cæ HSO O, dans les cires drtme tourbe russie.

RETLLY et wrtSoN (1!.) isolenË drrlræ clre de rourbe irlandaise (l{ona wax)r de lracide cérotique Kn _\r0r) et de lracide carbocérique

( c 2 7 H s 4

o

z ) .

Les méthodes de séparation (dtsttllEtlon fraetionnée,

recrisÈel-L i s a t i o n ) e È d t l d e n t i f i c a Ë i o n ( c o r n p o s l t l o n cenÈéelaale, iadice dr iode,

lndice drhydroxyle, lndiee dracidlÈé, polÉ de fuslon) (voir chap. Îf)

apparaissent aujourdrhui blen lnsufflsantes poqr lranalyse de uélanges atrsst

complexesr Qul semblent,r cotme on peut le æastaÈer, contenir esEeqtielleænt d e s a c i d e s g r a s l l n é a i r e s .

Cr'est ainsi çe REILLY et col1. (fea) Èéntent de décolorer la trMona llaxrr par trait,enent a{rec Gr€, dans ltacide acétique. rls isolent a l o r s d € I t a c l d e b é h é n l ç e ou docosanoique (czzr+rr or). cet acide est analysé, puts exaralné aux Rayons X pat GARLISLE et CRO}|FoûI (12b) : malgré

p l u s i e u r s dtsttllations f r a c t l o n n é e s , i 1 contlent encore de lraclde

eicosanolçe (G, _{ll4o 02) dans la proportlon d€ 2r5 à 10 pour 1oo dracide}

b&énlque, alnsl que des traces dtacide tétracosenolçe (CrO tt* Or).

Les spectres de diffractlon peÈ tes rayons X obtenus par

lrOLAROl,ltCH (13) Eontrent une simllitude entre les hydrocarbures aliphatiçee

saturés et les ctres de tourbes. Lraut,eur EtÈrlbue les variations du

psra-nètre a de lE naille éléoenÈaire mesurée à la présence posstble

dfhydro-carbures cycllq4es possédant une longue chetne latéra1e.

KACAIwICË et coll. (14) séparentr psr crlstallisatlon fractlonnée,

divers acides gras (a,rachidi.que, béhénlque, llgnocérlque, néllssique)e

b r u t , e crs Hro (P.F. = 23OoC).

I l s o b t i e n n e n t également, dans lrune de leur fraction c h r o m a È o

-g r a p h i q u e , u n composé possédant les mêmes propriétés que L" Ê - sitosÈérol

i d e n t i f i é _{p a r l e p o i n t de fusion de ltacét,ate et du benzoate et par son}

s p e c t r e i n f r a - r o u g e ( t 7 ) .

U n e a u t , r e f r a c t i o n p r é s e n t e quelques rêactions qualitatives p o s i

-t i v e s d e s s È é a r i n e s ( -t g ) .

THOMAS (t9) ctrronaÈographie des bitr:mes, présentant un maxi.mum

d r a b s o r p t i o n e n u l È r a - v i o l e t à 2 8 5 n n , sur une résine échangeuse dranions

e t é t u d i e l e s spectres infra-rouge des bitunes et des différentes f r a c t i o n s

o b È e n u e s . L e s s p e c È r e s i n d i q u e n t surtout une strucÈure aliphatique, b i e n q u e

l e s é l u a n t s l e s p l u s a c i d e s semblent libérer d e s e s t e r s a r o m a t i g u e s p o s

-s é d a n t p e u t - ê t i e d e s f o n c t i o n s p h é n o l s o u d r a u t r e s g r o u p e n e n t s i o n i s a b l e s .

KW.IAIOWSKI (æ) étudie le comport,ænt de bitr:mes sur colonne

d f a l u m l n e e t m e t e n é v i d e n c e d e s a c i d e s r i e b e s en oxygène (peut-être des a c i d e s h y d r o r y l é s ) e t d e s a c i d e s g r e s e n C , à ar.. A lraide de méthodes chromatographlques (colonne dralumine, couches minces, chromatographie en

p h a s e vapeur) et des méthodes comrentionnelles de caractérisation c h i n i q u e

(21), _{il montre que la composition des réslnes obtenues varie largenent}

s u i v a n t l a n é t h o d e d r e x t r a c t i o n d e s b i t u r n e s e t suivant le solvant utilisé

p o u r séparer les résines des bitumes, à partir dtune même tourbe. Les résines c o n t , i e n n e n t d e s h y d r o c a r b u r e s , d e s c o m p o s é s h y d r o x y l é s r p ê u d t a c i d e s e t d e nombreuses substances inconûuêso

SUNDGREN et RAIJHALA se sont inÈéressés à plusieurs reprises aux a c i d e s c o n t e n u s d a n s l e s c i r e s d e t o u r b e ( 2 2 , ? 3 , 2 4 r 2 5 ) . A l r a i d e d e l a chromatographie sur coloane draluqine et des néthodes chimiques

convenÈion-n e l l e s , R A I J H A L A s u p p o s e l a p r é s e n c e d r a c i d e s hydroxylés dans les cires (Z+1,

r e s p o n s a b l e s d e s r é a c t i o n s d e p o l y c o n d e n s a t i o n o b s e r v é e s l o r s q u e l r o n c h a u f f e

l e s c i r e s e t l e s résines (23). SUNDGREN e t R A U H A L A p e u v e n t meÈtre en

évi-d e n c e p a r c h r o m a t o g r a p h i e en phase gazeuse (CPV) évi-des aciévi-des grâs saturés

l i n é a i r e s d e C r U U

" r n ,

a v e c u n m a x i m u m p o u r l e s acides

" n C 2 4 e t Q 2 6 t

s a n s p a r : \ r e n i r à i s o l e r e t i d e n t i f i e r d r a c i d e s h y d r o x y l é s ( 2 5 ) .

I O R R I S O N e t B I C K ( 2 6 ) comparenÈ les cires exÈraites drune tourbe

e t d r u n s o l d e j a r d i n . L e s r é s u l t a Ë s o b È e n u s a p r è s f r a c t i o n n e m e n È s u r c o l o n n e d r a l u m i n e e t p a r C P V in d i q u e n t d a n s l a f r a c t i o n s a p o n i f i a b l e d e s c i r e s l a p r é s e n c e d ' a c i d e s g r a s n o r m a u x d e C f g à C : a ( 2 4 " L d e l a c i r e d e t o u r b e e È 3 O % d e l a c i r e d u s o l d e j a r d i n , a v e c u n m a x i m u m p o u r les acides en Cr4, C 2 6 , C z g , C 3 O ) . D a n s l r i n s a p o n i f i a b l e i l s i d e n t i f i e n t d e s a l c o o l s g r a s n o r m a u x d e G r U à a r . , d e s a l c a n e s n o n ranifiés d e C r U à a r ' a v e c d e s t r a c e s d r a l c a n e s d e C r U à a r . . D e l a r É m e m a n i è r e i l s i d e n t i f i e n t d e s

r n é t h y l c é t o n e s de Cn à Ca5 (Or5 % des cires de tourbe ) (27).

A p a r t i r d r u n e t o u r b e r é c e n t e d t l s r a e l , I K A I { e t c o l l . ( 2 )

s é p a r e n t , p a r C P V , s o u s f o r m e d r e s t e r s m é t h y l i q u e s , des acides gras normaux de G,

Z à CZO avec un maximum pour les acides _"r C16 et Cr, ; le

s p e c È r e d e m a s s e d u m é l a n g e d r e s t e r s p r é s e n t e u n p i c à * / " : 7 4 caract é r i s È i q u e d e s e s caract e r s m é caract h y l i q u e s d caract a c i d e s g r a s , a i n s i q u e l e s p i c s m o l é

-c u l a i r e s -c o r r e s p o n d a n t a u x d i f f é r e n t s e s t e r s .

IvAl{OvA et coll. (ZA) séparenÈ également par CPV des acides gras

normaux de CrO à aæ avec un maxinum pour les acides

"n C22, C24, C26 ,

( b , 2 6 , _{2 1 28r 37r 3S ) è o n f i r m e n t l a p r é p o n d é r a n c e des acides gras} à n o m b r e p a i r dtatomes de carbone.

Dtaut,re Partr par fract,ionnement chromatographique de f

insapo-n i f i a b l e d e s c i r e s e x t r a i t e s d e s m o u s s e s drune tourbière canadienne,

M S e t O ' N E I L L ( n , 3 0 ) i s o l e n t u n m é l a n g e d e p - s i r o s t é r o l e r d e

p - s i t o s t a n o l _{e t È r o i s È r i t e r p É r r o l d e s : CY-amyrine, t,araxérone et,}

t , a r a x é r o 1 .

A p a r t i r d t u n e t o u r b e é c o s s a i s e , Mc LEAlil et coll. ( 3 f ) obtiennent, un

m é l a n g e i n s é p a r a b l e d e p - s i t o s t é r o I e r d e p s i t o s È a n o l e t u n r r i t e r

-p é n o 1 d e , 1 É p i - f r i édé1 a n o 1 .

I K A l t l e t coll. ( 3 2 ) raettenÈ en évidence dans la tourbe dtlsraËI

c i t é e c i - d e s s u s ( 2 ) l e s c o m p o s é s s u i v a n t s : f r i é d é l i n e , é p i - f r i é d é l a n o 1 ,

p - s i t o s t é r o 1 e t p - s i t o s t a n o l m é l a n g é s .

D t a u t r e s c o m p o s é s o n t également éÈé signalés dans la tourbe : p é r y l è n e ( 3 3 , 3 4 ) , v i t a m i n e s B , e t B , . ( l S ; .

u-gIIgT_EIg-E_gE_gIlI€_p+Ig_!-Et_+glpls-_gly-rgg-Eg_EI-IytE-agES_

L e s c i r e s cont,enues dans les acides hr:miques et les acides

f u l v i q u e s n r o n t fait I t o b j e È que de peu dr6tudes. OGNER e t scHNITzER (36)

a p r è s extraction s u c c e s s i v e d e s a c i d e s fulviques à lfhexane, au benzène

e t à l r a c é È a t e d r é t h y l e , o n t i s o l é d e s h y d r o c a r b u r e s ( o r t 6 % d e s a c i d e s

f u l v i q u e s ) , d o n t u n t i e r s d e n - a l c a n e s e t d e u x È i e r s d r a l c a n e s c y c l i q u e s

o u r a r n i f i é s . L a l o n g u e u r d e c h a î n e des n-alcanes varie entre 14 et 36

etomes de carbone. Des rÉmes acides fulviques, SCTTNITZER et OGNER (37)

: - l - z \ / l - r H H r- l-l H H H Epi- Friédélanol

H O

_H CU- Amyrine

HO

p - Sitostérol

B

-Sitostanot

Taraxérone Friédéline _Pérylène

o b È e n u s p a r K t t A N et scHNrrzER (38), à partir dtacides humiques (alcanes O r 3 4 7", acides Or47 % de Hlun). Les substances qui ont pu être identifiées n e c o n s t i t u e n t d o n c q u t u n e f a i b l e p a r t i e d e l a c i r e t o t a l e e x t r a i t e d e 1 r acide hurnique.

s i g n a l o n s d e p l u s q u e L r a n a l y s e e t , d r u n e f a ç o n g ê n ê r a l e , 1 r é t u d e

d e s ' r a c i d e s fulviquesrr est partiqrlièrernent d é l i c a t e : e n e f f e t ceux-ci

n e c o n s t i t u e n t q u r u n e fraction i n f i m e d e s c o L l o l d e s organiques du sol,

p o s s é d a n t une fonction acide : leur extraction est basée sur leur

propri-é t propri-é d e n e p a s p r propri-é c i p i t e r e n m i l - i e u c h l o r h y d r i q u e , _{c o n È r a i r e r n e n t aux acides}

h u m i q u e s . Notre expérience nous a prouvé que le rendemenÈ en acides fulvi-q u e s e s t d f e n v i r o n f O - 3 g p a r L i t r e à p a r t i r d e s t o u r b e s .

III. THEORIES REIÂTIVES A LEUR ORIGTNE

L e s m i c r o o r g a n i s m e s ( c h a n p i g n o n s , a l g u e s , b a c t é r i e s ) 3ouent

certai-n e m e certai-n Ë u certai-n r ô L e i m p o r t a certai-n t dacertai-ns les processus de fossil-isatiocertai-n. O n a trouvé,

p a r exempLe, dans une tourbière d'URSS, une concentration de 7.108 bactéries

p a r g r E r r r n e _{d e t , o u r b e s è c h e à l a surface et de 25.106 jusqu'à 6 mètres de}

p r o f o n d e u r . Drautres travaux d&nontrent la présence de spores de champignons j u s q u t à 60 cm de profondeur (3 x 106 spores par gramne de tourbe en été,

e t ! 7 x 104 en hiver). L e s m é c a n i s m e s chimiques, probablement de nature

e n z l m a t i q u e , q u i p o u r r a i e n t avoir lieu sont, peu conrurs (1 chap.11) : les a c i d e s g r a s p r o v i e n n e n t p e u t , - ê t r e de restes végétaux ou sont synthétisés p a r d e s b a c È é r i e s .

D r a u t r e P a r t , o n s a i t g u e l e s c i r e s d e b a c t é r i e s o n t f a i t l t o b j e t d r i m p o r t a n t e s r e c h e r c h e s ( 3 9 ) . Bien que ces études se rapportent princi-p a l e m e n t à d e s e s princi-p è c e s princi-p a t h o g è n e s ( b a c i l l e d e 1 a t u b e r c u l o s e e n princi-p a r t i c u l i e r ) , e l l e s P € u v e n t é c l a i r e r l a c h i n i e m i c r o b i e n n e d u s o l . E l l e s o n t m i s e n

é v i d e n c e d e s a c i d e s m o n o o u p o l y u . é t h y l é s , des acides possédant une longue

c h a î n e l a t é r a l e , a i n s l q u e d e s a c i d e s hydroxylés. En voici ci-dessous

q u e l q u e s e x e m p l e s :

cHg - (cHr)7 - c,H - (ctrr), - cooH

cH3 GHg A c i d e È u b e r c u l o s t éarique

- (cH2)19

_{- c,H}

_{- Grrz}

_{- c,H}

_{- crz- cl - cH2 - cr - coou}

c"3

cH:

GHI CH: A c i d e C , .-mycocérosique_{5 Z} R - C H o H - C H - C O O H I ( c H 2 ) æ - c H : A c i d e s m y c o l i q u e s

GHg

- (cHr)17 - c,H

- cHz - cI - ." :

1

- cooH

GHg

ct3

_c"g

A c i d e G r r - R h t i é n o i q u e

E n r é s u m é l e s auteurs ont essentiellement trouvé : dfune façon g é n é r a l e dans les sols, des hydrocarbures acycliques, des acides de cru

à C o . , d e p e È i t e s g u a n t i È é s d r a c l d e s h y d r o x y l é s . L e s a l c o o l s s o n t , m o i n s_{J O '}

b i e n c o n n u s : i l y a p e u d e p o l y o l s c o u r a n t s t e l s q u e l e g l y c e r o l , d e p e t i t e s q u a n t i È é s d e c e r t a i n s s t é r o l s o u d t a l c o o l s t r i t e r p é n i q u e s .

D a n s l e s c i r e s d e t o u r b e s , l e p r o b l è m e r e s t e e n t i e r , p u i s q u e

l e s r e c h e r c h e s nront permis de caractériser q u e 10-25 % de la cire

t o t a l e : s i c e s s u b s t a n c e s o n t u n e o r i g i n e m i c r o b i e n n e o u f o n g i q u e , i 1 e s t p o s s i b l e q u e l f o n p u i s s e t r o u v e r d e s a c i d e s b i e n c a r a c t é r i s t i q u e s

CHAPÏTRE I1 E T U D E P H Y S I C O . C H I M T Q U E P R E L I M I N A I R E D E S C I R E S C O N l E N U E S D A N S L E S T O U R B E S E T L I A C I D E H U I { I Q U E N o u s é t u d i o n s p a r a l l è l e m e n t l e s c i r e s e x t r a i È e s d t u n e t o u r b e p r o -v e n a n t d t O l d e n b u r g ( R . F . A . ) e t d e l t a c i d e h u m i q u e p r é p a r é à p a r t i r d e c e t t e t o u r b e ( 3 ) p a r t r a i t e m ê n t æ u n o n i a c a l , s u i v i d t u n e a c i d i f i c a t i o n e t d r u n e é l e c t r o d i a l y s e p r o l o n g é e ( v o i r a n n e x e I ) . I - EXTRACTION . SOLUBILITE a ) L t e x t r a c È i o n d e s c i r e s à p a r t i r d e l a È o u r b e e s t e f f e c t u é e à

1 t é È h e r éthylique dans un extracteur de Kr:mawaga o u d e S o x h l e È , p e n d a n t

1 2 h e u r e s e n v i r o n p o u r 9 g d e t o u r b e t r F l o r a t o r f r r s è c h e . O n a r r ê t e l r e x t r a c -t i o n l o r s q u e l a p h a s e é -t h é r é e r e s -t e i n c o l o r e d a n s l e s i p h o n d e l r e x -t r a c -t e u r . A p r è s é v a p o r a t i o n du solvanÈ, on obÈient 2r3 à 2rg % de cire présentant une c o l o r a t i o n b r u n e q u i s r a c c e n t u e p a r c h a u f f a g e à p a r t i r d e 6 O o C . S o n p o l n t

d e f u s i o n , m a l d é f i n i , s e s i È u e v e r s 7 2 o C .

L e m ê m e r e n d e m e n t e n c i r e s est obtenu lorsque lton agiÈe préala-b l e m e n t l a Èourpréala-be avec HCI N pendant 24 heures, dans le préala-but drhydrolyser d r é v e n t u e l s s a v o n s .

b ) L t a c i d e h u m i q u e e x t r a i t d e l a t o u r b e ' r F l o r a t o r f f r , l i b è r e

e n v i r o n 7 % d e c i r e d a n s l e s m ê m e s conditions. D e s s u b s t a n c e s c i r e u s e s

a p p a r a i s s e n t d r a i l l e u r s à t o u s l e s s È a d e s d e l a p r é p a r a t i o n o u d e I a

P a r I r a c i d e p e r a c é t i q u e ( 3 ) r H l l r n li b è r e à n o u v e a u 7 % d e c i r e . U n e s i m p l e

e x t r a c t i o n n e s u f f i t d o n c p a s à l i b é r e r l a t o t a l i t é d e s c i r e s f i x é e s s u r

H H m . L r o x y d a t i o n p e r a c é t i . q u e de HI{n semble donc détruire les sites respon-s a b l e respon-s d e l a f i x a t i o n d e respon-s c i r e respon-s .

L e s l i a i s o n s u n i s s a n t H I l m et les cires sont probablement dues à des phé-n o m è phé-n e s d t a d s o r p t i o phé-n , m a i s d e v é r i t a b l e s l i a i s o phé-n s c h i m i q u e s phé-n e s o phé-n t p a s à e x c l u r e p a r exemple entre certains acides gras et certaines fonctions

a l c o o l d e s g l u c i d e s . K H A N e t SCHNITZER ( 3 8 ) supposent que leur acide

h u m i q u e e x t r a i È d r u n t c h e r n o z o m n o i r du Canada, possède une sÈructure du

t y p e t a r n i s m o 1 é c u l a i r e , c a p a b l e d e f i x e r d e s c o m p o s é s h y d r o p h o b e s . c ) S o l u b i l i t é : L e s m e i l l e u r s s o l v a n t , s d e n o s c i r e s s o n t l e c h l o r o f o r m e , l e b e n z è n e e È l a p y r i d i n e f r o i d s , 1 r é t . h e r é t h y l i q u e , I e s a l c o o l s é t h y l i q u e e t m é t h y l i q u e b o u i l l a n t s . L a s o l u b i t i t é n r e s t q u e p a r t i e l l e , m ê m e à c h a u d , d a n s l e s a l c a n e s l é g e r s , l e s u l f u r e d e c a r b o n e e t l e t é t r a -c h l o r u r e d e -c a r b o n e . IÏ . SAPONIFICATION L a s a p o n i f i c a t i o n d t e n v i r o n 1 g d e c i r e b r u t e e s t e f f e c È u é e d a n s 5 O m I d e soude éthanolique N/2, par chauffage sous reflux pendant 4 heures. L r h y d r o l y s a t , e s t e n s u i t e transféré dans une ampoule à décanter et dilué a v e c 5 O O m l d t e a u o u d e p r é f é r e n c e avec une solution de NaCl saturée. On

e x Ë r a i t l r i n s a p o n i f i a b l e a v e c È r o i s p o r È i o n s d e 1 O O m l d r é t h e r é t h y l i q u e ,

e n p r e n a n È s o i n d e l a i s s e r È o u t e é r m r l s i o n d a n s l r a n p o u l e . L e s p h a s e s

é t h é r é e s r é u n i e s s o n t l a v é e s t r o i s f o i s a ' r e c 2 0 r u l d e soude N/1O, puis

a v e c d e s p o r t i o n s d e 2 0 m l d t e a u d i s t i l l ê e , j u s q u t à n e u t r a l i t é d e s e a u x

o n o b t i e n t 2 0 à 2 3 % d t i n s a p o n i f i a b l e . L a p h a s e a q u e u s e , à l a q u e l l e o n a d j o i n t l e s d i f f é r e n t e s e a u x d e l a v a g e , e s t a c i d i f i é e p a r H C l c o n c e n t r é

e t e x t r a i t e p l u s i e u r s f o i s a v e c 1 O O m l d r é t h e r .

L t e x t r a i t é t h d i é f o u r n i È a i n s i 6 5 à 7 1 7. dtune phase contenant

proUâUle-m e n t l a t o t a l i t é d e s a c i d e s d e n o t r e c i r e , p h a s e q u e n o u s a p p e l l e r o n s

' ' @ ' ' , a u s s i b i e n p o u r 1 a c i r e e x t ' r a i t e d e l a t o u r b e q u e p o u r 1 a

c i r e e x t r a i t e d e l I H m . L e s p e r t e s v a r i e n t suivant les manipulations entre

0 e t 1 5 7 " . L a m a s s e m o l a i r e m o y e n n e ( v o i r c i - d e s s o u s ) d e l a c i r e a c i d e n t a c c u s e p a s d e d i m i n u t i o n n o t a b l e l o r s q u r o n u t i l i s e d e s t e m p s d t h y d r o l y s e p l u s l o n g s ( 1 2 h e u r e s o u 2 4 h e u r e s ) . I l e n e s t d e m â m e l o r s q u f o n e f f e c t u e 1 a s a p o n i f i c a t i o n à p l u s h a u t e t e m p é r a t u r e , c r e s t - à - d i r e e n u t i l i s a n t c o f l t r n e s o l v a n t l e g l y c o l é t h y l é n i q u e o u l e d i r n é t h y l - s u l f o x i d e . L a c o n s o n r n a t i o n d e s o u d e , d é È e r m i n é e s u i v a n t u n e m é t h o d e c l a s s i q u e d e m e s u r e d e s i n d i c e s d e s a p o n i f i c a È i o n ( 4 O , p . 1 8 1 ) e s t d e l r o r d r e d e I r 4 m l l l i - é q u i v a l e n t s ( m é q u i v ) p o u r 1 g d e c i r e . L e s d o s a g e s e f f e c È u é s e n p r é s e n c e d e p h é n o 1 - p h t a l é i n e o u p a r p o t e n t i o m é t r i e , s o n t p e u p r é c i s d u f a i t d e l a t r è s g r a n d e c o m p l e x i t é d u m é l a n g e d e c i r e s e t d e l e u r f o r t e c o l o r a t i o n b r u n e , d t a i l l e u r s p l u s a c c e n t u é e e n m i l i e u b a s i q u e .

rrr - 9+Eâ9IEEI

gEI-QgEt

_-gEIyI-agIg

1 o ) G o m p o s i È i o n

L e s r é s u l t a t s d e s a n a l y s e s d e d i v e r s é c h a n t i l l o n s s o n t d o n n é s d a n s

l e t a b l e a u I . L e s t e n e u r s e n o x y g è n e sont obtenues par différence. L e p o u r

-c e n t a g e d r a z o t e e s t d a n s È o u s l e s -c a s i n f é r i e u r à t %. Le taux de cendres

n i s o u f r e , r é s u 1 Ë a t s 1 o n s . n r e x c è d e p a s o , L 5 7 " . L e s é c a r È s o b s e r v é s e n t r e l e s d i f f é r e n t s t r a d u i s e n t u n c e r t a i n m a n q u e d t h o m o g é n é i t é d e s d i v e r s é c h a n t i l -: E c h a n t i l l o n : C % z H % : O % : ' C i r e b r u t e ' . _{7 6 , 9 4 . t f , S S . f t , S f :} ' C i r e b r u È e ' _{7 5 , 1 8 . t t r O l} ' _{1 3 , 1 5 :} . C i r e b r u t e * : 7 5 1 4 4 . f O r S A ; f : , e A : . M o y e n n e . 7 5 ,8 : 1 1 , 3 ' . ! 2 r 9 ' . C i r e a c i d e ' . 7 4 1 5 5 : 11106 ' . I 4 r 3 9 : . C i r e a c i d e ' . 7 5 r 2 O . tfrO+ ' . t 3 r 7 6 _: ' M o y e n n e _. 7 4 1 9 _{. t f r O S : 14rO5 :} ' I n s a p o n i f i a b l e ' . _{7 8 , 7 4 . t t r S O} ' _{9 , 7 6 :} ' I n s a p o n i f i a b l e ' . 7 9 , 6 9 ' . I t , 2 7 _{: 9 , O 4 .} ' M o y e n n e ' 7 9 1 2 ' , l ! r 4 _. g r + _: T A B L E A U _{I : C o m p o s i t i o n centésimale de la cire b r u t e} e t d e l a c i r e s a p o n i f i é e . ! o ) M a s s e m o l a i r e L e s m a s s e s m o l a i r e s m o y e n n e s e n n o m b r e ( t a b l e a u I I ) s o n t d é t e r -m i n é e s d a n s l e c h l o r o f o r -m e à 3 7 o C p a r t , o n o -m é t r i e , à I t a i d e d f u n p o n t d e m e s u r e T K N A U E R T I . P o u r o b t e n i r u n e p r é c i s i o n s u f f i s a n È e , 1 a c o n c e n t r a t i o n d e s é c h a n t i l l o n s d o i t ê t r e s u p é r i e u r e à 1 0 g / l i t r e . * A n a l y s e e f f e c t , u é e p a r l e service de microanalyse du C.N.R.S.

: C i r e b r u t e : C i r e a c i d e : I n s a p o n i f i a b l e :

i

t t t t

: 106O t 9 1 5 : 1 O 3 O

:

1o6s

: Moy. 1036+100 1 1 e s t d é t e r m i n é s e l o n l a e r B U S I û E L L _{( 4 O r P. 157) : f indice} l e s d o u b l e s l i a i s o n s é t h y l é n i q u e s . t e r m i n e r 1 r i n s a t , u r a t i o n d e s h u i l e s p o n d au poids driode, en grartrnes, ( v o i r annexe II).

méthode de HANUS, modifiée par IORRIS d r i o d e e x p r i m e I t a d d i È i o n d r i o d e s u r G e t i n d i c e , u t i l i s é s u r t o u t p o u r d é e t d e s g r a i s s e s a l i m e n t a i r e s , c o r r € s -f i x é p a r 1 O O g d e substance 634 643 6t5 7 2 7 695 800 ' 4 7 2 : 4 8 0 : ' 500 : lloy. 484 * 50 :

i_-___-.--_____i-y_::::l:-_i---_

--___

__-i

T A B L E A U I I : M a s s e m o l a i r e moyenne des cires.

P o u r v é r i f i e r l a v a l i d i t é d e s m e s u r e s , n o u s a v o n s d é t e r m i n é l a

m a s s e m o l a i r e d e l f a c i d e s È é a r i q u e . L a v a l e u r È r o u v é e e s t e n v i r o n 1 r 3 f o i s

t r o p f o r t e , _{t a n d i s q u e c e l l e o b t e n u e p o u r l e stéarate de méthyle est}

cor-r e c t e . C e c i s cor-r e x p l i q u e p a cor-r l e s a s s o c i a t i o n s p a cor-r l i a i s o n s h y d cor-r o g è n e d e s f o n c t i o n s C O O H . N é a r m o i n s , p o u r n o s é c h a n t i l l o n s , l e s d i f f é r e n c e s e n t r e l e s m a s s e s m o l a i r e s d e s p r o d u i È s m é t h y l é s e t n o n m é t h y l é s n r e x c è d e n t p a s l e s i n c e r t i t u d e s e x p é r i m e n t a l e s : p a r c o n s é q u e n È , il n r y a p a s à È e n i r c o m p t e d a n s n o t r e c a s d r a s s o c i a t i o n s i n t e r m o l é c u l a i r e s . 3 0 ) l n d i c e d t i o d e

L e s r é s u l t a t s d e p l u s i e u r s d o s a g e s d o n n e n t d e s i n d i c e s c o m p r i s e n t r e 4 3 r 1 e t 6 3 1 5 p o u r l a c i r e b r u È e , e n t r e 4 O 1 6 e t 7 3 1 6 p o u r l a c i r e a c i d e . L a d i s p e r s i o n d e c e s r é s u l È a t s m o n t r e u n e f o i s e n c o r e L a d i f f i c u l t é d r o b t e n i r d e s é c h a n t i l l o n s d e c o m p o s i t i o n i d e n t i q u e . D r a u t r e p e r t . , i l n r e s t p a s p o s s i b l e d e c o n n a î t r e , p o u r I t i n s t a n È , l r i n f l u e n c e d e r é a c t i o n s d e s u b s È i t u t i o n o u s e c o n d a i r e s d e l r i o d e _{a v e c l e s n o m b r e u x c o m p o s é s d e} I a c i r e . 4 0 ) I n d i c e d e r n é t h o x y l e L e d o s a g e d e s g r o u p e m e n t s - O - C H 3 ( é t h e r s e t e s È e r s m é t h y l i q u e s ) e s t e f f e c t u é à l r a i d e d e l a m é t h o d e d e Z E T S E L ( 4 O , p . 1 6 5 ) ( v o i r a n n e x e I I I ) . L t i n d i c e d e m é t h o x y l e , n u l a v a n t m é t h y l a t i o n ( v o i r _{a n n e x e I V ) , e s t} v o i s i n d e 2 r 2 m é q u i v d e g r o u p e m e n t m é t h o x y l e p o u r 1 g d e c i r e a c i d e . 5 o ) A c i d i t é 11 10 9 I 7

ml méthyhe dc so<Iun N/5O

o

F i g . 1 1 2 3 : Exemple de m é t h y l a t e d o s a g e p o È e n t . i o , m é t r i q u e d e d e s o d i u m N / 5 O . 9 1 0 l a c i r e a c i d e p a r l e

L e s d o s a g e s sonÈ effectués en milleu non aqueux, dans un mélange

benzène méthanol (4-t v/v) proposé par LUGOI{SI(A et Î'{AC}ITINGER (41). Une

p r i s e d r e s s a i d t e n v i r o n 0 r 1 g d i s s o u È e d a n s 1 o o m l d e c e m é l a n g e , e s t

t i t r é e p a r du méthylate de sodium N/50 préparé dans le même rnélange.

L e p o i n t d t é q u i v a l e n c e e s t d é t e r : m i n é p a r p o t e n t i o m é t r i e ( f i g . _{1 ) . L e s}

r é s u l t a t s d e p l u s i e u r s d o s a g e s d o n n e n t u n e a c i d i t é m o y e n n e d e 1 r o ! or1 m é q u i v / g et de 2rr + or 1 méquiv/g, pour la cire brute et la cire acide

r e spect ivemenÈ.

1 1 f a u t r e m a r q u e r q u e I t a c i d i t é t o t a l e d e s c i r e s c o n t e n u e s

dans 1OO g de Hllrn (t+ g maximum) nrexcède donc pas 14 x 2rO : 28 méquiv.

E l l e n t i n t e r v i e n È d a n s I a c a p a c i r é dtéchange de ltHrn (450 méquiv/1oo g

+ 3 0 ) q u e d a n s l a l i m i t e d e s i n c e r t i È u d e s e x p é r i m e n t a l e s .

6 o ) F o n c t i o n s h y d r o x y l e et carbonyle

P o u r I e d o s a g e des fonctions -OH, on utilise u n e m é t h o d e

d r a c é È y l a t i o n p a r l t a n h y d r i d e a c é t i q u e e n p r é s e n c e d e p y r i d i n e . ' L t e x c è s d t a n h y d r i d e , d é c o m p o s é p a r l t e a u , e s t t i È r é p a r I a . s o u d e a l c o o l i q u e ( 4 o , p . 1 7 4 ) . L a d é t e r m i n a t i o n d e s f o n c t i o n s C = O e s t b a s é e s u r l a r é a c t i o n d e l t h y d r o x y l a m i n e a v e c l e s c o m p o s é s c é È o n i q u e s ( 4 O , p . 1 7 g ) . ( V o i r a n n e x e s V e t V I ) . D t a p r è s c e s d o s a g e s , i l y a u r a i È m o i n s d r u n g r o u p e m e n t - O H

ou C = O pour 1OOO g de cire.

T o u t e s c e s d é t e r r o i n a t i o n s sont, souvent peu précises et peu r e p r o d u c t i b l e s , à c a u s e d e l a g r a n d e c o m p l e x i t é d u m é l a n g e d e c i r e s ,

c i r e s , s u r t o u t à f r o i d , d a n s l a p l u p a r t d e s r é a c t i f s . E l l e s s o n t s u r t o u t u t i l e s d a n s l e c a s d e c o m p o s é s c h i m i q u e s p u r s e t n e p r é s e n Ê e n È , d a n s n o t r e c a s , q u ' u n i n t é r ê t q u a l i t a t i f . IV - ETUDE DE LIINSAPONIFIABLE 1 o ) R é a c È i o n s q u a l i È a t i v e s d e s s t é r o l s L t i n s a p o n i f i a b l e _{s e p r é s e n t e s o u s f o r m e d r u n e p â t e 3 a u n e , f o n d a n t} v e r s 5 5 o C , m o i n s c o l o r é e q u e l a c i r e b r u t e o u a c i d e . 1 1 d o n n e q u e l q u e s r é a c t i o n s q u a l i t a t i v e s d e s s È é r o 1 s e t d e s a l c o o l s t r i t e r p é n i q u e s . D r a p r è s A S S E L I N E A U ( 3 9 ) , l e s l i p i d e s b a c t é r i e n s n e c o n t i e n n e n t , p a s d e s t é r o 1 s , c o n t r a i r e m e n È a u x l i p i d e s d t o r i g i n e f o n g i q u e . a) Réaction de SAIKOIùSKI D a n s u n t u b e à e s s a i s s e c o n a j o u t e 2 r n l d e H 2 S O 4 c o n c e n t r é à q u e l q u e s m g d t i n s a p o n i f i a b l e d i s s o u s d a n s 2 m l d e C H C 1 3 e t o n a g i t e . L a p h a s e s u l f u r i q u e s e c o l o r e e n r o u g e e t j a u n e o r a n g é . b) Réaction de LIEBERMANN-BURCHARD D a n s u n t u b e à e s s a i s s e c o n a j o u t e q u e l q u e s g o u È t e s d e H r S O O c o n c e n t r é à q u e l q u e s m g d r i n s a p o n i f i a b l e d i s s o u s d a n s 2 m I d e C H C 1 3 e È 2 m l d t a n h y d r i d e a c é t i q u e . I 1 a p p a r a i È u n e c o l o r a t i o n v i o l e t È e f u g a c e q u i v i r e a u b l e u , p u i s a u v e r t . C e t t e c o l o r a t , i o n e s t s t a b l e p e n d a n t q u e l q u e s h e u r e s à I t a b r i d e l a l u m i è r e .

c ) R é a c t i o n d e Z A K E n p r é s e n c e d e q u e l q u e s m l d e F e r C l U à t " / l i t r e d a n s H , S O O c o n c e n t r é e t d e q u e l q u e s m l d e C H 3 C O O H i n d i f f é r e n t à I ' a n h y d r i d e c h r o -m i q u e , l t i n s a p o n i f i a b l e d é v e l o p p e u n e c o l o r a t i o n r o u g e - b r u n . L e d o s a g e c o l o r i m é t r i q u e s u i v a n t 1 a m é t h o d e a u p e r c h l o r u r e d e f e r ( 4 2 ) n e p e u t ô t r e i n È e r p r é t é c o n v e n a b l e m e n t s a n s c o n n a î t r e 1 a n a t u r e e x e c t e d e s c o m p o s é s r e s p o n s a b l e s d e 1 a c o l o r a t i o n . 2 0 ) R e c h e r c h e d e ,polyols N o u s n o u s s o n t r n e s d e m a n d é s i l a s a p o n i f i c a t i o n o u 1 ' h y d r o l y s e a c i d e n a r H , S O O N d e l a c i r e b r u È e l i b é r a i t d e s g l u c i d e s o u d e s p o l y o l s ( g l y c é r o l _{p a r e x e m p l e ) . E n e f f e t H l l m e s t f o r m é d e g l u c i d e s} e t d r a m i n o -a c i d e s : n o t r e p h -a s e l i p i d i q u e p o u r r a i t d o n c c o n t e n i r d e s e s t e r s d e g l u c i d e s . A p r è s h y d r o l y s e a c i d e p a r H , S O O N o u H C I N ' l a p h a s e a q u e u s e e s t d é b a r r a s s é e d e s c i r e s p a r e x t r a c t i o n à 1 r é t h e r , p u i s c o n c e n t , r é e p o u r ê t r e é t u d i é e p a r c h r o m a È o g r a p h i e s u r p a p i e r . E n u t i l i s a n t c o n t r n e é l u a n t l e m é l a n g e p y r i d i n e - b e n z è n e - b u t a n o l - e a u - C H r @ O H ( 3 - 1 - 5 - 3 - 1 v / v ) e t c o r u n e r é v é l a È e u r l e c h l o r h y d r a t e d e p a r a - a n i s i d i n e d a n s I e m é t h a n o I , n o u s e v o n s p u m e t t r e e n é v i d e n c e u n s u c r e r é d u c t e u r ( g l u c o s e o u g a l a c t o s e ) . P a r m i c r o - d o s a g e b a s é s u r l t o x y d a t i o n d u g l u c o s e p a r l e f e r r i c y a n u r e d e p o t a s s i u m ( 4 3 ) , n o u s a v o n s p u d é t e r m i n e r q u e l a q u a n t i t é d t h e x o s e p r é s e n t n t e x c è d e p a s 5 m g p o u r 1 g d e c i r e b r u t e . D r a u t r e p a r t n o u s n t a v o n s p u d é c e l e r l a p r é s e n c e d e g l y c é r o l . L e s q u a n t i È é s d e g l u c i d e s d é t e r m i n é e s s o n t d o n c t r o p f a i b l e s p o u r p r o v e n i r d e l t h y d r o l y s e d e g l y c o l i p i d e s . 1 1 s r a g i t p r o b a b l e m e n t d e s u c r e s p r o v e n a n t d e H I I n q u i s o n t e n t r a î n é s a u c o u r s d e l t e x È r a c t i o n d e s c i r e s .

v - ETgtE-s-tE9T$9tggtI-a9E

1 o ) S p e c t r e s U . V . L e s p e c t r e u l t r a v i o l e t d e s c i r e s , e n r e g i s t r é s u r u n s p e c t r o p h o -t o m è È r e -t -t B a u s c h e -t L o m b s p e c -t r o n i c 5 0 5 ' r , e s t p a u v r e e n d é p i t d e l e u r c o l o r a t i o n . E x a m i n é e d a n s l e n - h e x a n e , L a f r a c t i o n d e s c i r e s s o l u b l e s d a n s c e s o l v a n t p r é s e n t e u n e a b s o r p t i o n f a i b l e e n t r e 2 7 o e t 3 3 0 n r n ( f i g . 2 ) . 2 0 ) S p e c t r e s I . R . L e s é c h a n t i l l o n s s o n t e x a m i n é s s o u s f o r m e d e p a s t i l l e s d e K B r e t l e s s p e c t r e s s o n t e n r e g i s t . r é s s u r u n s p e c t r o g r a p h e r r r . R . 4 5 7 P e r k i n - E I m e r " . C e s p a s t i l l e s _{s o n t o b t e n u e s e n c o m p r i m a n t s o u s u n e p r e s} -s i o n d e 8 t o n n e -s . . * - 2 r r , m é l a n g e d e 3 m g d e c i r e , d e 3 O O m g d e K B r h o m o g é n é i s é p r é a l a b l e m e n t e n p r é s e n c e d e 1 m l d e C H C I " . a ) l , e s p e c t r e I R d e l a c i r e b r u t e ( f i g . 3 a ) p r é s e n t e l e s c a r a c t é r i s t . i q u e s s u i v a n t . e s : - B a n d e t r è s l a r g e à 3 4 2 0 c m - l : f o n c r i o n s O H l i é e s p a r l i a i s o n h y d r o g è n e ( 4 4 ) .

- Bandes inÈenses à 2960, 2920 et 2850 cm-1 drr"" aux groupemenrs

C H , e t C H r . - B a n d e à 1 7 4 0 " * - 1 p r o . r e n a n È d u c a r b o x y l e d ' e s t e r s a l i p h a t i q u e s . - B a n d e à t 7 1 0 " * - 1 : c a r b o n y l e d e f o n c t i o n C O O H . - Bande faible e t l a r g e v e r s 1 6 4 0 c m - 1 p r o v e n a n t s a n s d o u Ë e d e d o u b l e s l i a i s o n s é t h y l é n i q u e s .

Ë É

2

_a

T

- tt+60 et 1375 crn-1 : bandes dues aux vibrations de déformation des groupemenÈs CH, et C-CH3.

- Bande large à t26O *-1 qr. nous attribuons aux liaisons G-O

et au mode de déforrnation des groupements 0H.

- 72O cra-1 : il sragit, drune bande carectéristique d r u n

e n c h a l n e m e n t ( C H r ) n a v e c n ) 4 . L e s p e c t r e I . R . d e l a c i r e a c i d e ( f i g . 3 b ) p r é s e n t e l e s É n e s c a r a c t é r i s t i q u e s , à l r e x c e p t i o n , b i e n e n t e n d u , d e l a b a n d e e s t e r à t 7 @ c m - l b ) L a r n é t h y l a t i o n p r é a l a b l e d e l a c i r e a c i d e conduit au dépla-c e m e n t d e l a b a n d e à 1 7 1 0 * r - 1 r " r " t 7 4 o e m - l ( t r a n s f o r m a t i o n d r u n c a r -b o x y l e e n e s t e r a l i p h a t i q u e ) e t à l t a p p a r i È i o n d e b a n d e s c a r a c t é r i s t i q u e s d r e s t e r s m é t h y l i q u e s à t 2 6 O , 1 2 0 O e t 1 1 7 0 c m - 1 . U n e a b s o r p t i o n p e r s i s t e - 1 à 3 4 æ c m - ' ( f i g . 3 c ) , i n d i q u a n t p e u t - ê t r e u n e n é t h y l a t i o n i n c o m p l è t e o u l a p r é s e n c e d e f , o n c t i o n s O H . c ) S p e c t r e I . R . d e s s e l s d e b a r l u m ( v o i r p r é p a r a t i o n a n n e x e V I I ) : n o u s l t a v o n s d é t e r n i n é a f l n d e v é r i f i e r I t e x i s t e n c e d e f o n c t , i o n s c a r b o x y

-l i q u e s . L e spectre obtenu (fig. 3 d ) m o n t r e l a d i s p a r i t , i o n p r e s q u e c o u p l è t e

d e l a b a n d e à 1 7 1 0 c n - 1 e È l r a p p a r i t i o n d t u n e b a n d e l a r g e à t58O cn-l

a È t r i b u é e à l r i o n R - O O O - .

Lrexarnen de ces spectr€s suggère que noÈre cire acide est cons-t i cons-t u é e p a r u n r n é l a n g e d r a c i d e s o r g a n i q u e s à l o n g u e c b a î n e r p e u r æ i f i é s , c e r t a i n s d t e n t r e e u x p o u v a n t ê t r e p o r È e u r s d r u n o u p l u s i e u r s g r o u p e æ n t s h y d r o x y l e s .

l,lorrbre dbnde cm-l

F i g . 3 : S p e c Ë r e s IR . a : c i r e b r u t e ; b : m é t h y l é e ; d : c i r e a c i d e , s e l d e B a l e :

c i r e a c i d e ; c : c i r e a c i d e i n s a p o n i f i a b l e .

d ) S p e c t r e I . R . d e f i n s a p o n i f i a b l e .

A p a r t l a q u a e i - a b s e n c e d t a b s o r p È i o n d a n s l a r é g i o n 17OO-175O c r n - l ,

l e s p e c t r e I . R . d e l t i n s a p o n i f i a b l e ( f i g . _{3 e ) , p r é s e n t e l a m ê m e a l l u r e q u e}

l e s s p e c t r e s p r é c é d e n t s . L e m é l a n g e d o i t ê t r e constitué principalement de c o m p o s é s à l o n g u e c h a î n e , m o n o o u p o l y h y d r o x y l é s . r l nrest pas possible a u v u de ce sPeetre' de metÈre en évidence dans le mélange la présence de s t é r o 1 s .

3 o ) R é s o n a n c e magnétique nucléaire (RMN)

L e s d é p l a c e m e n È s chimiques ô exprimés en ppm sonÈ mesurés par

r a p p o r t a u tétranéthylsilane p r i s cortrtre r é f é r e n c e . Les spectres RMN de

l a c i r e a c i d e o u d e l r i n s a p o n i f i a b l e ( f i g . _{4 a e t 4 b ) c o n f i r m e n t l a s t r u c}

-t u r e - ( C H

Z ) n - C H , ( p i c i n È e n s e à L r Z s p p n er massif à O,g5 ppm). Le

g r o u p e m e n t - c H 2 - c o o - est responsable du massif observé vers 213 ppm dans

l e s s p e c t r e s d e l a c i r e a c i d e ( f i g . 4 a ) , d u d o c o s a n o a t , e d e m é t h y l e

( f i g . 5 a ) _{e t d e I t a c i d e 1 2 - h y d r o x y s t é a r i q u e ( f i g . 5 b ) . L e m a s s i f à}

3 1 7 p p m ( f i g . _{4 a e t 4 b ) p e u t - ê t r e a t t r i b u é a u x a t o m e s d t h y d r o g è n e s d t u n}

c a r b o n e p o r t e u r d t u n e f o n c t i o n a l c o o l p r i m a i r e o u s e c o n d a i r e ( c f . fig.5b).

E n c o n c l u s i o n , l e s m é t h o d e s c l a s s i q u e s d r a n a l y s e , o u I r é t u d e

s p e c t r o g r a p h i q u e d e n o È r e cire, avant ou après saponification, n e n o u s

f o u r n i s s e n t q u e p e u d e r e n s e i g n e m e n t s : i l s t a g i t , p r o b a b l e m e n t d e

com-p o s é s à longue chaîne alicom-phatique, p e u ramifiée, c o m p o r t a n t des

a) SnrEl a rËlâ I o rF9| b) s-ff!â T----o pFral ? i g . 4 : S p e c t r e s R M N . a : c i r e a c i d e ; b : i n s a p o n i f i a b l e .

!) . b c d

clri.(cHrËcH2-

coo ct{3

| | | | I a 7 G 6 a 3 2 1 0 F ( r ) -b)

tc'

c}b-(ctft -ctl -(gt) - cltz - cooH

. b d b c d s b . I I | | | | r -l 7 C 5 a 3 Z r a F{|) -F i g . 5 : S p e c t r e s R M N . a : d o c o s a n o a t e d e m é t h y l e ; b : a c i d e 1 2 - h y d r o x y - s t é a r i q u e .

CHAPITRE IIl A N A L Y S E C H R O M A T O G R A P H T Q U E D E L A C I R E G R A S . A C I D E . I D E N T I F I C A l I O N D I A C I D E S L a f r a c È i o n s a p o n i f i a b l e d e s c i r e s , r e p r é s e n t a n t e n v i r o n l e s t r o i s - q u a r t s _{d e 1 a c i r e b r u t e , a r e t e n u p l u s p a r t i c u l i è r e m e n t n o È r e a t} t e n t i o n e È , d a n s l a s u i t e d u p r é s e n t e x p o s é , i l s e r a e x c l u s i v e m e n t q u e s -t i o n d e s c i r e s p r é s e n -t a n -t u n carac-tère acide après saponificaËion e-t

s é p a r a t i o n d e l t i n s a p o n i f t a b l e . _{N o u s d i r o n s q u e l q u e s m o t s s u r 1 a p r é s e n c e}

d t a l c o o l s g r a s d a n s l r i n s a p o n i f i a b l e _{e n f i n d u $ r d e c e c h a p i È r e .}

r - I9!ITIII9âTI9I-9:â9IPE9-gls-IâS-9839YâI993+IEI!-sr_try-!_gêzrytl_!gty)

1 o ) G é n é r a l i t é s .

L e s a c i d e s g r a s , i n i t i a l e m e n t c h r o m a t o g r a p h i é s sans transformation

c h i m i q u e p r é a l a b l e p a r JAIîES et MARTIN e n 1 9 5 2 ( 4 5 ) , sont généralemenr

é t u d i é s s o u s f o r . m e s d t e s t e r s m é t h y l i q u e s , a f i n d t o b t e n i r d e s p i c s p l u s

s y m é t r i q u e s e t d t a u g m e n È e r la v o l a t i l i t é d e s t e r m e s l e s p l u s l o u r d s . D e

très nombreux travaux, quron trouvera résumés par BURCHFIELD et STORRS (t6),

o n t é t é c o n s a c r é s à l a s é p a r a t i o n d e s e s t e r s r n é t h y l i q u e s d r a c i d e s g r a s

s a t u r é s o u i n s a t u r é s . B E R T H U I S ( 4 7 ) r pâr exemple, sépare les esters

rnéthy-l i q u e s d e s a c i d e s d e C , à a 3 O , e n u t i rnéthy-l i s a n t u n e p h a s e s t a t i o n n a i r e a p o

-l a i r e , L t A p i é z o n L . D a n s l e s c o n d i È i o n s u t i l i s é e s , l e t r i a c o n t a n o a t e d e

m é t h y l e est élué au bout drenviron 110 minutes. KHAN er I{ltrrHAM (48)

r i o n 4 o 7 . ) . I O R R I S S O N e t B I C K ( 2 6 ) u t i l i s e n r _{u n m é l a n g e d e s i l i c o n e S E _ 5 2} e È d e c a r b o w a x 20 M ( 2 % eE or2 "ï. respecËivement sur céli,te) à 25ooc pour l a séparation des esÈers rnéthyliques de cra à ca4. rKAlit er coll . (2) c h r o m a t o g r a p h i e n t les esters des acides de c,

z à czo sur une colonne

a p o l a i r e ( A p i ê z o n L , 1 0 7 " s u r c é l i t e ) e t s u r u n e colonne polaire (D E G s,

1 5 % chromosorb I4I.A.1I.). SCHIfftZER et OGNER ( 3 7 ) , à lraide drune colonne

c o n t e n a n t 2 r 5 % de silicone SE-30 sur chromosorb I^I HI{DS, rê,aLisent la s é p a r a t i o n d e s a c i d e s d e C r U à a g O

P o u r n o t r e p a r t , a p r è s a v o i r e s s a y é p l u s i e u r s p h a s e s station-n a i r e s ( S station-n - 3 0 , S E - 5 2 , A p i é z o station-n L , O V - 1 7 ) a v e c d i f f é r e station-n t s taux drirstation-nprégstation-na- drirnprégna-t i o n r n o u s a v o n s p o r drirnprégna-t é n o drirnprégna-t r e c h o i x s u r l a s i l i c o n e O V - 1 7 . Cedrirnprégna-tdrirnprégna-te phase

s t a t i o n n a i r e _{p e r m e t drobtenir de très bons chromaÈograutrnes, a u s s i b i e n}

p o u r l e s e s t e r s m é t h y l i q u e s d t a c i d e s g r a s q u e p o u r l e s acétates dralcools g r a s ou les n-alcanes à longue chaîne.

1 1 e s t p o s s i b l e , a v e c l e f a i b l e t a u x d r i m p r é g n a t i o n u t , i l i s é ( 2 r 5 % ) d r o b t e n i r e n m o i n s drune heure, en prograrrnat,ion de température, la sépara-t i o n d e s sépara-t , e r m e s d e C r O U a r . ( v o i r c i - d e s s o u s f i g . 1 0 ) . E n o p é r a È i o n

i s o È h e r m e , le ÈéÈratriacontanoate de méthyle peut être élué au bout d r e n v i r o n 2 5 m i n u t e s à 2 8 O o C (v o i r c i - d e s s o u s f i g . g ) .

2 0 ) A n a l y s e p a r GPV à température de colonne constanÈe

Après avoir méthylé la cire (voir annexe IV) nous avons chercher à i s o l e r e t à i d e n È i f i e r p a r C P V le s a c i d e s o r g a n i q u e s l e s p l u s simples,

a ) P r i n c i p e

P o u r u n e colonne donnée eÈ une tenpérature choisie, le logarithme

d e s È e m p s d e r é t , e n t i o n v r a i s t r , - t y r r e l a t i f s a u È e m p s d e rétention vrai

d t u n soluté choisi corlnrc référence, esÈ lié linéairement au nombre n d t a t o m e s d e c a r b o n e d a n s u n e m ê m e série homologue (esters méthyliques d t a c i d e s g r a s n o r m a u x , a c é t , a t e s d f a l c o o l s g r a s n o r m a u x l n - â l c a n e s , e t c . . . )

à p a r t i r d u t e r m e e n C r .

t : temps de rétention dtun composé choisi comae référence.

o t U : t e m p s m o r È d e l r e n s e m b l e i n j e c t e u r - c o l o n n e d é t e c t , e u r . m e t n : c o n s t a n t e s . o L e t e m p s m o r t e s t d é t e r m i n é p a r l r i n t e r v a l l e d e t e m p s séparant l r i n j e c È i o n e t l a s o r t i e d u p i c d e l r a i r . L e d é t e c t e u r à i o n i s a È i o n d e f l a n r m e n r é t a n t p a s s e n s i b l e à l r a i r , i l e s t n é c e s s a i r e d e d é t e r m i n e r t M P a r u n a r t i f i c e d e c a l c u l . N o u s a v o n s u t i l i s é l a m é t h o d e d e G O L D (4 9 ) . P o u r t r o i s e s t e r s r n é t h y l i q u e s d t a c i d e s g r a s n o r m a u x a y a n t 11, .2 et n3 a t o m e s d e c a r b o n e , e t d e s t e m p s d e r é t e n t i o n t , e t, et t3t on déduit d e l r e x p r e s s i o n ( 1 ) l e s r e l a t i o n s : t 3 - t l m = -

( 2 )

' ^ ^ t t - t " * , , n = m r o g E - j M o

tr, t temps de rétention du terme

d e c a r b o n e . . t 3 - t u ,-og -T- 1 - M , 2 - r t 1 o ( n 2 - n t ) / m ( 1 ) d e l a s é r i e a y a n t n a t o m e s E M = 1 _ 1o(n2 - nr) lm ( 3 )