APPORT DE LA CYTOGÉNÉTIQUE DANS LE DIAGNOSTIC DES HÉMOPATHIES MALIGNES MYÉLOÏDES (A PROPOS DE 473 CAS)

ميحرلا نامحرلا ﷲ مسب

ام ﻻإ انل ملع ﻻ كناحبس

ميكحلا ميلعلا تنأ كنإ انتملع

ةيﻵا :ةرقبلا ةروس

٣١

ميظعلا ﷲ قدص

UNIVERSITE MOHAMMED V

FACULTE DE MEDECINE ET DE PHARMACIE RABAT

DOYENS HONORAIRES :

1962 – 1969 : Professeur Abdelmalek FARAJ 1969 – 1974 : Professeur Abdellatif BERBICH 1974 – 1981 : Professeur Bachir LAZRAK 1981 – 1989 : Professeur Taieb CHKILI

1989 – 1997 : Professeur Mohamed Tahar ALAOUI 1997 – 2003 : Professeur Abdelmajid BELMAHI 2003 - 2013 : Professeur Najia HAJJAJ – HASSOUNI

ADMINISTRATION :

D

Professeur Mohamed ADNAOUI

Vice-Doyen chargé des Affaires Académiques et estudiantines

Professeur Brahim LEKEHAL

Vice-Doyen chargé de la Recherche et de la Coopération

Professeur Toufiq DAKKA

Vice-Doyen chargé des Affaires Spécifiques à la Pharmacie

Professeur Jamal TAOUFIK

Secrétaire Général

1

- ENSEIGNANTS-CHERCHEURS MEDECINS ET PHARMACIENS

PROFESSEURS :

Décembre 1984

Pr. MAAOUNI Abdelaziz Médecine Interne – Clinique Royale

Pr. MAAZOUZI Ahmed Wajdi Anesthésie -Réanimation Pr. SETTAF Abdellatif Pathologie Chirurgicale

Novembre et Décembre 1985

Pr. BENSAID Younes Pathologie Chirurgicale

Janvier, Février et Décembre 1987

Pr. LACHKAR Hassan Médecine Interne

Pr. YAHYAOUI Mohamed Neurologie

Décembre 1989

Pr. ADNAOUI Mohamed Médecine Interne –Doyen de la FMPR

Pr. OUAZZANI Taïbi Mohamed Réda Neurologie

Janvier et Novembre 1990

Pr. HACHIM Mohammed* Médecine-Interne

Pr. KHARBACH Aîcha Gynécologie -Obstétrique Pr. TAZI Saoud Anas Anesthésie Réanimation

Février Avril Juillet et Décembre 1991

Pr. BAYAHIA Rabéa Néphrologie

Pr. BELKOUCHI Abdelkader Chirurgie Générale Pr. BENCHEKROUN Belabbes Abdellatif Chirurgie Générale Pr. BENSOUDA Yahia Pharmacie galénique

Pr. BERRAHO Amina Ophtalmologie

Pr. BEZAD Rachid Gynécologie Obstétrique Méd. Chef Maternité des Orangers

Pr. CHERRAH Yahia Pharmacologie

Pr. CHOKAIRI Omar Histologie Embryologie

Pr. KHATTAB Mohamed Pédiatrie

Pr. SOULAYMANI Rachida Pharmacologie- Dir. du Centre National PV Rabat

Pr. TAOUFIK Jamal Chimie thérapeutique V.D à la pharmacie+Dir. du CEDOC +

Directeur du Médicament

Décembre 1992

Pr. AHALLAT Mohamed Chirurgie Générale Doyen de FMPT

Pr. BENSOUDA Adil Anesthésie Réanimation Pr. CHAHED OUAZZANI Laaziza Gastro-Entérologie Pr. CHRAIBI Chafiq Gynécologie Obstétrique Pr. EL OUAHABI Abdessamad Neurochirurgie

Pr. FELLAT Rokaya Cardiologie

Pr. GHAFIR Driss* Médecine Interne

Pr. JIDDANE Mohamed Anatomie

Pr. TAGHY Ahmed Chirurgie Générale

Pr. ZOUHDI Mimoun Microbiologie

Mars 1994

Pr. BENJAAFAR Noureddine Radiothérapie

Pr. BEN RAIS Nozha Biophysique

Pr. CAOUI Malika Biophysique

Pr. CHRAIBI Abdelmjid Endocrinologie et Maladies Métaboliques Doyen de la FMPA Pr. EL AMRANI Sabah Gynécologie Obstétrique

Pr. EL BARDOUNI Ahmed Traumato-Orthopédie Pr. EL HASSANI My Rachid Radiologie

Pr. ERROUGANI Abdelkader Chirurgie Générale – Directeur du CHIS-Rabat

Pr. ESSAKALI Malika Immunologie

Pr. ETTAYEBI Fouad Chirurgie Pédiatrique Pr. HASSAM Badredine Dermatologie

Pr. IFRINE Lahssan Chirurgie Générale

Pr. MAHFOUD Mustapha Traumatologie – Orthopédie Pr. RHRAB Brahim Gynécologie –Obstétrique

Pr. SENOUCI Karima Dermatologie

Mars 1994

Pr. ABBAR Mohamed* Urologie Directeur Hôpital My Ismail Meknès

Pr. ABDELHAK M’barek Chirurgie – Pédiatrique Pr. BENTAHILA Abdelali Pédiatrie

Pr. BENYAHIA Mohammed Ali Gynécologie – Obstétrique Pr. BERRADA Mohamed Saleh Traumatologie – Orthopédie Pr. CHERKAOUI Lalla Ouafae Ophtalmologie

Pr. LAKHDAR Amina Gynécologie Obstétrique

Pr. MOUANE Nezha Pédiatrie

Mars 1995

Pr. ABOUQUAL Redouane Réanimation Médicale Pr. AMRAOUI Mohamed Chirurgie Générale Pr. BAIDADA Abdelaziz Gynécologie Obstétrique Pr. BARGACH Samir Gynécologie Obstétrique Pr. DRISSI KAMILI Med Nordine* Anesthésie Réanimation Pr. EL MESNAOUI Abbes Chirurgie Générale Pr. ESSAKALI HOUSSYNI Leila Oto-Rhino-Laryngologie

Pr. HDA Abdelhamid* Cardiologie Inspecteur du Service de Santé des FAR

Pr. IBEN ATTYA ANDALOUSSI Ahmed Urologie Pr. OUAZZANI CHAHDI Bahia Ophtalmologie

Pr. SEFIANI Abdelaziz Génétique

Pr. ZEGGWAGH Amine Ali Réanimation Médicale

Décembre 1996

Pr. AMIL Touriya* Radiologie

Pr. BELKACEM Rachid Chirurgie Pédiatrie Pr. BOULANOUAR Abdelkrim Ophtalmologie Pr. EL ALAMI EL FARICHA EL Hassan Chirurgie Générale

Pr. GAOUZI Ahmed Pédiatrie Pr. MAHFOUDI M’barek* Radiologie

Pr. OUZEDDOUN Naima Néphrologie

Pr. ZBIR EL Mehdi* Cardiologie DirecteurHôp.Mil. d’Instruction Med V Rabat

Novembre 1997

Pr. ALAMI Mohamed Hassan Gynécologie-Obstétrique

Pr. BEN SLIMANE Lounis Urologie

Pr. BIROUK Nazha Neurologie

Pr. ERREIMI Naima Pédiatrie

Pr. FELLAT Nadia Cardiologie

Pr. KADDOURI Noureddine Chirurgie Pédiatrique

Pr. KOUTANI Abdellatif Urologie

Pr. LAHLOU Mohamed Khalid Chirurgie Générale

Pr. MAHRAOUI CHAFIQ Pédiatrie

Pr. TOUFIQ Jallal Psychiatrie Directeur Hôp.Ar-razi Salé

Pr. YOUSFI MALKI Mounia Gynécologie Obstétrique

Novembre 1998

Pr. BENOMAR ALI Neurologie Doyen de la FMP Abulcassis

Pr. BOUGTAB Abdesslam Chirurgie Générale Pr. ER RIHANI Hassan Oncologie Médicale

Pr. BENKIRANE Majid* Hématologie

Janvier 2000

Pr. ABID Ahmed* Pneumo-phtisiologie

Pr. AIT OUAMAR Hassan Pédiatrie

Pr. BENJELLOUN Dakhama Badr.Sououd Pédiatrie

Pr. BOURKADI Jamal-Eddine Pneumo-phtisiologie Directeur Hôp. My Youssef

Pr. CHARIF CHEFCHAOUNI Al Montacer Chirurgie Générale

Pr. ECHARRAB El Mahjoub Chirurgie Générale Pr. EL FTOUH Mustapha Pneumo-phtisiologie

Pr. EL MOSTARCHID Brahim* Neurochirurgie

Pr. MAHMOUDI Abdelkrim* Anesthésie-Réanimation Pr. TACHINANTE Rajae Anesthésie-Réanimation Pr. TAZI MEZALEK Zoubida Médecine Interne

Novembre 2000

Pr. AIDI Saadia Neurologie

Pr. AJANA Fatima Zohra Gastro-Entérologie

Pr. BENAMR Said Chirurgie Générale

Pr. CHERTI Mohammed Cardiologie

Pr. ECH-CHERIF EL KETTANI Selma Anesthésie-Réanimation

Pr. EL HASSANI Amine Pédiatrie - Directeur Hôp.Cheikh Zaid

Pr. EL KHADER Khalid Urologie

Pr. EL MAGHRAOUI Abdellah* Rhumatologie

Pr. GHARBI Mohamed El Hassan Endocrinologie et Maladies Métaboliques

Pr. MDAGHRI ALAOUI Asmae Pédiatrie

Pr. ROUIMI Abdelhadi* Neurologie

Décembre 2000

Pr.ZOHAIR ABDELLAH * ORL

Décembre 2001

Pr. BALKHI Hicham* Anesthésie-Réanimation Pr. BENABDELJLIL Maria Neurologie

Pr. BENAMAR Loubna Néphrologie

Pr. BENAMOR Jouda Pneumo-phtisiologie Pr. BENELBARHDADI Imane Gastro-Entérologie

Pr. BENNANI Rajae Cardiologie

Pr. BENOUACHANE Thami Pédiatrie

Pr. BEZZA Ahmed* Rhumatologie

Pr. BOUCHIKHI IDRISSI Med Larbi Anatomie Pr. BOUMDIN El Hassane* Radiologie

Pr. CHAT Latifa Radiologie

Pr. DAALI Mustapha* Chirurgie Générale Pr. DRISSI Sidi Mourad* Radiologie

Pr. EL HIJRI Ahmed Anesthésie-Réanimation Pr. EL MAAQILI Moulay Rachid Neuro-Chirurgie

Pr. EL MADHI Tarik Chirurgie-Pédiatrique Pr. EL OUNANI Mohamed Chirurgie Générale

Pr. ETTAIR Said Pédiatrie - Directeur Hôp. d’EnfantsRabat

Pr. GAZZAZ Miloudi* Neuro-Chirurgie Pr. HRORA Abdelmalek Chirurgie Générale

Pr. KABBAJ Saad Anesthésie-Réanimation

Pr. KABIRI EL Hassane* Chirurgie Thoracique Pr. LAMRANI Moulay Omar Traumatologie Orthopédie Pr. LEKEHAL Brahim Chirurgie Vasculaire Périphérique Pr. MAHASSIN Fattouma* Médecine Interne

Pr. MEDARHRI Jalil Chirurgie Générale Pr. MIKDAME Mohammed* Hématologie Clinique Pr. MOHSINE Raouf Chirurgie Générale

Pr. NOUINI Yassine Urologie - Directeur Hôpital Ibn Sina

Pr. SABBAH Farid Chirurgie Générale

Pr. SEFIANI Yasser Chirurgie Vasculaire Périphérique Pr. TAOUFIQ BENCHEKROUN Soumia Pédiatrie

Décembre 2002

Pr. AL BOUZIDI Abderrahmane* Anatomie Pathologique

Pr. AMEUR Ahmed * Urologie

Pr. AMRI Rachida Cardiologie

Pr. AOURARH Aziz* Gastro-Entérologie Pr. BAMOU Youssef * Biochimie-Chimie

Pr. BELMEJDOUB Ghizlene* Endocrinologie et Maladies Métaboliques

Pr. BENZEKRI Laila Dermatologie

Pr. BENZZOUBEIR Nadia Gastro-Entérologie Pr. BERNOUSSI Zakiya Anatomie Pathologique Pr. BICHRA Mohamed Zakariya* Psychiatrie

Pr. CHOHO Abdelkrim * Chirurgie Générale Pr. CHKIRATE Bouchra Pédiatrie

Pr. EL HAOURI Mohamed * Dermatologie

Pr. FILALI ADIB Abdelhai Gynécologie Obstétrique

Pr. HAJJI Zakia Ophtalmologie

Pr. IKEN Ali Urologie

Pr. JAAFAR Abdeloihab* Traumatologie Orthopédie

Pr. KRIOUILE Yamina Pédiatrie

Pr. MABROUK Hfid* Traumatologie Orthopédie Pr. MOUSSAOUI RAHALI Driss* Gynécologie Obstétrique Pr. OUJILAL Abdelilah Oto-Rhino-Laryngologie Pr. RACHID Khalid * Traumatologie Orthopédie Pr. RAISS Mohamed Chirurgie Générale

Pr. RGUIBI IDRISSI Sidi Mustapha* Pneumo-phtisiologie

Pr. RHOU Hakima Néphrologie

Pr. SIAH Samir * Anesthésie Réanimation

Pr. THIMOU Amal Pédiatrie

Pr. ZENTAR Aziz* Chirurgie Générale

Janvier 2004

Pr. ABDELLAH El Hassan Ophtalmologie

Pr. AMRANI Mariam Anatomie Pathologique Pr. BENBOUZID Mohammed Anas Oto-Rhino-Laryngologie Pr. BENKIRANE Ahmed* Gastro-Entérologie

Pr. BOULAADAS Malik Stomatologie et Chirurgie Maxillo-faciale

Pr. BOURAZZA Ahmed* Neurologie

Pr. CHAGAR Belkacem* Traumatologie Orthopédie Pr. CHERRADI Nadia Anatomie Pathologique

Pr. EL FENNI Jamal* Radiologie

Pr. EL HANCHI ZAKI Gynécologie Obstétrique Pr. EL KHORASSANI Mohamed Pédiatrie

Pr. EL YOUNASSI Badreddine* Cardiologie

Pr. HACHI Hafid Chirurgie Générale

Pr. JABOUIRIK Fatima Pédiatrie

Pr. KHARMAZ Mohamed Traumatologie Orthopédie Pr. MOUGHIL Said Chirurgie Cardio-Vasculaire Pr. OUBAAZ Abdelbarre * Ophtalmologie

Pr. TARIB Abdelilah* Pharmacie Clinique

Pr. TIJAMI Fouad Chirurgie Générale

Pr. ZARZUR Jamila Cardiologie

Janvier 2005

Pr. ABBASSI Abdellah Chirurgie Réparatrice et Plastique Pr. AL KANDRY Sif Eddine* Chirurgie Générale

Pr. ALLALI Fadoua Rhumatologie

Pr. AMAZOUZI Abdellah Ophtalmologie

Pr. AZIZ Noureddine* Radiologie

Pr. BAHIRI Rachid Rhumatologie Directeur Hôp. Al Ayachi Salé

Pr. BARKAT Amina Pédiatrie

Pr. BENYASS Aatif Cardiologie

Pr. EL HAMZAOUI Sakina * Microbiologie

Pr. HAJJI Leila Cardiologie(mise en disponibilité)

Pr. HESSISSEN Leila Pédiatrie

Pr. JIDAL Mohamed* Radiologie

Pr. LAAROUSSI Mohamed Chirurgie Cardio-vasculaire Pr. LYAGOUBI Mohammed Parasitologie

Pr. RAGALA Abdelhak Gynécologie Obstétrique

Pr. SBIHI Souad Histo-Embryologie Cytogénétique Pr. ZERAIDI Najia Gynécologie Obstétrique

AVRIL 2006

Pr. ACHEMLAL Lahsen* Rhumatologie

Pr. AKJOUJ Said* Radiologie

Pr. BELMEKKI Abdelkader* Hématologie

Pr. BENCHEIKH Razika O.R.L

Pr. BIYI Abdelhamid* Biophysique

Pr. BOUHAFS Mohamed El Amine Chirurgie - Pédiatrique

Pr. BOULAHYA Abdellatif* Chirurgie Cardio – Vasculaire. Pr. CHENGUETI ANSARI Anas Gynécologie Obstétrique

Pr. DOGHMI Nawal Cardiologie

Pr. FELLAT Ibtissam Cardiologie

Pr. FAROUDY Mamoun Anesthésie Réanimation Pr. HARMOUCHE Hicham Médecine Interne Pr. HANAFI Sidi Mohamed* Anesthésie Réanimation Pr. IDRISS LAHLOU Amine* Microbiologie

Pr. JROUNDI Laila Radiologie

Pr. KARMOUNI Tariq Urologie

Pr. KILI Amina Pédiatrie

Pr. KISRA Hassan Psychiatrie

Pr. KISRA Mounir Chirurgie – Pédiatrique Pr. LAATIRIS Abdelkader* Pharmacie Galénique Pr. LMIMOUNI Badreddine* Parasitologie

Pr. MANSOURI Hamid* Radiothérapie

Pr. OUANASS Abderrazzak Psychiatrie

Pr. SAFI Soumaya* Endocrinologie

Pr. SEKKAT Fatima Zahra Psychiatrie

Pr. SOUALHI Mouna Pneumo – Phtisiologie

Pr. TELLAL Saida* Biochimie

Pr. ZAHRAOUI Rachida Pneumo – Phtisiologie

Décembre 2006

Pr SAIR Khalid Chirurgie générale Dir. Hôp.Av.Marrakech

Octobre 2007

Pr. ABIDI Khalid Réanimation médicale Pr. ACHACHI Leila Pneumo phtisiologie Pr. ACHOUR Abdessamad* Chirurgie générale

Pr. AIT HOUSSA Mahdi * Chirurgie cardio vasculaire Pr. AMHAJJI Larbi * Traumatologie orthopédie

Pr. AOUFI Sarra Parasitologie

Pr. BAITE Abdelouahed * Anesthésie réanimation Directeur ERSSM

Pr. BENZIANE Hamid * Pharmacie clinique Pr. BOUTIMZINE Nourdine Ophtalmologie Pr. CHERKAOUI Naoual * Pharmacie galénique Pr. EHIRCHIOU Abdelkader * Chirurgie générale

Pr. EL BEKKALI Youssef * Chirurgie cardio-vasculaire Pr. EL ABSI Mohamed Chirurgie générale

Pr. EL MOUSSAOUI Rachid Anesthésie réanimation Pr. EL OMARI Fatima Psychiatrie

Pr. GHARIB Noureddine Chirurgie plastique et réparatrice Pr. HADADI Khalid * Radiothérapie

Pr. ICHOU Mohamed * Oncologie médicale

Pr. ISMAILI Nadia Dermatologie

Pr. KEBDANI Tayeb Radiothérapie

Pr. LALAOUI SALIM Jaafar * Anesthésie réanimation Pr. LOUZI Lhoussain * Microbiologie

Pr. MADANI Naoufel Réanimation médicale

Pr. MAHI Mohamed * Radiologie

Pr. MARC Karima Pneumo phtisiologie

Pr. MASRAR Azlarab Hématologie biologique

Pr. MRANI Saad * Virologie

Pr. OUZZIF Ez zohra * Biochimie-chimie Pr. RABHI Monsef * Médecine interne Pr. RADOUANE Bouchaib* Radiologie Pr. SEFFAR Myriame Microbiologie Pr. SEKHSOKH Yessine * Microbiologie

Pr. SIFAT Hassan * Radiothérapie

Pr. TABERKANET Mustafa * Chirurgie vasculaire périphérique Pr. TACHFOUTI Samira Ophtalmologie

Pr. TAJDINE Mohammed Tariq* Chirurgie générale Pr. TANANE Mansour * Traumatologie-orthopédie Pr. TLIGUI Houssain Parasitologie

Pr. TOUATI Zakia Cardiologie

Décembre 2008

Pr TAHIRI My El Hassan* Chirurgie Générale

Mars 2009

Pr. ABOUZAHIR Ali * Médecine interne

Pr. AGADR Aomar * Pédiatrie

Pr. AIT ALI Abdelmounaim * Chirurgie Générale Pr. AIT BENHADDOU El Hachmia Neurologie

Pr. AKHADDAR Ali * Neuro-chirurgie

Pr. ALLALI Nazik Radiologie

Pr. AMINE Bouchra Rhumatologie

Pr. ARKHA Yassir Neuro-chirurgie Directeur Hôp.des Spécialités

Pr. BELYAMANI Lahcen* Anesthésie Réanimation

Pr. BJIJOU Younes Anatomie

Pr. BOUI Mohammed * Dermatologie Pr. BOUNAIM Ahmed * Chirurgie Générale

Pr. BOUSSOUGA Mostapha * Traumatologie-orthopédie

Pr. CHTATA Hassan Toufik * Chirurgie Vasculaire Périphérique Pr. DOGHMI Kamal * Hématologie clinique

Pr. EL MALKI Hadj Omar Chirurgie Générale

Pr. EL OUENNASS Mostapha* Microbiologie

Pr. ENNIBI Khalid * Médecine interne Pr. FATHI Khalid Gynécologie obstétrique

Pr. HASSIKOU Hasna * Rhumatologie

Pr. KABBAJ Nawal Gastro-entérologie

Pr. KABIRI Meryem Pédiatrie

Pr. KARBOUBI Lamya Pédiatrie

Pr. LAMSAOURI Jamal * Chimie Thérapeutique Pr. MARMADE Lahcen Chirurgie Cardio-vasculaire

Pr. MESKINI Toufik Pédiatrie

Pr. MESSAOUDI Nezha * Hématologie biologique Pr. MSSROURI Rahal Chirurgie Générale

Pr. NASSAR Ittimade Radiologie

Pr. OUKERRAJ Latifa Cardiologie

Pr. RHORFI Ismail Abderrahmani * Pneumo-Phtisiologie

Octobre 2010

Pr. ALILOU Mustapha Anesthésie réanimation Pr. AMEZIANE Taoufiq* Médecine Interne Pr. BELAGUID Abdelaziz Physiologie Pr. CHADLI Mariama* Microbiologie

Pr. CHEMSI Mohamed* Médecine Aéronautique Pr. DAMI Abdellah* Biochimie- Chimie Pr. DARBI Abdellatif* Radiologie

Pr. DENDANE Mohammed Anouar Chirurgie Pédiatrique

Pr. EL HAFIDI Naima Pédiatrie

Pr. EL KHARRAS Abdennasser* Radiologie

Pr. EL MAZOUZ Samir Chirurgie Plastique et Réparatrice

Pr. EL SAYEGH Hachem Urologie

Pr. ERRABIH Ikram Gastro-Entérologie Pr. LAMALMI Najat Anatomie Pathologique Pr. MOSADIK Ahlam Anesthésie Réanimation Pr. MOUJAHID Mountassir* Chirurgie Générale

Pr. NAZIH Mouna* Hématologie

Pr. ZOUAIDIA Fouad Anatomie Pathologique

Decembre 2010

Pr.ZNATI Kaoutar Anatomie Pathologique

Mai 2012

Pr. ABOUELALAA Khalil * Anesthésie Réanimation Pr. BENCHEBBA Driss * Traumatologie-orthopédie Pr. DRISSI Mohamed * Anesthésie Réanimation Pr. EL ALAOUI MHAMDI Mouna Chirurgie Générale Pr. EL KHATTABI Abdessadek * Médecine Interne Pr. EL OUAZZANI Hanane * Pneumophtisiologie Pr. ER-RAJI Mounir Chirurgie Pédiatrique

Pr. JAHID Ahmed Anatomie Pathologique

Pr. MEHSSANI Jamal * Psychiatrie

Pr. RAISSOUNI Maha * Cardiologie

* Enseignants Militaires

Février 2013

Pr.AHID Samir Pharmacologie

Pr.AIT EL CADI Mina Toxicologie

Pr.AMRANI HANCHI Laila Gastro-Entérologie

Pr.AMOR Mourad Anesthésie Réanimation

Pr.AWAB Almahdi Anesthésie Réanimation

Pr.BELAYACHI Jihane Réanimation Médicale Pr.BELKHADIR Zakaria Houssain Anesthésie Réanimation Pr.BENCHEKROUN Laila Biochimie-Chimie

Pr.BENKIRANE Souad Hématologie

Pr.BENNANA Ahmed* Informatique Pharmaceutique Pr.BENSGHIR Mustapha * Anesthésie Réanimation Pr.BENYAHIA Mohammed * Néphrologie

Pr.BOUATIA Mustapha Chimie Analytique et Bromatologie Pr.BOUABID Ahmed Salim* Traumatologie orthopédie

Pr BOUTARBOUCH Mahjouba Anatomie

Pr.CHAIB Ali * Cardiologie

Pr.DENDANE Tarek Réanimation Médicale

Pr.DINI Nouzha * Pédiatrie

Pr.ECH-CHERIF EL KETTANI Mohamed Ali Anesthésie Réanimation

Pr.ECH-CHERIF EL KETTANI Najwa Radiologie Pr.EL FATEMI NIZARE Neuro-chirurgie Pr.EL GUERROUJ Hasnae Médecine Nucléaire Pr.EL HARTI Jaouad Chimie Thérapeutique Pr.EL JAOUDI Rachid * Toxicologie

Pr.EL KABABRI Maria Pédiatrie

Pr.EL KHANNOUSSI Basma Anatomie Pathologique

Pr.EL KHLOUFI Samir Anatomie

Pr.EL KORAICHI Alae Anesthésie Réanimation Pr.EN-NOUALI Hassane * Radiologie

Pr.ERRGUIG Laila Physiologie

Pr.FIKRI Meryem Radiologie

Pr.GHFIR Imade Médecine Nucléaire

Pr.IMANE Zineb Pédiatrie

Pr.IRAQI Hind Endocrinologie et maladies métaboliques

Pr.KABBAJ Hakima Microbiologie

Pr.LATIB Rachida Radiologie Pr.MAAMAR Mouna Fatima Zahra Médecine Interne

Pr.MEDDAH Bouchra Pharmacologie

Pr.MELHAOUI Adyl Neuro-chirurgie

Pr.MRABTI Hind Oncologie Médicale

Pr.NEJJARI Rachid Pharmacognosie

Pr.OUBEJJA Houda Chirugie Pédiatrique

Pr.OUKABLI Mohamed * Anatomie Pathologique

Pr.RAHALI Younes Pharmacie Galénique

Pr.RATBI Ilham Génétique

Pr.RAHMANI Mounia Neurologie

Pr.REDA Karim * Ophtalmologie

Pr.REGRAGUI Wafa Neurologie

Pr.RKAIN Hanan Physiologie

Pr.ROSTOM Samira Rhumatologie

Pr.ROUAS Lamiaa Anatomie Pathologique

Pr.ROUIBAA Fedoua * Gastro-Entérologie

Pr SALIHOUN Mouna Gastro-Entérologie

Pr.SAYAH Rochde Chirurgie Cardio-Vasculaire Pr.SEDDIK Hassan * Gastro-Entérologie

Pr.ZERHOUNI Hicham Chirurgie Pédiatrique

Pr.ZINE Ali* Traumatologie Orthopédie

AVRIL 2013

Pr.EL KHATIB MOHAMED KARIM * Stomatologie et Chirurgie Maxillo-faciale

MAI 2013

Pr.BOUSLIMAN Yassir Toxicologie

MARS 2014

Pr. ACHIR Abdellah Chirurgie Thoracique

Pr.BENCHAKROUN Mohammed * Traumatologie- Orthopédie Pr.BOUCHIKH Mohammed Chirurgie Thoracique

Pr. EL KABBAJ Driss * Néphrologie

Pr. EL MACHTANI IDRISSI Samira * Biochimie-Chimie

Pr. HARDIZI Houyam Histologie- Embryologie-Cytogénétique

Pr. HASSANI Amale * Pédiatrie

Pr. HERRAK Laila Pneumologie

Pr. JANANE Abdellah * Urologie

Pr. JEAIDI Anass * Hématologie Biologique

Pr. KOUACH Jaouad* Génycologie-Obstétrique

Pr. LEMNOUER Abdelhay* Microbiologie

Pr. MAKRAM Sanaa * Pharmacologie

Pr. OULAHYANE Rachid* Chirurgie Pédiatrique Pr. RHISSASSI Mohamed Jaafar CCV

Pr. SABRY Mohamed* Cardiologie

Pr. SEKKACH Youssef* Médecine Interne

Pr. TAZI MOUKHA Zakia Génécologie-Obstétrique

AVRIL 2014

PROFESSEURS AGREGES :

DECEMBRE 2014

Pr. ABILKASSEM Rachid* Pédiatrie

Pr. AIT BOUGHIMA Fadila Médecine Légale

Pr. BEKKALI Hicham * Anesthésie-Réanimation Pr. BENAZZOU Salma Chirurgie Maxillo-Faciale Pr. BOUABDELLAH Mounya Biochimie-Chimie

Pr. BOUCHRIK Mourad* Parasitologie

Pr. DERRAJI Soufiane* Pharmacie Clinique

Pr. DOBLALI Taoufik* Microbiologie

Pr. EL AYOUBI EL IDRISSI Ali Anatomie

Pr. EL GHADBANE Abdedaim Hatim* Anesthésie-Réanimation Pr. EL MARJANY Mohammed* Radiothérapie

Pr. FEJJAL Nawfal Chirurgie Réparatrice et Plastique

Pr. JAHIDI Mohamed* O.R.L

Pr. LAKHAL Zouhair* Cardiologie

Pr. OUDGHIRI NEZHA Anesthésie-Réanimation

Pr. RAMI Mohamed Chirurgie Pédiatrique

Pr. SABIR Maria Psychiatrie

Pr. SBAI IDRISSI Karim* Médecine préventive, santé publique et Hyg.

AOUT 2015

Pr. MEZIANE Meryem Dermatologie

Pr. TAHRI Latifa Rhumatologie

JANVIER 2016

Pr. BENKABBOU Amine Chirurgie Générale

Pr. EL ASRI Fouad* Ophtalmologie

Pr. ERRAMI Noureddine* O.R.L

Pr. NITASSI Sophia O.R.L

JUIN 2017

Pr. ABI Rachid* Microbiologie

Pr. ASFALOU Ilyasse* Cardiologie

Pr. BOUAYTI El Arbi* Médecine préventive, santé publique et Hyg.

Pr. BOUTAYEB Saber Oncologie Médicale

Pr. EL GHISSASSI Ibrahim Oncologie Médicale

Pr. OURAINI Saloua* O.R.L

Pr. RAZINE Rachid Médecine préventive, santé publique et Hyg.

Pr. ZRARA Abdelhamid* Immunologie

2

- ENSEIGNANTS-CHERCHEURS SCIENTIFIQUES

PROFESSEURS/Prs. HABILITES

Pr. ABOUDRAR Saadia Physiologie

Pr. ALAMI OUHABI Naima Biochimie-chimie

Pr. ALAOUI KATIM Pharmacologie

Pr. ALAOUI SLIMANI Lalla Naïma Histologie-Embryologie

Pr. ANSAR M’hammed Chimie Organique et Pharmacie Chimique Pr .BARKIYOU Malika Histologie-Embryologie

Pr. BOUHOUCHE Ahmed Génétique Humaine

Pr. BOUKLOUZE Abdelaziz Applications Pharmaceutiques Pr. CHAHED OUAZZANI Lalla Chadia Biochimie-chimie

Pr. DAKKA Taoufiq Physiologie

Pr. FAOUZI Moulay El Abbes Pharmacologie

Pr. IBRAHIMI Azeddine Biologie moléculaire/Biotechnologie

Pr. KHANFRI Jamal Eddine Biologie

Pr. OULAD BOUYAHYA IDRISSI Med Chimie Organique

Pr. REDHA Ahlam Chimie

Pr. TOUATI Driss Pharmacognosie

Pr. ZAHIDI Ahmed Pharmacologie

Mise à jour le 10/10/2018 Khaled Abdellah

Chef du Service des Ressources Humaines

Après avoir rendu grâce à ALLAH

Le tout Puissant, le Miséricordieux ; ainsi qu’à son

prophète

Mohamed, paix et salut sur lui.

Par la grâce et la bonté de Dieu qui a toujours guidé

nos pas et qui nous a donné la chance et la force

d’étudier et d’en arriver là.

A ma très chère mère

A la douceur incarnée, à la plus merveilleuse de toutes les mamans. A

la personne qui m'a tout donné sans compter, qui m'a comblé avec son

affection et son amour inconditionnel, qui m'a toujours épaulé et

soutenu, tu représentes pour moi le symbole de la bonté par excellence,

la source de tendresse et l’exemple du dévouement qui n’a pas cessé de

m’encourager et de me pousser à l'avant. Aucune dédicace ne saurait

être assez éloquente pour exprimer ce que tu mérites pour tous les

sacrifices que tu n’as cessé de me donner depuis ma naissance, durant

mon enfance et même à l’âge adulte.

Accepte ce travail comme le témoignage de ma reconnaissance, ma

gratitude et mon profond amour. Puisse ALLAH m’aider pour rendre

un peu soit-il de ce que tu m’as donné. Puisse ALLAH t’accorder

santé, bonheur et longue vie.

A mon très cher père

Le grand militant, qui a toujours été un exemple pour ses enfants, qui

m’a toujours poussé à me surpasser dans tout ce que j’entreprends, qui

a su m’inculquer le sens de la responsabilité, de l’optimisme et de la

confiance en soi face aux difficultés de la vie.

Je te serai cher père reconnaissante toute ma vie, pour tout le mal que

tu t’es donné pour moi à chaque étape de ma vie, pour ta patience et

ton amour. J’espère être la fille que tu as voulu que je sois, et je

m’efforcerais d’être digne de ce que tu aurais souhaité que je sois.

Ce titre de Docteur en Médecine je le porterai fièrement et je te le dédie

tout particulièrement. Que ALLAH te protège et t’accorde santé,

longue vie et bonheur.

A mes chers frères Mouad et Zakaria et ma sœur

chérie Nassiba

Pour m’avoir accompagné dans ce périple de la vie et d’avoir su

embellir mes jours. Je vous aime.

A mon cher mari Fayçal

Aucun mot ne saurait exprimer la profondeur de mes sentiments et

l’estime que j’ai pour toi. En témoignage de mon amour, de mon

respect, et de ma grande affection, Je te prie de trouver dans ce travail

l’expression de mon sincère attachement. Je te remercie pour ta

tendresse. Je prie Dieu le tout puissant de nous combler de bonheur,

d’amour et de prospérité.

A mon Neveu Majd

Tu nous as rejoint il y a deux ans mais tu occupes déjà une grande

place dans mon cœur. Je t’adore.

A mes amis

Je ne peux trouver les mots justes et sincères pour vous exprimer mon

affection et mes pensées, vous êtes pour moi des frères et sœurs et des

amis sur qui je peux compter.

A

Tous mes enseignants de l’école primaire, du collège et du lycée.

A

Tous ceux qui ont contribué de près ou de loin à la réalisation de ce

travail.

A notre maître et président de thèse

Madame la professeure TAZI MEZALEK

Zoubida

Professeur de Médecine Interne CHU Avicenne

de Rabat

Vous nous avez fait un grand honneur en acceptant aimablement la

présidence de mon jury de thèse. Votre culture, votre compétence

professionnelle incontestable ainsi que vos qualités humaines vous

valent l’admiration et le respect de tous. Que ce travail soit une

occasion de vous exprimer nos sentiments de gratitude, de respect et

d’admiration les plus sincères.

A Notre Maître et Rapporteur de thèse

Monsieur le professeur SEFIANI Abdelaziz

Professeur de Génétique Médicale

Vous m’avez fait l’honneur de me confier ce travail et de veiller à son

élaboration. Je vous suis très reconnaissante pour l’aide précieuse que

vous m’avez apporté tout au long de la réalisation de ce travail. Vous

m’avez toujours accueilli avec sympathie et modestie, votre

disponibilité malgré vos multiples charges professionnelles m’ont

profondément touché. Votre gentillesse extrême, votre compétence

pratique, vos qualités humaines et professionnelles, ainsi que votre

compréhension, m’inspire une grande admiration et un profond

respect. J’espère être digne de la confiance que vous avez placée en moi

en me guidant dans l’élaboration et la mise au point de ce travail.

Veuillez trouver dans ce travail, cher maître, le témoignage de ma

gratitude et l’expression de mes sentiments les plus respectueux

A Notre Maître et juge de thèse

Monsieur LE PROFESSEUR MIKDAME

Mohammed

Professeur d’Hématologie Clinique Hôpital

Militaire d'Instruction Mohamed V

Nous sommes très sensibles à l'honneur que vous nous accordez en

acceptant de juger notre thèse. Votre compétence et votre dynamisme

ont suscité en nous une grande admiration et sont pour vos élèves un

exemple à suivre. Veuillez agréer, Monsieur, l'expression de nos

respects les plus distingués.

A Notre Maître et juge de thèse

Madame La PROFESSEURE EL KABABRI

Maria

Professeur de Pédiatrie Hôpital d’Enfant Rabat

Vous nous faites l’honneur d’accepter de siéger parmi notre jury de

thèse. Honneur d’autant plus grand de voir ce travail jugé par un

professeur émérite. Vous nous avez reçus avec amabilité et modestie.

Aussi nous tenons particulièrement à vous exprimer notre

reconnaissance et nos plus sincères remerciements.

A Madame Yassamine Doubaj

Médecin généticien

Nous vous remercions de votre aide à l’élaboration de ce travail, votre

soutien tout au long de la période de notre étude était de grand apport.

Veuillez trouver ici l’expression de nos sincères remerciements.

Liste des abréviations

add Addition

SMP Les syndromes myéloprolifératifs

ABL1 Abelson

ADN Acide Désoxyribonucléique

p Bras court d’un chromosome

q Bras long d’un chromosome

BCR Breakpoint Cluster Region

CSH cellules souches hématopoïétiques

Ph Chromosome Philadelphie

X Chromosome X

Y Chromosome Y

CIVD Coagulation intravasculaire disséminée CBFB Core-Binding Factor Subunit Béta

der dérivé

FAB French-American-British

GB globules blancs

HB Hémoglobine

HMM Hémopathie maligne myéloïde FISH Hybridation in Situ en Fluoresence

INH Institut National d’Hygiène

inv Inversion

OMS l’Organisation Mondiale de la Santé

NGS Le séquençage de nouvelle génération

NPM Les néoplasies myéloprolifératives

LA Leucémie aiguë

LAL Leucémie aiguë lymphoïde

LAM Leucémie aiguë myéloïde

LLC leucémie lymphoïde chronique

LMMC leucémie myélo-monocytaire chronique

LMC Leucémie Myéloïde Chronique

mar Marqueur chromosomique

M/F Masculin/Féminin

MYH11 Myrosin Heavy chain 11

NFS numération formule sanguine

PB Phase blastique PC Phase chronique PA Phase d'accélération PLQ Plaquettes PV Polyglobulie primitive PML promyelocytic leukemia

RCyC Rémission cytogénétique complète RCyP Rémission cytogénétique partielle RARA retinoic acid receptor alpha

r ring

SMC splénomégalie myéloïde chronique

SMD Syndromes myélodysplasiques

TE Thrombocytémie essentielle

t Translocation

del délétion

Liste des figures

Figure 1: Nombre annuel des hémopathies malignes vues au DGM.

Figure 2: Motif de la consultation de génétique au DGM.

Figure 3: Age des patients adressés au DGM pour suspicion hémopathies malignes. Figure 4: Sexe des patients adressés au DGM pour suspicion d’hémopathies malignes. Figure 5: données de l'hémogramme des patients avec suspicion de LMC.

Figure 6: Anomalies de l'hémogramme des patients avec suspicion de SMD. Figure 7: Anomalies de l'hémogramme des patients avec suspicion de LAM.

Figure 8: La classification des chromosomes en fonction de la taille et de la position du centromère.

Figure 9: nomenclature chromosome 3

Figure 10: Localisation de la sonde LSI BCR/Abl double fusion double couleur au niveau chromosomique.

Figure 11: Localisation de la sonde LSI RUNX1/RUNX1T1 double fusion double couleur. Figure 12: Localisation de la sonde PML-RARA double fusion double couleur.

Figure 13: Localisation de la sonde LSI CBFB Break Apart. Figure 14: Données du caryotype dans 257 LMC.

Figure 15: Les patients LMC sans traitement au diagnostic. Figure 16: Les patients LMC sous traitement au diagnostic.

Figure 17: Caryogramme montrant un chromosome de Philadelphie résultant d’une translocation réciproque t (9;22)

Figure 18: Caryogrammes montrant des anomalies cytogénétiques additionnels au chromosome Ph chez des patients LMC au moment du diagnostic

Figure 19: Caryogrammes montrant un variant de Ph avec implication de 3 chromosome retrouvées chez un patient avec suspicion LMC au moment de diagnostic.

Figure 20: Données de FISH des patients LMC au diagnostic. Figure 21: Données de FISH des patients suivis pour LMC.

Figure 23: Image de FISH interphasique avec la sonde BCR,ABL.

Figure 24: Réponse cytogénétique au traitement des patients LMC.

Figure 25: Caryogrammes montrant des ACA au Ph retrouvées chez des patients suivi pour LMC.

Figure 26: Récapitulatif des résultats cytogénétiques et moléculaires dans les LMC (298 patients).

Figure 27: Caryogrammes montrant des anomalies retrouvées chez des patients avec suspicion de SMD.

Figure 28: Récapitulatif des résultats cytogénétiques dans les SMD (75 patients).

Figure 29: Caryogramme complexe montrant une hyperdyploidy a 50 chromosome avec des chromosomes 4, 6, 8, 12 et 16 surnuméraires et du matériel additionnel sur le chromosome 21 chez un patient adressé pour suspicion de LAM.

Figure 30: FISH interphasique avec la sonde CBFB break apart monteront une inversion du chromosome 16 chez un patient avec LAM.

Figure 31: FISH interphasique avec la sonde PML/RARA monteront une t(15,17) chez un patient avec LAM.

Figure 32: Schéma de l’hématopoïèse .

Figure 33: Représentation schématique des points de cassure entre Bcr et Abl conduisant aux différentes protéines de fusion. Break Cluster Region (BCR), Abelson (ABL).

Figure 34: Prise en charge cytogénétique de la LMC au diagnostic.

Figure 36: Récapitulatif des résultats cytogénétiques et de leurs valeurs pronostiques dans les SMD (75 patients).

Figure 37: Indications de la cytogénétique conventionnelle au suivi de la LMC. Figure 38: Indications de FISH au suivi de la LMC .

Liste des tableaux

Tableau 1: Résultats du myélogramme chez les patients adressés pour suspicion d’hémopathies malignes myéloïdes.

Tableau 2: Les anomalies surajoutées associées au Ph retrouvées chez les patients LMC au moment de diagnostic.

Tableau 3: Variants de Ph observés lors du diagnostic.

Tableau 4: Anomalies cytogénétique non associées au Ph retrouvées chez les patients avec suspicion de LMC au moment de diagnostic

Tableau 5: Anomalies cytogénétiques additionnelles chez les patients lors des contrôles. Tableau 6: Résultats du caryotype des patients adressés pour suspicion de SMD.

Tableau 7: Résultats du caryotype des patients adressés pour suspicion de LAM. Tableau 8: Comparaison d’âge des patients LMC .

Tableau 9: le sex-ratio des différentes séries rapportées.

Tableau 10: Comparatif des résultats cytogénétiques dans la LMC.

Tableau 11: Principales anomalies chromosomiques des SMD de novo (D’après Haase et al, 2008)

Tableau 12: anomalies cytogénétiques retrouvées chez les patients adressés pour suspicion de SMD.

Tableau 13: International scoring system(IPPS) dans les SMD. Tableau 14: Score pronostique IPSS révisé(IPSS-R) des SMD.

Tableau 15: Valeur pronostique des anomalies cytogénétiques dans les SMD Tableau 16: Groupe pronostique

Tableau 17: Classification cytogénétique du MRC

Tableau 18: Réponse cytogénétique au traitement chez les patients suivis pour LMC. Tableau 19: Réponse cytogénétique chez les patients LMC.

Tableau 20: Récapitulatif de la réponse cytogénétique.

Tableau 21: Comparaison de réponses optimales avec celles de l’étude IRIS et l'étude HMMV 2016.

sommaire

INTRODUCTION :... 1

I. PATIENTS : ... 4

1 DONNÉS ÉPIDÉMIOLOGIQUE : ... 5

1.1 Origine des prescriptions: ... 5

1.2 Les indications de l’étude cytogénétique : ... 7

1.3 Age des patients : ... 7

1.4 Sexe des patients : ... 8

2 DONNÉES BIOLOGIQUES :... 10

2.1 Les données de la numération formule sanguine :...10

2.1.1 La NFS dans les suspicions de LMC :... ... ...10

2.1.2 Les données de la NFS dans les suspicions de SMD : ... ... 11

2.1.3 Les données de la NFS dans les suspicions de LAM : ... ... 11

2.2 Les données du myélogramme : ...13

2.2.1 Les données du myélogramme dans les suspicions de LMC :... ...13

2.2.2 Les données du myélogramme dans les suspicions de SMD : ... ...13

2.2.3 Les données du myélogramme dans les suspicions de LAM : ... ...13

II. METHODES :... 15

A. Étude cytogénétique : caryotype hématologique...15

1 PRINCIPE DU CARYOTYPE : ... ... ... 15

2 MÉTHODES : TECHNIQUES DE BANDING CHROMOSOMIQUES ... 16

2.1 Les prélèvements : ... ... ... ... 16 2.2 La culture des cellules hématologiques : ... ... ... 16 2.3 Le blocage des cellules en métaphase : ... ... ... 16 2.4 L’éclatement des mitoses : ... ... ... ..16 2.5 La fixation des culots cellulaires :... ... ... 16 2.6 Étalements sur lame des culots cellulaires : ... ... ... 17 2.7 Dénaturation des chromosomes métaphasiques : ... ... ...17 2.8 Analyse au microscope et interprétation : ... ... ... 18 2.9 Nomenclature :... ... ... ... 19

B. Étude cytogénétique par H ybridation I n Situ à Fluorescence :...23 1 LE PRINCIPE :... ... ... ... 23

2 METHODES : TECHNIQUE D’HYBRIDATION DES SONDES ABBOTT PAR

CODENATURATION AVEC L’HYBRITE (LSI). ... ... ..28

2.1 Prétraitement des lames : ... ... ... ... 28 2.2 Préparation de mix de sonde : ... ... ... 28

III. RÉSULTATS : ... 30

1 ANOMALIES CYTOGÉNÉTIQUE DANS LES NPM :... ... 30

1.1 Leucémie Myéloïde Chronique (LMC) :...31

1.1.1 Les données du caryotype :... ... ... 31 1.1.2 Les données de la FISH :... ... ... 38 1.1.3 Suivi cytogénétique des patients LMC : ... ... ...38 1.1.4 La réponse cytogénétique au traitement : ... ... ....41

2 ANOMALIE CYTOGÉNÉTIQUE DANS LES SYNDROMES MYÉLODYSPLASIQUES : 45

3 ANOMALIES CYTOGÉNÉTIQUE DANS LA LEUCÉMIE AIGUË MYÉLOÏDE: ....49

IV. DISCUSSION :... 54

A. Rappel sur la physiologie et la leucémogenèse : ...54 B. Données É pidémiologiques : ...57 C. Apport de la cytogénétique dans le diagnostic des H MM :...59 D. Apport de la cytogénétique à l’évaluation pronostique des HMM : ...67 E. Apport de la cytogénétique dans le suivi des patients atteint de H MM : ...73

CONCLUSION : ... 79

RESUME : ... 80

1

Introduction :

En onco-hématologie, la cytogénétique occupe et depuis plus de la moitié d’un siècle ; une place primordiale dans le diagnostic des hémopathies malignes. Découvert en 1960 par Nowell et Hungerford, le chromosome de Philadelphie (Ph) constitue la première anomalie chromosomique spécifique à un cancer humain. Ce n’est qu’en 1973 que Rowley a conclu que ce petit chromosome 22 résultait en fait d’une translocation réciproque entre les chromosomes 9 et 22, et non d’une délétion. En effet et grâce à l'introduction des colorations chromosomiques différentielles en 1970 ; la cytogénétique a connu un nouvel essor. Chaque chromosome pouvait être identifié avec précision sur la base d'un schéma alternant des bandes fluorescentes et non fluorescentes (bandes Q) ou claires et sombres (bandes G, bandes R).

La découverte des bandes chromosomiques a considérablement amélioré les potentialités d'analyse et a permis la reconnaissance plus aisée des anomalies chromosomiques de structure (délétions, translocations, inversions), la localisation de points de cassures, la caractérisation des centromères et de la nature hétérochromatique des certains segments chromosomiques qui n'étaient pas évidentes auparavant. L'application de ces techniques aux hémopathies malignes a mis en évidence de nombreuses anomalies récurrentes, certaines d'entre elles s'avérant spécifiques à un type tumoral particulier, telle que la translocation récurrente t(8;21) dans les leucémies aiguës myéloïdes découverte par Rowley 1972.

Les années 1980 vont connaitre le développement d’une nouvelle technologie, l’Hybridation In Situ Fluorescente (FISH) découverte par l’équipe de David Ward. Il s’agit d’une technique combinant la cytogénétique et la biologie moléculaire qui se base sur l’association spécifique d’une molécule d’ADN simple brin marquée (sonde) avec sa séquence complémentaire (cible). La FISH permet ainsi de détecter un hybride entre une séquence ayant préalablement incorporé un marqueur et sa séquence chromosomique complémentaire, permettant l’observation de loci sur des métaphases ou des noyaux. Ainsi la cytogénétique devient moléculaire et offre de nombreux avantages pour la détection d'anomalies chromosomiques et de remaniements génétiques en métaphase et en interphase.

2

Le développement des méthodes d’hybridation in situ, par l’utilisation de plusieurs fluorochromes et de filtres microscopiques idoines ainsi que l’amélioration du système de numérisation des signaux fluorescents ont permis d’hybrider plusieurs sondes concomitantes, il est possible aujourd’hui d’étudier de façon simultanée plus de 20 loci sur des chromosomes.

Plus récemment, est apparue une technique permettant de réaliser une analyse sur puces à ADN (CGH-array) et la détection, sur l’ensemble du génome, de déséquilibres chromosomiques de très petites tailles et ceci sans avoir spécifiquement une clinique évocatrice. Il est ainsi possible d’effectuer une étude pangénomique à la recherche de pertes ou de gains de séquences d’ADN et caractériser des variations structurales submicroscopiques non décelées par les méthodologies habituelles avec une résolution de quelques milliers de bases (kb).

Grâce aux progrès de la génétique, le mécanisme physiopathologique des hémopathies est mieux élucidé et un grand nombre d’entre elles a pu être caractérisé sur le plan moléculaire.

L’accumulation de ces nouvelles données émanant des études cliniques et scientifiques a imposé la révision continue des critères définissant les classifications des hémopathies, depuis la première version établie au début des années 1970 sous l’égide de l’OMS. Désormais, les classifications se sont succédées pour aboutir à une classification internationale consensuelle publiée en 2000, et mise à jour en 2008 puis en 2016. Cette révision tient compte du tissu d’origine de la prolifération lymphoïde ou myéloïde puis des éléments cliniques et biologiques (cytologiques, histopathologiques, immunophénotypiques, cytogénétiques et moléculaires) pour définir chaque entité.

Les hémopathies malignes myéloïdes sont des néoplasies hématopoïétiques qui se développent à partir des cellules souches précurseurs touchant au moins l’une des trois lignées myéloïdes (granuleuse, érythrocytaire ou mégacaryocytaire). Elles se traduisent par l’augmentation de la prolifération, une résistance au phénomène de mort programmée et des anomalies de la différenciation pouvant aller jusqu’au blocage complet. On distingue quatre grandes catégories de proliférations myéloïdes : - les néoplasies myéloprolifératives (NMP) avec une prolifération d’une ou plusieurs lignées myéloïdes sans blocage de différenciation.

- les syndromes myélodysplasiques (SMD) caractérisés par une augmentation de la prolifération cellulaire avec une anomalies de différenciation et un avortement intramédullaire des cellules. - les entités intermédiaires dénommée « SMD/NMP »

3

- les leucémies aiguës myéloïdes (LAM) caractérisées par un blocage complet de la différenciation accompagné d’une augmentation de la prolifération cellulaire.

Notre travail est une étude rétrospective descriptive qui porte sur 473 dossiers de patients (379 cas de néoplasies myéloprolifératives, 75 cas de Syndrome Myélodysplasique et 19 cas de Leucémies Aigues Myéloïdes), suivis au Département de Génétique Médicale à l’Institut National d’Hygiène de Rabat (INH). Ces patients ont été adressés au laboratoire de la cytogénétique pour hémopathie maligne myéloïde soit au stade de diagnostic ou pour le suivi de la maladie résiduelle. Ce travail porte ainsi sur l’apport de la cytogénétique dans l’étude des hémopathies malignes myéloïdes à travers l’expérience du laboratoire d’onco-hématologie du département génétique médicale à l’INH de Rabat.

Le présent rapport comporte quatre parties. La première donne une vue globale sur les patients inclus dans le travail, leurs caractéristiques sociodémographiques et leurs résultats d’hémogramme et du myélogramme lorsqu’ils sont disponibles.

La seconde partie est consacrée à la présentation des différentes techniques d’examens cytogénétiques utilisées dans notre étude, notamment les techniques de la cytogénétique conventionnelle (caryotype) et de la cytogénétique moléculaire (FISH).

Dans la troisième partie, nous exposons les résultats de l’étude cytogénétique des différentes classes des hémopathies malignes myéloïdes.

Enfin, la quatrième partie, est consacrée à un rappel physiopathologique, et une discussion de la place de la cytogénétique dans la prise en charge des principales hémopathies malignes myéloïdes.

4

I. Patients :

Cette étude est de type rétrospectif descriptif menée au niveau du département de génétique médicale (DGM) à l’Institut National d’Hygiène de Rabat. Elle porte sur 473 cas de suspicion d’hémopathies malignes myéloïdes colligés durant la période du 15 Mai 2001 au 8 Mai 2018. Ces patients en provenance de différentes régions du Maroc, ont été adressés pour une étude cytogénétique par des hématologues ou des internistes exerçant dans des hôpitaux publics (CHU ou CHP) ou dans des établissements privés.

Le travail est basé sur l’étude et l’exploration des dossiers cliniques des patients vus au laboratoire d’onco-hématologie du DGM, pendant la période d’étude.

Les paramètres sur lesquels notre étude a porté sont :

 L’âge, le sexe, le secteur d’activité du médecin référent, le motif d’admission dans le service et la date de consultation de génétique au laboratoire d’onco-hématologie du département génétique médicale.

 Les résultats d’hémogramme et du myélogramme lorsqu’ils sont disponibles.

Ces données ont été directement recueillies à partir des dossiers des malades archivés et saisies dans une base de données Microsoft Excel 2016.

5

1 Donnés épidémiologique :

 Durant ces 17 ans, le laboratoire de génétique médicale a colligé 531 cas d’hémopathies

malignes.

 Le nombre des cas a connu une augmentation progressive au cours des années, passant

de 14 cas en 2001 pour atteindre 45 cas en 2017. (Figure 1)

1.1 Origine des prescriptions:

 Les patients proviennent du secteur public dans 65% et du secteur privé dans 35%.  Les patients provenant du secteur public sont suivis dans différents établissements de

santé :

 le CHU IBN SINA : 64%

 l’hôpital militaire Mohammed V : 15%

 l’hôpital d’enfant de Rabat : 6%

 le CHU Casablanca Ibn Rochd : 4%

 le CHU de FES : 3,5%

 Les patients provenant du secteur privé ont été adressés au DGM par :

 les médecins libéraux de Rabat : 95%  l'Hôpital de la Fondation Cheikh Zaid: 2%  les médecins libéraux de Fès : 2%

6

Figure 1: Nombre annuel des hémopathies malignes vues au DGM

Figure 2: Motif de la consultation de génétique au DGM.

14 20 37 35 53 25 23 38 21 33 9 18 17 17 38 39 45 3 1 1 5 9 13 21 16 12 15 26 15 18 ₁₅ 18 18 22 43 13 2001 2002 2003 2004 2005 2006 2007 2008 2009 2010 2011 2012 2013 2014 2015 2016 2017 2018 Diagnostic contrôle

H.M.myéloides H.Lymphoides Leucémie aigue autre 473

19 16 23

89,1%

3,6%

7

1.2 Les indications de l’étude cytogénétique :

Nous rapportons dans la figure 2 les indications pour lesquelles les patients ont été adressés au laboratoire d’onco-hématologie pour une étude cytogénétique. Sur les 531 dossiers explorés le principal motif de consultation était les hémopathies malignes myéloïdes avec un pourcentage supérieur à 89%. Ce qui explique que ce travail sera focalisé sur 473 dossiers qui comprennent :

 des néoplasies myéloprolifératives NMP avec 379 patients (80%) ;  des syndrome Myélodysplasique SMD avec 75 patients (16%) ;  des leucémies Aigues Myéloïdes LAM avec 19 patients (4%).

1.3 Age des patients :

 L’âge des patients atteints de LMC varie entre 1 et 86 ans, avec un âge médian de 45

ans. 161 patients sur 257 avaient plus de 41 ans, soit 63% des cas.

 L’âge des patients adressés pour suspicion de SMD se situe entre 5 et 89 ans, avec un

âge médian de 52 ans. 33 patients sur 72 avaient plus de 61 ans, soit 46 % des cas.

 L’âge des patients adressés pour suspicion de LAM au moment du diagnostic, est entre

8 et 78 ans, avec un âge médian de 39 ans. 8 patients sur 19 avaient entre 20 et 40 ans, soit 42 % des cas. (Figure 3)

8

1.4 Sexe des patients :

 Parmi les 257 patients adressés pour suspicion de LMC, 130 sont de sexe féminin, et

127 de sexe masculin, soit un sex-ratio de 0,97 en faveur du sexe féminin.

 Les patients adressés pour suspicion de SMD et de LAM se répartissent comme suit :

 Une prédominance des hommes avec un taux de 57% par rapport à un taux

féminin de 43%.

9

Figure 3: Age des patients adressés au DGM pour suspicion hémopathies malignes.

Figure 4: Sexe des patients adressés au DGM pour suspicion d’hémopathies malignes.

<de 20 ans de 21 a 40 de 41 a 60 > de 61 16 80 104 57 3 13 23 33 3 8 3 3 LMC SMD LAM LMC SMD LAM 127 43 11 130 32 8 H F

10

2 Données biologiques :

2.1 Les données de la numération formule sanguine :

2.1.1 La NFS dans les suspicions de LMC :

2.1.1.1 Lignée érythroblastique :

 Chez les 257 patients, le taux d’hémoglobine au diagnostic était disponible chez 171;  Pour la lignée érythroblastique, on a noté une anémie chez 122 patients (71%) sur 257

patients adressés pour suspicion de LMC au moment de diagnostic et chez 99 sur 122 patients (53%) lors du contrôle.

 La valeur moyenne de l’hémoglobine est de 9,8 g/dl avec des extrêmes allant de 4,8

g/dl a 16 g/dl. (Figure 5 ;C)

2.1.1.2 Lignée granulocytaire :

 Sur les 257 résultats de NFS, le taux des globules blancs au diagnostic est disponible

chez 240 cas. Dans notre série, l’hyperleucocytose est observée chez 210 patients (82%) adressés pour suspicion de LMC au moment du diagnostic et chez 45 patients (16%) lors du contrôle. (Figure 5 ;B)

2.1.1.3 Lignée mégacaryocytaire :

 La thrombocytose est fréquente dans notre série. Plus de 133 cas (52%) ont un taux

des plaquettes >450.000/mm3 au moment du diagnostic et chez 86 patients (31%) lors du contrôle. (Figure 5 ;A)

11

2.1.2 Les données de la NFS dans les suspicions de SMD :

2.1.2.1 La Lignée érythrocytaire :

 Pour la lignée érythroblastique, on a noté une anémie chez 52 patients, soit 72% des patients

adressés pour suspicion de SMD au moment du diagnostic.

 Chez nos patients, la valeur moyenne de HB est de 9g/dl. (Figure 6 ;C)

2.1.2.2 Lignée granulocytaire :

 Dans notre série, la leucopénie est observée chez 32 patients (44%). (Figure 6 ;B)

2.1.2.3 Lignée mégacaryocytaire :

 45 patients (63%) adressés pour suspicion de SMD présentent une thrombopénie. (Figure

6 ;A)

2.1.3 Les données de la NFS dans les suspicions de LAM :

2.1.3.1 La Lignée érythrocytaire :

 Pour la lignée érythroblastique, le résultat du Hb n’a été mentionné que chez 7 cas.  On a noté une anémie constante au diagnostic.

 Le taux d’hémoglobine se situait entre 5,5 et 10,8 g/dl avec un taux médian de 7,8 g/dl.

(Figure 7 ;C)

2.1.3.2 Lignée mégacaryocytaire :

 Pour la lignée mégacaryocytaire, 9 patients LAM (47%) présentaient une

hyperleucocytose. (Figure 7 ;B)

2.1.3.3 Lignée granulocytaire :

 12 patients (63%) adressées pour suspicion de LAM présentent une thrombopénie.

12

Figure 5: données de l'hémogramme des patients avec suspicion de LMC.

Figure 6: Anomalies de l'hémogramme des patients avec suspicion de SMD.

Figure 7: Anomalies de l'hémogramme des patients avec suspicion de LAM.

 A : Taux des plaquettes

 B : Taux des leucocytes

 C : Taux de l’Hb 3 46 122 86 209 21 1017 133 81 42 1 2 84 99 92 45 140 42 50 86 135 86 0 polyglobulie anémie hyperleucocytose leucopénie thrombocytose thrombopenie Diagnostic contrôle A B C 52 8 12 32 32 2 6 45 17 3 7 anémie normaleND leucopénienormale hyperleucocytoseND thrombopénienormale thrombocytoseND A B C 4 3 12 4 3 9 3 12 2 5 anémie HB:5,5-10 anémie HB>10 ND leucopénie normale hyperleucocytose ND thrombopénie normale ND C B A

13

2.2 Les données du myélogramme :

Dans la majorité des cas ; un prélèvement médullaire est fait le même jour pour la réalisation à la fois du myélogramme et du caryotype hématologique. De ce fait, les données du myélogramme sont rarement disponibles avant l’analyse cytogénétique.

2.2.1 Les données du myélogramme dans les suspicions de LMC :

 Chez 26 patients (soit 49%), le myélogramme était en faveur d’une LMC deux patients

était en phase accélérée et 3 patients en transformation aigue.

 Pour les autres cas, le myélogramme a montré une moelle riche chez la plupart des

patients. (Tableau 1)

2.2.2 Les données du myélogramme dans les suspicions de SMD :

 Le myélogramme a été réalisé chez 30 patients soit 41% des malades adressés pour

suspicion de SMD.

 73% ont été en faveur de SMD. (Tableau 1)

2.2.3 Les données du myélogramme dans les suspicions de LAM :

 Chez 8 patients, le myélogramme était en faveur de LAM soit 42% des patients adressés

14

Pathologies Résultats de myélogramme Nombre des cas

Suspicion de LMC 53 cas Aspect évoquant LMC 20 Moelle riche 12 Aspect NMP 4 LMC en phase accélérée 2

Aspect d'une LAM 2

Ponction blanche 2

Aspect atypique 2

LMC transformation aigue 3

LMC en rémission (sous traitement) 1

Moelle hyperplasique 1 Moelle désertique 1 Normale 1 Dysmyélopoïèse multilignée 1 Aspect en faveur LMMC 1 Suspicion de SMD 30 cas Aspect évoquant SMD 25 Aspect évoquant LMMC 1 Hypoplasie médullaire 1 LMC en phase chronique 1 Mégacaryocytes rares 1 Moelle inflammatoire 1 Suspicion de LAM 12 cas

LAM sans orientation 2

LAM2 4

LAM3 1

LAM4 1

ND 4

Tableau 1: Résultats du myélogramme chez les patients adressés pour suspicion d’hémopathies malignes myéloïdes.

15

II. METHODES :

La recherche des anomalies chromosomiques acquises dans les hémopathies malignes est un élément essentiel dans la prise en charge de ces maladies. Les anomalies peuvent être détectées en utilisant des techniques de la cytogénétique conventionnelle (caryotype) et de la cytogénétique moléculaire (FISH).

A. Étude cytogénétique : caryotype hématologique

1 Principe du caryotype :

Le caryotype permet l’obtention et la classification des chromosomes présents au stade de métaphase de la mitose. Il est par conséquent réalisé à partir de cellules nucléées capables de se diviser in vitro (culture cellulaire).

Différents types de prélèvements peuvent être analysés : la moelle osseuse, le sang, les liquides d’épanchement, les ganglions, voire les masses tumorales extra ganglionnaires. La nature des prélèvements varie selon le type de pathologie :

- La moelle osseuse est le prélèvement de choix dans les leucémies aiguës, les syndromes

myéloprolifératifs et les localisations médullaires exclusives de certaines pathologies lymphoprolifératives.

- Le sang périphérique est principalement utilisé dans les syndromes lymphoprolifératifs de type leucémie lymphoïde chronique (LLC), mais peut également être utiliser dans les leucémies aiguës avec blastose sanguine.

- Enfin, les prélèvements ganglionnaires représentent le tissu de choix dans les lymphomes malins.

La technique classique du caryotype consiste à bloquer les cellules en métaphase grâce à la colchicine (poison du fuseau mitotique) ; à réaliser un choc hypotonique pour faire gonfler et éclater les cellules et disperser le cytoplasme, puis à fixer et à étaler la préparation cellulaire sur une lame afin d’obtenir une dispersion chromosomique satisfaisante. Les méthodes de

16

dénaturation avant la coloration par le Giemsa permettent d’obtenir un marquage en bandes (GTG par dénaturation enzymatique, RHG par dénaturation thermique) c’est-à-dire une alternance, le long des chromosomes, de bandes transversales claires et sombres spécifique de chaque paire chromosomique.

2 Méthodes : Techniques de banding chromosomiques

2.1 Les prélèvements :

Le jour du rendez-vous pour la réalisation du caryotype, 1 à 2 ml de suc médullaire sont aspirés. Le prélèvement de la moelle est rapidement mis dans un tube hépariné, homogénéisé et acheminé aussitôt au laboratoire d’onco-hématologie du département de la génétique médicale à l’INH. Le prélèvement est accompagné d’une fiche de liaison remplie par le médecin traitant. A son arrivée au laboratoire, on procède à l’enregistrement de l’échantillon et l’établissement d’un dossier médical contenant tous les renseignements relatifs à la réalisation de ce test.

2.2 La culture des cellules hématologiques :

Les cellules prélevées, sont mises en culture, dans un milieu nutritif prêt à l’emploi (Marrow-Max), et incubées à 37°C pendant une durée variable selon le type d’hémopathie (17h ou 24h).

2.3 Le blocage des cellules en métaphase :

L'étape suivante consiste à bloquer les cellules en métaphase afin de pouvoir observer les chromosomes. Pour cela, on ajoute la colchicine (qui inhibe la formation du fuseau mitotique) et on remet les tubes dans l’incubateur à 37°C.

2.4 L’éclatement des mitoses :

Après centrifugation et élimination de surnageant, on procède au choc hypotonique qui provoque un gonflement et une lyse des membranes cytoplasmiques et nucléaires. Pour cela, on ajoute la solution hypotonique de chlorure de potassium (KCL) chauffée à 37°C et on remet les tubes dans l’incubateur à 37°C pendant 20 minutes.

17

2.5 La fixation des culots cellulaires :

Cette étape consiste en une fixation par la solution Carnoy (un mélange de méthanol et d'acide acétique). Cette acidification du milieu permet l’arrêt du choc cellulaire.

En général, on réalise deux fixations et on la laisse reposer pendant 30 min ou plus à température ambiante.

Si le culot est trouble, on peut ajouter un lavage jusqu'à l’obtention d’un aspect clair.

2.6 Étalements sur lame des culots cellulaires :

Sur une lame humide, on dépose sous vapeur 2 à 3 gouttes de la suspension sur la lame, puis on la dépose sur un papier sec. On réalise deux lames par patient ou plus en fonction de la culture et on apprécie au microscope inverse la qualité des lames (le nombre de mitoses, la qualité de l’éclatement cellulaire et la forme des chromosomes).

En cas d’échec de culture, la mise en culture est refaite le jour même. On peut garder le sang à +4º pendant 5j et on le jette après.

2.7 Dénaturation des chromosomes métaphasiques :

Les méthodes de marquages ou banding révèlent le long des chromosomes une alternance de bandes transversales, faiblement ou fortement colorées, dont la disposition topographique est spécifique de chaque paire chromosomique. Les bandes G (GTG) obtenues par dénaturation enzymatique et les bandes R (RHG) par dénaturation thermique ont chacune un contenu spécifique en ADN.

Dans notre travail, nous avons utilisé la technique de banding chromosomique classique obtenue après dénaturation par la solution tampon phosphate (bandes R : RHG). Les lames sont dénaturées à J0 de leur étalement dans un bain-marie préchauffé à une température de 87,4°C.

Le temps de dénaturation est très important et de lui va dépendre la qualité du banding chromosomique. Ce temps est variable : il dépend de l’âge des lames (plus les lames sont « vieilles », plus le temps de dénaturation diminue).

18

Enfin, on contre colore les lames au Giemsa à 2% , on les rince à l’eau courante et on les laisse sécher.

2.8 Analyse au microscope et interprétation :

Cette partie se fait grâce à un logiciel de capture et d'analyse d'image de type CytoVision. Les mitoses (au moins 20) sont capturées et enregistrées. Le classement des chromosomes est fait à la fois de façon automatique par le logiciel et corrigé par la personne responsable de la technique.

Chaque cellule compte 23 paires de chromosomes dont 22 chromosomes homologues ou autosomes et une paire de chromosomes sexuels appelés gonosomes.

La classification des chromosomes est fondée sur leurs caractères morphologiques, à savoir:

 La taille : par convention

 22 paires d'autosomes, notés de 1 à 22 en fonction de leur taille décroissante ;  1 paire de gonosomes, ou chromosomes sexuels : XX chez le sujet féminin,

XY chez le sujet masculin.

 L’index centromérique (IC) ; C'est-à-dire le rapport entre la taille du bras court et la

taille totale du chromosome (p/p+q). Cet index permet de reconnaître trois familles de chromosomes :

 Les chromosomes métacentriques dont les deux bras ont une taille à peu près

équivalente (IC= 1/2) : centromère au milieu (chromosomes 1, 3, 16, 19 et 20).

 Les chromosomes sub-métacentriques qui ont un bras franchement plus petit

que le bras long (IC≈ 0) : centromère terminal (13, 14, 15, 21, 22).

 Les chromosomes acrocentriques dont le bras court est quasi inexistant

(0<IC< (1/2)) : centromère en position intermédiaire.

 En fonction de la taille et de la position du centromère, les chromosomes sont classés

19

 Le groupe A : Les grands métacentriques 1, 2, 3.  Le groupe B : Les grands submétacentriques 4, 5.

 Le groupe C : Les métacentriques et submétacentriques moyens 6, 7, 8, 9, 10,

11, 12 et X.

 Le groupe D : Les grands acrocentriques 13, 14 et 15.  Le groupe E : Les petits submétacentriques 16, 17 et 18.  Le groupe F : Les petits métacentriques 19, 20.

 Le groupe G : Les petits acrocentriques 21, 22 et Y.

 Les bandes chromosomiques, qui sont caractéristiques de chacune des paires. Le

nombre de bandes visibles est variable d'une mitose à l'autre et dépend du niveau de condensation du chromosome. Plus les chromosomes sont condensés, moins on peut observer de bandes et moins l'analyse permet de dépister des anomalies de petite taille.

2.9 Nomenclature :

Pour exploiter nos résultats, nous avons fait appel à la nomenclature cytogénétique internationale (International System for Human Cytogenomic Nomenclature, ISCN version 2016)1_.

 Il est indiqué successivement, le nombre total de chromosomes suivi d’une virgule, les

chromosomes sexuels, et l’anomalie chromosomique quand elle existe. - caryotype féminin normal : 46, XX

- caryotype masculin normal : 46, XY

 Chaque bras chromosomique est divisé en régions numérotées de 1 à 3. Chaque région est

divisée en bandes numérotées, et certaines bandes en sous bandes.

Donc pour la précision d’une zone sur un chromosome, on utilise le numéro du chromosome, le bras court ou le bras long, la région, la bande et la sous bande. (Figure 9)

20

Figure 8: La classification des chromosomes en fonction de la taille et de la position du centromère.

21

On appelle anomalie chromosomique tout remaniement du nombre ou de la structure des chromosomes.

 Anomalies numériques : établies à partir d’un caryotype normal diploïde (2n) à 46

chromosomes :

 Perte ou gain (monosomie ou trisomie)

Exemples :monosomie du 7 : 45,XY,-7

trisomie de 8 : 47,XY,+8

 Degré de ploïdie (diploide2n, hypodiploide, haploïde n, triploïde 3n).

 Anomalies structurales :

 Portant sur un chromosome (délétion, inversion, duplication, iso chromosome).

Exemples :

 Une délétion au niveau du bras long du chromosome 5 : 46,XX,del(5)(q13q33)  isochromosome 17 : 46,XY,i(17q)

 Portant sur deux ou plusieurs chromosomes (translocation simple ou complexe).

Exemples :

 Une translocation entre les chromosomes 8 et 21 :46,XX,t(8;21)(q22;q22)  Une translocation entre les chromosomes 9 et 22 : 46,XY,t(9;22)(q34;q11).

 Mosaïcisme :

 Un clone (ou lignée cellulaire) est défini comme une population de cellules dérivée d’un seul progéniteur. Il est courant d'inférer une origine clonale lorsqu'un certain nombre de cellules ont le même complément ou un complément similaire de chromosome anormal. Un clone n'est donc pas forcément complètement homogène car des