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Enzymologie: fiche TD n°2

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Academic year: 2021

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Fiche de TD Enzymologie L3 Génétique 2019/2020 Dr BELHADJ BENNACEUR Amina

Exercice n°1

Les effets d’un inhibiteur I sur la vitesse d’une réaction enzymatique ont été étudiés ; les résultats suivants ont été obtenus :

Exercice n°2

Calculer la constante d’inhibition pour un inhibiteur compétitif sachant que :

Km=6,7010-4 M. V max= 330µM/min Vi= 1,5µM /mn pour [I]=1.10-5M et[ S]=2.10-5 M

Exercice n°3

Une enzyme catalyse une réaction S P est dosée par les concentrations initiales suivantes :

(S) 10-4 M Vi M/Min.mG 50 166.60 20 111.10 10 71.42 7 55.55 5 41.66 Exercice n°4

L’activité phosphodiéstérique est inhibée par la caféine. Le tableau suivant donne les vitesses en nmoles de 3’,5’-AMPc transformée en 5’-AMP pendant les 5 premières min de la réaction (E= phosphodiéstérase)

1.Quel est le mode d’action de l’inhibiteur 2.Déterminer Vmax ; Km ainsi que la constante d’inhibition Ki

1. Déterminez graphiquement les paramètres de cette réaction enzymatique La même réaction a lieu en présence d’un composé A. On trouve K’m=25.10-4M et

V’max=12.5*10-6M /Min/mg

2. Quel type d’action exerce A sur la réaction enzymatique ? justifiez votre réponse

1.Déterminez la Km et la Vmax pour chacune des expériences

2.Quel est le type d’inhibition

3.Que devient la Km et V max lorsque la concentration en caféine est 0.1 nM . tracez cette droite ! 4.Calculez Ki S [mM] [I] (mM) 0 0.5 1.0 Vitesse (µM/mn) 0.05 0.33 0.20 0.14 0.10 0.50 0.33 0.25 0.20 0.67 0.50 0.40 0.40 0.80 0.67 0.57 0.50 0.83 0.71 0.63 (S) V 3’,5’ AMPc.10-9 M Expérience A Caféine=0nM Expérience B Caféine=0.05nM 0.15 2.65 1.30 0.25 3.90 1.90 0.35 4.80 2.40 0.50 5.90 2.90 1.00 8 4.00

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