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Hematological changes among Beninese motor-bike taxi drivers exposed to benzene by urban air pollution

IV- Symptômes fonctionnels

b) Si oui, quelle maladie? Et pendant quelle période avez-vous commencé par les recevoir ?

……….. c) Situez cette période par rapport à votre travail ; Avant Pendant

IV- Symptômes fonctionnels

 Intoxication aiguë

1- Vous arrive-t-il d’avoir une diminution de la pression artérielle ?

OUI NON

2- Vous arrive-t-il d’avoir des céphalées atroces ? OUI NON 3- Avez-vous de la difficulté à respirer (dyspnée) ? OUI NON 4- Vous arrive-t-il d’avoir des troubles visuels ? OUI NON

5- Avez-vous fait une fois le coma ? OUI NON

6- Vous arrive-t-il d’avoir des vertiges ? OUI NON

7- Vous arrive-t-il d’avoir des nausées ? OUI NON

 Intoxication chronique

1-Vous arrive-t- il d’avoir des troubles de coordination OUI NON des mouvements (ataxie) ?

2- a) Vous a-t-on déjà dit une fois que vous avez l’anémie ? OUI NON b) Si oui, pendant quelle période l’avez-vous eu ?

Avant Pendant votre travail de taxi-moto.

3- a) Vous a-t-on transfusé une fois du sang ? OUI NON b) Si oui, pendant quelle période ? Avant Pendant votre travail 4- Vous arrive-t- il d’avoir des vomissements ? OUI NON 5- Vous arrive-t-il d’avoir des douleurs d’estomac (gastralgies) ? OUI NON 6- Vous arrive-t-il d’avoir des troubles de mémoire ? OUI NON 7- Vous arrive-t-il d’être fatigué après un effort physique ? OUI NON

8- Vous arrive-t- il d’avoir des manques d’appétit OUI NON ou refus de se nourrir (anorexie) ?

9- Vous arrive-t-il d’avoir des saignements anormaux ? OUI NON 10- Vous arrive-t-il d’avoir des douleurs articulaires ? OUI NON 11- Vous arrive-t-il d’avoir des essoufflements ? OUI NON

AUTRE……….…….

FICHE D’ENQUETE RELATIVE AUX DONNEURS DE SANG

Questionnaire

I- Identification du donneur Numéro :…………. Date………

Nom : ……… Prénom : ……… Age : ……… Domicile : ……… Activité/Emploi : ………... Tél. : ……….

II- Renseignement sur l’exposition professionnelle 1- Quelles activités avez-vous exercé dans le passé (citez-en trois, de la plus récente à la plus ancienne) ? ………

2- Quel moyen de déplacement utilisez-vous pour vous rendre sur votre lieu de travail ? ………

3- Depuis combien d’année exercez-vous ce travail ? ………...

4- En moyenne combien d’heures par jour passez-vous dans la circulation ? ………

5- Quels sont les quartiers que vous sillonnez le plus (citez dans l’ordre décroissant trois

quartiers) ? ………..

6- a) Utilisez-vous un matériel de protection? OUI NON

b) Si oui, lequel ? Mouchoir cache-nez Autre c) Si oui, l’utilisez-vous ? Rarement Fréquemment III- Antécédents OUI NON 1-a) Etes-vous fumeur ?

b) Avez-vous fumé dans le passé ?

c) Etes-vous fumeur occasionnel ?

d) Avez-vous fumé ce matin ? 2-a) Consommez-vous du café ?

b) Avez-vous pris du café ce matin ? 3-a) Consommez-vous de l’alcool ?

4- De quoi est constituée en générale votre alimentation ?

……… ……… ……… 5- a) Recevez-vous des traitements particuliers pour une OUI NON maladie donnée ?

b) Si oui, quelle maladie? Et pendant quelle période avez-vous commencé par les recevoir ?

……….. c) Situez cette période par rapport à votre travail ; Avant Pendant

IV- Symptômes fonctionnels

 Intoxication aiguë

1- Vous arrive-t-il d’avoir une diminution de la pression artérielle ?

OUI NON

2- Vous arrive-t-il d’avoir des céphalées atroces ? OUI NON 3- Avez-vous de la difficulté à respirer (dyspnée) ? OUI NON 4- Vous arrive-t-il d’avoir des troubles visuels ? OUI NON

5- Avez-vous fait une fois le coma ? OUI NON

6- Vous arrive-t-il d’avoir des vertiges ? OUI NON

7- Vous arrive-t-il d’avoir des nausées ? OUI NON

 Intoxication chronique

1-Vous arrive-t- il d’avoir des troubles de coordination OUI NON des mouvements (ataxie) ?

2- a) Vous a-t-on déjà dit une fois que vous avez l’anémie ? OUI NON b) Si oui, pendant quelle période l’avez-vous eu ?

Avant Pendant votre travail de taxi-moto.

3- a) Vous a-t-on transfusé une fois du sang ? OUI NON b) Si oui, pendant quelle période ? Avant Pendant votre travail 4- Vous arrive-t- il d’avoir des vomissements ? OUI NON

5- Vous arrive-t-il d’avoir des douleurs d’estomac (gastralgies) ? OUI NON 6- Vous arrive-t-il d’avoir des troubles de mémoire ? OUI NON 7- Vous arrive-t-il d’être fatigué après un effort physique ? OUI NON 8- Vous arrive-t- il d’avoir des manques d’appétit OUI NON ou refus de se nourrir (anorexie) ?

9- Vous arrive-t-il d’avoir des saignements anormaux ? OUI NON 10- Vous arrive-t-il d’avoir des douleurs articulaires ? OUI NON 11- Vous arrive-t-il d’avoir des essoufflements ? OUI NON

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La pollution atmosphérique à Cotonou : Impacts sur des populations cibles

ABSTRACT

Since more than one decade, atmospheric pollution became alarming in Cotonou, the most important city in Benin Republic. Data on the impact of air pollution on public health in Benin Republic are scarce. This study has been initiated to examine the impact of air pollution on public health in Cotonou. The samples were constituted of taxi-motor bike drivers (42 to 144), street vendors (fuel)-17; population of the household along the main street such as Marina and St Michel-37 and those from the cityside-42) compared to the population of the village of Sohon-28 (located at 80 km far away from Cotonou) considered as control population. To achieve this goal, we have:

1. analyzed the gasoline sold in Benin by Gas chromatography coupled with the Mass Spectrometry (CG/SM);

2. evaluated the levels of major pollutants of the air such as benzen and its derivatives, the ultrafine particles (PUFs) and aromatic and polycyclic hydrocarbons associated (HAPs) by CG/SM and High Performance Liquid Chromatography (HPLC);

3. studied the hematologic profile of the target populations;

4. evaluated the level of biomarkers of exposure (acid S-Phenyl Mercaturic-APM, urinary benzen, 1-Hydroxy pyren-1-HOP, metabolite of the benzo (A) pyren) by selective CG/detector of mass as well as the antibodies anti metabolites of benzen-AAMB by ELISA;

5. quantified the damage in the DNA by the measurement of the levels of breaks of bits (CB), modifications of bases, as well as adducts of DNA by the test of comets and the method of post marking to the 32P;

6. and finally evaluated the capacity of the target populations to detoxify these pollutants by analyzing number of genes polymorphisms of the glutathion S-transferase (GST) and Nicotinamide Adenine Dinucleotide Phosphates (NADPH) quinone oxydoreductase 1 (NQO1) by PCR.

La pollution atmosphérique à Cotonou : Impacts sur des populations cibles

a) The gasoline sold in Benin contains high levels of benzene and the ratio is higher (from 3 to 6 fold) than the gasoline sold in France for instance, and a this gasoline doesn’t have the ethyl tertio butyl ether (ETBE) which allows better combustion of hydrocarbons;

b) High concentration of the main compounds has been quantified including benzene with mean concentration of 76 µg/m3 compare to the limit of 5µg/m3 recommended by WHO; of PUFs-166816 particles/Cm3 and HAPs-103 ng/m3) compare to low concentrations obtained from the village of Sohon (benzen-3,4µg/m3; PUFs-5276 particles/Cm3 and HAPs-1,55 ng/m3);

c) The examination of the hematologic profile showed a reduction of the number of blood cells (leucocytes, lymphocytes) of the exposed population compared to those from the village samples in which the hematologic profile was not affected. However, no significance difference was observed between the numbers of red blood cells in both exposed and control populations;

d) The levels of biomarkers of exposure (urinary benzen, APM, 1-HOP and AAMB) are in general higher in the blood of the target population in Cotonou compared to those from the control village (Sohon);

e) The levels of CB, modifications of bases, adducts of DNA are significantly higher in Cotonou compared to the village (Sohon);

f) Polymorphisms of genes involved in detoxification revealed that the deletion of gene GSTT1 implies less excretion of APM compared to the wild allele. A positive correlation was observed between the levels of APM and CB for the transferred allele of NQO1 on the one hand, and between the levels of APM and hot sites of the formamidopyrimidin glycosylase for the deleted allele of the gene GSTP1 on the other hand.

In conclusion, the ambient air in Cotonou is more polluted by benzen, HAPs and the particles arise mainly from the incomplete combustion of the gasoline depleted from ETBE. The results showed that these pollutants have negative impact on public health, so are harmful for the studied populations: reduction in the number of blood cells, fragmentation, breaks of bits, modification of bases and formation of the adducts of DNA. The data resulting from this study revealed that damages in the DNA is more important in urban (Cotonou) than rural (Sohon) populations. Therefore, actions have to be taken for reducing the air pollution in Benin especially in urban areas.

Résumé

Depuis plus d’une décennie, la pollution atmosphérique est devenue préoccupante à Cotonou, la plus importante ville du Bénin. Cette étude porte sur l'impact de la pollution de l’air sur la santé des populations exposées de Cotonou comparées aux habitants du village Sohon (population témoin). Pour atteindre cet objectif, nous avons :

1. analysé l’essence vendue au Bénin par CG/SM ;

2. évalué les niveaux de certains polluants majeurs de l’air ainsi que leurs biomarqueurs par HPLC, CG/SM;

3. quantifié les dommages dans l’ADN par les modifications de bases, la formation d’adduits d’ADN par le test des comètes et la méthode de post marquage au 32P ;

4. et enfin évalué la capacité des populations étudiées à détoxifier ces polluants par le polymorphisme de certains gènes par PCR.

Nos résultats montrent que :

a) L’essence vendue au Bénin contient trois à six fois plus de benzène que l’essence vendue en France, et est dépourvue de l’éthyl tertio butyl éther (ETBE) qui permet une bonne combustion des hydrocarbures. b) L’air de Cotonou contient de fortes concentrations de polluants [benzène-76 µg/m3

contre 5 µg/m3 recommandée par l’OMS ; Particules ultrafines (PUFs :166816 particules/cm3

) ; Hydrocarbures aromatiques polycycliques (HAPs : 103 ng/m3).

c) Les niveaux de tous les biomarqueurs ainsi que les modifications de bases, d’adduits d’ADN sont en général plus élevés chez les sujets de la ville de Cotonou par rapport aux habitants du village témoin. d) La délétion des gènes de la gluthation-S-trasférase (GST) et de la NADP(H) oxydo-réductase (NQO1)

entraîne une réduction de l’excrétion d’acide phényl mercapturique (APM) par rapport à l’allèle sauvage. En conclusion, l’air ambiant à Cotonou est fortement pollué par le benzène, les hydrocarbures HAPs et les PUFs issus de la combustion incomplète du carburant dépourvu de l’ETBE. Ces polluants ont un impact négatif sur la santé des populations exposées surtout par les dommages observés dans l’ADN.

Mots clés : Pollution atmosphérique, ETBE, Biomarqueurs, Adduits d’ADN, Fragmentation d’ADN.

Abstract

Since more than ten years, urban air pollution became worrying in Cotonou city. The present study aimed to assess the effect of air pollution on citizens and rural population living respectively in Cotonou and in a village distant from 80 kms to Cotonou.

1. The study consisted to analyze fuel sold in Benin;

2. evaluated the level of exposure in Cotonou and in village by determining the level of pollutants (Benzene and its metabolites, ultrafine particles, polycyclic aromatic hydrocarbons) and biomarkers exposure (S-Phenyl Mercaturic acid, urinary benzene, antibodies anti benzene metabolites, 1-Hydroxy pyren, pyren metabolites);

3. identified the DNA damages

4. and evaluated the capacity of populations studied to detoxify these pollutants by studying gene polymorphism of glutathione S-tranferase (GST) and Nicotinamide Adenine Dinucleotide Phosphate (NADPH) quinone oxydoreductase 1 (NQO1).

The results obtained showed that:

a) The rate of benzene in Benin fuel is higher than (3 to 6 time) those sold in France and this fuel doesn’t contained ETBE.

b) Cotonou air ambient is polluted and contained pollutants like volatile organic compounds such as benzene (76 µg/m3), ultrafine particles (166816 particles/cm3) associated to polycyclic aromatic hydrocarbons (103 ng/m3) with high concentration in comparison with WHO’norm (5 µg/m3

) and values obtained from Sohon’s village;

c) Benzene metabolites, polycyclic aromatic hydrocarbons, the level of DNA damage observed in urban people are also higher than those obtained from rural people.

The results of this study showed that urban air in Cotonou is very polluted and has harmful effects on people exposed.