Protocoles et caractéristiques des produits synthétisés

(4-Bromophényl)-4,8-diméthylnona-3,7-diène-1,2-diol (1)

Du 4-bromobenzaldéhyde (553,8 mg ; 3 mmol) a été mis à réagir en présence de citral (4,6 g ; 30,2 mmol ; 10 éq.) et de zinc (1,964 g ; 30 mmol ; 10 éq.) dans un mélange éthanol / eau distillée (1 :1 ; 15 mL / 15 mL). Le milieu réactionnel a été laissé à réagir à température ambiante sous agitation durant 4 heures. De l’acide acétique (1,5 mL ; 5% vol. ; 1,3 mmol ; 0,4 éq.) a ensuite été ajouté au milieu réactionnel, puis une sonication durant 10 minutes a été appliquée. Un suivi CCM a été utilisé durant toutes les étapes de synthèse. De l’acétate d’éthyle (30 mL a été ajouté au brut réactionnel qui a été placé sous agitation avant d’être filtré sur Büchner à l’aide d’un papier filtre. Le filtrat a ensuite été extrait à l’aide d’acétate d’éthyle (2 x 30 mL et la phase organique obtenue a été séchée sur MgSO4. Le sulfate a ensuite été filtré et la phase organique séchée a été évaporée avant d’être purifiée par chromatographie flash (gradient : cyclohexane à cyclohexane/AcOEt 90/10 durant 30 minutes). Le produit 1 est ainsi obtenu sous forme d’huile incolore (658 mg ; 1,9 mmol ; 65 %). Caractérisations : 1 H RMN (400 MHz, CDCl3) : δ (ppm 7,48 (2H, dd, J 8,5 Hz, 1,6 Hz, CHarom) ; 7,23 (2H, d, J 8,1 Hz, CHarom) ; 5,27-5,07 (2H, m, CH=) ; 4,62 (2H, brs, CHOH) ; 4,46-4,03 (1H, m, CHOH), 2,16-2,07 (4H, m, CH₂) ; 1,74 (6H, 2d, J 15,2 Hz, 7,8 Hz, CH₃) ; 1,60-1-59 (3H, m, CH₃).

22 atomes d’hydrogènes sont identifiés, car les protons des groupements hydroxyles sont labiles.

13

C RMN (400 MHz, CDCl3 : δ (ppm 141,6 ; 139,9 ; 137,6 ; 131,7 ; 131,6 ; 129,6 ; 128,7 ; 124,7 ; 124,2 ; 121,5 ; 120,8 ; 102,6 ; 81,7 ; 69,1 ; 64,6 ; 40,3 ; 26,4 ; 25,8 ; 24,0 ; 20,4 ; 17,8 ; 17,2.

(4-Bromophényl)hept-3-ène-1,2-diol (2)

Du 4-bromobenzaldéhyde (552 mg ; 3 mmol a été mis à réagir en présence d’hexènal (1,52 g ; 15,5 mmol ; 5,2 éq.) et de zinc (1,97 g ; 30 mmol ; 10 éq. dans de l’éthanol (15 mL . Le milieu réactionnel a été laissé à réagir à température ambiante sous agitation durant 3 heures. De l’acide acétique (1 mL ; 5% vol. ; 0,87 mmol ; 0,3 éq.) a ensuite été ajouté au milieu réactionnel, puis une sonication durant 5 minutes a été appliquée. Un suivi CCM a été utilisé durant toutes les étapes de synthèse. Une filtration sur Büchner à l’aide d’un papier filtre, suivie d’une évaporation sous vide ont été effectuées avant une purification par chromatographie flash (gradient : cyclohexane/AcOEt 95/05 à cyclohexane/AcOEt 70/30 durant 30 minutes). Le produit 2 est ainsi obtenu sous forme d’huile incolore (262 mg ; 0,92 mmol ; 31 %).

Caractérisations :

1

H RMN (400 MHz, CDCl₃) : δ (ppm 7,47 (2H, d, J 8,3 Hz, CH_arom) ; 7,22 (2H, d, J 8,3 Hz, CHarom) ; 5,82-5,04 (2H, m, CH=CH) ; 4,79-3,88 (2H, m, CHOH) ; 4,62 (2H, s, OH) ; 2,24-1,99 (2H, m, CH2) ; 1,43-1,25 (2H, m, CH2) ; 0,90 (3H, t, J 7,4 Hz, CH3).

13

C RMN (400 MHz, CDCl₃ : δ (ppm 139,9 ; 131,7 (3) ; 128,7 (3) ; 121,5 ; 64,6 ; 63,9 ; 34,4 ; 22,4 ; 13,8.

2-(Hydroxyphényl)hept-3-ène-1,2-diol (3) (Sali-hex)

Du salicylaldéhyde (368 mg ; 3 mmol) et du trans-hex-2-ènal (296 mg ; 3 mmol, 1 éq.) ont été placés en présence de zinc (982 mg ; 15 mmol ; 5 éq.), et d’eau distillée (10 mL dans un tube micro-ondes de 30 mL. Le milieu réactionnel a été irradié en micro-ondes durant 15 minutes à une température de 150 °C sous une agitation de 600 rpm. Puis, quelques gouttes d’acide chlorhydrique et de l’acétate d’éthyle (5 mL ont été ajoutés au mélange réactionnel. Ce dernier a été placé sous ultra-sons durant 10 minutes. Après filtration du zinc à l’aide d’acétate d’éthyle, la solution obtenue a été extraite à l’acétate d’éthyle (2 x 50 mL et la phase organique séchée sur MgSO₄. Après filtration, la phase organique a été évaporée sous vide et purifiée par chromatographie flash (gradient : cyclohexane/AcOEt 90/10 à cyclohexane/AcOEt 70/30 durant 30 minutes). Le produit 3 a été obtenu sous la forme d’une huile orange (202 mg ; 0,9 mmol ; 30 %).

Caractérisations :

1

H RMN (400 MHz, CDCl3) : δ (ppm 8,21 (1H, brs, OH) ; 7,16 (1H, t, J 7,6 Hz, CHarom) ; 6,91 (1H, d, J 7,9 Hz, CHarom) ; 6,84 (1H, d, J 8,5 Hz, CHarom) ; 6,80 (1H, t, J 7,6 Hz, CHarom) ; 5,59-5,51 (1H, m, CH=CH) ; 5,37-5,31 (1H, m, CH=CH) ; 4,56 (1H, d, J 7,6 Hz, CHOH) ; 4,31 (1H, t, J 7,2 Hz, CHOH) ; 4,05 (1H, brs, OH) ; 3,03 (1H, brs, OH) ; 2,01-1,84 (2H, m, CH₂) ; 1,35-1,26 (2H, m, CH₂) ; 0,96-0,77 (3H, m, CH₃).

13

C RMN (400 MHz, CDCl3 : δ (ppm 155,6 ; 135,6 ; 129,4 ; 127,8 ; 126,9 ; 123,6 ; 119,8 ; 117,2 ; 78,8 ; 75,5 ; 34,4 ; 22,1 ; 13,7.

IR ν_max/cm^-1 : 2965 (-OH) ; 2864 (alcane) ; 1712 (alcène) ; 1489 (aromatique) ; 1457 (aromatique, alcane) ; 1244 (phénol) ; 1055 (alcools secondaires) ; 970 (alcène bisubstitué

HRMS (ESI) : C₁₃H₁₇O₂ [M-H]- : calculée 221,1183 ; obtenue 221,1183.

1,2-bis(2-hydroxyphenyl)ethane-1,2-diol (4) (Sali-diol)

Du salicylaldéhyde (368 mg ; 3 mmol) a été place en présence de magnésium (148 mg ; 6,1 mmol ; 2 éq.) et d’acide acétique (0,5 mL ; 8,7 mmol ; 3 éq. dans de l’éthanol (1,8 mL). Le milieu réactionnel a été laissé à réagir à température ambiante durant 24 heures sous agitation. Après évaporation du solvant, le brut réactionnel a été purifié par chromatographie flash (gradient : cyclohexane/AcOEt 80/20 à cyclohexane/AcOEt 70/30 en 30 minutes afin d’obtenir le 1,2-bis(2-hydroxyphényl)éthane-1,2-diol 4 sous forme d’huile incolore (87 mg, 0,4 mmol, 24 %). Caractérisations : Référence : ¹⁶⁷ 1 H RMN (400 MHz, MeOD) : δ (ppm 7,03 (2H, td, J 7,7 Hz, 1,8 Hz, CHarom) ; 6,91 (2H, dd, J 7,7 Hz, 1,6 Hz, CHarom) ; 6,74 (2H, dd, J 8,1 Hz, 1,1 Hz, CHarom) ; 6,64 (2H, td, J 7,5 Hz, 1,3 Hz, CHarom) ; 5,24 (2H, s, CHOH) ; 4,89 (4H, brs, OH).

DEPT ¹³C RMN (400 MHz, MeOD : δ (ppm 132,4 (2) ; 131,9 (2) ; 122,6 (2); 119,1 (2); 78,4 (2).

2-Méthylphénol / o-crésol (5)

Du salicylaldéhyde (371 mg ; 3 mmol) a été placé en présence de zinc (589 mg ; 9 mmol ; 3 éq.) dans un tube micro-ondes de 10 mL. Le tout a été mis en suspension dans du toluène (1,8 mL en présence d’acide acétique (0,5 mL ; 8,7 mmol ; 3 éq.). Le milieu réactionnel a été irradié en micro-ondes durant 35 minutes à une température de 150 °C sous une agitation de 1 200 rpm. Le brut réactionnel a été directement placé dans de l’acétate d’éthyle en présence de naphtalène (64 mg et analysé en GC afin d’observer l’o-crésol 5 avec un rendement de 61 %. Après ajout de silice et évaporation des solvants, le mélange réactionnel a été purifié par chromatographie flash (gradient : cyclohexane/AcOEt 98/02 à cyclohexane/AcOEt 95/05 en 30 minutes afin d’obtenir l’o-crésol 5 sous forme d’huile incolore (198 mg, 1,8 mmol, 61 %).

Caractérisations :

Référence : ¹⁶⁸

1

H RMN (400 MHz, CDCl3) : δ (ppm 7,15 (1H, d, J 7.5 Hz, CHarom) ; 7,11 (1H, t, J 8,1 Hz, CH_arom) ; 6,88 (1H, t, J 7,4 Hz, CH_arom) ; 6,79 (1H, d, J 7,8 Hz, CH_arom) ; 4,95 (1H, brs, OH) ; 2,28 (3H, s, CH₃).

13

4-Méthylbenzène sulfonate 2-[2-(2-Méthoxyéthoxy)éthoxy]éthyle (6) (TsOPEGMe)

Du méthyltriglycol (10 g ; 61 mmol) a été placé dans du THF (20 mL) à 0 °C. De la soude (5 g ; 125 mmol ; 2 éq. ainsi que de l’eau (20 mL ont été ajoutés au milieu réactionnel. Enfin, du chlorure de tosyle (15 g ; 79 mmol ; 1,3 éq.) et du THF (20 mL) ont été ajoutés avant de laisser le milieu réactionnel revenir à température ambiante. Après 2 heures de réaction, le brut réactionnel a été extrait à l’aide d’éther (120 mL , lavé avec de la soude à 1 M, puis avec de l’eau. Le produit 6 a été obtenu sans purification avec un rendement quantitatif sous forme d’huile incolore et utilisé comme tel.

Caractérisations :

1-[2-[2-(2-Méthoxyéthoxy)éthoxy]éthoxy]-2-méthyl-benzène (7) (o-crPEGMe)

Du 2-méthylphénol/o-crésol (5) (414 mg ; 3,8 mmol, 1,2 éq.) a été mis à réagir en présence de 2-(2-(2-méthoxyéthoxy)éthoxy)éthyl 4-méthylbenzènesulfonate 6 (1 g ; 3,1 mmol et d’hydroxyde de potassium (261 mg ; 4,7 mmol, 1,5 éq. dans de l’acétonitrile (32 mL). Le milieu réactionnel a été chauffé à reflux durant 4 jours sous agitation, puis le solvant a été évaporé sous vide. De l’acétate d’éthyle (50 mL a été ajouté au brut réactionnel avant d’être lavé à l’aide d’une solution de soude (NaOH 1 M ; 3 x 50 mL). La phase organique a été séchée sur MgSO4 et concentrée sous vide. Le résidu obtenu a été purifié par chromatographie flash (gradient : cyclohexane à cyclohexane/AcOEt 80/20 en 30 minutes) afin d’obtenir le produit 7 sous forme d’huile incolore (697 mg, 2,7 mmol, 87 % .

Caractérisations :

1

H RMN (400 MHz, CDCl3) : δ (ppm 7,14 (2H, m, CHarom) ; 6,86 (1H, t, J 7,4 Hz, CHarom) ; 6,81 (1H, d, J 8,5 Hz, CH_arom) ; 4,13 (2H, t, J 4,9 Hz, OCH₂) ; 3,88 (2H, t, J 5,0 Hz, OCH₂) ; 3,78-3,75 (2H, m, OCH2) ; 3,70-3,65 (4H, m, OCH2) ; 3,56-3,54 (2H, m, OCH2) ; 3,38 (3H, s, CH₃) ; 2.23 (3H, s, CH_3arom).

13

C RMN (400 MHz, CDCl3 : δ (ppm 157,0 ; 130,8 ; 127,1 ; 126,8 ; 120,6 ; 111,3 ; 72,1 ; 71,1 ; 70,8 ; 70,7 ; 70,0 ; 67,8 ; 59,2 ; 16,4.

IR ν_max/cm^-1 : 2873 (alcane) ; 1496 (aromatique) ; 1246 (éther aromatique) ; 1122 (éther) ; 752 (Aromatique bisubstitué en 1,2).

2-(Ethoxyméthyl)phénol (8) (EMP)

Du salicylaldéhyde (373 mg ; 3 mmol) a été placé en présence de zinc (590 mg ; 9 mmol, 3 éq.) dans un tube micro-ondes de 10 mL. Le tout a été mis en suspension dans de l’éthanol (1,8 mL ; 30 mmol, 10 éq. en présence d’acide acétique (0,5 mL ; 8,7 mmol, 3 éq.). Le milieu réactionnel a été irradié en micro-ondes durant 15 minutes à une température de 150 °C sous une agitation de 1 200 rpm. Après ajout de silice et évaporation des solvants, le mélange réactionnel a été purifié par chromatographie flash (gradient : cyclohexane/AcOEt 98/02 à cyclohexane/AcOEt 95/05 en 30 minutes afin d’obtenir le 2-(éthoxyméthyl)phénol 8 (260 mg ; 1,7 mmol ; 57 % sous forme d’huile incolore.

Caractérisations :

Référence : ¹⁷⁰

1

H RMN (400 MHz, CDCl3) : δ (ppm 7,74 (1H, s, OH) ; 7,21 (1H, t, J 7,8 Hz, CHarom) ; 7,01 (1H, d, J 7,8 Hz, CHarom) ; 6,90 (1H, d, J 8,1 Hz, CHarom) ; 6,84 (1H, t, J 7,5 Hz, CHarom) ; 4,72 (2H, s, CH₂O) ; 3,62 (2H, q, J 7,1 Hz, OCH₂) ; 1,28 (3H, t, J 7,1 Hz, CH₃)

13

C RMN (400 MHz, CDCl₃ : δ (ppm 156,4 ; 129,5 ; 128,1 ; 122,4 ; 119,9 ; 116,6 ; 72,4 ; 66,4 ; 15,2.

2-(Butoxyméthyl)phénol (9) (BMP)

Du salicylaldéhyde (372 mg ; 3 mmol) a été placé en présence de zinc (597 mg ; 9,1 mmol, 3 éq.) et d’acide acétique (0,5 mL ; 8,7 mL, 3 éq.) dans du n-butanol (2,75 mL ; 30 mmol, 10 éq.). Le milieu réactionnel a été chauffé à reflux durant 24 heures sous agitation, puis le solvant a été évaporé sous vide. Le brut réactionnel a été purifié par chromatographie flash (gradient : cyclohexane à cyclohexane/AcOEt 80/20 en 30 minutes afin d’obtenir le 2-(butoxyméthyl)phénol 9 (264 mg ; 1,5 mmol ; 48 %) sous forme d’une huile grise.

Caractérisations :

1

H RMN (400 MHz, CDCl3) : δ (ppm 7,76 (1H, s, OH) ; 7,21 (1H, t, J 7,7 Hz, CHarom) ; 7,01 (1H, d, J 7,8 Hz, CH_arom) ; 6,89 (1H, d, J 8,2 Hz, CH_arom) ; 6,84 (1H, t, J 7,4 Hz, CH_arom) ; 4,71 (2H, s, CH₂O) ; 3,55 (2H, q, J 6,5 Hz, OCH₂) ; 1,67-1,61 (2H, m, CH₂) ; 1,45-1,36 (2H, m, CH₂) ; 0,93 (3H, t, J 7,4 Hz, CH₃).

13

C RMN (400 MHz, CDCl3 : δ (ppm 156,5 ; 129,5 ; 128,0 ; 122,4 ; 119,9 ; 116,6 ; 72,7 ; 70,9 ; 31,7 ; 19,4 ; 14,0.

IR νmax/cm^-1 : 2961-2866 (alcane) ; 1590-1490 (aromatique) ; 1458 (aromatique, alcane) ; 1363 (alcane) ; 1242 (phénol) ; 1086-1034 (éther) ; 753 (Aromatique bisubstitué en 1,2).

2-(Hexyloxyméthyl)phénol (10) (HMP)

Du salicylaldéhyde (379 mg ; 3,1 mmol) a été placé en présence de zinc (596 mg ; 9,1 mmol, 3 éq.) et d’acide acétique (0,5 mL ; 8,7 mmol, 3 éq. dans de l’hexanol (3,77 mL ; 30 mmol, 10 éq.). Le milieu réactionnel a été chauffé à 115 °C durant 24 heures sous agitation, puis le solvant a été évaporé sous vide. Le brut réactionnel a été purifié par chromatographie flash (gradient : cyclohexane/AcOEt 98/02 à cyclohexane/AcOEt 96/04 en 30 minutes) afin d’obtenir le 2-(Hexyloxyméthyl)phénol 10 (165 mg ; 0,8 mmol ; 26 %) sous forme d’huile incolore. Caractérisations : 1 H RMN (400 MHz, CDCl₃) : δ (ppm 7,76 (1H, s, OH) ; 7,21 (1H, t, J 7,8 Hz, CH_arom) ; 7,0 (1H, dd, J 7,1 Hz, J 1,6 Hz, CH_arom) ; 6,89 (1H, dd, J 8,2 Hz, J 1,2 Hz, CH_arom) ; 6,84 (1H, td, J 7,4 Hz, J 1,2 Hz, CH_arom) ; 4,71 (2H, s, CH₂O) ; 3,54 (2H, q, J 6,7 Hz, OCH₂) ; 1,68-1,61 (2H, m, CH2) ; 1,40-1,35 (2H, m, CH2) ; 1,32-1,27 (2H, m, CH2) ; 0,89 (3H, t, J 6,6 Hz, CH3). 13 C RMN (400 MHz, CDCl3 : δ (ppm 156,5 ; 129,5 ; 128,0 ; 122,4 ; 119,9 ; 116,6 ; 72,7 ; 71,2 ; 31,7 ; 29,6 ; 25,9 ; 22,7 ; 14,2.

IR νmax/cm^-1 : 2934-2864 (alcane) ; 1587-1490 (aromatique) ; 1454 (aromatique, alcane) , 1364 (alcane) ; 1243 (phénol) ; 1087-1033 (éther) ; 753 (Aromatique bisubstitué en 1,2).

2-(2-Hydroxyéthoxy)benzaldéhyde (11) (HEB)

Du salicylaldéhyde (1,22 g ; 10 mmol) a été mis à réagir en présence de 2-chloroéthanol (842 mg ; 15 mmol, 1,5 éq.) et d’hydroxyde de potassium (842 mg ; 15 mmol, 1,5 éq.) dans du n-butanol (10 mL). Le milieu réactionnel a été chauffé à reflux durant 5 heures sous agitation, puis le solvant a été évaporé sous vide. Le milieu réactionnel a été lavé à l’eau (2 x 20 mL , puis extrait à l’aide de dichlorométhane (3 x 20 mL . La phase organique a été séchée sur MgSO₄, filtrée et concentrée sous vide. Le résidu obtenu a été purifié par chromatographie flash (gradient : cyclohexane à cyclohexane/AcOEt 70/30 en 30 minutes) afin d’obtenir le produit 11 sous forme d’huile incolore (804 mg, 4,8 mmol, 48 %).

Caractérisations :

1

H RMN (400 MHz, CDCl₃) : δ (ppm) 10,44 (1H, s, HC=O) ; 7,82 (1H, dd, J 7,8 Hz ; 2,0 Hz, CH_arom) ; 7,55 (1H, m, CH_arom) ; 7,07 (1H, d, J 7,8 Hz, CH_arom) ; 7,00 (1H, d, J 8,8 Hz,

CHarom) ; 4,21 (2H, t, J 4,6 Hz, O-CH2) ; 4,03 (2H, t, J 4,6 Hz, CH2-OH).

9 atomes d’hydrogènes sont identifiés, car le proton du groupement hydroxyle est labile.

1) Appareils utilisés

L’incubateur utilisé pour les phases de croissance fonctionnait à une température de 22 °C avec une photopériode de 12 heures/12 heures. La température du réfrigérateur utilisé pour la conservation des souches était comprise entre 0 et 4 °C.

Les mesures de densité optique (DO) ont été effectuées à l’aide d’un spectrophotomètre Thermo Fisher Scientific Multiskan GO (Type 1510).

Toutes les stérilisations ont été effectuées à l’aide d’un appareil à autoclave à une température de 120 °C maintenue pendant 15 minutes sous une pression de 2,2 bars.

2) Milieu de culture : milieux liquides

La composition du milieu minéral est indiquée dans le Tableau 28.

Tableau 28 : Composition du milieu minéral.

H₂O distillée 500 mL

KCl (Prolabo^®, Suisse) 125 mg

NaH2PO4 (Prolabo^®, Suisse) 594 mg

Na₂HPO₄.2H₂O (Prolabo^®, Suisse) 4 mg

MgSO4.7H2O (Prolabo^®, Suisse) 250 mg

NH4NO3 (Prolabo^®, Suisse) 500 mg

pH 5,5 (non tamponné)

Auxquels ont été ajoutés 5 mL d’une solution d’oligo-éléments dont la composition est indiquée dans le Tableau 29.