Mécanisme d'action

Il est bien établi que les stimulateurs de l'adénosine monophosphate cyclique (AMPc), tels que l'adénosine, prostaglandine I2 (PGI2), PGE1, et inhibiteurs de la PDE, e tels que ceux de la guanosine cyclique 5'-monophosphate (cGMP), tels que oxyde azote (NO), sont capables d'inhiber les fonctions plaquettaires. L’augmentation des concentrations d'AMPc cGMP peut être accomplie soit directement par la stimulation de l'adénylate / guanylate cyclases soit indirectement par l'inhibition de PDEs.[217] Il a été considéré que l'AMPc a augmenté / cGMP dans les plaquettes activées AMPc-dépendante protéine kinase (PKA) et cGMP-dépendante protéine kinase (PKG) et régule ainsi l'activation des plaquettes et l'agrégation des réponses par la phosphorylation intracellulaire des protéines, tels que le récepteur IP3, Cß phospholipase, la glycoprotéine (GP) Ibβ, Gα13, RapIb, protéine actine, phosphopro-protéine vasodilatatrice stimulée (VASP), et PDE3. [218] Dans la plupart des cellules, y compris les plaquettes, les effets de l'AMPc intracellulaire sont principalement médiés par la PKA et les substrats protéiques. Toutefois, les voies détaillées de transduction du signal restent floues. Les taux intracellulaires d'AMPc et le GMPc sont régulés par des systèmes de synthèse, qui comprennent l'adénylate cyclase et la guanylate cyclase, et les systèmes de l'hydrolyse, incluant les PDEs. Dans les tissus des mammifères, 11

La plupart des types cellulaires expriment un ou plusieurs isoenzymes PDE, qui sont exprimés dans les schémas de distribution des tissus et de cellules spécifiques, dans chaque camp de régulation intracellulaire et / ou des concentrations de GMPc dans les différents compartiments cellulaires et de différentes manières. L'activité PDE de plaquettes est principalement attribuable à PDE3 et de la PDE5, avec une activité mineure pour PDE2. [221-222]

PDE2 et PDE3 hydrolysent préférentiellement l’AMPc, tandis que la PDE5 hydrolyse spécifiquement cGMP. Il a été rapporté que l'inhibition de PDE3 est importante pour la répression de l'adénosine diphosphate (ADP) et l’agrégation plaquettaire induite, tandis que celle de la PDE5 est liée à une réduction de la sérotonine. [223]Cilostazol inhibe sélectivement l’isozyme PDE3 par un mécanisme AMPc-concurrentiel (Tableau 21)

Le Cilostazol un puissant inhibiteur de l'activité de PDE3A (sous-type cardiovasculaires de PDE3 (IC50 0,20 uM)), et augmente les concentrations intracellulaires d'AMPc et active la PKA dans les plaquettes humaines. Tyr751, Thr844, Asp950, Phe972, et Gln975 dans le domaine de catalysation de PDE3A sont des résidus clés pour la liaison de cilostazol. [224] les effets inhibiteurs d'inhibiteurs sur l'activité PDE3 PDE3A sont fortement corrélés avec leur inhibition de l'agrégation plaquettaire induite par la thrombine, ADP, ou collagène. [216] l'effet pharmacologique du cilostazol est donc considéré comme du à l'élévation du taux d'AMPc intracellulaire par l’inhibition de l'activité PDE3A dans les plaquettes. Cilostazol induit la phosphorylation de VASP dans les plaquettes, médiée par l'activation PKA, malgré les faibles

Figure 45. Structure chimique de la cilostazol: 6 - [4 - (1 - cyclohexyl-1H-tétrazole-5-yl)

butoxy] -3,4 - dihydro-2 (1H)-quinolinone.

Effets stimulants sur l'accumulation d'AMPc par rapport à la forskoline, PGE1, ou PGI2. [216], [225] .VASP est une protéine de 46 à 50 kDa, qui a été trouvée concentrée le long de structures très dynamiques de la membrane filamenteuse, des adhérences focales et cellules contacts. [226-218] VASP module la polymérisation de l’actine, le regroupement des filaments d'actine et l'activation des intégrines. La VASP est phosphorylée dans les plaquettes humaines au Ser157, Ser239 et Thr278 avec des affinités différentes à la fois par la PKA et PKG.la Phosphorylation de VASP est régulée à la baisse de son interaction avec les filaments l’actine. [227] cette phosphorylation a été établie en étroite corrélation avec l'inhibition de la liaison du fibrinogène à l'intégrine αIIbβ3, l'inhibition de l'agrégation plaquettaire et l’adhesion. [228-229] L'analyse de phosphorylation de VASP est également utile pour quantifier les effets antiagrégants du clopidogrel. [230]

Les Donneurs de NO induisent la phosphorylation de VASP avec une augmentation marquée des concentrations de GMPc, sans influer l'AMPc. Le fait que la phosphorylation de VASP en réponse à divers antiagrégants est

L'inhibition de la fonction plaquettaire par cilostazol semble être due à une diminution des niveaux de Ca2 + intracellulaire résultant de l'augmentation de l'AMPc. [216-231]

Cependant, le cilostazol inhibe également le calcium au cours de l'agrégation plaquettaire induite, de sorte que le mécanisme d'action détaillé reste incertain. Il est rapporté que l'inhibition de l'agoniste évoqué éléve la concentration intracellulaire de Ca2 +par l’augmentation de l'AMPc / cGMP et donc pourrait avoir deux composantes - un mécanisme PKA/PKG- à charge pour l'inhibition de la libération de Ca2 + des réserves intracellulaires et une PKA / PKG à mécanisme indépendant de l'inhibition directe de l'entrée de Ca2 + médié par la protéine tyrosine phosphatase. [232] Ces résultats suggèrent que l'effet inhibiteur du cilostazol sur l'agrégation plaquettaire pourrait être médié par un mécanisme PKA / PKG-dépendant, telle que la phosphorylation de VASP et l'inhibition de la libération de Ca2 +, et un mécanisme PKA / PKG-indépendant

Tableau 20

Isozyme cAMP cGMP Subtype Major Tissue

Distribution

PDE1 (Ca2+ /CaM-dependent) PDE2 (cGMP-stimulated) PDE3 (cGMP-inhibited) 1–12 30 0.1-0.4 1–3 15 0.03-0.3 1A, 1B, 1C 2A 3A, 3B

Brain, heart, SMC, lung Adrenal, heart, brain, kidney,

liver, platelet

Platelet, heart, SMC, adipocyte, liver, β cell

PDE4 (cAMP-specific) PDE5 (cGMP-specific) PDE6 (photoreceptor cGMP-specific) PDE7 (cAMP-specific, rolipram-insensitive) 1–3 >100 >100 0.2 >300 0.5-5 5-20 — 4A, 4B, 4C, 4D 5A α, β, γ 7A, 7B

Brain, leukocyte, testis, EC, SMC, heart

Lung, platelet, SMC Retina Skeletal muscle, T cell PDE8 (cAMP-specific,

IBMX-insensitive) ^{0.055 124 8A, 8B}

Testis, thyroid, liver, kidney, ovary, brain

PDE9 (cGMP-specific,

IBMX-insensitive) ^{230 0.07-0.17 9A}

Small intestine, kidney, liver, lung, brain, heart

PDE10 (cAMP/cGMP-specific) 0.05 3 10A Brain, thyroid, testis

PDE11 (cAMP/cGMP-specific) 3.3 5.7 11A ^{Prostate, testis, pituitary, skeletal}