Interpretation- hypothèse :
V.3. L’artériographie de tension
Comme montré ci-dessus, l’HI est responsable d’une augmentation de l’épaisseur intima-média de l’artère carotide et l’artère abdominale, qui est probablement responsable, en partie, de l’élévation de la pression arterielle suite a la diminution des diamtères des vaisseaux contenant le sang circulant. D’autre part, l’EI s’est révelé capable de limiter cet épaississement de l’artère carotide et par conséquence, il peut réduire potentiellement l’augmentation de la pression artérielle résultante.
Pour aller plus loin, et vour valider cette hypothèse, nous avons ensuite étudié l’effet de l’HI et de l’EI sur la réactivité vasculaire en présence des agents vaso-actifs.
V.3. L’artériographie de tension
Après l’évaluation des effets de l’hypoxie intermittente et de l’entraînement physique sur le remodelage vasculaire, nous avons étudié leurs effets sur la réactivité vasculaire en utilisant la technique d'artériographie de tension sur des anneaux d'aortes prélevés sur des rats de chacun des 4 groupes (N, IH, NIT et IHIT). Nous avons utilisé trois agonistes pharmacologiques différents : la phényléphrine (PE), l’endothéline-1 (ET-1) et l'acétylcholine (ACh). La PE est un agent vasoconstricteur activant les récepteurs α-adrénergiques des CMLV (Gonzales RJ. et coll., 2000), l’ET-1 est le vasoconstricteur le plus puissant dans le corps humain et est secrété par les cellules endothéliales. En se fixant sur les récepteurs ETA et ETB dans les cellules musculaires lisses vasculaires,il exerce son effet biologique essentiel qui est la régulation du tonus vasculaire (Ivey ME. et coll., 2008). Quant à l’Ach, c'est un vasodilatateur agissant sur les récepteurs cholinergiques parasympathiques des CMLV, qui induisent une relaxation dépendante de l’endothélium. Celle-ci implique la synthèse et la libération du monoxyde d’azote (NO), qui est un agent diffusible agissant comme relaxant musculaire, par les cellules endothéliales des vaisseaux sanguins (Landry Y. et coll., 2009). La réactivité vasculaire des anneaux d’aorte est étudiée en réponse à des concentrations croissantes de ces agents vasoconstricteurs et vasodilatateurs.
L’analyse de nos résultats par une ANOVA à 3 facteurs (HI, EI, dose) montre qu’en réponse à des doses croissantes de PE, l’HI n’affecte pas la tension de l’aorte produite en réponse à la PE
(p = 0,4841). En revanche, l’EI diminue globalement la tension produite par les anneaux de l’aorte (p < 0,0001), d’une façon indépendante de l’HI (interaction non-significative EI x HI : p = 0,134). Cet effet est dépendant de la concentration de PE (interaction significative EI x dose : p < 0,0001). Ainsi, les tests post hoc LSA montrent qu’à 10-11mol/L de PE, l’effet de EI n’est pas significatif (p = 0,4601), alors qu’à partir de 10-10mol/L, l’effet de l’EI est significatif et devient plus important l'augmentation de la concentration ( PE de10-10 mol/L 10-6 mol/L : p = 0,001 et PE à 10-5 mol/L et 10-4 mol/L : p <0,0001) (Fig. 46).
De même, en réponse à l’ET-1, une ANOVA à 3 facteurs (HI, EI, dose) montre que l’effet de l’HI sur la tension de l’aorte est absent (p = 0,2654) (Fig. 47). En revanche, l’EI diminue globalement la force développée par les anneaux de l’aorte (p < 0,0001) chez les rats soumis à la normoxie et à l’HI (Fig. 47). De plus, l’effet de l’EI dépend de la concentration de l’ET : interaction EI x dose : p < 0,0001. En effet, les tests post hoc LSD montrent qu'à la plus faible concentration d'ET-1 (10-12 mol/L), la différence entre la tension de l’aorte produite chez les rats sédentaires et les rats entraînes n’est pas significative p = 0,1099. En revanche, à partir de la concentration 10-11 mo/L d'ET-1 l’effet de l’EI est significatif (p = 0,0349) et devient plus important avec l'augmentation de la concentration (p = 0,009 pour 10-10 mo/L 10-8 mo/L d'ET-1 et p < 0,000d'ET-1 pour d'ET-10-7 mo/L 10-5 mo/L d'ET-1) (Fig. 47).
D’autre part, concernant la réponse à l’ACh, l'ANOVA à 3 facteurs (HI, EI, dose) montre que l’HI n'induit aucun changement significatif global. En revanche, l’EI fait augmenter globalement la vasodilatation induite par l'ACh, en valeurs brutes et en pourcentages (Fig. 48 A et B) (p < 0,0001), indépendamment de l’HI (interaction HI x EI : p = 0,1973) et de la dose (interaction EI x dose : p = 0,06). Cependant, cette valeur limite (p = 0,06) pour l'interaction EI x dose indique une tendance à un effet de l'EI augmentant avec la dose d'Ach, comme cela peut être observé dans la figure 48 B.
Figure 46 : Courbes représentant les réponses cumulées concentration-tension des anneaux d'aorte extraits des 4 groupes de rats étudiés: (N : rats sédentaires en normoxie, IH : rats sédentaires soumis à l’hypoxie intermittente, NIT : rats en normoxie soumis à l’entraînement physique intensif, IHIT : rats soumis à l'hypoxie intermittente et à l’entraînement physique intensif) en réponse à la phényléphrine (PE). Les données sont exprimées comme la tension des anneaux de l'aorte en g. Un effet significatif global de l'entraînement physique intensif (rats normoxiques et hypoxiques ensemble) est représenté par #### pour p ≤ 0,0001.
Figure 47 : Courbes représentant les réponses cumulées concentration-tension des anneaux d'aorte extraits des 4 groupes de rats étudiés : (N : rats sédentaires soumis à la normoxie, IH : rats sédentaires soumis à une hypoxie intermittente, NIT : rats en normoxie soumis à l’entraînement physique intensif, IHIT : rats soumis à l'hypoxie intermittente et à l’entraînement physique intensif) en réponse à l'endothéline-1 (ET-1). Les données sont exprimées comme la tension des anneaux de l'aorte en g. Un effet significatif global de l'entraînement physique intensif (rats normoxiques et hypoxiques ensemble) est représenté par #### pour p ≤ 0,0001.
Figure 48 : Courbes cumulées concentration-tension des anneaux d'aorte extraits des 4 groupes de rats étudiés (N : rats sédentaires en normoxie, IH : rats sédentaires soumis à l’hypoxie intermittente, NIT : rats en normoxie soumis à l’entraînement physique intensif, IHIT : rats soumis à l’hypoxie intermittente et à l’entraînement physique intensif) en réponse à l'acétylcholine (ACh) après pré-contraction avec 10-6 mol / L de phényléphrine (PE). Les données sont exprimées comme la tension en g des anneaux soumis à l'Ach (A) ou comme le % de relaxation par rapport à la précontraction initiale induite par 10-6 mol / L de PE (B). Un effet significatif global de l'entraînement physique intensif (rats normoxiques et hypoxiques ensemble) est représenté par #### pour p ≤ 0,0001.
Pris ensemble, ces résultats montrent que l'HI n'a pas d'effet sensible sur la réponse aortique à l'Ach. Cependant, l’EI est capable de réguler la réactivité vasculaire de l’aorte en favorisant la relaxation endothélium-dépendant en réponse à l’ACh, et en réduisant la vasoconstriction en réponse à l’ET-1 et à la PE, aussi bien sur l'aorte issue d'animaux normoxiques que ceux ayant subi une HI.
Les changements de la vasoréactivité de l’aorte sont associés principalement à des changements dans la contraction musculaire. Comme la voie de signalisation du calcium est le régulateur clé de la contraction musculaire, en particulier des mécanismes de couplage excitation-contraction (Hill-Eubanks DC. et coll., 2011) (Chalmers S. et coll., 2007), nous avons donc choisi d'étudier les processus sous-jacents de la contractilité du muscle lisse de l’aorte en considérant les variations de la concentration du calcium intracellulaire des cellules musculaires lisses vasculaires (CMLV) de l'aorte.
Interprétation- hypothèse :
Les résultats ci-dessus révèlent que l’EI fait diminuer la réponse contractile de l’aorte des rats en réponse aux agents vasoconstricteurs (PE, ET-1), alors qu’il améliore la vasodilatation de leurs aortes en réponse à l’ACh. L’effet de l’HI n’était pas significatif sur la vasoreactivité des aortes. Nous avons donc ensuite passé à examiner si les effets de l’EI et de l’HI sont associés à des changements de la gestion du calcium dans les cellules musculaires lisses vasculaires constituants les aortes.