DISCUSSION DES RESULTATS A 14 JOURS POST IR

L’ensemble des résultats obtenus 14 jours après IR+CsA montre une altération de la fonction rénale avec l’apparition d’une légère FIAT. Ces modifications observées à 14 jours post IR+CsA sont accompagnées par l’augmentation de l’expression du TGF-β1 et des composants de la MEC ainsi qu’une augmentation de la prolifération, l’absence d’apoptose, de nécrose, d’inflammation et de stress oxydant.

L’inhibition de la MAO-A par la Pg avant ischémie semble jouer un rôle dans la prévention de la FIAT en diminuant l’expression des gènes pro-fibrotiques et en préservant une structure et une fonction rénale normale. Le traitement à la Pg après IR améliore la fonction rénale sans aucun effet bénéfique sur la FIAT.

Quand est -il de la fonction rénale à 14 jours post IR ?

L’évaluation de la fonction rénale dans notre modèle d’IR+CsA à 14 jours montre une altération fonctionnelle associée à une hypertrophie rénale. Des travaux récents mettent en évidence la présence d’un phénomène de récupération fonctionnelle à 14 jours chez le groupe ayant subi une IR seule (Kim et al. 2009) avec une hypertrophie rénale par rapport au contrôle (Aunapuu et al. 2005). L’administration de la CsA seule présente une légère détérioration fonctionnelle à 14 jours (Ghorbanihaghjo et al. 2008). Ainsi, nous pouvons suggérer que c’est l’association des deux facteurs qui dans notre modèle aggravent la fonction rénale à 14 jours.

Peut-on parler de la FIAT à ce stade ?

Nos résultats montrent que le traitement des groupes non ischémiés à la CsA durant 14 jours n’induit pas des lésions histologiques. En effet, la néphrotoxicité de la CsA n’est visible que dans des modèles d’animaux recevant un régime alimentaire désodé pendant 28 jours (Elzinga et al. 1993). Par contre l’association de l’IR à la CsA entraîne l’apparition de la FIAT dès 14 jours. En effet, ce protocole entraîne des lésions ischémiques aiguës qui se manifestent à 14 jours par la destruction de l’architecture rénale, l’augmentation de l’atrophie tubulaire et le dépôt interstitiel de la MEC (Aunapuu et al. 2005).

Discussion – Jour 14

L’apparition de la fibrose dès 14 jours résulte d’une augmentation de l’expression du TGF-β1 chez les rats IR+CsA. Un résultat similaire a été obtenu dans des modèles d’IR traités ou pas à la CsA (Broekema et al. 2009; Kim et al. 2009). En effet, le TGF-β est un médiateur essentiel capable d’induire à lui seul l’ensemble des altérations observées lors de la TEM en augmentant l’expression des MMP-2 qui induisent la rupture de la membrane basale tubulaire en digérant le collagène IV. Cela permet aux fibroblastes de migrer dans l’interstitium et de synthétiser les constituants de la matrice extracellulaire (collagènes I et III) dont l’expression augmente à 14 jours dans notre modèle d’IR+CsA (Yang et al. 2001).

L’apparition de la FIAT à 14 jours chez le groupe IR+CsA est marquée par l’absence d’apoptose, de nécrose et une augmentation de la prolifération des cellules épithéliales au niveau du cortex et de la jonction cortico-médullaire rénale.

La prolifération joue un rôle anti-fibrosant en favorisant la régénération des cellules mortes dès la phase aiguë de la reperfusion (Kunduzova et al. 2002). Les cellules en prolifération peuvent être des cellules tubulaires survivantes ou des cellules souches provenant de la moelle osseuse qui se fixent au niveau rénal et participent à la régénération cellulaire (Gupta et al. 2002; Kale et al. 2003) sans que le traitement à la CsA affecte cette régénération (Broekema et al. 2009).

De même ces cellules peuvent être des fibroblastes interstitiels qui prolifèrent pour se différencier en myofibroblastes et synthétiser les composants de la MEC (Iwano et al. 2002). Cependant, dans notre modèle la localisation tubulaire des cellules en prolifération éloigne cette possibilité.

Un phénomène majeur observée à 14 jours après IR est la présence des cellules inflammatoires interstitielles (Kim et al. 2009). Cependant dans notre modèle d’IR+CsA, l’mmunosuppression obtenue suite à l’utilisation de la CsA explique l’absence d’infiltrat inflammatoire à 14 jours. Malgré l’absence de cet infiltrat, les reins présentent une augmentation de l’expression l’IL-1 β, cytokine favorisant la progression de la fibrose à plus long terme.

En réponse à notre question, 14 jours après IR+CsA, la FIAT démarre avec l’absence de l’apoptose et de la nécrose tubulaire.

Discussion – Jour 14

Effet de l’inhibition de la MAO.

L’effet de l’inhibition des MAOs avant ou après IR sur la FIAT ne peut pas être mis en évidence puisque cette dernière, qui démarre à 14 jours chez les IR+CsA, n’est pas significativement différente du contrôle CsA. Toutefois, la Pg avant IR diminue significativement l’expression des gènes TGF-β1 et MMP-2 entraînant une tendance à ralentir l’apparition de la FIAT à 14 jours. La Pg après IR ne présente pas d’amélioration au niveau histologique mais préserve la fonction rénale. Une étude a montré qu’en réponse à l’IR, le taux de production d’H2O2 et de la peroxydation lipidique augmentent dès 7 jours et demeurent élevés jusqu’à 16 jours (Kim et al. 2009). Cela met en évidence un rôle important du stress oxydant dans la progression des lésions d’IR avec une diminution de l’activité enzymatique des gènes anti- oxydants 24 heures après reperfusion. Ces activités ne sont pas rétablies à 16 jours post IR (Kim et al. 2009). Toutefois, bien que n’ayant pas mesuré les mêmes paramètres nos résultats montrent l’absence d’effet sur l’expression des ARNm des gènes d’oxydation à 14 jours après IR. Ces résultats controversés restent à élucider.

Le traitement des rats ischémiés à la Pg favorise la prolifération dès la phase aiguë de la reperfusion (Kunduzova et al. 2002) et est maintenue selon nos résultats jusqu’à 14 jours. En effet, les EROs produits lors de la reperfusion se comportent comme des messagers prolifératifs ou apoptotiques selon leurs concentrations. Cela laisse supposer qu’à 14 jours la diminution du stress oxydant initial par la Pg favoriserait plutôt la voie de la prolifération et de la régénération cellulaire.

Afin d’évaluer l’impact de l’inhibition des MAOs sur la progression de la FIAT, nous avons effectué un 3ème groupe de rats à 28 jours d’IR+CsA qui sera présenté dans la partie suivante.

En conclusion, à 14 jours après IR+CsA, la FIAT apparaît avec une diminution de la mort cellulaire et du stress oxydant. L’administration de Pg avant IR exerce un effet protecteur

Résultats - Jour 28