Choix de la technique à développer

La PCR nichée présente de nombreux inconvénients. Les manipulations sont longues, nombreuses et nécessitent l’utilisation de gels contenant du BET (cancérigène). De plus, la ré-amplification d’un premier produit PCR exposé a un très haut risque de contamination. Cette technique ne doit pas être utilisée en méthode diagnostique [76, 174].

La PCR en temps réel est un outil de diagnostic présentant l’avantage d’être plus rapide (révélation in situ), de ne pas utiliser de BET et de se réaliser en système clos, d’où le faible risque de contaminations. De plus, le rendement d’amplification est supérieur à la PCR classique, offrant ainsi une meilleure sensibilité [76, 174, 175]. Toutefois, la technique FRET décrite par l’équipe de Babady et coll., imposée, par l’homologie entre P. vivax et P. knowlesi, l’utilisation de 2 couples de sondes (4 sondes) pour chaque identification d’espèce de Plasmodium. Ces sondes, très coûteuses, limitent l’utilisation de cette technique en routine. Pour chacune des 4 espèces plasmodiales humaines, un couple d’amorces spécifiques ciblant le gène 18S ARNr de type A est utilisé. La révélation de l’amplification est réalisée grâce à un agent fluorescent s’intercalant dans l’ADN double brin, le SYBR Green. Cette technique possède l’avantage d’être sensible (seuil de sensibilité = 0,3 parasite / µL), rapide (3 heures), peu coûteuse et spécifique d’espèce. Il est donc intéressant de faire évoluer cette méthode en développant sur ce même modèle un cinquième couple d’amorces spécifiques de P. knowlesi [76].

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1. Généralités

En 2001, les dirigeants du monde entier ont adopté les Objectifs du Milléna

Développement (OMD), pour améliorer l'état du monde en 2015. Un des objectifs est une réduction du nombre de cas de paludisme de 50% en 2015 (OMD 6). Ce but est en voie d'être atteint. Le paludisme a, en effet, régressé au cours des dernières années dans toutes les régi du monde sous l'effet de l'amélioration conjointe de la lutte anti

massive de moustiquaires imprégnées d'insecticides à longue durée d'action [MILDA] et plus localement aspersion intra-domiciliaire d'insecticides), du diagnost

plasmodiales (tests de diagnostic rapide [TDR]), des traitements efficaces (combinaisons à base de dérivés d'artémisinine [CATs], des traitements présomptifs intermittents [TPI] des femmes enceintes et des enfants) et des changemen

économique et climatiques) [176

En 5 octobre 2015, la chinoise Youyou Tu pour ses travaux sur le paludisme, ainsi que lutte contre des maladies parasitaires

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Généralités :

En 2001, les dirigeants du monde entier ont adopté les Objectifs du Milléna

pour améliorer l'état du monde en 2015. Un des objectifs est une réduction du nombre de cas de paludisme de 50% en 2015 (OMD 6). Ce but est en voie d'être atteint. Le paludisme a, en effet, régressé au cours des dernières années dans toutes les régi du monde sous l'effet de l'amélioration conjointe de la lutte anti-vectorielle (distribution massive de moustiquaires imprégnées d'insecticides à longue durée d'action [MILDA] et plus domiciliaire d'insecticides), du diagnostic rapide des infections plasmodiales (tests de diagnostic rapide [TDR]), des traitements efficaces (combinaisons à base de dérivés d'artémisinine [CATs], des traitements présomptifs intermittents [TPI] des femmes enceintes et des enfants) et des changements sociaux (urbanisation, développe

176].

En 5 octobre 2015, la chinoise Youyou Tu a été récompensée par le prix Nobel pour ses travaux sur le paludisme, ainsi que deux autres scientifiques, tous travaillant sur la

parasitaires.

En 2001, les dirigeants du monde entier ont adopté les Objectifs du Millénaire pour le pour améliorer l'état du monde en 2015. Un des objectifs est une réduction du nombre de cas de paludisme de 50% en 2015 (OMD 6). Ce but est en voie d'être atteint. Le paludisme a, en effet, régressé au cours des dernières années dans toutes les régions vectorielle (distribution massive de moustiquaires imprégnées d'insecticides à longue durée d'action [MILDA] et plus ic rapide des infections plasmodiales (tests de diagnostic rapide [TDR]), des traitements efficaces (combinaisons à base de dérivés d'artémisinine [CATs], des traitements présomptifs intermittents [TPI] des ts sociaux (urbanisation, développement

a été récompensée par le prix Nobel 2015 autres scientifiques, tous travaillant sur la

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Tu Youyou, 84 ans, qui était depuis longtemps pressentie pour recevoir le prix, a découvert un traitement particulièrement efficace contre le paludisme grâce à un extrait de la plante armoise annuelle (Artemisia annua). L’Artémisinine est le traitement le plus efficace et sûr contre le paludisme, maladie qui touche près de 200 millions de personnes par an, et en tue plus de 500 000, principalement des enfants africains. Elle est la douzième femme et la première Chinoise à être récompensée par le Nobel de médecine depuis la création du prix, en 1901. Youyou Tu est une belle histoire et le symbole d’un mélange réussi entre médecine ancestrale et médecine moderne. Si on parle du paludisme, il y a eu des avancées : plusieurs molécules ont été testées sur le terrain et se sont montrées efficaces. Simplement, leur principal problème c’est le développement de résistances rapides chez le parasite, qui font que leur molécule finit par ne plus soigner. La petite révolution de l’artémisinine, c’est qu’elle apporte une nouvelle molécule particulièrement efficace et qui pendant longtemps n’a pas vu de résistances pour deux raisons : elle tue très vite les parasites et elle est utilisée en combinaison avec d’autres drogues antiparasitaires, ce qui fait qu’il n’y a pas de risque que le parasite développe en même temps une résistance contre toutes les molécules. La molécule a pu être employée seule au Cambodge, on y voit le développement de résistances, mais ailleurs elle continue de fonctionner très efficacement [177, 178].

P. knowlesi peut progresser rapidement à une maladie grave, de ce fait, il doit être traité comme le P. falciparum si l'identification des espèces est basée sur l'examen microscopique seul ou en cas d’une co-infection avec P. falciparum. P. knowlesi est sensible aux nombreux autres traitements.

En général, les médicaments antipaludiques doivent être introduits une fois les résultats du frottis sanguin sont positifs et l'espèce peut être identifiée ou confirmée plus tard. Dans les infections à P. knowlesi, les médicaments doivent être commencés immédiatement et aussi important que dans l'infection à P. falciparum en raison de la nature potentiellement grave des deux infections et à cause de la difficulté de distinguer entre ces deux espèces ou de déterminer s’il ya une infection mixte sur la base de l'examen microscopique seul.

Deux espèces de Plasmodium, vivax et ovale, peuvent devenir dormantes et donnent les hypnozoïtes du foie qui peuvent provoquer une ou plusieurs rechutes de la maladie,

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pouvant aller jusqu’à des années après l'infection initiale si la Primaquine n’est pas donnée pour éradiquer cette forme du parasite. Après le traitement primaire, les patients Malaisiens ont été traités par la Primaquine pour éliminer les hypnozoïtes possibles, cependant, il n’existe aucune preuve soit chez les macaques ou dans les cas des infections humaines sur l’existence des rechutes ou de ces hypnozoïtes dans l'infection à P. knowlesi. Par conséquent, il semble peu probable que l'administration de la primaquine est bénéfique ou nécessaire dans l’infection au P. knowlesi [158].