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ADN et cycle cellulaire

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Academic year: 2022

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ADN et cycle cellulaire

Figure 1 : répartition de la quantité d’ADN dans une population cellulaire en croissance, obtenue par cytométrie de flux. Marquage à l’iodure de propidium.

L'iodure de propidium (IP ou PI pour propidium iodide) est un agent intercalant des acides nucléiques (l'ADN ou l'ARN) et une molécule fluorescente. Il se lie aux bases de l'ADN avec peu ou pas de spécificité de séquence et suivant une stœchiométrie d'une molécule pour 4-5 paires de bases.

Exposition des cellules pendant 30 minute à la BrDU (bromodesoxyuridine).

La Bromodéoxyuridine (5-bromo-2'-deoxyuridine, ou BrdU) est un nucléoside synthétique analogue de la thymidine. La BrdU peut être incorporée dans l'ADN nouvellement synthétisé des cellules en cours de réplication à la place de la

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thymidine. Des anticorps spécifiques peuvent ensuite être utilisés afin de détecter la BrdU incorporée.

L'hydroxyurée pour bloquer en phase S et la colchicine pour bloquer en G2/M.

Par contre pour bloquer en G1/S, le mieux est une déprivation en sérum, qui augmentera la population cellulaire en G1.

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