ZZ domain of dystrophin and utrophin: topology and mapping of a beta-dystroglycan interaction site.

(1)

HAL Id: inserm-00144563

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Submitted on 2 Jul 2007

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ZZ domain of dystrophin and utrophin: topology and

mapping of a beta-dystroglycan interaction site.

Karim Hnia, Dora Zouiten, Sonia Cantel, Delphine Chazalette, Gérald Hugon,

Jean-Alain Fehrentz, Ahmed Masmoudi, Ann Diment, Janice Bramham,

Dominique Mornet, et al.

To cite this version:

Karim Hnia, Dora Zouiten, Sonia Cantel, Delphine Chazalette, Gérald Hugon, et al.. ZZ domain of dystrophin and utrophin: topology and mapping of a beta-dystroglycan interaction site.. Biochemical Journal, Portland Press, 2007, 401 (3), pp.667-77. �10.1042/BJ20061051�. �inserm-00144563�

(2)

Figure 1 Hnia et al

Dys 3311…AKCNICKECPIIGFRYRSLKHFNYDICQSCFF…3342

|||||||||||:|||||||||||||:||||||

Utr 3068…AKCNICKECPIVGFRYRSLKHFNYDVCQSCFF…3099

CNICKEC NICKECP 1_ICKECPI 2_CKECPII 4_KECPIIG 6_ECPIIGF AKCNICK KCNICKE 12_IIGFRYR 14_IGFRYRS 16_GFRYRSL 17_FRYRSLK 18_RYRSLKH 19_YRSLKHF 8_CPIIGFR 10_PIIGFRY 22_LKHFNYD 23_KHFNYDI 25_HFNYDIC 27_FNYDICQ 29_NYDICQS 31_YDICQSC 20_RSLKHFN 21_SLKHFNY 33_DICQSCF 35_ICQSCFF 3_CKECPIV 24 5_KECPIVG 7_ECPIVGF 9_CPIVGFR 11_PIVGFRY 13_IVGFRYR 15_VGFRYRS KHFNYDV 26_HFNYDVC 28_FNYDVCQ 30_NYDVCQS 32_YDVCQSC 34_DVCQSCF 36_VCQSCFF

(3)

(4)

(5)

Figure 3 Hnia et al

1. MVWLPVLHRVAAAETAKHQA 2. VWLPVLHRVAAAETAKHQAK 3. WLPVLHRVAAAETAKHQAKC 4. LPVLHRVAAAETAKHQAKCN 5. PVLHRVAAAETAKHQAKCNI 6. VLHRVAAAETAKHQAKCNIC 7. LHRVAAAETAKHQAKCNICK 8. HRVAAAETAKHQAKCNICKE 9. RVAAAETAKHQAKCNICKEC 10. VAAAETAKHQAKCNICKECP 11. AAAETAKHQAKCNICKECPI 12. AAETAKHQAKCNICKECPIV 13. AETAKHQAKCNICKECPIVG 14. ETAKHQAKCNICKECPIVGF 15. TAKHQAKCNICKECPIVGFR 16. AKHQAKCNICKECPIVGFRY 17. KHQAKCNICKECPIVGFRYR 18. HQAKCNICKECPIVGFRYRS 19. QAKCNICKECPIVGFRYRSL 20. AKCNICKECPIVGFRYRSLK 21. KCNICKECPIVGFRYRSLKH 22. CNICKECPIVGFRYRSLKHF 23. NICKECPIVGFRYRSLKHFN 24. ICKECPIVGFRYRSLKHFNY 25. CKECPIVGFRYRSLKHFNYD KECPIVGFRYRSLKHFNYDV 26. ECPIVGFRYRSLKHFNYDVC 27. CPIVGFRYRSLKHFNYDVCQ 28. PIVGFRYRSLKHFNYDVCQS 29. IVGFRYRSLKHFNYDVCQSC 30. VGFRYRSLKHFNYDVCQSCF 31. GFRYRSLKHFNYDVCQSCFF 32. FRYRSLKHFNYDVCQSCFFS 33. RYRSLKHFNYDVCQSCFFSG 34. YRSLKHFNYDVCQSCFFSGR 35. RSLKHFNYDVCQSCFFSGRT 36. SLKHFNYDVCQSCFFSGRTA 37. LKHFNYDVCQSCFFSGRTAK 38. KHFNYDVCQSCFFSGRTAKG 39. HFNYDVCQSCFFSGRTAKGH 40. FNYDVCQSCFFSGRTAKGHK 41. NYDVCQSCFFSGRTAKGHKL 42. YDVCQSCFFSGRTAKGHKLH 43. DVCQSCFFSGRTAKGHKLHY 44. VCQSCFFSGRTAKGHKLHYP 45. CQSCFFSGRTAKGHKLHYPM 46. 47. 48. 49. 50.

A.

B.

A K N I C K E C S Q C V D Y N F C F F Zn E Q T S Zn A K H C P I V G F R Y R S L K H G

(6)

Figure 4 Hnia et al

1 2 6 8 1012141617181920212223252729313336 0 0,05 0,1 0,15 0,2 0,25 0,3 0,35 0,4 0,45

_A1:

_13D2

_A2:

_12D7 0 0,05 0,1 0,15 0,2 0,25 0,3 0,35 0,4 0,45 1 2 6 8 1012141617 181920 21222325 272931 3336 1 2 6 8 1012141617181920212223252729313336 0 0,05 0,1 0,15 0,2 0,25 0,3 0,35 0,4

0,45

_A3:

_4G3

_A4:

_14A4

1 2 6 8 10121416171819202122232527293133 36 0 0,05 0,1 0,15 0,2 0,25 0,3 0,35 0,4 0,45 14A4 24 33 35 0 0,05 0,1 0,15 0,2 0,25 0,3 0,35 0,4 0,45 34 36 2526 303132 23 272829

B

D3326-3332 U3083-3089 D3315-3321 U3072-3078

A

Abs (405 nm) Abs (405 nm) Abs (405 nm) Abs (405 nm) Abs (405 nm) D3335-3341 D3335-3341 12D7 13D2 14A4

Peptide 1 Peptide 19 Peptide 33

C

_*

*

A K N I C K E C S Q C I D Y N F C F F Zn E Q T S Zn A K H C P I I G F R Y R S L K H G

(7)

Figure 5AB Hnia et al

13D2 A1 12D7 A2 14A4 A3 4G3 A4

13D2 B1 12D7 B2 14A4 B3 4G3 B4

A

B

Torpedo m. Torpedo m. Torpedo m.

Rabbit Rabbit Rabbit

Pep19+13D2 B1- Pep1+12D7 B2- Pep33+14A4 B3

(8)

-Figure 5CD Hnia et al

C

-203 -120 -94 -43 Pep19+ Pep19 -13D2 400 kDa -203 -120 -94 -43 Pep1+ Pep1 -12D7 400 kDa -203 -120 -94 -43 Pep33+ Pep33 -14A4 170 kDa -203 -120 -94 -43 4G3 C-ter-Dys (H4) -203 -120 -94 -43 400 kDa C-ter-Utr (K7) -203 -120 -94 -43 12D7 -203 -120 -94 -43 14A4 -203 -120 -94 -43

D

Rabbit skeletal muscle

(9)

Figure 6 Hnia et al

Pep 19 + β-DG+ 13D2 β-DG + 43DAG Pep 19 + 13D2 0 0,1 0,2 0,3 0,4 0,5 0,6 0,7 0,8 1 2 3 4 5 6 7 8 9 0,5 Abs (405 nm) Pep 19 + 43DAG Pep 19 + β-DG + 43DAG

A

B

Pep19 + 13D2 Pep19 + [Ht] +13D2 Abs (405 nm) 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 0 0,1 0,2 0,3 0,4 0,5 0,6 0,7 0,8

∗

_∗

∗

β-DG + [Ht] + 43DAG

∗

Pep19 + 43DAG [β-dystroglycan] μg/ml [dystroglycan extract, Ht] μg/ml

(10)

Figure 7 Hnia et al

A1) C-ter-β-DG A3) O/L DYS

Pep19- Pep19+ A2) C-ter-DYS

A

B

-203 -120 -94 -43 -203 -120 -94 -43

B1) C-ter-β-DG B2) C-ter-UTR B3) O/L UTR

Pep19- Pep19+ -203 -120 -94 -43 -203 -120 -94 -43 β-DG DYS β-DG UTR 0 0,1 0,2 0,3 0,4 0,5 0,6 0,7 0,8 Abs (405 nm) DYS UTR

A4) O/L fraction DYS/UTR 0 0,1 0,2 0,3 0,4 0,5 0,6 0,7 0,8 Abs (405 nm) DYS UTR B4) O/L fraction UTR/DYS

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