Oeuf d'ascaris Suum : Approches structurales et environnementales

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Submitted on 29 Mar 2018

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Oeuf d’ascaris Suum : Approches structurales et environnementales

Sandrine Capizzi

To cite this version:

Sandrine Capizzi. Oeuf d’ascaris Suum : Approches structurales et environnementales. Médecine humaine et pathologie. Université Henri Poincaré - Nancy 1, 2000. Français. �NNT : 2000NAN12002�.

�tel-01747560�

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Sujet:

Titulaire du Diplôme d'Etudes Apg €S opdies Mention Chimie et MicFobiolo

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ae l'Eau

pour obtenir le titr~ de

THESE

MEMBRES DU JURY

Sandrine CARIZZI

Présentée et soutenue publiquement

ECOLE DOCTORALE "BIOLOGIE ET SANTE"

DOCTEUR DE L'UNIVERSITE HENRI POINCARE - NANCY 1

Mention Chimie et Microbiologie de l'Eau

Oeuf d'Ascaris suum : Approches structurales et environnementales

Juges: Dr KARPEL (Chargée de recherche, ESIP, Poitiers) Pr BONALY (Faculté de Pharmacie, Nancy)

Pr SCHWARTZBROD (Faculté de Pharmacie, Nancy) Rapporteurs: Dr HARF-MONTEIL (Faculté de Pharmacie, IIkirch)

Pr BOUCHET (Faculté de Pharmacie, Reims)

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Biochimie de la couche externe de l'œuf d'Ascaris

De plus, la surface mamelonnée semble avoir été altérée, la couche externe est déchiquetée, alors que les œufs observés avant la réaction ne sont pas abîmés. L'alcool ou l'acide ont dû détériorer la couche externe, soulignant la fragilité des œufs provenant de dissection d'utérus.

5.1.4 Coloration à l'Acide Périodique de Schiff - bleu d'Alcian

La coloration réalisée au bleu d'Alcian conjuguée au PAS (Acide Périodique de Schiff) a pour but de colorer les noyaux en noir et de mettre en évidence la présence ou l'absence de polysaccharides. Le protocole est basé sur la méthode de Mowry (Chevreau et al., 1977). La technique au bleu d'Alcian permet de visualiser les mucopolysaccharides acides et la réaction avec l'Acide Périodique de Schiff permet de colorer les mucopolysaccharides neutres (Revel & Hay, 1963). Les observations attendues sont:

• une coloration bleue témoignant:

de la présence de mucopolysaccharides acides (test au bleu d'Alcian positif) ou de l'absence de polysaccharides (test PAS négatif)

• une coloration rouge signant la présence de mucopolysaccharides neutres (test PAS positif)

L'examen microscopique réalisé en triplicata (cf 4.1.2.2.4), sur des suspensions d'œufs permet de visualiser des œufs entourés d'une structure de nature gélatineuse colorée en bleu vif. La coloration bleue indique la présence de mucopolysaccharides acides ou une absence de polysaccharides, or la présence de polysaccharides ayant été démontrée avec la coloration à la Fuchsine basique, nous pouvons conclure à la présence de mucopolysaccharides acides. Nous n'observons pas de coloration rose-rouge, d'où une absence de polysaccharides neutres.

De plus, nous remarquons une déstructuration de la couche externe qui est lésée, altérée et déchirée alors qu'elle était intacte avant la coloration. La structure mamelonnée a disparu laissant place à des morceaux de couche externe plus ou moins accrochés à la coque. Nous avons une modification apparente de la couche externe, il semblerait que la structure de la couche externe ait subi des altérations provoquées par l'Acide Périodique. En effet, cette couche transparente serait très sensible à l'action de l'acide.

Avec cette technique, Volpi et al. (1995) caractérisent les protéoglycannes sulfatés isolés du mucus entourant les embryons d'un mollusque. Les mucocytes donnent une coloration positive à l'Acide Périodique de Schiff et au bleu d'Alcian à pH 0,5 et 2,5 confirmant la présence de polysaccharides sulfatés dans ces cellules.

5.1.5 Interprétation de l'ensemble des colorations

Sur les 3 colorations testées, le test de coloration à la Fuchsine basique révèle une couche externe de l'œuf d'Ascaris suum constituée de polysaccharides. La coloration au bleu d'Alcian témoigne de la présence de mucopolysaccharides à caractère acide, qui est confirmée par la coloration au bleu d'Alcian associée à la coloration avec le PAS. Les résultats des colorations sont regroupés dans le tableau n029.

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