EVALUATION DE LA QUALITE MICROBIOLOGIQUE DU MATERIEL MEDICO-TECHNIQUE, DES SURFACES ET LOCAUX DANS LE SERVICE DE NEONATOLOGIE DU CHUD -O/P EN 2018

(1)

REPUBLIQUE DU BENIN (RB)

**********

MINISTERE DE L’ENSEIGNEMENT SUPERIEUR ET DE LA RECHERCHE SCIENTIFIQUE (MESRS)

**********

UNIVERSITE D’ABOMEY CALAVI (UAC)

*************

ECOLE POLYTECHNIQUE D’ABOMEY CALAVI (EPAC)

****************

CENTRE AUTONOME DE PERFECTIONNEMENT (CAP)

*********************

Option: BIO-HYGIENE ET SECURITE SANITAIRE E N MILIEU DE SOINS (BSS)

RAPPORT DE STAGE DE FIN DE FORMATION

POUR L’OBTENTION DU DIPLOME DE LICENCE PROFESSIONNELLE THEME:

Présenté par:

CHALLA ANASTHASIE

Sous la direction de : Tuteurs :

Soutenu : le 27 / 11/ 2018 Jury :

Président : Pr BANKOLE Honoré S.

Rapporteur : Dr. DEGBEY Cyriaque C.

Examinateur : Dr. AGBANKPE Gérold

Année Académique : 2017 – 2018 1^ère Promotion

EVALUATION DE LA QUALITE MICROBIOLOGIQUE DU MATERIEL MEDICO-TECHNIQUE, DES SURFACES ET LOCAUX DANS LE

SERVICE DE NEONATOLOGIE

DU CHUD -O/P EN 2018

Dr DEGBEY C. Cyriaque

Maître Assistant de Microbiologie et d’Hygiène Hospitalière IRSP -UAC

Dr. DOSSOU Ange

Médecin Microbiologiste

&

M. DEHOUMON François B.

Biologiste médicale, Surveillant du laboratoire du CHUD-O/P

(2)

REPUBLIQUE DU BENIN (RB)

**********

MINISTERE DE L’ENSEIGNEMENT SUPERIEUR ET DE LA RECHERCHE SCIENTIFIQUE (MESRS)

**********

UNIVERSITE D’ABOMEY-CALAVI (UAC)

**********

ECOLE POLYTECHNIQUE D’ABOMEY-CALAVI (EPAC)

**********

CENTRE AUTONOME DE PERFECTIONNEMENT (CAP)

Option : BIO-HYGIENE ET SECURITE SANITAIRE EN MILIEU DE SOINS (BSS)

DIRECTEUR de l’ EPAC

Professeur SOUMANOU Mohamed

DIRECTEUR ADJOINT de l’EPAC

Docteur AHOUANNOU Clément

CHEF CAP

Professeur AWANTO Christophe

(3)

SOMMAIRE

LISTE DES ENSEIGNANTS AYANT INTERVENUS DANS CETTE FORMATION ... ii

DEDICACE ... iv

REMERCIEMENTS ... v

HOMMAGES : ... vii

RESUME ... viii

ABSTRACT ... ix

LISTE DES SIGLES, ABREVIATIONS ET ACRONYMES ... x

LISTE DES TABLEAUX ... xi

INTRODUCTION ... 1

I- GENERALITES ... 3

II- CADRES ET METHODES ... 10

III-RESULTATS ... 19

IV-DISCUSSION ... 29

CONCLUSION ... 32

SUGESTIONS ... 33

REFERENCES ... 35

ANNEXES ... 38

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LISTE DES ENSEIGNANTS AYANT INTERVENUS DANS CETTE FORMATION

N° NOMS et PRENOMS MATIERES ENSEIGNEES

1 Professeur BANKOLE S.

Honoré

Bactériologie médicale et TP Bactériologie médicale 2 Professeur AHOYO Angèle

Théodora

Microbiologie médicale, TP microbiologie médicale, Santé publique et Hygiène hospitalière

3 Dr AKOWANOU D. Christian Physique

4 Professeur AKPOVI Casimir Biologie cellulaire, Physiologie cellulaire, Biochimie métabolique des

lipides et Enzymologie

5 Dr ALAMOU Eric Bio-statistique

6 Professeur ALITONOU Guy Chimie organique

7 Dr ATCHADE Pascal Parasitologie médicale, appliquée et Mycologie

8 Dr DOUGNON T. Victorien Infections communautaires, Ecosystème- Pollution, Méthodologie

de la recherche, Hygiène du milieu et gestion des déchets

9 Dr FAH Lauris Biochimie métabolique

10 Dr KOUDOKPO Ornel et Mr FANOU Brice Armand

TP microbiologie médicale et Hygiène hospitalière

11 Mr HOUNSOSSOU Hubert Anatomie générale

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12 Dr KLOTOE Jean Robert Cytologie sanguine et Hémostase

13 Dr LAFIA Edgard Immunologie générale

14 Dr SEGBO Julien Biochimie structurale, Biologie moléculaire et Biologie moléculaire

appliquée

15 Dr TCHOBO Fidèle Paul Chimie générale

16 Dr YEHOUENOU Boniface Bodounrin

Microbiologie générale

17 Dr DEGBEY Comlan Cyriaque Lutte contre les bactéries multirésistants, Infections associées

aux soins et Epidémiologie 18 Professeur AYELO Paul Physiologie, Psychologie et

Ergonomie du travail 19 Mr DESSOUASSI Noel Biophysique des solutions 20 Professeur HOUNNOU

Hyppolite

Mathématiques

21 Mr KOUNASSO Gabriel Informatique médicale

22 Dr YOVO Kokou Paulin Pharmacologie et Toxicologie 23 Dr NOUDEHOUENOU Marc Introduction à l’évaluation du risque

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DEDICACE

A

Tous ceux qui œuvrent pour la promotion de la qualité du système sanitaire au Bénin.

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REMERCIEMENTS

Avant tout propos nous remercions DIEU, le Père Tout Puissant pour le souffle de vie et pour sa protection quotidienne, car sans lui nous ne sommes rien.

Par ailleurs, durant cette formation nous avons eu l’honneur et le privilège de rencontrer des personnes exceptionnelles dont la sollicitude, le dévouement et la disponibilité nous laissent muette d’admiration. Ce travail n’aurait pu aboutir sans leurs soutiens et aides car de diverses manières, ils ont contribué efficacement à la réalisation de celui-ci. C’est alors le lieu de leur exprimer toutes nos gratitudes.

Je remercie donc très sincèrement :

- Dr DEGBEY C. Cyriaque, Enseignant chercheur à l’IRSP/ UAC, Chef de Service Clinique Universitaire d’Hygiène Hospitalière du CNHU-HKM qui a accepté malgré ses multiples occupations diriger ce travail, et dont la disponibilité, les conseils et orientations ont permis l’amélioration de ce travail.

- Dr KEKE René Kpèmahouton, Médecin microbiologiste, chef service du Laboratoire du CHUD-O/P.

- Dr DOSSOU Ange, Médecin microbiologiste, assistant du chef service du laboratoire CHUD-O/P, tuteur de ce travail.

- Dr KOUDJO T. Casimir, Médecin infectiologue, chef service du CIPEC O/P.

- Mr DEHOUMON François, Biologiste médical, Surveillant du Laboratoire du CHUD-O/P, tuteur de ce travail.

- Mes géniteurs : Mr CHALLA Alexandre et YAI Juliette, très chers parents recevez ce travail comme l’un des fruits de cette minuscule graine que vous aviez semés et qu’inlassablement vous ne cessez d’entretenir. Puisse l’éternel vous accorder santé et longue vie.

- Mon très cher époux, Professeur FANGNON Bernard, toi qui par ta passion aux études m’a contaminée. Pour les nombreux sacrifices, soutien de

(8)

tout genre, ta compréhension et surtout pour la patience, reçois par ce travail un hommage mérité et encore une fois le témoignage de mon amour.

- Mes chers enfants : Précieux Constant, Jean Fritzell et Housen Gosner, pour le soutien moral et les sacrifices consentis lors de mes absences.

- Mes frères et sœurs : Christian, Ghislain, Hervé, Brice, Sylvie et Florence, vos mots d’encouragement ont été d’une grande importance.

- Tout le personnel enseignant et administratif de l’EPAC et du CAP.

- Nos chers conseillés dont les conseils pratiques ont été d’une grande importance: Professeur QUENUM François-José, Dr FAH Lauris, Mr KOUTCHIKA Eric, Mme ASSOGBA Rolande et Mr TODEDJI Judicael.

- Le Directeur par intérim du CHUD-O/P et le CSAE pour avoir accepté que ce travail se réalise dans cet hôpital.

- Tout le personnel du service de néonatologie pour la promptitude, compréhension de l’importance de ce travail et la disponibilité à répondre aux différentes questions.

- Tout le personnel du Laboratoire du CHUD-O/P pour l’accompagnement, et en particulier Mme GNIMASSOU Rosine et Mlle SALAOU Rafath-Lay personnel de la section Bactériologie pour le partage d’expériences et les conseils pratiques.

- Tout le personnel du CS Houinmè, en particulier Mr BOTON Rolland, Mme ALINGO Marconie et Mme YAROU Aminatou loin d’être collègues, vous êtes pour moi comme respectivement frère et sœurs.

- Tous les collègues de la 1^ère promotion de Bio-hygiénistes pour les temps forts d’émotion et de stress passés ensemble. Je saisis cette occasion pour nous souhaiter plein succès dans nos nouvelles fonctions en vue de l’amélioration qualitative des soins administrés aux patients et de l’environnement hospitalier.

- Tous ceux dont les noms ne sont pas cités nommément ici et qui ont contribué efficacement à ce résultat.

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HOMMAGES :

 A son Excellence, le Président du Jury

C’est un grand honneur que vous nous faites en acceptant de présider le jury de notre soutenance.

Nous vous rassurons que nous tiendrons compte de vos pertinentes remarques pour améliorer la qualité de ce travail. Veuillez recevoir, l’expression de nos respectueux hommages et soyez comblé.

 Aux Honorables Membres du Jury

Nous vous sommes reconnaissantes de l’honneur que vous nous faites en acceptant de siéger dans ce jury et de juger la qualité de ce travail. Vos remarques et suggestions contribueront à coup sure à améliorer la qualité scientifique de ce travail. Veuillez trouver ici l’expression de notre gratitude et de nos sincères considérations.

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RESUME

L’hygiène hospitalière est un ensemble de mesures préventives indispensables pour assurer la qualité des soins dans les structures sanitaires.

Le présent travail a pour objectif d’évaluer la qualité microbiologique du matériel médico-technique, des surfaces et locaux dans le service de néonatologie du CHUD-O/P et s’est déroulé du 14 avril au 31août 2018. Nous avons mené une étude transversale et descriptive qui a porté sur 130 prélèvements réalisés par écouvillonnage répartis en quatre lots : Lot 1 (Matériel Médico-technique); Lot 2 (surface); Lot 3 (Locaux) et Lot 4 (mains du personnel).

Les résultats ont montré que 105 ont donné une culture positive, soit 80,76%

(risque de contamination élevé). Le nombre total de micro-organismes identifiés est de trois cent soixante neuf (369) toutes espèces confondues.

Les germes isolés sont : Staphylococcus aureus (21,95%), Staphylococcus spp (20,32%), Klebsiella pneumoniae (18,97%), Escherichia coli (17,07%), Candida spp (12,73%) et Candida albicans (8,94%).

La majorité des bactéries identifiées présente de résistance aux antibiotiques couramment utilisés.

Il est utile d’organiser dans un bref délai des séances de bio-nettoyage et de désinfection de haut niveau afin d’offrir les soins dans les conditions d’hygiène recommandées par l’OMS.

Mots clés : Qualité, microbiologique, Néonatologie, Résistances, Antibiotiques.

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ABSTRACT

Hospital hygiene is a set of preventive measures essential to ensure the quality of

care in health facilities.

The present work aims to evaluate the microbiological quality of the medical- technical equipment, surfaces and premises in the CHUD-O / P neonatology department and took place from April 14 to August 31, 2018. We conducted a study cross-sectional and descriptive analysis of 130 samples taken by swabs divided into four lots: Lot 1 (Medical-technical equipment); Lot 2 (surface); Lot 3

(Premises) and Lot 4 (staff hands).

The results showed that 105 gave a positive culture, ie 80.76% (high risk of contamination). The total number of identified micro-organisms is three hundred

and sixty-nine (369) all species combined.

The isolated organisms are: Staphylococcus aureus (21.95%), Staphylococcus spp (20.32%), Klebsiella pneumoniae (18.97%), Escherichia coli (17.07%), Candida spp (12.73%) and Candida albicans (8.94%).

Most of the bacteria identified have resistance to commonly used antibiotics.

It is useful to organize high-level bio-cleaning and disinfection in a short time to provide the care in the hygienic conditions recommended by WHO.

Key words: Quality, microbiological, Neonatology, Resistances, Antibiotics.

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LISTE DES SIGLES ,ABREVIATIONS ET ACRONYMES

% : Pourcentage

°C : Degré Celcius µg : Microgramme

ADN : Acide Désoxyribonucléique

CAP : Centre Autonome de Perfectionnement

CCLIN : Centre de Coordination de Lutte contre les Infections

CHUD-O/P : Centre Hospitalier Universitaire Départemental Ouémé/Plateau CIPEC : Centre d’Information de Prospective et de Conseil

CLIN : Comité de Lutte contre les Infections Nosocomiales CM : Centimètre

CS : Centre de Santé

DDS : Directeur Départemental de la Santé Dnase : Désoxyribonucléase

EMB : Eosine Bleue Méthylène

EPAC : Ecole Polytechnique d’Abomey Calavi G : Gramme

HH : Hygiène Hospitalière

IAS : Infection Associée aux Soins IN : Infection Nosocomiale L : Litre

MH : Mueller Hinton ml : Millilitre

MS : Ministère de la Santé NaCl : Chlorure de Sodium

OMS : Organisation Mondiale de la Santé QSP : Quantité Suffisante Pour

R : Résistant S : Sensible

UAC : Université d’Abomey Calavi

ATB : Antibiotique

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LISTE DES TABLEAUX

Tableau I: Nombre de prélèvements réalisés par écouvillonnage et

par lot dans le service de néonatologie.

13

Tableau II: Qualité microbiologique du matériel médico- technique 19 Tableau III: Qualité microbiologique des surfaces 20 Tableau IV: Qualité microbiologique des locaux 21 Tableau V: Qualité microbiologique des mains du personnel 22 Tableau VI: Qualité microbiologique des sur-blouses imposées aux

visiteurs des bébés.

23

Tableau VII : Fréquences des germes identifiés en fonction de leur niveau de résistance aux antibiotiques

24

Tableau VIII : Liste des disques d’antibiotiques utilisés pour l’antibiogramme des Cocci Gram positif.

25

Tableau IX : Liste des disques d’antibiotiques utilisés pour l’antibiogramme des Bacilles Gram négatif.

26

Tableau X: Pourcentage de sensibilité et de résistance des germes identifiés antibiotiques.

27

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INTRODUCTION

Dans les structures de santé, de nombreuses sources de germes infectieux sont responsables d’infections dont la fréquence varie en fonction de la nature et de la structure de l’hôpital ou centre de santé d’une part, de l’activité des unités d’hospitalisation et de la qualité de l’équipe de soins d’autre part [1]. Les usagers des établissements de soins côtoient un grand nombre de microbes qui sont pour la plupart présents sur les surfaces, les sols, dans les locaux, et dans l’air.

Chaque année dans le monde, le traitement et la prise en charge des centaines de millions de patients sont perturbées par les infections contractées au cours des soins et plus de 1,4 millions de personnes souffrent des complications infectieuses acquises à l’hôpital [2]. La prévention du risque infectieux par les professionnels de santé est une partie intégrante de la lutte contre les IAS.

L’élaboration d’un programme de prévention et la mise en place des mesures spécifiques pour protéger tous les usagers des établissements de soins doit prendre en compte l’ensemble des risques de transmission des agents infectieux à travers son volet hygiène du milieu hospitalier et des mains du personnel par exemple. Le risque infectieux professionnel en milieu de soin est donc omniprésent [3].

Les infections associées aux soins (IAS) sont reconnues aujourd’hui comme un problème de santé publique de par leur fréquence, leur coût et leur gravité. Les IAS sont connues dans le monde entier et touchent aussi bien les pays développés que les pays sous développés. Les services les plus touchés par ordre croissant sont : la réanimation, la chirurgie, la médecine, la néonatologie, la maternité [4]. Ainsi, le Bénin à l’instar de tous les pays du monde entier s’est approprié aussi cette lutte contre les IAS, en créant par arrêté ministériel 2006/N°6501/MS/DC/SGM/ CNHU-HKM du 06/07/2006, le premier service d’hygiène hospitalière. Il a été également mis sur pied le Comité de Lutte contre

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les Infections Nosocomiales (CLIN) dans les structures sanitaires de grande taille et les Centres de Coordination de la Lutte contre les Infections Nosocomiales (CCLIN) dans les trois régions du pays (zone nord, zone centre et zone sud)[4]. Malheureusement le CLIN et le CCLIN ne sont véritablement pas opérationnels dans le département de l’Ouémé Il faut rappeler que l’Institut de Veille Sanitaire (InVS) existait depuis 1999 par décret n° 99-1034 du 6 décembre 1999[4]. Aussi il faut signaler que les prévalences des IAS détectées varient de 10,52% à 33,8% [3]. L’hôpital institué pour soigner et guérir devient ainsi une source de contamination de l’homme sain et de complication de l’affection initiale du malade induisant une hospitalisation prolongée, un traitement plus coûteux, des défaillances multi viscérales et parfois le décès. La présente étude intitulée : «Evaluation de la qualité microbiologique du matériel médico-technique, des surfaces et locaux dans le service de néonatologie du CHUD-O/P en 2018» a pour objectif général d’étudier le profil microbiologique du matériel médico-technique des surfaces et locaux dans ce service.

De façon spécifique, il s’est agit de:

 Identifier les bactéries présentes sur le matériel médico-technique, les surfaces et locaux;

 Déterminer le profil de résistance de ces bactéries aux antibiotiques,

 Proposer des mesures pour la réduction des germes dans ce service.

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I- GENERALITES

1-1. Définition de quelques concepts

 Flore de la main

L’écosystème de la main comprend la flore résidente et la flore transitoire.

Encore appelée flore superficielle [3].

 Flore résidente

Ensemble des micro-organismes vivant naturellement sur la couche superficielle de l'épiderme. Les micro-organismes sont profondément enchâssés et adhérents à la surface de la peau. Les espèces bactériennes les plus représentatives sont les staphylocoques à coagulase négative, Staphylococcus aureus et les corynébactéries [5].

 Flore transitoire

Il s’agit de l’ensemble des micro-organismes de passage, acquis au contact des personnes, des surfaces ou objets touchés au cours des gestes quotidiens. Elle est surtout importante au niveau des parties découvertes notamment les mains. Les espèces bactériennes les plus représentatives sont les entérobactéries, Pseudomonas spp [5].

 Hygiène

C’est l’ensemble des principes et pratiques tendant à préserver, à améliorer l’état de santé. C’est aussi la partie de la médecine qui étudie les moyens propres à conserver la santé en permettant l’accompagnement normal des fonctions de l’organisme et en harmonisant les rapports entre l’homme et les milieux dans les quels il vit afin d’éliminer notamment les influences nocives que peuvent éventuellement comporter ces milieux [4] ou une partie de la médecine qui traite des milieux où l’homme est appelé à vivre, de la manière de les modifier dans le sens le plus favorable à son développement. C’est aussi l’ensemble des règles et des pratiques relatives à la conversation de la santé [1].

 Hygiène des Mains

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L’hygiène des mains concerne toutes actions visant à réduire ou inhiber la croissance de la flore résidentielle des mains, généralement par friction des mains avec un produit hydro-alcoolique ou lavage des mains à l’eau et au savon doux [4].

 Hygiène hospitalière

L’hygiène hospitalière au sens strict est la prévention des infections hospitalières et au sens large est la prévention de toutes les nuisances en milieu hospitalier.

Elle a pour but de prévenir les infections associées aux soins afin de limiter la mortalité, la morbidité et les coûts hospitaliers [2]. Elle prend en compte l'ensemble des aspects clinques, microbiologiques et épidémiologiques des infections mais les également l’organisme des soins, la maintenance des équipements hospitaliers, la gestion de l’environnement, la protection du personnel. Elle constitue un indicateur de qualité des soins et de sécurité. Les règles de base sont :

- le lavage des mains : il a pour objectif de prévenir la transmission manu- portée et d’éliminer la flore transitoire ;

- le port de gants : il est nécessaire lors de tout contact avec un liquide biologique et n’exclut pas le lavage des avant et après leur utilisation ; - la tenue professionnelle : elle doit être changée quotidiennement et à

chaque fois qu’il qu’elle est souillée. Les ongles doivent être courts et sans vernis. Les mains et poignées doivent être nus et les cheveux longs attachés ;

- les isolements : les mesures d’isolement ont pour objectif d’établir des barrières à la transmission des micro-organismes ;

- l’élimination des déchets : pour prévenir le risque infection, les déchets hospitaliers doivent être éliminés selon certaines procédures ;

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- les antibiotiques : opération au résultat momentané permettant au niveau des tissus vivant dans la limite de leur tolérance, d’éliminer ou de tuer les micro-organismes et/ou d’inactiver les virus ;

- les désinfectants : la désinfection est une opération au résultat momentané permettant d’éliminer les micro-organismes et/ ou d’inactiver les virus portés par les milieux inertes (contrairement aux antiseptiques) [1].

 Transmission manu portée

Transmission d'un micro-organisme par l'intermédiaire des mains [3].

Importance du lavage des mains

La prise en compte de l’hygiène des mains est une étape très importante en milieu hospitalier.

* Avant manipulations

L’agent de santé doit éviter toute contamination des mains par les produits biologiques car elles sont vecteur essentiel du transfert des germes.

L’hygiène des mains avant toute manipulation reste donc plus que jamais d’actualité. Les plis palmaires, les espaces interdigitaux, les ongles constituent autant de gîtes bactériens moins aisément accessibles. La sudation importante de la paume crée aussi une humidité favorable à la multiplication des germes. Ainsi l’hygiène rigoureuse des mains avant la manipulation permet d’éliminer les souillures, les squames cutanées et de réduire le nombre de bactéries constituant la flore transitoire. [5,4,6].

* Après manipulations

La transmission interhumaine est la cause essentielle d’une large proportion d’infections. La prévention des infections dans les hôpitaux et centres de santé est un préalable indispensable à la qualité des soins. Il s’agit donc de

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réduire au maximum le risque de la transmission des maladies. La fréquence du contact des mains avec le milieu extérieur explique la possibilité de nombreuses sources de contamination. La transmission manu portée occupe une place primordiale dans les modes de transmission et comme on est dans un contexte de poly- variabilité des germes et d’indéniables infections nosocomiales ; le lavage des mains après les manipulations s’avère donc indispensable. En effet l’hygiène des mains après manipulations protègera non seulement l’agent de santé, mais aussi l’environnement hospitalier contre les infections d’origine manu portée [5, 4,6].

 Infection

C’est la pénétration dans un organisme vivant d’un agent infectieux étrange (bactérie, virus, champignon, parasite, …) capable de se multiplier et d’y induire des lésions pathologiques. L’infection peut s’accompagner de manifestations cliniques [7]. Ou une maladie infectieuse contractée durant ou à la suite d’un séjour dans un établissement de soins et qui était absente et non en incubation à l’admission du patient [8].

 Infection nosocomiale ou infection associée aux soins ou infection hospitalière : Une infection est dite nosocomiale, associée aux soins ou hospitalière si elle apparait au cours d’un transit à l’hôpital ou à la suite d’une hospitalisation et si elle était absente (ni asymptomatique ni en incubation) à l’admission du patient [7].

 Nettoyage

Opération d’entretien et de maintenance des locaux, surfaces et équipements dont l’objectif principal est d’assurer un aspect agréable (notion de confort) et un niveau de propreté (notion d’hygiène) [8,9].

Bio nettoyage

 Il est défini comme un procédé destiné à réduire la contamination biologique des surfaces. Il est obtenu par combinaison en 3 temps :

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nettoyage, évacuation des salissures et des produits utilisés puis l’application d’un désinfectant. Ce terme est souvent employé en pratique pour désigner les opérations d’entretien des locaux [8,9].

 Risque infectieux

C’est l’exposition à un agent biologique pathogène avec deux corollaires présence d’agent et l’infection. La gestion du risque a pour objectifs de réduire au plus bas niveau possible pour éviter le risque infectieux par des approches:

anticipative, réactive et analyse en hiérarchisant les risques, d’élaborer, mettre en œuvre un plan d’action et faire l’ évaluation et le suivi [10,11].

 Bactérie :

C’est un être vivant pathogène ou non, dépourvu de chlorophylle, ayant une taille de l’ordre du micromètre. [12 ].

 Germes :

Ces sont des micro- organismes infiniment petits qu’on ne peut voir à l’œil nu [12].

Bactérie multi-résistante :

Une bactérie est dite résistante lorsqu’elle développe des caractères pour s’opposer à l’action de plusieurs familles d’antibiotiques [4, 5, 18].

1. 2- Synthèse bibliographique

L’hygiène dans un établissement de soins de santé est un ensemble de comportements destinés à préserver ou conserver un bon état de santé et des actes à poser dans le but de réduire considérablement l’incidence des maladies.

En effet, les infections associées aux soins et services constituent des menaces sérieuses ; dont l’impact économique, environnemental, et sanitaire pour tous les usagers des centres de santé et hôpitaux et les systèmes de santé dans le monde entier est significatif [5,4]. Le bio-nettoyage, la stérilisation, l’hygiène des mains, …. font partie des moyens efficaces pour assurer la propreté du

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matériel médico-technique, des surfaces et locaux. L’hygiène des mains désignant toute action visant à réduire ou inhiber la présence et la croissance de la flore microbienne sur les mains, généralement par friction des mains avec un produit hydro-alcoolique ou lavage des mains au savon doux avec de l’eau propre, permet de réduire significativement le transport des germes d’une surface à un autre endroit.

Cependant, bien que le bio-nettoyage et l’hygiène des mains soient des gestes simples, leur observance par les professionnels soignants surtout selon les recommandations de l’OMS reste insuffisante en général dans le monde [17,18,4]. Les IAS sont à l’origine d’un accroissement de la mortalité, de la morbidité et du coût élevé de prise en charge tant pour les patients, leurs familles que pour les systèmes de santé[7]. Selon l’OMS, ces infections affectent des centaines de millions de personnes dans le monde [8]. Elles constituent un véritable problème universel pour la sécurité des patients. Pour preuve, dans les pays développés, l’incidence des IAS se situe autour de 7%

tandis-que dans les pays sous développés, cette proportion peut dépasser 25%.

Les USA, estiment que près de 100000 décès annuels sont causés par les IAS alors qu’en Europe, dans les hôpitaux de soins aigüs, près de 135000 décès par an surviennent suite aux IAS avec une incidence financière de 6,5 milliards de dollars US et entre 12 et 24 milliards d’Euro en Europe. Au Canada, on estime à plus de 200000 cas de patients qui contractent des IAS lors des soins de santé chaque année [19]. Depuis 1946, l’école d’hygiène de Montréal a beaucoup contribué à la formation des professionnels d’hygiène qui dès lors assurent les luttes contre les IAS et se battent pour la promotion de l’hygiène hospitalière à ce jour [20]. L’Afrique également subit les affres des IAS [19], exemple du Congo Démocratique. Le Bénin, un pays en développement est aussi victime des conséquences des IAS car les établissements de soins de santé sont pour la plupart en mauvais état, les conditions de vie et de travail difficiles en général

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avec une insalubrité remarquable [17,18,4]. Les théories des comportements de santé étant la prévention des IAS et la promotion de l’hygiène, ne pas en faire une priorité entraine à coût sur un fort taux d’IAS [6]. Il faut donc que tous les acteurs du système sanitaire s’approprient cette réalité et amener la population en générale à faire de même. Ceci ne sera possible que si les vielles pratiques peu recommandées en hygiène sont bannies des habitudes. Les infections post- opératoires dues aux plaies opératoires ont révélées respectivement en 1989 et 1999, les prévalences de 33,8% et 10,52% au CNHU-HKM/Cotonou [2].

Les mêmes problèmes se posent au CHD Zou- Collines [5]. Aujourd’hui le CNHU-HKM de Cotonou fait assez d’efforts grâce au dynamisme de toute l’équipe de la clinique universitaire d’hygiène hospitalière dudit hôpital [4, 18].

Il faut alors prendre au sérieux l’épineuse question d’hygiène en milieu hospitalier en général et en milieu de soins et services en particulier.

(23)

II- CADRES ET METHODE D’ETUDE 2.1- Cadres d’étude

2.1. 1- Cadre théorique

L’Ecole Polytechnique d’Abomey-Calavi (EPAC) ex CPU, créée en 1977 est une institution universitaire publique de formation professionnelle. Le Centre Autonome de Perfectionnement(CAP), a été créé pour le renforcement des capacités du monde professionnel. Il répond aux normes car s’est entouré d’enseignants de haut niveau et de praticiens chevronnés, qui mettent tout en œuvre pour offrir au monde professionnel, les compétences nécessaires. Le CAP, sous tutelle de l’EPAC, offre plusieurs filières au nombre des quelles on peut citer : Analyse biomédicale, Contrôle qualité des denrées alimentaires, Environnement, Topographie, Bio- hygiène et Sécurité en milieu Sanitaire,…

.Ce dernier a donc sélectionné pour la première promotion de cette nouvelle filière qu’est la Bio- hygiène et Sécurité en milieu Sanitaire : des infirmiers/ières, sages-femmes et techniciens de laboratoire à la rentrée académique 2014-2015. La formation s’est déroulée sur une période de 4 ans en cours à distance, avec des calendriers assez riches en modules de cours aussi bien théoriques que pratiques et qui sont bien établis dans le souci d’aider le système sanitaire à régler un temps soit peu le déficit dans les formations sanitaires des professionnels en hygiène et sécurité en milieu sanitaire.

2.1. 2- Cadre pratique

Le laboratoire de bactériologie du Centre Hospitalier Universitaire Départemental Ouémé/ Plateau (CHUD-O/P) a été le lieu de ce stage. Le CHUD-O/P est le plus grand hôpital de référence dans ces deux départements.

Il comporte en son sein, les services : d’urgences, de médecine, de maternité, de chirurgie, de bloc opératoire, de néonatologie, de radiologie, de réanimation, de stomatologie, d’ophtalmologie, de stomatologie, d’otorhino-

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laryngologie, de rééducation fonctionnelle, de pédiatrie, de laboratoire d’analyses médicales, de la morgue,… .

Il est situé dans le quartier Ouinlinda de Porto-Novo, non loin du siège de l’Assemblée Nationale, du Jardin des Plantes et de la Nature(JPN) et de la Cour Suprême.

Le stage de fin de formation s’est déroulé sur une période de 3 mois dans le laboratoire dudit centre hospitalier où les échantillons ont été manipulés, plus précisément dans la section de bactériologie sous le contrôle des autres responsables que sont respectivement le surveillant, le chef service et son adjoint. La collecte des échantillons a été faite dans le service de néonatologie du même hôpital.

 Le laboratoire d’analyses médicales

Le service de laboratoire du CHUD-O/P comporte en son sein : 5 sections pour les manipulations techniques à savoir l’hématologie- parasitologie, l’immunologie, la biochimie et de la bactériologie qui assurent le service régulier et la section dite des urgences qui assure la garde 24 heures sur 24 et 7jours sur 7.

Il faut noter au passage que chacune de ces sections a un responsable qui assure la coordination des activités. Le laboratoire dispose : d’un hall d’accueil , d’une salle de prélèvement sanguin ,de cinq salles de manipulations, d’une salle de prélèvements spécifiques (prélèvement vaginal, prélèvement urétral, et de sperme), de deux salles de garde pour homme et femme, d’un couloir, du bureau du chef service, du bureau du surveillant, d’une salle dénommée laverie où se font aussi le stérilisation et la destruction, de deux toilettes, d’un magasin et d’unité d’accueil des patients situé à l’entrée gauche du laboratoire.

 Le service de néonatologie

Situé à l’entrée droite, juste derrière le mât, le service de néonatologie est érigé sur le même bâtiment que le service de la pédiatrie plus précisément au

(25)

premier étage. Ce service accueil les bébés de 0 à 28 jours venant de toutes les maternités des deux départements et généralement admis pour ictère néonatal, fièvre, faible poids ou prématurés,….

Le personnel qui y intervient est composé de médecins pédiatres, d’infirmières et d’aides soignantes. Ce service offre les soins aux bébés 24

heures sur 24 et 7jours sur 7.

2.2- Méthodes

2. 2. 1- Type et période d’étude

Nous avons réalisé une étude transversale et descriptive, visant à évaluer la qualité microbiologique du matériel médico-technique, des surfaces, locaux et mains du personnel dans le service de néonatologie du CHUD-O/P en 2018.

2.2.2-Population d’étude

La population d’étude est composée de 2 cibles :

Cibles primaires: matériel médico-technique (literie /couveuses des bébés ou berceaux); aspirateurs (CPAP); seringue électronique; potences; plateaux;

haricots; boite métallique rectangulaire à instruments; tambour; chariot; pèse bébés; petits gobelets pour alimentation des bébés, bacs à eau pour toilette aux bébés ; réfrigérateur et lampe chauffante), les surfaces (matelas; draps;

paillasses, clenches de portes; lavabo; sur-blouses; les mains du personnel présent) et locaux (sols; air ; murs)

Cibles secondaires: responsables (surveillante, médecin chef néonatologie et chef service pédiatrie-néonatologie); infirmières; aides-soignantes et l’agent d’entretien.

2.2.3- Critères d’ inclusion et de non inclusion

 Critères d’inclusion: Sont inclus dans la présente étude : le matériel médico-technique en utilisation dans le service de néonatologie, les surfaces, les locaux, et les mains du personnel soignant.

(26)

 Critères de non inclusion: sont non inclus dans l’étude, tout le matériel hors usage (défectueux), et le personnel absent lors de l’enquête.

2.2.4- Echantillonnage

2.2.4.1- Méthode et technique d’échantillonnage

La méthode d’échantillonnage est non probabiliste avec la technique de choix raisonné pour le matériel médico-technique, les surfaces et locaux ; puis de commodité pour le personnel.

2.2.4.2- Taille de l’échantillon

Le tableau ci- dessous présente la taille de l’échantillon.

Tableau N°I: Nombre de prélèvements réalisés par écouvillonnage et par lot dans le service de néonatologie.

LOTS Lot 1 :

Matériel Médico- technique

Lot 2 : surfaces

Lot 3 Locaux

Lot 4

Les mains du personnel

Total

Nombre d’écouvillons avant nettoyage

25 25 10 06 66

Nombre d’écouvillons après nettoyage

25 22 05 12 64

Total 50 47 15 18 130

Source : Données de stage, 2018 2.2.5- Définition des variables

*Variable dépendante

La variable dépendante de cette étude est la qualité microbiologique du matériel médico-technique, des surfaces, locaux et mains du personnel.

*Variables indépendantes

Elles sont composées de matériel médico-technique, des surfaces, locaux et mains du personnel de garde dans ce service.

(27)

2.2.6- Collecte des données

2.2.6. 1- Technique de collecte des données

Les techniques de collectes utilisées sont : la recherche documentaire, l’enquête par questionnaire, le prélèvement par écouvillonnage et l’analyse microbiologique des échantillons.

*Prélèvement

Les échantillons de cette étude ont été obtenus à partir des

écouvillonnages réalisés sur le matériel médico-technique (chariots, tambourts, boîtes à instruments, pèses bébés,…) ; les surfaces (paillasses, tables,

bureaux,...), locaux (air ambiant, sols) et les mains du personnel de garde dudit service, selon la norme ISO 14698-1.

*Technique de prélèvement

A l’aide d’écouvillons stériles, les différents sites choisi ont été écouvillonnés séparément, à raison de deux écouvillons au moins par site de prélèvement (avant et après nettoyage). Les prélèvements ont été systématiquement acheminés au laboratoire pour les différents tests bactériologique.

2.2.6.2- Outils de collecte de données

Les outils de collecte de données dans cette étude sont : la fiche de dépouillement, le questionnaire et le matériel utilisés.

Matériel

*Consommables: Ecouvillons stériles ; Markers permanent ; Stylo ; Crayon gras ; Lames ; Lamelles ; Tubes à hémolyse stériles de 5ml ; Tubes à vice stériles ; tubes pyrex de 20 ml stériles ; boîtes de Pétri en verre pour antibiogramme, boîtes de pétri en plastique stériles à usage unique ; Bouteilles de gaz ; Pipettes Pasteur ; Eau distillée ; Eau physiologique stérile (NaCl 9 %o) ;

(28)

Eau de javel; Huile à immersion ; Coton cardé ; Compresse ; Papier essuie mains, Râtelier, Portoirs ; Scotch en papier ; pied à coulisse, Papier aluminium, Allumettes, Savon liquide et Papier de contrôle de stérilité.

*Equipements

Il est composé de : Réfrigérateur ; Microscope optique; Balance mécanique ; Etuves ; Poupinel ; Autoclave ; Bec bunsen ; Plaque chauffante ; Bouteille de gaz le brûleur et Microscope binocculalaire (Olympus CX21).

*Réactifs

Au nombre des réactifs indispensables utilisés, on peut citer :

 Violet de Gentiane et la Fuchsine de Ziehl.

 Le lugol

 Alcool à 95°

 Eau oxygénée

 Acide chlorhydrique à 10%

 Galerie de Le Minor

 Réactif d’urée-indole

 Réactif de Kovac

 Disques d’antibiotiques

Milieux de culture

 Bouillon Mueller Hinton

 Gélose Chapman

 Gélose EMB

 Gélose Sabouraud

 Gélose Mueller Hinton

 Serum frais humain

 Gélose Dnase

(29)

2.2.7- Traitement et analyse des données

2.2.7 .1- Analyse microbiologique des échantillons

Toutes les manipulations ont été précédées de la pratique correcte de l’hygiène des mains. Le poste de travail a été la paillasse de la section de bactériologie sur laquelle a été installé tout le matériel nécessaire. Chaque échantillon a fait l’objet aussi bien systématiquement d’un examen macroscopique, microscopique composé de l’état frais, de la coloration de Gram puis d’un ensemencement sur milieux ordinaire et sélectif en vue d’apprécier les comportement (s) des bactéries pour la suite des travaux.

*Procédure de manipulations

 Premier jour : dans le souci de favoriser la multiplication rapide des germes, chaque écouvillon a été immergé dans 5ml de bouillon MH correspondant devant la flamme du brûleur et porté à l’étuve pendant 24heures à 37°C.

 Deuxième jour : les échantillons ainsi préparés ont été retiré de l’étuve et l’observation macroscopique a été faite (bouillon échantillon comparé avec le témoin à la recherche ou non de la turbidité).

A l’observation macroscopique, on remarque que les contenus de certains tubes sont restés limpides (25) alors que ceux des autres sont troubles avec parfois présence de mousse à la surface (105).

Puis on passe à la réalisation de l’état frais à partir d’une goutte du bouillon de chaque tube après l’avoir mis en suspension, entre lame et lamelle et observé aux objectifs 10X et 40X

- Etat coloré

Il a été également réalisé systématiquement sur chaque échantillon. Un frottis mince réalisé et fixé à la flamme du brûleur qui ensuite a été coloré au Gram puis observé à l’objectif 100X à immersion.

(30)

- Culture

Elle a tenu compte des résultats obtenus à l’état coloré de chaque échantillon. Ainsi, Eosine Méthylène Bleue (EMB) a été ensemencée pour les bacilles. Quant aux cocci, la gélose Chapman a été ensemencée. Pour ce qui est des levures, le milieu Sabouraud au chloramphénicol a été ensemencé. Chaque échantillon est également ensemencé sur gélose MH qui est un milieu pousse tout.

Pour se faire, les boîtes de gélose ont été sorties du réfrigérateur et séchées à l’étuve pendant quelques minutes. Ces milieux de cultures ont été ensemencés par la méthode d’épuisement et incubés à 37°C pendant 24 heures.

 Troisième jour :

- Examen de contrôle de Gram

A partir de nouveaux étalements de frottis, une nouvelle coloration de Gram a été faite sur les différentes colonies isolées qui ont poussé sur les différents milieux et par échantillon. Ceci vient confirmer le Gram du j2.

- Identification

La galerie de Le Minor a été ensemencée et incubée à l’étuve à 37°C pendant 24 heures pour l’identification des entérobactéries (Bacilles à Gram négatif). Cette galerie est constituée d’urée-indole, de la gélose Kligler-Hajna, de la gélose mannitol-mobilité et de la gélose citrate de Simmons.

Pour ce qui est des cocci Gram positifs, ils ont été identifiés par une série de tests biochimiques que sont: la catalase et Dnase.

- Etude de la résistance des bactéries isolées aux antibiotiques usuels

L’antibiogramme a été réalisé sur la gélose Mueller Hinton par la méthode d’inondation. Sept (7) disques de papier buvard imprégnés de différents antibiotiques à tester ont été déposés à la surface de la gélose. La gélose a été ensuite incubée à 37°C pendant 24 heures à l’étuve.

(31)

Par ailleurs, la concentration minimale inhibitrice (CMI) a été faite et comparée à l’étalon de Mac Farland à 0,5.

 Quatrième jour

Les boîtes de pétri ont été sortie de l’étuve et l’aide du pied à coulisse le diamètre de la zone d’inhibition a été mesurer. Les mesures obtenues ont été comparées à celles figurant sur la fiche fournie par ce dernier afin de noter le profil de résistance ou de sensibilité des différentes souches suivant la marge de sensibilité prévue par le fabricant.

2.2.7.2- Analyse statistique des données

Les données collectées ont été dépouillées manuellement. Elles ont été analysées et traitées au moyen des logiciels WORD et EXCEL.

2.2.8- Limites et difficultés rencontrées

Cette étude réalisée sur le profil microbiologique du matériel médico-technique, des surfaces et locaux n’a pu prendre en compte que le service de néonatologie sur la vingtaine de service que comporte cet hôpital surtout pour des raisons économiques. Aussi, certains examens complémentaires (identification des autres espèces de staphylocoques n’ont pu être effectués

Au nombre des difficultés rencontrées, on peut citer entre autre :

- Vu le coût élevé des disques d’antibiotique, on s’est vue obligé de ne tester que sept (07) disques d’antibiotique.

- Capacité réduite de l’étuve ; - Inexistence de Hotte aspirateur ;

- Inexistence de poste de sécurité microbiologique (PSM II) ; - Inexistence de balance de précision ;

- Nombre limité de milieux de culture utilisé vu leur coût élevé ;

- Inexistence de certains réactifs dans le laboratoire (disque d’oxydase,…).

2.2.9- Aspect éthique et déontologique

Une lettre de stage signée du Directeur de l’EPAC et une autorisation de stage signée à son tour du Directeur du CHUD-O/P, sont les pièces justificatives de cette étude. L’étude a été donc conduite dans le respect des règles d’éthiques après avoir recueilli le consentement éclairé du personnel impliqué (confidentialité, équité) selon les recommandations d’une étude scientifique.

(32)

III-RESULTATS

3.1-Qualité microbiologique du matériel médico-technique, des surfaces, locaux et mains du personnel

Le tableau N° II présente les résultats de 50 écouvillons réalisés au niveau du lot 1 (25 écouvillons avant nettoyage et 25 après nettoyage).

Tableau N° II : Qualité microbiologique du matériel médico-technique (lot 1) Germes Nombre de germes

identifiés avant nettoyage

Nombre de germes identifiés après

nettoyage

Total

Staphylococcus aureus 21 13 34

Staphylococcus spp 17 07 24

Klebsiella pneumoniae 16 09 25

Escherichia coli 15 07 22

Candida spp 12 06 18

Candida albicans 10 05 15

Total 91 47 138

Source : Données de stage, 2018

De la lecture du tableau N° II, on retient qu’au total 138 germes ont été identifiés; soit 91 sur le matériel non nettoyé et 47 sur le même matériel après nettoyage ce qui fait une élimination de 44 (près de 50%). La présence de germes sur ce matériel même après nettoyage, explique que ce dernier n’est pas efficace car l’idéal serait de ne pas retrouver des germes après nettoyage.

(33)

Le tableau N° III présente les résultats de 34 écouvillons réalisés au niveau du lot 2 (17 écouvillons avant nettoyage et 17 après nettoyage).

Tableau N° III : Qualité microbiologique des surfaces (lot 2)

Germes Nombre de germes

identifiés avant nettoyage

Nombre de germes identifiés après nettoyage

Total

Total 82 45 127

A la lecture du tableau N° III, on retient qu’un total de 127 germes ont été identifiés; soit 82 sur les surfaces non nettoyées et 45 sur les même surfaces après nettoyage. Ceci fait une élmination de 37(près de 50%). La présence de germes même après nettoyage explique que ce dernier n’a pas été efficace.

Le tableau N° IV présente les résultats de 23 écouvillons réalisés au niveau du lot 3 (13 écouvillons avant nettoyage et 10 après nettoyage) et des cinq (5) boîtes de pétri ensemencées directement en vue d’apprécier la qualité microbiologique de l’air ambiant de la salle se soins dans ledit service.

(34)

Tableau N° IV: Qualité microbiologique des locaux (lot 3)

identifiés avant nettoyage

Nombre de germes identifiés après nettoyage

Total

Total 48 25 73

A la lecture du tableau N° IV, on constate qu’au total 73germes ont été identifiés avec 48 avant le nettoyage et 25après le nettoyage dans les mêmes locaux; ce qui montre une élimination de 23(près de 50%). Résultat pas satisfaisant puis que les locaux devraient être exempte des germes.

Pour récapituler, que ce soit le matériel médico-technique (lot 1), les surfaces (lot 2) et locaux (lot 3), ils sont tous pollués par au moins cinq espèces différentes de microorganismes avant le nettoyage. Après le nettoyage on retrouve encore sur certains d’entre eux, au moins deux espèces de microorganismes. Il faut souligner que sur le matériel métallique (plateaux, boîte rectangulaire à instrument et tambour) qui ont subi la stérilisation au Poupinel, on a plus identifié de germes. Autrement dit les écouvillons réalisés sur ce matériel stérilisé a donné comme résultat : absence de germe donc culture stérile.

Le tableau N° V présente les résultats de 18 écouvillons réalisés au niveau du lot 4.

Six (06) membres du personnel ont été choisis (deux médecins, deux infirmières et deux aides) sur les dix-sept. Trois (03) écouvillons ont été réalisés

(35)

par agent (avant lavage des mains, après lavage simple des mains et après friction des mains avec la solution hydro-alcoolique ou le gel à base de chlorure de benzothélium).

Tableau N° V: Qualité microbiologique des mains du personnel (lot 4)

Germes Nombre de

germes identifiés avant lavage des

mains

Nombre de germes identifiés après lavage des mains

au savon doux

Nombre de germes identifiés après friction des mains

Total

Staphylococcus aureus 06 01 00 07

Staphylococcus spp 06 00 00 06

Klebsiella pneumoniae 06 01 00 07

Escherichia coli 05 01 00 06

Candida spp 03 00 00 03

Candida albicans 02 00 00 02

Total 28 03 00 31

La lecture des résultats du tableau N° V montre que les mains du personnel soignant comportent aussi les mêmes germes que le matériel médici- technique, les surfaces et locaux avant lavage simple. Après lavage simple (eau+savon doux) de ces mêmes mains, on constate que des 28 germes on est passé à 3 seulement; soit une élimination de 25. On en déduit que le lavage simple des mains réduit à plus de 90% le risque de contamination par les mains.

Mieux les résultats des mêmes mains frictionnée avec la solution hydro- alcoolique du service ou le gel à base du chlorure de benzothélium a rendu les mains momentanément stériles, très efficace.

Le tableau N° VI présente les résultats des écouvillons réalisés au niveau des sur-blouses imposées aux visiteurs des bébés

(36)

Ici on a remarqué seulement six (06) sur-blouses pour les visiteurs d’une quarantaine de bébés. Les six ont été écouvillonnées et les résultats se présentent comme suit dans le tableau N° VI

Tableau N° VI: Qualité microbiologique des sur-blouses imposées aux visiteurs des bébés

identifiés avant lavage

Nombre de germes identifiés après lavage au savon ‘’omo’’

Total

Total 28 08 36

Le tableau N° VI montre que les sur-blouses imposées aux visiteurs des bébés même après lavage comportent encore des germes dangereux (Staphylococcus aureus, Klebsiella pneumoniae et Escherichia coli)

Sur les six (06) espèces de micro-organismes identifiés avant lavage, seulement trois (03) à savoir : les deux espèces de levures et Staphylococcus spp) ont été éliminées après lavage.

3.2- Fréquences, pourcentage de résistance et de sensibilité

La fréquence des germes identifiés et les pourcentages de résistance et de sensibilité sont présentés dans le tableau N° VII comme suit :

(37)

Tableau N° VII : Fréquences des germes identifiés en fonction de leur niveau de résistance aux antibiotiques

Germes Nombre

de germes

Fréque nce en

%

Nombre de Sensible

Pourcen- tage de Sensible

Nombre de Résistant

Pourcen- tage de Résistant

Staphylococcus aureus 81 21,95 51 62,96 30 37,01

Staphylococcus spp 75 20,32 63 84,00 12 16,00

Klebsiella pneumoniae 70 18,97 57 81,43 13 18,57

Escherichia coli 63 17,07 48 76,19 15 23,81

Candida spp 47 12,73 NA NA NA NA

Candida albicans 33 08,94 NA NA NA NA

Total 369 99,98

NA = Non applicable

Source: Données de stage, 2018

A la lecture du tableau N° VII, on comprend ce qui suit :

 En ce qui concerne les fréquences, Staphylococcus aureus est plus fréquent 21,95%, suivi de Staphylococcus spp 20,32%, ensuite Klebsiella pneumoniae 18,97%, Escherichia coli 17,07%, respectivement Candida spp 12,73% et Candida albicans 08,94%.

 Quant à la sensibilité, Staphylococcus spp sont plus sensibles 84%

suivi de Klebsiella pneumoniae 81,43%, d’Escherichia coli 76,19% et de Staphylooccus aureus 62,96%.

 Pour ce qui est de la résistance, Staphylococcus aureus sont plus résistant 37,01%, suivi d’Escherichia coli 23,81%, de Klebsiella pneumoniae 18,57% et de Staphylococcus spp 16,00%.

Il faut souligner qu’on n’a pas pu faire de fongigramme pour les levures parce que ça ne se fait pas dans ce laboratoire. De ce fait on ne peut aborder ni la sensibilité ni la résistance des levures identifiées.

(38)

La liste des disques utilisés pour la réalisation de l’antibiogramme des cocci Gram positif se présente dans le tableau N° VIII ci-dessous

Tableau N° VIII : Disques utilisés pour la réalisation de l’antibiogramme des cocci Gram positif

Espèce bactérienne

Sigle du disque

Charge Diamètre des zones d’inhibition en mm et Pourcentage de résistance et de sensibilité

Famille des antibiotiques

R S

Cocci Gram positif

Amoxicilline +acide clavulamique

AMC 30µg <16 ≥21 β -

Lactamines

Gentamycine GEN 10 µg <16 ≥18 Aminosides

Vancomycine VAN 30µg <17 ≥17

Céfoxitine FOX 30µg <15 ≥22 β -

Lactamines

Erythromycine ERY 15 µg <17 ≥22 Macrolides

Nitrofuranes NIT 30µg <15

≥15

Autres familles

Imipénème IPM 10µg ^<17 ^≥24

Source : Données de stage, 2018

(39)

La liste des disques utilisés pour la réalisation de l’antibiogramme des bacilles Gram négatif se présente dans le tableau N° IX ci-dessous

Tableau N° IX: Disques utilisés pour la réalisation de l’antibiogramme des bacilles Gram négatifs

Espèce bacté rienne

Antibio- Tique

Sigle du disque

Charge du disque

Diamètre des zones d’inhibition en mm et Pourcentage de résistance et de sensibilité

Famille des antibio tiques

R S

Bacilles Gram négatif

Amoxicilline +acide clavulamique

AMC 30µg <16 ≥21 β-

Lactamines

Chloremphénicol CHL 30 µg <19 ≥23 Aminosides

Vancomycine VAN 30µg <17 ≥17

Artéonam ATM 30µg <21 ≥23 β -

Lactamines

Nétilmicine NET 15 µg <17 ≥22 Macrolides

Ceftriaxoone CRO 30µg <19

≥23

Autres familles

Imipénème IPM 10µg ^<17 ^≥24

R=Résistant S= Sensible Source : Données de stage, 2018

(40)

Le tableau N° X aborde le pourcentage de sensibilité et de résistance des germes identifiés face aux disques d’antibiotiques utilisés.

Tableau N° X : Pourcentage de sensibilité et de résistance des germes aux antibiotiques.

Liste des disques d’ATB utilisés

Sensible pour les cocci

Résistant pour les cocci

Sensible pour les bacilles

Résistant pour les bacilles Amoxicilline +Acide

clavilamique

S R

Gentamycine R R

Vancomycine S

Erythromicine R

Céfoxitine R

Nitrofurane R

Chloremphénicol R

Aztréonam S

Netilmicine R

Imipénème S S

Ceftriaxone S

Total 03 sensibles 04 résistants 03 sensibles 04 résistants

Pourcentage 42,85 57,14 42,85 57,14

S= Sensible R= Résistant Source : Données de stage 2018

La lecture du tableau N° X montre qu’aussi bien les cocci que les bacilles, sont sensibles à trois (3) disques d’antibiotiques et résistants à quatre (4) disques d’antibiotique; soit 42,85% de sensibilité contre 57,14% de résistance.

3.3- Synthèse de l’entretien avec le personnel

Il ressort des entretiens avec le personnel ce qui suit :

- une mauvaise compréhension de la politique d’hygiène des mains,

(41)

- une mauvaise application des indications de l’hygiène des mains, - une insuffisance de matériel de nettoyage mis à disposition, - une mauvaise application de la procédure de bio-nettoyage, - absence de formation en cour d’emploi,

- la masse de travail est importante avec un effectif réduit du personnel.

- Par ailleurs, le personnel porte la tenue correcte au travail, le port de gants est aussi systématique, mais n’est pas changé systématiquement entre deux bébés. Aussi le service dispose de gel hydro-alcoolique entre deux lits.

(42)

IV-DISCUSSION

De la lecture des différents tableaux, on peut affirmer que les objectifs de cette étude sont atteints parce qu’on a réussi à isoler une quantité importante de micro-organismes pathogènes qui polluent le matériel médico-technique, les surfaces, les locaux et même les mains du personnel du service de néonatologie.

Mieux, ce sont les mêmes espèces de microbes qui sont identifiés dans tous les lots mais à des fréquences variées ainsi présenté dans l’ordre décroissant (21,95%

pour Staphylococcus aureus, 20,32% pour Staphylococcus spp, 18,97% pour

Klebsiella pneumoniae, 17,07% pour Escherichia coli, 12,73% pour Candida spp et 08,94 pour Candida albicans. Aussi il est constaté que les pourcentages de résistances aux ATB observés sont également important et se présentent comme suit (37,01% pour Staphylococcus aureus, 23,81% pour Escherichia coli, 18,57% pour Klebsiella pneumoniae et 16,00% pour Staphylococcus spp.

Par ailleurs, les mêmes micro-organismes sont aussi présents sur les sur-blouses dites de protection qui sont imposées aux visiteurs des bébés et ces sur-blouses ne sont pas à usage unique et ce qui est marrant ces sur-blouses ne sont lavées que lorsqu’elles sont visiblement salles. Donc plutôt que de protéger ces âmes très fragiles, elles sont plus exposées. Le fait de mettre deux bébés voir trois de mères différentes et de pathologies différentes dans une même couveuse augmente l’exposition de ces âmes sensibles et leur séjour dans cette crèche

plutôt que d’être court et bénéfique pourrait devenir long, voir fatal.

Dans le service de chirurgie du CHD Zou- Collines, l’étude réalisée sur le profil bactériologique de la literie de ce service en 2016 révèle que la quasi totalité des lits écouvillonnés sont infectés par des germes multi-résistants (Staphylocoques, Klebsiella, Pseudomonas,…) [9]. De même l’étude intitulée : évaluation des précautions contacts à l’ABPF Sikèkodji en 2016 révèle que les règles d’hygiène des mains ne sont pas bien respectées d’où la présence de germes (Staphylococcus, Klebsiella, Escherichia coli,…) sur les mains du