Prévention du paludisme transfusionnel par l'utilisation des Tests de Diagnostics Rapides (TDR)

(1)

REPUBLIQUE DU BENIN ***********

MINISTERE DE L’ENSEIGNEMENT SUPERIEUR ET DE LA RECHERCHE SCIENTIFIQUE (MESRS)

***********

UNIVERSITE D’ABOMEY-CALAVI (UAC) ***********

ECOLE POLYTECHNIQUE D’ABOMEY-CALAVI (EPAC) ***********

DEPARTEMENT DE GENIE DE BIOLOGIE HUMAINE (GBH) Option : Analyses Biomédicales (ABM)

RAPPORT DE STAGE DE FIN DE FORMATION POUR L’OBTENTION DU DIPLOME DE LICENCE PROFESSIONNELLE

Réalisé par :

S. Fréjure Lionel B. AKOTAN

Superviseur : Dr Lauris FAH Enseignant-Chercheur Maître-

Assistant

Biochimie-Physiologie EPAC/UAC

EPAC/UAC

Tuteur :

M. Martial DOFONHAKOU Biotechnologiste Chef Laboratoire du CSVH

Saint Luc, Cotonou

(2)

***********

MINISTERE DE L’ENSEIGNEMENT SUPERIEUR ET DE LA RECHERCHE SCIENTIFIQUE (MESRS)

***********

UNIVERSITE D’ABOMEY-CALAVI (UAC) ***********

ECOLE POLYTECHNIQUE D’ABOMEY-CALAVI (EPAC)

***********

DEPARTEMENT DE GENIE DE BIOLOGIE HUMAINE (GBH) Option : Analyses Biomédicales (ABM)

RAPPORT DE STAGE DE FIN DE FORMATION POUR L’OBTENTION DU DIPLOME DE LICENCE PROFESSIONNELLE

DIRECTEUR : Professeur Guy Alain ALITONOU

DIRECTEUR — ADJOINT : Docteur (Maître Conférence) François-Xavier FIFATIN

CHEF DE DEPARTEMENT : Docteur (Maître Conférence) Eugénie ANAGO

(3)

Prévention du paludisme transfusionnel par l'utilisation des Tests de

Diagnostics Rapides (TDR)

2020

Réalisé par Sènami F. Lionel B. AKOTAN i

LISTE DES ENSEIGNANTS DU DEPARTEMENT DE GENIE DE BIOLOGIE

NOMS ET PRENOMS DISCIPLINE ENSEIGNÉE

ABLEY Sylvestre Déontologie médicale et Sémiologie AGBANGLA Clément Génétique moléculaire

AHOYO Théodora Angèle Microbiologie/Santé publique et Hygiène hospitalière

AKPLOGAN Sophie Management de la Qualité

AKPOVI D. Casimir Biologie cellulaire/Physiologie humaine/Biochimie métabolique ANAGO Eugénie Biochimie structurale/Biochimie

clinique/Biologie moléculaire ANAGONOU Sylvestre Education physique et sportive

ATCHADE Pascal Parasitologie/Mycologie/Entomologie médicale

BANKOLE Honoré Bactériologie Appliquée/Gestion de laboratoire

DOSSEVI Lordson Techniques instrumentales

DOSSOU Cyriaque Technique d’Expression et Méthode de Communication

DOUGNON Victorien Microbiologie/Méthodologie de la recherche

EGBOHO Franck Initiation à l’Analyse Numérique FAH Lauris Biochimie/Physiologie

FANOU Jean-Louis Physique

HOUNGA Bernard Mathématiques HOUNSOSSOU Hubert Bio statistique

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KOUDANDE Marlène Cytologie sanguine/Introduction à l’hématologie

LALEYE Christel-Marie Anatomie Générale

LOKOSSOU Gatien Immunologie générale/Immunologie pathologie

MAGNIDET Grégoire Transfusion Sanguine PERE MASLOKONON Vincent Histologie générale

SEGBO Julien Biochimie/Biologie moléculaire SENOU Maximin Histologie Générale/Histologie

Appliquée

SOEDE Casimir Anglais technique

TCHOBO Fidèle Chimie générale/Chimie organique TOHOYESSOU Zoé Soins infirmiers

TOPANOU Adolphe Hématologie/Hémostase

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2020

Réalisé par Sènami F. Lionel B. AKOTAN iii

DEDICACE

A mes parents Julien AKOTAN et Adidjatou MOUSSE qui m’ont inculqué des valeurs et des règles de vie. Je vous suis reconnaissant pour l’éducation que vous m’avez

donnée et tous les sacrifices que vous avez consentis à mon égard.

Puisse ce travail vous rendre fiers

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REMERCIEMENTS

Cette étude n’aurait été possible sans la contribution de plusieurs personnes à qui nous exprimons nos sincères remerciements. Il s’agit de :

❖ Mon superviseur, Docteur Lauris FAH, qui a accepté suivre ce travail, par ses apports, conseils et améliorations malgré votre emploi du temps chargé ;

❖ Docteur Hornel KOUDOKPON, malgré son emploi du temps `a su nous consacrer du temps par ses apports, conseils ;

❖ Mes tuteurs de stage, M. Martial DOFONHAKOU et M. Alexandre QUENUM, pour leur encadrement et leur rigueur dans notre apprentissage ;

❖ Tout le personnel du laboratoire du CSVH Saint Luc, pour votre disponibilité, votre soutien, vos multiples conseils et l’ambiance cordiale qui a régné lors de mon stage ;

❖ Feu Moise BONOU, que la mort a malheureusement fauché, repose en paix ;

❖ Mon oncle Dr Naboth SAGBOHAN, sa femme et ses enfants pour leurs conseils et orientations ;

❖ Mon grand frère Dr Alphonse AKOTAN, pour ses conseils et orientations ;

❖ Ma grande sœur Josiane HOUNDOLO, son époux et son enfant en témoignage de leurs multiples efforts et sacrifices ;

❖ Mes grands frères Renauld et Michel DAHOUE, pour leurs conseils et soutiens ;

❖ Mon grand frère Eddy AWOKOU, pour ses conseils et soutiens ;

❖ Mon cher ami Godwill FAVI dont l’amitié m’a réchauffé le cœur et réconforté l’esprit, merci pour tout ;

❖ Tous mes frères, cousins, oncles et tantes pour leurs soutiens ;

❖ Mes frères Gertrude et Marie-José pour leurs affections et considérations ainsi qu’à mes proches ;

❖ Tous mes camarades de la 12^e promotion, spécialement à Ulrich, Mérison, Dieudonné, Régis, Vital, Ricardo ; merci pour la bonne ambiance qui a régné.

(7)

2020

Réalisé par Sènami F. Lionel B. AKOTAN v

HOMMAGES

➢ A son Excellence Monsieur le Président du Jury

C’est un grand honneur que vous nous faites en acceptant de présider le jury chargé d’apprécier notre travail. Cher Président de jury, par vos observations nous espérons pouvoir améliorer la qualité de ce travail. Veuillez recevoir nos profonds respects et nos vives gratitudes ;

➢ Aux Honorables Membres du Jury

Nous sommes touchées par l’honneur que vous nous faites en acceptant de siéger dans notre Jury de soutenance de rapport de stage de fin de formation. Soyez rassurés que vos conseils et remarques nous aideront à parfaire ce travail. Veuillez trouver ici, l’expression de nos profondes gratitudes et de nos sincères considérations.

(8)

LISTES DES SIGLES ET ABREVIATIONS

Ac

: Anticorps

ANTS

: Agence Nationale de Transfusion Sanguine

A-L

: Atlantique-Littoral

BS

: Banque de Sang

CGR

: Concentré de Globules Rouges

CPU

: Collège Polytechnique Universitaire

CSVH

: Centre de Santé à Vocation Humanitaire

DP

: Densité Parasitaire

EDTA

: Ethylène Diamine Tétra Acétique

ETS

: Etablissement de Santé

FN

: Faux Négatifs

FP

: Faux Positifs

FS

: Frottis Sanguin

GB

: Globule Blanc

GE

: Goutte Epaisse

Hb

: Hémoglobine

HBV

: Virus de l’Hépatite B

HIV : Human Immunodeficiency Virus

HLA

: Human Leucocyte Antigène

HRP-2

: Histidine Protéine Rich-2

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2020

Réalisé par Sènami F. Lionel B. AKOTAN vii

HVC

: Virus de l’Hépatite C

OMS

: Organisation Mondiale de Santé

MLD : Moustiquaire à Longue Durée

Pf

: Plasmodium falciparum

PNLP

: Projet National de Lutte contre le Paludisme

RAI

: Recherche d’Anticorps Irréguliers

SAG

: Saline Adénine Glucose

SDTS

: Service Départemental de Transfusion Sanguine

Se

: Sensibilité

Sp

: Spécificité

TDR

: Tests de Diagnostics Rapides

TPHA

: Treponema Pallidum Hémagglutination Assay

VN

: Vrais Négatifs

VP

: Vrais Positifs

VPN

: Valeur Prédictive Négative

VPP

: Valeur Prédictive Positive

%

: Pourcentage

µL

: Microlitre

g/dl

: Gramme par décilitre

ml/ kg

: Millilitre par kilogramme

(10)

֠ : Degré

◦C

: Degré Celsius

N ^◦

: Numéro

(11)

2020

Réalisé par Sènami F. Lionel B. AKOTAN ix

LISTE DES TABLEAUX

Tableau 1 : Tableau de contingence 2×2 pour l’évaluation de la performance

du TDR

….. 15

Tableau 2 : Tableau de contingence 2×2 pour l’évaluation de la performance du TDR

….. 19

Tableau 3 : Paramètres de précision du TDR à l’aide de la microscopie GE ….. 19 Tableau 4 : Répartition selon la détection du plasmodium par GE-DP et TDR ….. 20

(12)

LISTE DES FIGURES

Figure 1 : Don de sang pour une personne (Verra et al., 2018) ….. 4 Figure 2 : Répartition des sujets transfusés selon le sexe ….. 17 Figure 3 : Répartition des sujets transfusés selon l’âge ….. 18 Figure 4 : Répartitions des diverses anémies selon la cause des transfusions ….. 18

Figure 5 : Répartition des poches selon la nature ….. 19

Figure 6 : Répartition des poches selon le groupe sanguin Rh ….. 20

(13)

2020

Réalisé par Sènami F. Lionel B. AKOTAN xi

RESUME

Le paludisme transfusionnel est une réalité en Afrique Sub-Saharienne, en raison des transfusions sanguines répétées peu ou non contrôlées où les donneurs sont en majorité potentiellement porteurs de Plasmodium. L’objectif de cette étude est de prévenir le paludisme post-transfusionnel par l’utilisation des TDR.

Pour y parvenir, une étude a été réalisée au Centre de Santé à Vocation Humanitaire Saint Luc de Cotonou du 02 septembre au 22 novembre 2019 et a concerné 68 poches de sang de la Banque de Sang qui ont été testées par Tests de Diagnostics Rapides et la microscopie GE-DP.

Les paramètres pris en compte sont la nature des poches distribuées, les résultats de ses poches au TDR et à la microscopie, l’évaluation des performances du TDR utilisé, l’âge, le sexe et la cause des multiples transfusions chez les sujets transfusés.

La prévalence du portage asymptomatique du Plasmodium sur les poches testées est de 11,80 %. Les poches les plus transfusés sont les poches pédiatriques (avec un pourcentage 97,10 %) ayant pour cause majeure de transfusion une anémie palustre avec un pourcentage de 88,00 % sur des enfants de moins de 5 ans. Les performances du TDR utilisé présentent une sensibilité de 100 % et une spécificité de 91 %, ainsi que la valeur prédictive positive à 25 % contre une valeur prédictive négative à 100 %. Ainsi le TDR de cette étude à montrer une grande spécificité et une sensibilité assez élevée ce qui permet de détecter plus de cas positifs que la microscopie et de détecter des résultats négatifs qui ne sont pas effectivement malades, ce qui permet de ne pas traiter un malade non souffrant.

Le paludisme transfusionnel étant une grande menace pour la santé du transfusé fragilisé par la maladie, doit susciter une recherche des plasmodies par TDR avant et après toute transfusion sanguine. Il est donc important qu’avant toute introduction de TDR pour la qualification des poches de sang, de contrôler et de choisir les TDR ayant une bonne performance.

Mots clés : Transfusion Sanguine, Plasmodium, Paludisme transfusionnel, TDR, Sensibilité, Spécificité, VPP, VPN.

(14)

ABSTRACT

Transfusion malaria is a reality in Sub-Saharan Africa, due to repeated blood transfusions that are poorly or uncontrolled, where the majority of donors are potentially carriers of Plasmodium. The objective of this study is to prevent post-transfusion malaria through the use of RDTs.

To achieve this, a study was carried out at the Saint Luc de Cotonou Humanitarian Vocation Health Center from September 2 to November 22, 2019 and concerned 68 blood bags from the Blood Bank which were tested by Rapid Diagnostic Tests and the GE-DP microscopy.

The parameters taken into account are the nature of the bags distributed, the results of his bags by RDT and microscopy, evaluation of the performance of the RDT used, age, sex and the cause of the multiple transfusions in the transfused subjects.

The prevalence of asymptomatic carriage of Plasmodium on the bags tested is 11.80%.

The most transfused bags are the pediatric bags (with a percentage of 97.10%) whose major cause of transfusion is malaria anemia with a percentage of 88.00% in children under 5 years old. The performance of the RDT used has a sensitivity of 100% and a specificity of 91%, as well as the positive predictive value at 25% against a negative predictive value at 100%. Thus the RDT of this study to show a great specificity and a fairly high sensitivity which makes it possible to detect more positive cases than the microscopy and to detect negative results which are not actually sick, which makes it possible not to treat a patient. not suffering.

Since transfusion malaria is a major threat to the health of the transfused patient weakened by the disease, it should be possible to search for plasmodia by RDT before and after any blood transfusion. It is therefore important that before any introduction of RDTs for the qualification of blood bags, to control and choose RDTs with good performance.

Key words: Blood transfusion, Plasmodium, Malaria transfusion, TDR, Sensitivity, Specificity, VPP, VPN.

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Réalisé par Lionel Balajure S.F. AKOTAN

SOMMAIRE

INTRODUCTION ... 1

1 SYNTHESE BIBLIOGRAPHIQUE ... 3

1.1 La Transfusion Sanguine ... 3

2 CADRE, MATERIEL ET METHODOLOGIE DE TRAVAIL ... 10

2.1 Cadre de travail ... 10

2.2 Matériel ... 11

2.3 Méthodes ... 12

3 RESULTATS ET DISCUSSIONS ... 17

3.1 RESULTATS ... 17

3.2 DISCUSSION ... 21

3.3 CONCLUSION ... 23

SUGGESTIONS ... 24

BIBLIOGRAPHIE ... 25

(16)

INTRODUCTION

La transfusion sanguine est une discipline aux confins de l’hématologie et de l’immunologie. Elle implique la médecine, la biologie, la bio-industrie, la sociologie et repose sur l’éthique [1]. Chaque année, plusieurs malades sont transfusés sur l’étendue du territoire national. Des patients atteints de leucémie, de cancers mais aussi des grands brûlés, des accidentés de la route et des personnes victimes d’hémorragies importantes nécessitent une transfusion sanguine [2]. En fonction de la pathologie certains ont besoin de globules rouges, d’autres de plasma ou de plaquettes. La transfusion sanguine (TS) a été un grand secours à la survie de millions de personnes menacées de mort [2].

Elle est un support thérapeutique indispensable pour laquelle il n’existe pas actuellement de substitut. C’est un acte médical qui consiste à administrer à une personne un produit sanguin provenant du don de sang d’un autre individu par une injection continue par voie intraveineuse.

L’acte transfusionnel, même lorsqu’il est pratiqué dans le respect strict des règles immunologiques et d’asepsie, n’est pas dénué de risques. En effet, au cours de la transfusion à part le risque d’allo immunisation post-transfusionnelle, les receveurs sont également en risque de se faire transfuser des microbes tels que les virus (HIV, HBV, HVC, TPHA, …), les bactéries et des parasites (Plasmodium) [3]. Cependant dans les tests de qualification des poches de sang, ne figure pas la densité parasitaire alors qu’il est bien connu que le risque de paludisme transfusionnel est de plus en plus présent et peut engendrer chez des patients affaiblis par la maladie, des complications.

L’avènement des Tests de Diagnostics Rapides (TDR) qui ont montré leur efficacité dans le dépistage rapide du paludisme [4] pourrait être un bon moyen de dépistage du Plasmodium sur les poches de sang avant transfusion pour permettre de mettre en place un traitement palustre concomitamment à la transfusion.

C’est eu égard à cela que nous avons voulu réfléchir sur ce sujet dont le but est de prévenir le paludisme transfusionnel par l’utilisation des Tests de Diagnostics Rapides.

L’objectif général de cette étude est de contribuer à la prévention du risque du paludisme transfusionnel par l’utilisation des Tests de Diagnostics Rapides.

(17)

2020

Réalisé par Sènami F. Lionel B. AKOTAN 2

Spécifiquement il s’agira de :

❖ Déterminer la fréquence du risque de paludisme post-transfusionnel sur les poches de sang reçu à la banque de sang du CSVH ;

❖ Evaluer l’efficacité des TDR dans la détection des plasmodies sur les poches de sang.

Le développement de ce rapport s’articule autour de trois points : la première partie consacrée à la synthèse bibliographique, la deuxième partie a porté sur le cadre matériel et méthode mise en œuvre pour la prévention du paludisme post-transfusionnel et enfin, la troisième partie consacrée aux résultats, commentaires et discussions afin d’aboutir à une conclusion puis des suggestions concernant la prévention du risque du paludisme post- transfusionnel.

(18)

1 SYNTHESE BIBLIOGRAPHIQUE

1.1 La Transfusion Sanguine

1.1.1 Définition

La transfusion sanguine est l’administration par voie intraveineuse d’un concentré érythrocytaire ou d’un dérivé sanguin comme le plasma ou les plaquettes d’un ou de plusieurs donneurs sains à un patient [5].

La Transfusion sanguine est un acte thérapeutique complexe qui consiste à apporter à un patient, appelé receveur, les éléments du sang par perfusion intraveineuse qui lui font provisoirement défaut, soit à la suite d’une perte de sang (hémorragie), soit à la suite d’une maladie du sang ou enfin à la suite d’un traitement (chimiothérapie aplasiante). Les différents éléments du sang qui seront utilisés pour la transfusion proviennent de donneurs de sang.

L’élaboration de produits cellulaires dits labiles, nécessaires au traitement des malades, n’est possible que par la mise en œuvre d’une chaîne de solidarité dont le premier maillon est constitué par les donneurs de sang bénévoles. La mise à disposition des produits doit obligatoirement répondre à des règles de bonnes pratiques transfusionnelles : prélèvement, préparation, qualification biologique, distribution et indications cliniques. Le respect de ces règles est une nécessité absolue. Le plasma contient diverses protéines, dont l’albumine, les facteurs de coagulation et les immunoglobulines [1,6].

Il existe aussi la transfusion autologue dont les produits sanguins labiles transfusés proviennent de la personne qui est transfusée [1]. Les produits sanguins proviennent donc de son propre sang, prélevé plusieurs semaines auparavant. Ce type de transfusion est réalisé en cas de chirurgie programmée et lorsque le patient possède un phénotype exceptionnel, ne permettant pas de trouver de donneur de sang compatible [1].

1.1.2 Les différentes étapes de la Transfusion sanguine

La Transfusion sanguine passe par différentes étapes. Entre autres nous pouvons avoir : La sélection médicale au don du sang est une étape primordiale qui permet d’éliminer un certain nombre de donneurs avant la période des examens sérologiques. Cette sélection repose sur une information des donneurs pour favoriser une démarche d’auto-exclusion du don de sang et un entretien médical visant à déceler les symptômes ou les facteurs de risque

(19)

2020

d’infections conduisant, selon les cas, à une exclusion temporaire ou définitive du don de sang [7].

Figure 1 : Don de sang pour une personne (Verra et al., 2018)

Une seconde étape est de connaître les principales contre-indications au don de sang.

Un âge supérieur à 65 ans pour le sang total, 60 ans pour les plaquettes et le plasma d’aphérèse (plasma filtré à l’aide d’un appareil), 50 ans pour les granulocytes (GB), le poids inférieur à 38 kg, un taux d’hémoglobine inférieur à 11 g/dl, des prises médicamenteuses récentes pouvant nuire au receveur, un antécédent de maladie auto-immune (Sclérose, lupus...), une vaccination datant de moins de 10 jours, une infection récente, une chirurgie dentaire datant de moins d’un mois un antécédent de greffe de cornée ou de maladie neurodégénérative comme la maladie de Creutzfeldt-Jakob une chirurgie viscérale ou examens endoscopiques datant de moins de 6 mois de crainte d’une infection un antécédent de transfusion sanguine tout comme un antécédent de toxicomanie intraveineuse ou de pratiques sexuelles à risque datant dans les six derniers mois.

La quantité de sang prélevée est à 7 ml/kg pour ne pas induire de l’anémie [2].

Il est nécessaire de passer par l’étape de contrôle biologique du sang.

La sélection des donneurs de sang et des composants sanguins subiront une sélection de dépistage pour vérifier si le don est indiqué ou non.

On acceptera uniquement des personnes en bonne santé ayant des antécédents médicaux satisfaisant pour des dons de sang à des fins thérapeutiques [8].

(20)

Il s’en suivra le recueil et conservation de sang.

Le sang total est recueilli dans une poche renfermant une solution anticoagulante, qui contient du citrate et des nutriments cellulaires tels que le glucose et l’adénine. Les premières phases de centrifugation privent les globules rouges résiduels de plus de la moitié de ces nutriments. Aussi paraît-il plus logique de fournir les nutriments appropriés aux cellules par le biais d’un milieu de remise en suspension plutôt que de les incorporer dans la solution anticoagulante initiale. Le sang est prélevé dans des poches, on prend ensuite deux tubes [9].

Un tube dit "pilote" avec anticoagulant qui sert à la détermination du groupage sanguin et aux épreuves de compatibilité et l’autre tube sans anticoagulant sert aux examens sérologiques.

Le sang prélevé est stocké au réfrigérateur à +4℃. La durée de validité est de 21 jours à partir du prélèvement.

Le sang recueilli sera fractionné : la préparation de dérivée sanguine est l’opération la plus importante des fractionnements. Elle est coûteuse et les gammaglobulines constituent le produit sanguin stable dont la valorisation et la plus profitable.

Et enfin la transfusion proprement dite : elle est réglementée par l’Arrêté du 24 avril 2002.

Elle est sous la responsabilité de l’établissement de santé. Le transport peut être assuré par le personnel dépendant de l’établissement de santé, ou bien par du personnel de l’établissement de transfusion sanguine (ETS). Il doit respecter des conditions permettant une bonne conservation des PSL, notamment de température (2℃et 10℃pour les concentrés globulaires et le plasma frais congelé, entre 18℃et 24℃ pour les plaquettes [10].

1.1.3 Principes

La transfusion sanguine obéit à des principes qui cherchent à intégrer deux dimensions : développer la collecte de sang ; répondre aux besoins médicaux transfusionnels. Ces principes sont : le volontariat, le bénévolat et l’anonymat du donneur de sang ainsi que le non-profit des organisations chargées de la collecte, de la préparation, du contrôle et de la distribution des produits sanguins [2].

La transfusion sanguine devient une thérapeutique substitutive spécifique. « Le but de la transfusion est d’apporter au receveur les constituants du sang qui lui font défaut. », enseignait alors le professeur Salmon, et il ajoutait « Il faut transfuser le malade avec le produit sanguin dont il a besoin et rien d’autre. »

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2020

1.1.4 Causes

Une transfusion sanguine est proposée en cas d’anémie, c’est-à-dire un manque de globules rouges. Beaucoup de situations peuvent entraîner une anémie : hémorragies aiguës, hémolysines, saignements de faible quantité, mais régulière, leucémies, certains traitements lourds (chimiothérapies), alimentation ne contenant pas assez de fer…. D’autres cancers comme les cancers des tubes digestifs, peuvent causer des saignements susceptibles de provoquer l’anémie. Les cancers qui affectent les organes qui participent au maintien des taux sanguins, comme le rein et la rate, peuvent aussi modifier le nombre de cellules sanguines [11].

Les globules rouges assurent le transport de l’oxygène : les cellules du corps meurent si elles manquent d’oxygène. Dans les anémies les plus graves, la transfusion sanguine est indispensable et il n’y a pas d’alternative, son absence peut conduire à la mort ou à des séquelles graves (infarctus, lésions cérébrales irréversibles…).

Les traitements de cancer, dont de nombreux agents chimiothérapeutes, peuvent affecter les cellules sanguines de la moelle osseuse et faire baisser leur nombre. Une radiothérapie administrée à une grande partie du squelette ou aux os du bassin peut affecter la moelle osseuse et engendrer une baisse du nombre de cellules sanguines. Une personne qui a une greffe de cellules souches reçoit de fortes doses de chimiothérapie ou de radiothérapie ou bien des deux.

Ces traitements détruisent les cellules qui fabriquent le sang dans la moelle osseuse. Le nombre de cellules sanguines de ses personnes est souvent très bas pendant 10 à 20 jours à la suite de la greffe et elles peuvent avoir besoin de transfusions de produits sanguins [11].

Dans les cas où cela peut être programmé, une autotransfusion avec les propres globules rouges de la personne peut être proposée. Au cours de certaines interventions chirurgicales, le sang peut être récupéré, filtré et retransfusé. Dans certains cas également, le patient peut déposer à l’avance une certaine quantité de sang qui est conservée 2 à 3 semaines et peut lui être transfusée. Dans les cas où l’anémie est moins importante, il existe un certain nombre de traitements qui permettent de limiter, voire d’éviter le recours à une transfusion sanguine. Le don de sang autologue pourrait aussi être une option quand : La chirurgie est élective, c’est-à- dire non nécessaire immédiatement ou de toute urgence ou vous êtes en assez bonne santé pour donner du sang [1].

(22)

On peut aussi avoir recours à la transfusion sanguine pour traiter :

Une perte de sang soudaine pendant ou après la chirurgie, lorsque le taux d’hémoglobine est peu élevé avant, pendant ou après la chirurgie, en présence d’une maladie cardiaque ou pulmonaire grave ou une maladie qui affecte la production de cellules sanguines, comme la drépanocytose ou l’anémie aplasique.

On peut faire une transfusion de plasma frais congelé aux personnes atteintes de troubles de saignements, de certains types de cancer ou de maladie du foie. On peut aussi faire une transfusion de plasma frais après une greffe de moelle osseuse ou de cellules souches ou certaines opérations qui engendrent une perte de sang importante. Il existe deux types de transfusion de plasma : la transfusion de cryoprécipités (pour remplacer plusieurs facteurs de coagulation sanguine, l’hémophilie par exemple ou lorsque le taux de fibrinogène est réduit) et la transfusion de gammaglobulines (pour compenser le taux de gammaglobulines) [12].

Les globules blancs aident à combattre les infections et les maladies. On fait rarement des transfusions de globules blancs. On les réserve habituellement pour les personnes dont le nombre de globules blancs est bas (leucopénies, ou neutropénies) et qui sont atteintes d’une infection grave qui ne réagit pas à l’antibiotique.

Les plaquettes aident le sang à coaguler. Si le nombre de plaquettes est bas, on parle de thrombopénie. Une transfusion de plaquettes peut être nécessaire si la moelle osseuse ne fabrique pas suffisamment de plaquettes à cause du cancer ou de son traitement. On y a recours pour corriger le taux des plaquettes ou s’il y a un risque de saignement provoqué par une chirurgie ou d’autres interventions. Ils arrivent parfois que les transfusions de plaquettes ne soient pas nécessaires si le nombre de plaquettes est bas mais qu’il n’y a pas signe de saignement [13].

La décision de transfusion sanguine n’est prise, que dans les cas de nécessité absolue (risque de décès, de séquelles graves, de limitation importante des activités). Il n’existe, dans ces cas- là aucun substitut thérapeutique. Les autres traitements de l’anémie cités plus haut sont largement utilisés en France où le recours à la transfusion sanguine est nettement moins fréquent que dans d’autres pays européens de même niveau médical. Les risques mortels liés à un retard de transfusion sont nettement supérieurs à ceux liés aux produits sanguins eux-mêmes [11].

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2020

1.1.5 Risques liés à la transfusion sanguine

La transfusion est un traitement qui peut être nécessaire en cas de manque de globules rouges, de plaquettes, de facteurs de coagulation. Comme tout traitement, la transfusion comporte des avantages et des inconvénients. Les inconvénients sont rares et le plus souvent sans gravité : urticaire, réaction fébrile. Entre autres, il existe des inconvénients ou risques assez graves.

Nous allons juste nous intéresser à l’allo immunisation et au paludisme transfusionnel.

➢ Allo-Immunisation

C’est l’apparition d’anticorps anti-érythrocytaires : après introduction d’un antigène inexistant chez le receveur par transfusions, greffes, grossesses, fausses couches. Ce sont des AC immuns, irréguliers [14].

Anticorps les plus importants : Rhésus, Kell, Duffy et Kidd.

L’allo immunisation transfusionnelle se détermine en six points [15].

Elle est plus fréquente chez la femme et s’immunise deux fois plus souvent que chez l’homme, Elle est aussi plus fréquente dans certaines maladies et peut exploser et aboutir à un blocage : plus un sujet possède d’anticorps, plus il a des risques d’en fabriquer d’autres. Les anticorps apparaissent et disparaissent au rythme des stimulations (la concentration d’anticorps varie avec le temps) et la RAI et le test de compatibilité ont une durée de validité limitée dans le temps : 3 jours. L’allo immunisation est globale lorsqu’elle concerne le système HLA et les autres systèmes de groupes sanguins.

(24)

➢ Le paludisme transfusionnel

La transfusion est une voie potentielle de transmission du Plasmodium, ainsi que par partage d’une seringue souillée. La contamination peut être faite par un très faible nombre de parasites [16,17]. La transmission peut avoir lieu, non seulement par transfusion de culot globulaire mais également des autres produits sanguins labiles tels le plasma les concentrés leuco plaquettaires et les concentrés de leucocytes. Le risque de transmission par la transfusion de plasma est quasiment impossible en raison des diverses transformations subies par le plasma. La viabilité des parasites dans les poches de sang est directement dépendante de la viabilité des hématies.

Les solutions de conservation de type SAG (Saline Adénine Glucose) et Mannitol permettent une conservation des poches de sang de 3 à 6 semaines et donc de parasites, puisque ces derniers peuvent survivre à une température de 4℃ pendant plusieurs jours voire des semaines [18,19].

Les principales particularités du paludisme chez les receveurs sont un retard au diagnostic et une létalité élevée (10–12 %), vingt fois supérieure à la létalité du paludisme du voyageur, notamment chez le sujet âgé [16].

Face à toutes ces menaces, aucune méthode n’est mise en œuvre pour détecter les parasites dans les poches de sang avant toute transfusion sanguine.

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2020

2 CADRE, MATERIEL ET METHODOLOGIE DE TRAVAIL

2.1 Cadre de travail

Cette étude a été rendue possible grâce à deux cadres : l'un institutionnel et l'autre technique.

2.1.1 Cadre institutionnel

L'Ecole Polytechnique d'Abomey-Calavi (EPAC) ex CPU (Collège Polytechnique Universitaire) avait ouvert ses portes aux premiers étudiants en février 1977. Situé dans l'enceinte de l’Université d’Abomey-Calavi, il était un établissement public de formation scientifique et technique supérieure orientée vers la professionnalisation. Le 25 février 2005, le Président de la République signe un Décret (N⁰ 2005-078) portant création, attribution, organisation et fonctionnement de l'Ecole Polytechnique d'Abomey-Calavi (EPAC), « une Ecole Supérieure à caractère de Grande Ecole » en lieu et place du CPU et dépendant directement de l'Université d'Abomey-Calavi. Elle est actuellement dirigée par le Professeur Guy ALITONOU.

Cette institution comprend deux principaux secteurs à savoir : le secteur industriel et le secteur biologique au sein duquel se trouve le département du Génie de Biologie Humaine où nous avons suivi notre formation.

2.1.2 Cadre technique

➢ Présentation

Notre étude s'est déroulée dans les sections d'immuno- hématologie et de parasitologie du laboratoire du CSVH. Ce centre est situé dans le 10ème arrondissement au quartier Missèkplé dans la rue de la pharmacie Fifadji, à environ deux cents mètres de la voie pavée Kouhounou-Sainte Rita.

Le CSVH est un centre à but non lucratif et fait partie des œuvres sociales de l'Archidiocèse de Cotonou. Ce centre fourni des soins de santé aux patients de Cotonou dans des domaines très variés : Médecine générale, Gynéco-obstétrique, chirurgie, pédiatrie, cardiologie, ophtalmologie, etc.

Le laboratoire d'analyses biomédicales comporte une salle d'accueil des malades, deux postes de prélèvement, une section de bactériologie, une section d'immuno- hématologie, une section de sérologie, une section de biochimie et une section de parasitologie. Il est ouvert tous les jours 24heures sur 24. Les examens du jour sont effectués de 08heures à 16heures.

(26)

Les résultats sont prêts à partir de 18 heures, sauf ceux de certaines analyses (telles que les cultures bactériologiques et les électrophorèses d’hémoglobines) et les examens spéciaux.

Les nuits, les week-ends et les jours fériés un service minimum est assuré par la garde et la permanence.

➢ Activité

Au laboratoire, l’accueil est le premier contact avec les malades. Il se fait à la salle d’accueil dont le guichet est la porte d’entrée des bons d’analyse et de sortie des résultats. On y reçoit divers échantillons biologiques (sang, urine, ponction lombaire, pleurale ou ascitique, crachats…). Les malades sont ensuite enregistrés et affectés d’un numéro qui accompagne les échantillons et les bulletins jusqu’à la délivrance des résultats. L’accueil est une étape obligatoire avant d’accéder aux postes de prélèvement.

A 11 heures, les échantillons sont envoyés dans les différentes sections pour les diverses manipulations.

2.2 Matériel

2.2.1 Matériel biologique

Pour notre étude le matériel biologique est constitué de soixante-huit (68) poches de sang de la BS du CSVH St Luc. Ce sont des poches stockées à la BS et destinées à être cédées aux patients du centre qui sont dans le besoin. Notre étude a couvert la période allant du lundi 02 septembre 2019 au 22 septembre 2019. Nous avons eu à réaliser les tests de diagnostics rapides sur chaque poche de sang ainsi que la méthode conventionnelle qu'est la goutte épaisse.

2.2.2 Réactif

Nous avons utilisé de la Pissette d'alcool à 70℃ du Méthanol, la Solution de Giemsa dilué à 10 % et de l'Eau physiologique.

2.2.3 Consommables

Comme consommables nous avons les Gants en latex, le Coton hydrophile, les Aiguilles, le Marqueur, les Lames porte-objets propres bien dégraissées, les Lamelles propres à bord réguliers, le Crayon, le Support de coloration, Kit de TDR (cassette de TDR, anse de prélèvement, dessiccateur) en cours de validité et non ouvert au préalable, Gants à usage unique, Tampons imbibés d'alcool, Lancettes stériles à usage unique, Solution tampon, Conteneur à aiguilles, Poubelle à pédales, Crayons/marqueurs indélébiles, Minuteur, Registre.

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2.2.4 Matériel lourd

La Centrifugeuse, le microscope photonique de marque Olympus et le Blood Bank Réfrigérateur sont les matériaux lourds à utiliser.

2.3 Méthodes

2.3.1 Tests de Diagnostics Rapides du paludisme (TDR) [20]

➢ Principe

De nombreux tests sont disponibles sur le marché et les comparer les uns aux autres est délicat. Le principe des TDR est basé sur la reconnaissance des antigènes (Histidine-Riche Protéine II (HRP2)) par un anticorps monoclonal spécifique contenu dans la cassette ou la bandelette du TDR ; cette reconnaissance se fait par immuno- chromatographie, la réaction antigène-anticorps se révélant par l'apparition d'une bande de couleur mauve. Paracheck test : c'est un test manuel sur bandelettes. La sensibilité est estimée entre 77 et 98 %, soit plus de 100 parasites par microlitre de sang, avec une spécificité au Pf de 83 à 98 % [21]. Un résultat positif se traduit par l'apparition des bandes tests et contrôle. Un résultat négatif se traduit par l'apparition de la bande contrôle seul. Un résultat est invalide en l'absence de bande contrôle ; dans ce cas, il faut rependre l'examen avec un nouveau test. L'apparition des bandes est rapide 15 mn en moyenne (en fonction du type de TDR).

➢ Technique

Vérifier la date de péremption de la cassette de TDR, utiliser une surface propre et plane, porter des gants, mettre le test à la température ambiante, ouvrir le test juste au moment de l'emploi, mentionner le code ou le nom de la poche, le numéro et la date.

Piquer d'un coup sec et rapide avec une lancette/vaccinostyle stérile sur le bord du saucisson de la poche de sang et prélever 5 microlitres de sang à l'aide de l'anse de prélèvement.

NB : Pour le TDR, il n'est pas nécessaire d'essuyer la première goutte de sang.

Déposer les 5 microlitres de sang dans la fenêtre carrée puis déposer quatre gouttes (selon type de TDR disponible) de la solution tampon dans la fenêtre ronde verticalement.

Laisser reposer le test sur la surface plane, attendre au plus 15 minutes pour la lecture des résultats.

NB : Il est nécessaire d'attendre 15 minutes pour déclarer que le test est négatif.

(28)

Mettre la lancette dans le conteneur de sécurité après usage.

2.3.2 Confection de la Goutte Epaisse (GE) et du Frottis Sanguin (FS) [20]

Le diagnostic de certitude du paludisme repose sur deux techniques : la goutte épaisse et le frottis.

➢ Confection de la GE

La goutte épaisse permet une « concentration » Plasmodiums éventuellement présents dans l'échantillon examiné, si bien que la lecture en est normalement plus rapide et la sensibilité plus élevée. La goutte épaisse comme le frottis sanguin reste aussi une technique de référence pour l'OMS. Leur fiabilité est dépendante de la parasitémie du sujet infecté, de la qualité de la coloration de la lame, ainsi que de l'expérience et de l'attention du technicien qui les effectue [21]. Pour sa réalisation, il faut :

➢ Confection du frottis sanguin

Le frottis sanguin reste la technique de référence pour l'OMS. Il permet d'identifier l'espèce plasmodiale éventuellement présente dans l'échantillon examiné. Pour sa réalisation, il faut :

Disposer le poste de travail, rassembler le matériel à utiliser.

Tenir la lame à l'une des extrémités (par ses bords) entre le pouce et l'index de la main gauche (pour un droitier), à l'aide de la pipette pasteur, déposer une goutte de sang à environ 2 mm de l'autre extrémité de la lame.

Prendre la lamelle et la placer sur la lame à quelque cm au-dessus de la goutte, incliner la lamelle à 45⁰ puis glisser légèrement la lamelle vers la goutte de façon à amener son bord au contact de la goutte de sang, puis attendre l'étalement du sang par capillarité.

Tirer d'un geste uniforme et continu le frottis jusqu'à l'épuisement de la goutte de sang.

Le frottis a une langue de chat.

Déposer sur une lame, une goutte de sang de la grosseur d'un grain de blé, utiliser un coin de la lamelle qui a servir à confectionner le frottis sanguin ; Etaler en partant du milieu de la goutte de sang par au plus six (06) mouvements circulaires continus, en spirales pour obtenir une couche épaisse et uniforme ayant à peu près 1 cm de diamètre.

(29)

2020

Identifier et sécher la lame.

Pour séchage laisser la lame confectionnée à plat horizontalement sur la paillasse ou sur un râtelier pour permettre un séchage uniforme puis Identifier la lame en inscrivant sur la base du frottis sanguin séché les initiales ou numéro d’ordre de notre échantillon d'étude.

Pour fixation les frottis plonger le dans un bain de méthanol, la lame en position inclinée pour préserver la goutte épaisse et déposer la lame sur un râtelier avec le frottis orienté vers le bas.

2.3.3 Coloration des lames

Déposer les lames confectionnées sur les supports. Prélever à l'aide d'une pissette la solution de Giemsa dilué à 10 %, puis faire couvrir toutes les lames avec la solution prélevée. Laisser agir pendant 10 à 15 minutes, rincer à l'eau de robinet.

Laisser sécher à l'air en position inclinée (la GE orientée vers le haut) sur le râtelier [22].

2.3.4 Lecture

L'examen se fait à l'objectif x100.

Faire la mise au point à l'objectif x10 puis rechercher toujours à l'objectif x10, une partie bien colorée de la lame de GE sans dépôt de colorant et riche en cellules séparées les unes à côté des autres. Mettre une goutte d'huile à immersion sur la goutte épaisse [14].

Faire la mise au point à l'objectif x100. Parcourir la lame suivant la méthode de Rampart et procéder à l'identification correcte de l'espèce plasmodiale sur FS si la GE est positive.

2.3.5 Détermination de la densité parasitaire sur la GE

Le calcul de la densité parasitaire sur goutte épaisse est établi par rapport aux leucocytes. Il faut compter le nombre de parasites que l'on voit et compter au moins 200 leucocytes en même temps. On estime que le nombre moyen de leucocytes est de 6000 par µL de sang. Si le nombre de parasites comptés est inférieur à 100 pour 200 leucocytes, la numération est effectuée par rapport à 500 leucocytes [1]. La Parasitémie est exprimée par microlitre de sang. Le calcul du nombre de parasites par µL est :

(30)

Le résultat tient compte des éléments ci-après :

✓ Genre : Plasmodium

✓ Espèces identifiées : P. falciparum, P. vivax, P. ovale, P. malariae, P. Knowles 2.3.6 Présentation du résultat

En cas de résultat négatif on parle d'absence de trophozoïtes de Plasmodium et en cas de résultat positif Présence de trophozoïtes de Plasmodium plus le nom de l'espèce.

2.3.7 Evaluation des performances du TDR utilisé [4]

Méthodes de calcul de la sensibilité (Se), la spécificité (Sp), la valeur prédictive positive (VPP) et la valeur prédictive négative (VPN) du TDR utilisé.

• Sensibilité (Se) : est la capacité d'un test de TDR à identifier correctement les poches infectées par le plasmodium à la GE ;

• Spécificité (Sp) : est la capacité d'un test à identifier correctement les poches non infectées par le plasmodium à la GE ;

• Valeur Prédictive Positive (VPP) : c’est la probabilité qu'une poche ayant un résultat positif soit réellement infectée par le plasmodium à la GE ;

• Valeur Prédictive Négative (VPN) : c’est la probabilité qu'une poche ayant un résultat négatif ne soit pas infectée par le plasmodium à la GE.

Tableau 1 : Tableau de contingence 2×2 pour l’évaluation de la performance du TDR

GE TOTAL

Négatif Positif

TDR Négatif VN FN VN+FN

Positif FP VP FP+VP

TOTAL VN+FP FN+VP

• VP (Vrais Positifs) : ce sont les poches chez lesquels le TDR est positive et la GE est positive ;

• FP (Faux Positifs) : le TDR est positif et la GE est fausse ;

• FN (Faux Négatifs) : le TDR est négatif et la GE est positive

(31)

2020

• VN (Vrais Négatifs) : le TDR est négatif et la GE est négative.

Il s'agit donc de la probabilité conditionnelle qu'on peut noter : Sensibilité=VP ÷ (VP+FN)

De manière similaire, on a : Spécificité= VN ÷ (VN+FP) VPP= VN ÷ (VP+FP) VPN= VN ÷ (VN+FN)

(32)

3 RESULTATS ET DISCUSSIONS

3.1 RESULTATS

Notre étude a porté sur soixante-huit échantillons de poches de sang de la BS du CSVH St Luc.

A l’issue de cette étude, les résultats obtenus sont consignés au niveau des tableaux et figures suivants.

3.1.1 Information sur les transfusées

➢ Répartition des sujets transfusés selon le sexe

Figure 2 : Répartition des sujets transfusés selon le sexe

Cette répartition de la population en fonction du sexe révèle que la majorité des patients sont de sexe masculin avec un pourcentage de 52,90 % contre 47,10 % pour le sexe féminin, soit une sex-ratio de 0,89 masculin féminin.

47,10%

52,90%

Féminin Masculin

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➢ Répartition des sujets transfusés selon l’âge

Figure 3 : Répartition des sujets transfusés selon l’âge

La population étudiée est âgée de 15jours à 51 ans. La tranche d’âge la plus représentée dans la population des enfants de moins de 5 ans avec un pourcentage de 58,80 %.

➢ Répartition de diverses anémies selon la cause de transfusion

Figure 4 : Répartition de diverses anémies selon la cause des transfusions L’anémie palustre représente le motif le plus utilisé pour les transfusions.

58,80%

32,40%

8,80%

0,00%

10,00%

20,00%

30,00%

40,00%

50,00%

60,00%

70,00%

<5ans [5-10] >10ans

2,90%

8,80%

88,00%

A-C-A Anémie Drépanocytaire Anémie Palustre

(34)

3.1.2 Evaluation des performances du TDR utilisé

Tableau 2 : Tableau de contingence 2×2 pour l’évaluation de la performance du TDR

GE TOTAL

Négatif Positif

TDR Négatif 60 (90,9%) 0 (0%) 60 (88,2%)

Positif 6 (9,1%) 2 (100%) 8 (11,8%)

TOTAL 66 (100%) 2 (100%) 68 (100%)

Tableau 2 : Paramètres de précision du TDR à l’aide de la microscopie GE

Performances TDR utilisé

Se 100 %

Sp 91 %

VPP 25 %

VPN 100 %

De l’analyse de ce tableau, le TDR utilisé s’est révélé très sensible et spécifique. Cependant, on observe une faible valeur prédictive positive.

3.1.3 Information sur les poches

➢ Répartition des poches selon la nature

Figure 5 : Répartition des poches selon la nature

De cette figure, il ressort que plus de poches pédiatriques sont les utilisés pour les transfusions avec un pourcentage de 97,10 % que 2,9 % de poches adultes.

2,90%

97,10%

Poche de sang

Adulte Pédiatrique

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➢ Répartition des poches de sang selon le groupe sanguin

Figure 6 : Répartition des poches selon le groupe sanguin Rh De cette figure, il ressort que le groupe sanguin le plus majoritaire est le groupe 0+.

➢ Répartition selon la détection du plasmodium par GE-DP et TDR Tableau 4 : Répartition selon la détection du plasmodium par GE-DP et TDR

TDR GE-DP

Positif 11,80 % 2,90 %

Négatif 88,20 % 97,10 %

On remarque de l’analyse de ce tableau que 11,8 % de poche de sang se sont révélé positif au TDR contre 2,90 % sur la Goutte Epaisse.

32,40%

26,50%

41,10%

GS-RH

A+ B+ O+

(36)

3.2 DISCUSSION

La transfusion sanguine au Bénin depuis plusieurs années a connu une évolution parallèlement à celle du réseau hospitalier nationale et aux progrès scientifiques en matière de transfusion sanguine. La sécurité transfusionnelle assurée par une maîtrise parfaite de toutes les étapes de la chaîne transfusionnelle.

Le risque de paludisme transfusionnel constitue une préoccupation importante de santé publique compte tenu de l’état morbide des transfusés. Dans la présente étude qui a porté sur le risque de paludisme post-transfusionnel, 97 % des poches de sang testées avant transfusion étaient des poches pédiatriques. Cette remarque rejoint celui de Fatoumbi en 2019 [21] qui a fait le même constat au Centre Hospitalier Départemental Universitaire de l’Ouémé et du Plateau. Ce constat s’explique par la forte demande du sang en pédiatrie [23]. Cette forte demande est liée aux pathologies des enfants de 0 à 5 ans qui sont dominées par le paludisme, premier motif de la transfusion dans nos structures sanitaires au Bénin selon Alihonou et al, en 2018 [24].

Des résultats obtenus, 11, 80 % des poches de sang comportant des trophozoïtes P.

Falciparum par TDR pour 2,90 % par GEDP. A cela s’ajoute une sensibilité de 100 % et une spécificité de 91% des tests de diagnostic rapides.

Ces résultats sont en désaccord à ceux obtenus par Dougnon et al, en 2015 [4]. En effet, ces auteurs avaient obtenu une sensibilité de 45,45 % et une valeur prédictive de 86,9 %.

Notons aussi que l’amélioration des TDR cédées en ces dernières années. Il est donc important qu’avant toute introduction de TDR pour la qualification des poches de sang, de contrôler et de choisir les TDR ayant une bonne performance. Ces résultats rejoignent ceux de Hendricksen et al en 2011 [25], qui trouve que les TDR constituaient une bonne alternative pour le diagnostic du paludisme. Aussi dans notre contexte, ce test peut être réalisé comme test de contrôle ultime au lit du malade qui permettra en cas de positivité d’associer, à la transfusion, un traitement antipaludique systématiquement comme le proposent cet ouvrage [26].

Les sujets ayant reçu les poches de sang sont pour 52,9 % de sexe masculin avec une prédominance d’enfant de 0-5 an. Il est bien connu que cette tranche d’âge correspond à la tranche d’âge le plus affecté par le paludisme au Bénin [24], il est donc important que les poches de sang soient contrôlées pour ne pas augmenter la parasitémie chez ces enfants déjà fragiles.

Ces résultats sont en rapport avec nos observations qui montrent une prédominance de 88,00%

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des cas d’anémie palustre et 8,80% des cas d’anémies drépanocytaires chez qui la forme des hématies ne permet pas l’entrer des trophozoïtes dans les GR [20,27]. La présence des trophozoïtes n’est donc sans gravité pour ces sujets.

En Somme, le risque transfusionnel lié à la présence de trophozoïtes dans les poches de sang constitue une situation qui mérite une attention particulière pour rester en accord avec l’acte médical qui consiste à soigner sans apporter d’autres pathologies aux patients. Les TDR constituent un bon alternatif pour une bonne prévention du paludisme transfusionnel.

(38)

CONCLUSION

Le risque d’anémie transfusionnel est une réalité dans notre pays. De la présente étude, nous notons que les poches pédiatriques sont les plus servies au CSVH Saint Luc de Cotonou avec un risque résiduel de 11,80 % par TDR et 2,90 % GE-DP. Ceci montre une fois encore l’importance d’insérer le diagnostic du paludisme dans le package des tests de qualification en vue d’associer un traitement palustre en cas de positivité.

Ceci permettra de réduire le risque de paludisme transfusionnel qui peut être fatale encore qu’il concerne plus les enfants.

(39)

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SUGGESTIONS

Nous suggérons à l’endroit :

✓ Des autorités d’EPAC, en particulier du département de Génie de Biologie Humaine o D’améliorer les conditions de formations pratiques des étudiants ;

o D’augmenter la durée de stage de fin de formation des étudiants afin de leur permettre de mieux appréhender la pratique du terrain ;

• Du ministère de la santé, en particulier le PNLP en collaboration avec l’agence nationale de transfusion sanguine d’organiser des ateliers de formations en vue de sensibiliser les techniciens de laboratoires à inclure les TDR (HRP-2) dans les tests de qualifications des poches à divers niveaux afin d’améliorer les conditions de la transfusion sanguine ;

• Des cliniciens, de prescrire systématiquement les TDR avant et après toute transfusion de sang afin de réduire les risques de complication du paludisme post-transfusionnel ;

• De tout le personnel qualifié du SDTS/A-L, de multiplier les séances de sensibilisation vis-à-vis des donneurs sur les moyens de prévention du paludisme et leur conseiller d’éviter l’automédication.

(40)

BIBLIOGRAPHIE

[1] TAZEROUT M., GALINFER Y., 2019. Manuel d’aide à la formation en transfusion sanguine. Coordination Régionale d’Hémovigilance ; 40p.

[2] MEDJAMIA H., CHEKALIL I., AOUAMEUR K., 2018. La sécurité transfusionnelle et l'hémovigilance à l'hôpital de Sidi bouabida el-attaf. Mémoire de thèse de l'Université Djilali Bounama Khemis Miliana (Algérie) ; 52p.

[3] PILLONEL J. LAPERCHE S. ,2004. Risque résiduel de transmission du VIH, du VHC et du VHB par transfusion sanguine entre 1992 et 2002 en France et impact du dépistage génomique viral. Transfusion Clinique et Biologique. Volume 11, Issue 2 75-114p.

[4] DOUGNON TV., BANKOLE HS., HOUNMANOU YMG., ECHEBIRI S., ATCHADE P., MOHAMMED, 2015. Comparative Study of Malaria Prevalence among Traveller’s in Nigeria (West Africa) Using Slide Microscopy and a Rapid Diagnosis Test Hindawi Publishing Corporation Journal of Parasitology Research, Article ID 108707, 4 p.

[5] RUBIO TM., DARGAUD Y., REVERDY F., GHEQUIÈRES H., 2012. Hématologie- Cancérologie : Concours ECN, Pradel 2ème Edition 168p.

[6] WORLD HEATH ORGANIZATIONS, 2008. Manuel de gestion, maintenance et utilisation du matériel de chaine du froid pour le sang. Affichées avec l'autorisation de world health organization. Organisation mondiale de la santé : 6 et 8p.

[7] COORDONNIER C., HERBRECHT R., 2000. Infection en Hématologie. John Libbey Eurotext. 135p.

[8] OMS, 2017. Sécurité transfusionnelle et approvisionnement en sang.

[9] CONSEIL DE L'EUROPE ,2006. Guide Pour la préparation, l'utilisation et l'assurance de qualité des composants sanguins 12ème édition -34-62p.

[10] JEAN–JACQUES L., JEAN-FRANÇOIS S., édition 2010. John Libbey Eurotext 127, transfusion en hématologie avenue de la République, 92120 Montrouge, France, John Libbey Eurotext, Paris, : 352.268p.

(41)

2020

[11] HAUTE AUTORITE DE SANTE (HAS), Novembre 2014. Transfusion de globules rouges homologues : produits, indications alternatives en hématologie et en oncologie.

ARGUMENTAIRE SCIENTIFIQUE

[12] AGENCE FRANCAISE DE SECURITE SANITAIRE DES PRODUITS DE SANTE.

2002. Transfusion de Plasma Frais Congelé : produits, indication. Transfusion Clin Biol : 9 : 322-332pp.

[13] MULLER JY., 2011. Transfusion Sanguine : Produits Sanguins Labiles : Elsevier Masson SAS, Encyclopédie Médico-Chirurgicale :13-054-A-10.

[14] LIENHART A., AUROY Y., PEQUIGNOT F., BENHAMOU, JOUGLA E., 2003.

Enquête Mortalité » SFAR –Inserm Lienhart Conférences d'actualisation.

[15] MULLER JY., JEROME P., PATRICIA F., NATHALIE V., 2004.Le TRALI, syndrome de détresse respiratoire aiguë post transfusionnelle. Dans : Hématologie.

[16] ATCHADE SP, 2014. Utilisation de Biomarqueurs de Plasmodium dans le cadre de la prévention du paludisme transfusionnel au Sud Bénin. Mémoire de thèse de Université de Strasbourg (France) et de l'Université d'Abomey-Calavi (Bénin) ; 150p.

[17] LOUBNA MI, 2011. Paludisme transfusionnel A propos d'un cas. Mémoire de thèse de l'Université Mohammed V(Maroc). 109p.

[18] HOWARD RJ, UNI S, AIKAWA M, ALEY SB, LEECH JH, LEW AM, WELLEMS TE, RENER J, TAYLOR DW, 1986. Secretion of a malarial Histidine Rich protein (pf HRP II) from Plasmodium falciparum infected erythrocytes. J Cell Biol ; 103 : 1269- 77p.

[19] BOUCHAUD O, HOUZE S., LONGUET C., DI PIAZZA, RUGGIERI C., SECARDIN Y., COULAUD JP., LE BRAS J., 2000. Use of the PARASIGHT-F Diagnostic Test for imported malaria in a travel clinic. Am. J. Trop. Med Hyg ; 63 : 76-79p.

[20] AUBRY P., GAÜZÈRE B.A., 2020. Paludisme. Medicine tropicales. 30p .

[21] MINODIER P, 2005. Dépistage du paludisme : tests rapides Malaria diagnosis : rapid detection tests). Journal de Pédiatrie et de Puériculture ; 18 :386-388p.

(42)

[22] OMS.1994. Les techniques de base pour le diagnostic microscopique du paludisme Genève ; Partie I. Guide du stagiaire : 72 : 53p.

[23] FATOUMBI LSM., 2018. Évaluation de l'efficacité de la transfusion comme traitement chez les enfants en cas d'anémie palustre. Mémoire de licence professionnel en BIOHYGIENE ET SECURITE SANITAIRE. École Polytechnique d'Abomey-Calavi (EPAC). 36p

[24] ALIHONOU F., SAGBO GG., BAGNAN L., D'ALMEIDA M., LAYLA HF., KOUMAKPAI S., AHIVI B.,2018. Transfusion Sanguine dans le traitement grave chez l'enfant au CNHU-HKM de Cotonou. RAMUR :20(2) :84-88p

[25]HENDRIKSEN LCE., MTOVE G., PEDRO AJ., ERMELINDA G., KAMOLRAT S., SUE JL., ABRAHAM M., SAMUEL G., HUGH R., NICHOLAS PJD., NICHOLAS JW., LORENZ VS., ARIEN MD.,2011. “Evaluation of a PfHRP2 and a pLDH-based rapid diagnostic test for the diagnosis of severe malaria in 2 populations of african children,” Clinical Infectious Diseases, vol.52, no.9,1100–1107, pp.

[26] ANANI LY. BIGOT A., LATOUNDJI S., AHLONSOU F., DE SOUZA J., AKPLOGAN S., LAWSON J., PY JY., ZOHOUN I., 2014. Réalité et importance du paludisme transfusionnel dans un contexte d’endémie stable : Cas de Cotonou (Bénin).

Transfusion Clinique et biologique .21(1) :23-30p

[27] PERIGNON A., BOTTEREL F., FARRUGIA C., FOULET F., BACHIR D., GALACTEROS F., BRETAGNE F. 2008. Paludisme et drépanocytose homozygote.

Médecine et Maladies infectieuses (38) 140-141p.

(43)

2020

Table des matières

LISTE DES ENSEIGNANTS DU DEPARTEMENT DE GENIE DE BIOLOGIE ... i

DEDICACE ... iii

REMERCIEMENTS ... iv

HOMMAGES ... v

LISTES DES SIGLES ET ABREVIATIONS ... vi

LISTE DES TABLEAUX ... ix

LISTE DES FIGURES ... x

RESUME ... xi

ABSTRACT ... xii

SOMMAIRE ... 0

INTRODUCTION ... 1

1 SYNTHESE BIBLIOGRAPHIQUE ... 3

1.1 La Transfusion Sanguine ... 3

1.1.1 Définition ... 3

1.1.2 Les différents étapes de la Transfusion sanguine ... 3

1.1.3 Principes ... 5

1.1.4 Causes ... 6

1.1.5 Risques liés à la transfusion sanguine ... 8

2 CADRE, MATERIEL ET METHODOLOGIE DE TRAVAIL ... 10

2.1 Cadre de travail ... 10

2.1.1 Cadre institutionnel ... 10

2.1.2 Cadre technique ... 10

2.2 Matériel ... 11

2.2.1 Matériel Biologique ... 11

2.2.2 Réactif ... 11

2.2.3 Consommables ... 11

2.2.4 Matériel Lourd ... 12

2.3 Méthodes ... 12

2.3.1 Tests de Diagnostics Rapides du paludisme (TDR) ... 12

2.3.2 Confection de la Goutte Epaisse(GE) et du Frottis Sanguin(FS) ... 13

2.3.3 Coloration des lames ... 14

2.3.4 Lecture ... 14

(44)

2.3.5 Détermination de la densité parasitaire sur la GE ... 14

2.3.6 Présentation du résultat... 15

2.3.7 Evaluation des performances du TDR utilisé ... 15

3 RESULTATS ET DISCUSSIONS ... 17

3.1 RESULTATS ... 17

3.1.1 Information sur les poches ... 17

3.1.2 Evaluation des performances du TDR utilisé ... 19

3.1.3 Information sur les transfusés ... 19

3.2 DISCUSSION ... 21

3.3 CONCLUSION ... 23

SUGGESTIONS ... 24

BIBLIOGRAPHIE ... 25