Extraction, identification structurale et quantification des anthocyanes extraites de plantes endemiques de côte d'Ivoire

Texte intégral

(1)Union-Discipline-Travail. REPUBLIQUE DE COTE D’IVOIRE. ANTHOCYANES non. (Brouillard R., (1993). Colorants de parties des plantes (fleurs, fruits, feuilles, tiges, racines ou graines) en bleu, rouge, mauve, rose ou orange. Famille des flavonoï flavonoïdes;. Classe de pigments vé végétaux photosynthé photosynthétiques hydrosolubles;. . DEFINITION. COMMUNICATION présentée par ADJE Félix. 10èmes Journées Annuelles de la SOACHIM à Cotonou Bénin du 6 -11 août 2007. Félix Houphouët Boigny. Institut National Polytechnique. Ministère de l’Enseignement Supérieur. (Wallin B.K. and Smith B.J., B.J. 1977). Solutions aux ré récurrents problè problèmes de santé santé occasionné occasionnés par la consommation des colorants et antioxydants synthé synthétiques – Etude de la stabilité stabilité. INTERET DE L’ETUDE. CIRAD, UMR CIRADCIRAD-16 Génie des Procé Procédés et Elaboration des Bioproduits - GPEB TA BB-64 / 16 - 73, rue JeanJean-Franç François BRETON 34398 MONTPELLIER Cedex 5 FRANCE Tél. : +(33) 4 67 61 44 47 Fax : +(33) 4 67 61 65 37 E-mail: [email protected] http://www.cirad.fr http://www.gdp.univhttp://www.gdp.univ-montp2.fr/gpeb/. Félix ADJE, Yves LOZANO. EXTRACTION, IDENTIFICATION STRUCTURALE ET QUANTIFICATION DES ANTHOCYANES EXTRAITES DE PLANTES ENDEMIQUES DE CÔTE D’ ’IVOIRE D D’IVOIRE. UNIVERSITE PAUL CEZANNE AIXAIX-MARSEILLE 3. anthocyaniques contenus dans les extraits. Identifiication structurale des composé composés. techniques séparatives membranaires; membranaires;. d’une transposition à l’échelle ’échelle pilote d’extraction par. Optimisation des conditions d’extraction en vue. OBJECTIFS. COLORANT COLORANT NATUREL NATUREL OU OU MATIERE MATIERE PREMIERE PREMIERE EN EN MEDECINE MEDECINE TRADITIONNELLE ’ANTHOCYANES DD’ANTHOCYANES TRADITIONNELLE DU DU FAIT FAIT DE DE PRESENCE PRESENCE D’ ((Mazza Mazza G, ’AUTRES POLYPHENOLS DD’AUTRES G,Miniati MiniatiEE(2000) (2000)ET ETD’ POLYPHENOLS. EXPLOITATION EXPLOITATIONTRADITIONNELLE TRADITIONNELLE. ANTIOXYDANTS) ((ANTIOXYDANTS) SOURCES SOURCES DE DE BIOMOLECULES BIOMOLECULES ACTIVES ACTIVES (A ((Tsai Tsai P, P,McIntosh McIntoshJ.J.etetalal2002); 2002);ET ETFONCTIONNELLES FONCTIONNELLES. BIODIVERSITE BIODIVERSITEVEGETALE VEGETALE. INTRODUCTION.

(2) RESULTATS. METHODES. MS - MS. Identification / Confirmation des structures des composé composés phé phénoliques par HPLCHPLC- ESI -. Séparation / Identification des composé composés phé phénoliques. HPLC. CHROMATOGRAPHIE. 0. 500. 1000. 1500. 2000. 2500. 3000. 0. 50. 100. 200. 250. 300. Temps de macération (min). 150. 350. 400. C. procera. D. regia. 450. H. sabdariffa. CINETIQUES DE L’EXTRACTION PAR MACERATION EN SOLUTION AQUEUSE. RESULTATS ET DISCUSSION. Enzymage. Décoction. Macé Macération. EXTRACTION (Mil. Aqueux) Aqueux). fleurs séchées de D. regia (flamboyant) et H. sabdariffa (bissap en wolof). procera (kondou en baoulé). feuilles séchées de C.. MATERIEL VEGETAL. MATERIEL ET METHODES A L’ECHELLE LABO. Aires de pics (mAU). ET. H. sabdariffa. 17.2. 23.2. 30.4. 18.50. Anthocyanes C. procera (mg/L) équiv. cyanidine. 105.3. 111.7. 130.7. 35.2. Anthocyanes D. regia (mg/L) équiv. cyanidine. 62.1*. 45.9*. n.d. n.d.. 43.4. Anthocyanes H. sabdariffa (mg/L) équiv. cyanidine. Efficience de l’enzymage (bissap). Efficience de la macé macération H2O/H+ (kondou et flamboyant);. Enzymage. Décoction H2O/H+. Macé Macération H2O/H+. Macé Macération H2O. Mode d’extraction. TENEURS EN ANTHOCYANES EN FONCTION DU MODE D’EXTRATION (Sous Agitation pendant 120 min). Extraits anthocyaniques. D. regia. RESULTATS. METHODES. C. Procera. ET METHODES. ET. ASPECTS DES EXTRAITS AQUEUX OBTENUS. MATERIELS. MATERIELS. 73 62. 45 50. 38. 27. 18. 62 20 20. 50 55 60. 82 73. 40. 95. 0 45. %A. min. Enzyme optizym. 0. 1000 macération Macération Décoction eau eau/acide eau/acide 50°. 2000. 3000. 4000. 5000. 6000. 0. D. regia. C.procera. 7000. 8000. 9000. 2000 1000. 4000 3000. 6000 5000. 8000 7000. 9000. 82. 40. 5. 80. 80. 38. 27. 18. 5. %B. macération eau Décoction eau 50°C. Enzyme optizym. H.sabdariffa. T(° T(°C) capillaire: capillaire: 175 Voltage (kV): 2 Full mass scan spectra: 100 à 1000 Mode d’ionisation ESI Mode ion (+), (-). DIAGRAMMES COMPARATIFS DES METHODES D’EXTRACTION SOUS AGITATION (120 min). 95. 0. Gradient d’élution ’élution. %B. Gradient d’élution ’élution %A. SYSTEME DE SOLVANTS BINAIRES SOLVANT A: HCOOH/H2O (2/98; V/V), SOLVANT B: HCOOH/H2O/ACN (2/18/80; V/V) – Débit: bit: 0,25 mL/min. SYSTEME DE SOLVANTS BINAIRES: SOLVANT A : HCOOH/H2O (10/90; V/V), SOLVANT B: HCOOH/ACN (10/90; V/V) Débit: bit: 0,8 mL/min min. HPLCHPLC- ESI – MS - MS. HPLC. CONDITIONS D’ANALYSES CHROMATOGRAPHIQUES. A ir e s d e p ic s (m A U ). MATERIELS. A ir e s d e p ic s (m A U ).

(3) O. T. AA. M M. OO. RR. HH. C. 0. 10. A3. 20. 30. 40. min. 0. 10. A 3. 20. A5. A4. 30. Chromatogramme des anthocyanes de H. sabdariffa. A1. A2. 40. 0. 0. A3. 10. 20. A6. A5. DAD1 A, Sig=530,4 Ref=off (20 MARS 2007\003-5901.D). 30. Chromatogramme des anthocyanes de D. regia. min. 20. 40. 60. 80. 100. 120. mAU 140. COTONOU, août 2007. MERCI DE VOTRE ATTENTION. Chromatogramme des anthocyanes de C. procera. 0. 20. 20. 0. 40. 40. 60. A5. 80. 100. 100. 60. 120. 120. 80. mAU 140. mAU 140. DAD1 A, Sig=530,4 Ref=off (FIN DE TRAVAUX MARS 2007\005-0401.D). IDENTIFICATION DES COMPOSES EXTRAITS. DAD1 A, Sig=530,4 Ref=off (20 MARS 2007\011-6701.D). RESULTATS. 40 min. A4: Cyanidine 3-Osambubioside. A3: Cyanidine-3-Oglucopyranoside. A2: Delphinidine 3-Osambubioside. HO. HO. HO. HO. OH. OH. OH. OH. O. O. O. O. O. O. OH. O. OH. HO. O. HO. HO. HO. HO. O. O. OH. O. HO. OH. O. OH. HO. OH. OH. HO. O. HO. HO. HO. HO. O. O. OH. O. OH. OH. OH. OH. OH. OH. OH. OH. OH. OH. OH. O. O. H3C HO. HO. OH. OH. O. O. H3C HO. HO. HO. O. OH. HO. O. OH. A6: Pélargonidine 3-Orutinoside. HO. A5: Cyanidine 3-Orutinoside. HO. STRUCTURE CHIMIQUE DES ANTHOCYANES IDENTIFIEES A1: Delphinidine 3-Oglucopyranoside. RESULTATS. HO. O. OH. HO. O. OH OH. O. CH2. OH. CH2 O. DELPHINIDINE-3-O-SAMBUBIOSIDE ET CYANIDINE-3-OSAMBUBIOSIDE : ANTHOCYANES MAJEURES CHEZ H. sabdariffa (Conforme aux travaux d’Eloi Palé et al, 2004). CYANIDINE-3-O-GLUCOSIDE et CYANIDINE-3-O-RUTINOSIDE anthocyanes communes aux 3 espèces, à des taux variables;. TAUX D’ANTHOCYANES EXTRAITS DE H. sabdariffa > > > D. regia > > > C. procera ET FACILE DIFFUSION DE CES COMPOSES (H. sabdariffa) EN MILIEU AQUEUX;. OBTENTION DE TENEURS ELEVEES D’ANTHOCYANES A PARTIR DE C. procera, DE D. regia ET DE H. sabdariffa RESPECTIVEMENT PAR METHODES DE MACERATION (H2O/H+) ET D’ ENZYMAGE ;. CONCLUSION.

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