Laboratoire de Microbiologie et Biologie Laboratoire de Microbiologie et Biologie
Moléculaire Moléculaire
Université Mohamed V - Agdal• Faculté des Sciences B.P.
1014 - Rabat - MAROC
Filière SVI - S6
Module de Génétique et Biologie Moléculaire – M21
Elément 2: Biologie Moléculaire - Pr Abdelkarim FILALI-MALTOUF Elément 2: Biologie Moléculaire Pr. Abdelkarim FILALI MALTOUF
Exposé réalisé par:
Afrouch Rajae, Hassanaïn Imane, Lakhmi Rabab & Zrag Meryem Lakhmi Rabab & Zrag Meryem
La conjugaison La conjugaison La conjugaison La conjugaison jj chez les
chez les bactéries bactéries chez les
chez les bactéries bactéries
Partie 1 Partie 1
Afrouch Rajae (G1);
Afrouch Rajae (G1);
Hassanaïn Imane (G2);
Lakhmi Rabab (G3);
Zrag Meryem(G3).
I. La conjugaison bactérienne : I 1 Défi iti ;
II L l id j tif
I.1 Définition ; I.2 Utilité.
II. Les plasmides conjugatifs :
II. 1 .définition & description II. 2 le facteur de fertilité.
III f l f
III. Transfert du plasmide conjugatif:
III. 1 Etapes ;
III. 3 Exclusion donneur-donneur III.2 régulation
IV. Recombinaison des gènes bactériens par conjugaison V. Conséquences et applications
I .La conjugaison bactérienne
I 1 Défi iti
I.1 Définition f
Processus normal de transfert génétique entre bactéries Processus normal de transfert génétique entre bactéries Le contact physique entre les deux bactéries s’impose
Beaucoup d’espèces de bactéries possèdent cette faculté Le contact physique entre les deux bactéries s impose
Ob l 1 f i 1946 L d b T
Beaucoup d espèces de bactéries possèdent cette faculté Observée pour la 1ère fois en 1946 par Lederberg et Tatum
Souche A SouchesA + B Souche B
La souche A est :
met
La souche B est :
met-
bio-
thr+
leu+
met+
bio+
thr-
leu+ l
thi+. leu-
thi-
Joshua Lederberg et Edward Tatum (1946) Joshua Lederberg et Edward Tatum (1946) Joshua Lede be g et Edwa d atum (1946) Joshua Lede be g et Edwa d atum (1946)
Pas de colonies Colonies bactériennes Pas de colonies
I 2 Utilité I.2 Utilité.
S i é
Survivre en présence de conditions difficiles de conditions difficiles
II L l d j f
II. Les plasmides conjugatifs
II 1 Définition & description II.1. Définition & description.
forme circulaire
formée d’ADN à double brin
transfert de Plasmides dit « Conjugatifs »d’une cellule donneuse (mâle) À une cellule receveuse (femelle)
donneuse (mâle) À une cellule receveuse (femelle)
II 2 L f t d f tilité II. 2 Le facteur de fertilité.
Présent chez toutes les bactéries donatrices (F+) contrairement aux bactéries réceptrice Notée ( F-)
Peut être libre dans le cytoplasme des bactéries ou être intégré dans le chromosome
origine de réplication (oriV) et son système
( V) y
de contrôle
M i t à
Maintenu à un
exemplaire par cellulep p .
Répliqué comme p q n’importe quel parties du
pchromosome.
III T f d l d III.Transfert du plasmide
conjugatif
III.1Etapes
III.1Etapes
• Le transfert entre les organismes donneur et accepteur de plasmide se fait en quatre grandes étapes :
p f q g p
•Reconnaissance entre donneur (F+) et Reconnaissance entre donneur (F+) et accepteur (F-) grâce au pilis
•Transfert d'un des deux brins du plasmide
plasmide
•Synthèse du brin complémentaire chez y p l'accepteur
•R i l i ti d l id h
•Recircularisation du plasmide chez l'accepteur p
1- Reconnaissance et contact
•La reconnaissance se fait par
•La reconnaissance se fait par
l'intermédiaire du pili. Il est synthétisé p y par le donneur ,il est constitué de
filaments protéiques et a la forme d'un T b
Tube creux.
•Une fois en place, le pili sert à h l d b é i à l rapprocher les deux bactéries et à les amener au contact Ce rapprochement amener au contact. Ce rapprochement se fait par dépolymérisation du milieu f p p y
du pili, raccourcissant ainsi le pont entre les deux bactéries et tirant les
d ll l l' l' t
deux cellules l'une vers l'autre.
•Une fois ce contact réalisé, il y a
réorganisation du pili qui se transforme réorganisation du pili qui se transforme
en port de sécrétion. Le reste du pilis en port de sécrétion. Le reste du pilis
sert à perforer la membrane de l'accepteur afin de faire passer le
l id plasmide.
2- Transfert f
U f i l' é d d
•Une fois que l'agrégat des deux
bactéries est stabilisé il y a transfert bactéries est stabilisé, il y a transfert
d'un des deux brins du plasmide. x p
•Il y a donc coupure simple brin du y p p plasmide au niveau de son origine de
f ( ) l b l
transfert (oriT) puis, le brin va "glisser"
vers la bactérie hôte dans le sens 5' vers vers la bactérie hôte dans le sens 5' vers
3'.
3 .
•En même temps, du côté de la bactérie donneuse, le brin complémentaire est
théti é fi d d l id resynthétisé afin de garder un plasmide
double brin double brin.
•La bactérie donatrice conserve une copie du plasmide transféré.
3- Synthèse du brin complémentaire
U f d d l b
•Une fois introduit dans la bactérie t i il l thè d acceptrice, il y a alors synthèse du brin complémentaire afin de former brin complémentaire, afin de former
un nouveau plasmide double brin.
un nouveau plasmide double brin.
•Cette synthèse se fait de façon discontinue.
Des protéines primases synthétisent des Des protéines primases synthétisent des amorces à partir desquelles les ADN p q
polymérases pourront démarrer leur thè
synthèse.
i l i i
4- La recircularisation:
•La recircularisation du nouveau plasmide se fait grâce à ne protéine plasmide se fait grâce à une protéine (relaxase) qui va permettre la jonction (relaxase) qui va permettre la jonction
des deux bouts.
