UNIVERSITE MOHAMED V
FACULTE DE MEDECINE ET DE PHARMACIE DE RABAT
ANNEE :
2008
THESE N°84
Production de l’insuline humanisée
A partir des graines de carthame
Génétiquement modifié
THESE
Présentée et soutenue publiquement le …………..
PAR
Melle Kaoutar SKIREDJ
Née le 27 Mai, 1984 à Fès
Pour l’obtention du Doctorat en Pharmacie
Mots clés : Insuline – Diabète – Carthame - OGM.
Jury
Mr A. ETTAIB Président Professeur de Zootechnie Mr L. El GUESSABI Rapporteur Professeur de Pharmacognosie Mr H. BENZIANEProfesseur agrégé de Pharmacie clinique Juges Mr A. ZAHIDI
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UNIVERSITE MOHAMMED V- SOUISSI
FACULTE DE MEDECINE ET DE PHARMACIE - RABAT
DOYENS HONORAIRES :
1962 – 1969 Docteur Abdelmalek FARAJ 1969 – 1974 Professeur Abdellatif BERBICH 1974 – 1981 Professeur Bachir LAZRAK 1981 – 1989 Professeur Taieb CHKILI
1989 – 1997 Professeur Mohamed Tahar ALAOUI 1997 – 2003 Professeur Abdelmajid BELMAHI
ADMINISTRATION :
Doyen Professeur Najia HAJJAJ Vice Doyen chargé des Affaires Académiques et Estudiantines
Professeur Mohammed JIDDANE Vice Doyen chargé de la Recherche et de la Coopération
Professeur Naima LAHBABI-AMRANI Vice Doyen chargé des Affaires Spécifiques à la Pharmacie
Professeur Yahia CHERRAH
Secrétaire Général : Monsieur Mohammed BENABDELLAH
PROFESSEURS : Décembre 1967
1. Pr. TOUNSI Abdelkader Pathologie Chirurgicale
Février, Septembre, Décembre 1973
2. Pr. ARCHANE My Idriss* Pathologie Médicale 3. Pr. BENOMAR Mohammed Cardiologie
4. Pr. CHAOUI Abdellatif Gynécologie Obstétrique 5. Pr. CHKILI Taieb Neuropsychiatrie
d
Janvier et Décembre 1976
6. Pr. HASSAR Mohamed Pharmacologie Clinique
Février 1977
7. Pr. AGOUMI Abdelaziz Parasitologie 8. Pr. BENKIRANE ép. AGOUMI Najia Hématologie 9. Pr. EL BIED ép. IMANI Farida Radiologie
Février Mars et Novembre 1978
10. Pr. ARHARBI Mohamed Cardiologie
11. Pr. SLAOUI Abdelmalek Anesthésie Réanimation
Mars 1979
12. Pr. LAMDOUAR ép. BOUAZZAOUI Naima Pédiatrie
Mars, Avril et Septembre 1980
13. Pr. EL KHAMLICHI Abdeslam Neurochirurgie 14. Pr. MESBAHI Redouane Cardiologie
Mai et Octobre 1981
15. Pr. BENOMAR Said* Anatomie Pathologique 16. Pr. BOUZOUBAA Abdelmajid Cardiologie
17. Pr. EL MANOUAR Mohamed Traumatologie-Orthopédie 18. Pr. HAMMANI Ahmed* Cardiologie
19. Pr. MAAZOUZI Ahmed Wajih Chirurgie Cardio-Vasculaire 20. Pr. SBIHI Ahmed Anesthésie Réanimation 21. Pr. TAOBANE Hamid* Chirurgie Thoracique
Mai et Novembre 1982
22. Pr. ABROUQ Ali* Oto-Rhino-Laryngologie 23. Pr. BENOMAR M’hammed Chirurgie-Cardio-Vasculaire 24. Pr. BENSOUDA Mohamed Anatomie
e
25. Pr. BENOSMAN Abdellatif Chirurgie Thoracique 26. Pr. CHBICHEB Abdelkrim Biophysique
27. Pr. JIDAL Bouchaib* Chirurgie Maxillo-faciale 28. Pr. LAHBABI ép. AMRANI Naïma Physiologie
Novembre 1983
29. Pr. ALAOUI TAHIRI Kébir* Pneumo-phtisiologie 30. Pr. BALAFREJ Amina Pédiatrie
31. Pr. BELLAKHDAR Fouad Neurochirurgie 32. Pr. HAJJAJ ép. HASSOUNI Najia Rhumatologie 33. Pr. SRAIRI Jamal-Eddine Cardiologie
Décembre 1984
34. Pr. BOUCETTA Mohamed* Neurochirurgie 35. Pr. EL OUEDDARI Brahim El Khalil Radiothérapie 36. Pr. MAAOUNI Abdelaziz Médecine Interne 37. Pr. MAAZOUZI Ahmed Wajdi Anesthésie -Réanimation 38. Pr. NAJI M’Barek * Immuno-Hématologie 39. Pr. SETTAF Abdellatif Chirurgie
Novembre et Décembre 1985
40. Pr. BENJELLOUN Halima Cardiologie
41. Pr. BENSAID Younes Pathologie Chirurgicale 42. Pr. EL ALAOUI Faris Moulay El Mostafa Neurologie
43. Pr. IHRAI Hssain * Stomatologie et Chirurgie Maxillo-Faciale 44. Pr. IRAQI Ghali Pneumo-phtisiologie
45. Pr. KZADRI Mohamed Oto-Rhino-laryngologie
Janvier, Février et Décembre 1987
46. Pr. AJANA Ali Radiologie
47. Pr. AMMAR Fanid Pathologie Chirurgicale 48. Pr. CHAHED OUAZZANI Gastro-Entérologie 49. Pr. EL FASSY FIHRI Mohamed Taoufiq Pneumo-phtisiologie 50. Pr. EL HAITEM Naïma Cardiologie
f
51. Pr. EL MANSOURI Abdellah* Chimie-Toxicologie Expertise 52. Pr. EL YAACOUBI Moradh Traumatologie Orthopédie 53. Pr. ESSAID EL FEYDI Abdellah Gastro-Entérologie 54. Pr. LACHKAR Hassan Médecine Interne 55. Pr. OHAYON Victor* Médecine Interne 56. Pr. YAHYAOUI Mohamed Neurologie
Décembre 1988
57. Pr. BENHMAMOUCH Mohamed Najib Chirurgie Pédiatrique 58. Pr. DAFIRI Rachida Radiologie
59. Pr. FAIK Mohamed Urologie
60. Pr. FIKRI BEN BRAHIM Noureddine Médecine Préventive, Santé Publique et Hygiène 61. Pr. HERMAS Mohamed Traumatologie Orthopédie
62. Pr. TOULOUNE Farida* Médecine Interne
Décembre 1989 Janvier et Novembre 1990
63. Pr. ABIR ép. KHALIL Saadia Cardiologie 64. Pr. ACHOUR Ahmed* Chirurgicale 65. Pr. ADNAOUI Mohamed Médecine Interne 66. Pr. AOUNI Mohamed Médecine Interne 67. Pr. AZENDOUR BENACEUR* Oto-Rhino-Laryngologie 68. Pr. BENAMEUR Mohamed* Radiologie
69. Pr. BOUKILI MAKHOUKHI Abdelali Cardiologie
70. Pr. CHAD Bouziane Pathologie Chirurgicale 71. Pr. CHKOFF Rachid Pathologie Chirurgicale 72. Pr. FARCHADO Fouzia Pédiatrique
73. Pr. HACHIM Mohammed* Médecine-Interne 74. Pr. HACHIMI Mohamed Urologie
75. Pr. KHARBACH Aîcha Gynécologie -Obstétrique 76. Pr. MANSOURI Fatima Anatomie-Pathologique 77. Pr. OUAZZANI Taïbi Mohamed Réda Neurologie
78. Pr. SEDRATI Omar* Dermatologie
79. Pr. TAZI Saoud Anas Anesthésie Réanimation 80. Pr. TERHZAZ Abdellah* Ophtalmologie
g
Février Avril Juillet et Décembre 1991
81. Pr. AL HAMANY Zaîtounia Anatomie-Pathologique 82. Pr. ATMANI Mohamed* Anesthésie Réanimation 83. Pr. AZZOUZI Abderrahim Anesthésie Réanimation 84. Pr. BAYAHIA ép. HASSAM Rabéa Néphrologie
85. Pr. BELKOUCHI Abdelkader Chirurgie Générale 86. Pr. BENABDELLAH Chahrazad Hématologie 87. Pr. BENCHEKROUN BELABBES Abdelatif Chirurgie Générale 88. Pr. BENSOUDA Yahia Pharmacie galénique 89. Pr. BERRAHO Amina Ophtalmologie
90. Pr. BEZZAD Rachid Gynécologie Obstétrique 91. Pr. CHABRAOUI Layachi Biochimie et Chimie 92. Pr. CHANA El Houssaine* Ophtalmologie 93. Pr. CHERRAH Yahia Pharmacologie
94. Pr. CHOKAIRI Omar Histologie Embryologie 95. Pr. FAJRI Ahmed* Psychiatrie
96. Pr. JANATI Idrissi Mohamed* Chirurgie Générale 97. Pr. KHATTAB Mohamed Pédiatrie
98. Pr. NEJMI Maati Anesthésie-Réanimation
99. Pr. OUAALINE Mohammed* Médecine Préventive, Santé Publique et Hygiène 100. Pr. SOULAYMANI Pharmacologie
101. Pr. TAOUFIK Jamal Chimie thérapeutique
Décembre 1992
102. Pr. AHALLAT Mohamed Chirurgie Générale 103. Pr. BENOUDA Amina Microbiologie
104. Pr. BENSOUDA Adil Anesthésie Réanimation 105. Pr. BOUJIDA Mohamed Najib Radiologie
106. Pr. CHAHED OUAZZANI Laaziza Gastro-Entérologie 107. Pr. CHAKIR Noureddine Radiologie
108. Pr. CHRAIBI Chafiq Gynécologie Obstetrique 109. Pr. DAOUDI Rajae Ophtalmologie
110. Pr. DEHAYNI Mohamed* Gynécologie Obstétrique 111. Pr. EL HADDOURY Mohamed Anesthésie Réanimation 112. Pr. EL OUAHABI Abdessamad Neurochirurgie
h
113. Pr. FELLAT Rokaya Cardiologie 114. Pr. GHAFIR Driss* Médecine Interne 115. Pr. JIDDANE Mohamed Anatomie
116. Pr. OUAZZANI TAIBI Med Charaf Eddine Gynécologie Obstétrique 117. Pr. TAGHY Ahmed Chirurgie Générale 118. Pr. ZOUHDI Mimoun Microbiologie
Mars 1994
119. Pr. AGNAOU Lahcen Ophtalmologie 120. Pr. AL BAROUDI Saad Chirurgie Générale 121. Pr. ARJI Moha* Anesthésie Réanimation 122. Pr. BENCHERIFA Fatiha Ophtalmologie
123. Pr. BENJAAFAR Noureddine Radiothérapie 124. Pr. BENJELLOUN Samir Chirurgie Générale 125. Pr. BENRAIS Nozha Biophysique 126. Pr. BOUNASSE Mohammed* Pédiatrie 127. Pr. CAOUI Malika Biophysique
128. Pr. CHRAIBI Abdelmjid Endocrinologie et Maladies Métabolique 129. Pr. EL AMRANI ép. AHALLAT Sabah Gynécologie Obstétrique
130. Pr. EL AOUAD Rajae Immunologie
131. Pr. EL BARDOUNI Ahmed Traumato Orthopédie 132. Pr. EL HASSANI My Rachid Radiologie
133. Pr. EL IDRISSI LAMGHARI Abdennaceur Médecine Interne
134. Pr. EL KIRAT Abdelmajid* Chirurgie Cardio- Vasculaire 135. Pr. ERROUGANI Abdelkader Chirurgie Générale
136. Pr. ESSAKALI Malika Immunologie
137. Pr. ETTAYEBI Fouad Chirurgie Pédiatrique 138. Pr. HADRI Larbi* Médecine Interne 139. Pr. HDA Ali* Médecine Interne 140. Pr. HASSAM Badredine Dermatologie 141. Pr. IFRINE Lahssan Chirurgie Générale 142. Pr. JELTHI Ahmed Anatomie Pathologique 143. Pr. MAHFOUD Mustapha Traumatologie Orthopédie 144. Pr. MOUDENE Ahmed* Traumatologie Orthopédie 145. Pr. MOSSEDDAQ Rachid* Neurologie
i
146. Pr. OULBACHA Said Chirurgie Générale 147. Pr. RHRAB Brahim Gynécologie Obstétrique 148. Pr. SENOUCI ép. BELKHADIR Karima Dermatologie
149. Pr. SLAOUI Anas Chirurgie Cardio-vasculaire
Mars 1994
150. Pr. ABBAR Mohamed* Urologie
151. Pr. ABDELHAK M’barek Chirurgie - Pédiatrique 152. Pr. BELAIDI Halima Neurologie
153. Pr. BARHMI Rida Slimane Gynécologie Obstétrique 154. Pr. BENTAHILA Abdelali Pédiatrie
155. Pr. BENYAHIA Mohammed Ali Gynécologie -Obstétrique 156. Pr. BERRADA Mohamed Saleh Traumatologie -Orthopédie 157. Pr. CHAMI Ilham Radiologie
158. Pr. CHERKAOUI Lalla Ouafae Ophtalmologie 159. Pr. EL ABBADI Najia Neurochirurgie 160. Pr. HANINE Ahmed* Radiologie
161. Pr. JALIL Abdelouahed Chirurgie Générale 162. Pr. LAKHDAR Amina Gynécologie Obstétrique 163. Pr. MOUANE Nezha Pédiatrie
Mars 1995
164. Pr. ABOUQUAL Redouane Réanimation Médicale 165. Pr. AMRAOUI Mohamed Chirurgie Générale 166. Pr. BAIDADA Abdelaziz Gynécologie Obstétrique 167. Pr. BARGACH Samir Gynécologie Obstétrique 168. Pr. BELLAHNECH Zakaria Urologie
169. Pr. BEDDOUCHE Amoqrane* Urologie
170. Pr. BENAZZOUZ Mustapha Gastro-Entérologie 171. Pr. CHAARI Jilali* Médecine Interne 172. Pr. DIMOU M'barek* Anesthésie Réanimation 173. Pr. DRISSI KAMILI Mohammed Nordine* Anesthésie Réanimation 174. Pr. EL MESNAOUI Abbes Chirurgie Générale 175. Pr. ESSAKALI HOUSSYNI Leila Oto-Rhino-Laryngologie 176. Pr. FERHATI Driss Gynécologie Obstétrique
j
177. Pr. HASSOUNI Fadil Médecine Préventive, Santé Publique et Hygiène 178. Pr. HDA Abdelhamid* Cardiologie
179. Pr. IBEN ATTYA ANDALOUSSI Ahmed Urologie 180. Pr. IBRAHIMY Wafaa Ophtalmologie 182. Pr. BENOMAR ALI Neurologie
183. Pr. BOUGTAB Abdesslam Chirurgie Générale 184. Pr. ER RIHANI Hassan Oncologie Médicale 185. Pr. EZZAITOUNI Fatima Néphrologie 186. Pr. KABBAJ Najat Radiologie
187. Pr. LAZRAK Khalid (M) Traumatologie Orthopédie 188. Pr. OUTIFA Mohamed* Gynécologie Obstétrique
Décembre 1996
189. Pr. AMIL Touriya* Radiologie
190. Pr. BELKACEM Rachid Chirurgie Pédiatrie
191. Pr. BELMAHI Amin Chirurgie réparatrice et plastique 192. Pr. BOULANOUAR Abdelkrim Ophtalmologie
193. Pr. EL ALAMI EL FARICHA EL Hassan Chirurgie Générale 194. Pr. EL MELLOUKI Ouafae* Parasitologie
195. Pr. GAMRA Lamiae Anatomie Pathologique 196. Pr. GAOUZI Ahmed Pédiatrie
197. Pr. MAHFOUDI M’barek* Radiologie
198. Pr. MOHAMMADINE EL Hamid Chirurgie Générale 199. Pr. MOHAMMADI Mohamed Médecine Interne 200. Pr. MOULINE Soumaya Pneumo-phtisiologie
201. Pr. OUADGHIRI Mohamed Traumatologie – Orthopédie 202. Pr. OUZEDDOUN Naima Néphrologie
203. Pr. ZBIR EL Mehdi* Cardiologie
Novembre 1997
204. Pr. ALAMI Mohamed Hassan Gynécologie – Obstétrique 205. Pr. BEN AMAR Abdesselem Chirurgie Générale 206. Pr. BEN SLIMANE Lounis Urologie
207. Pr. BIROUK Nazha Neurologie 208. Pr. BOULAICH Mohamed O.RL.
k
209. Pr. CHAOUIR Souad* Radiologie 210. Pr. DERRAZ Said Neurochirurgie 211. Pr. ERREIMI Naima Pédiatrie 212. Pr. FELLAT Nadia Cardiologie 213. Pr. GUEDDARI Fatima Zohra Radiologie
214. Pr. HAIMEUR Charki* Anesthésie Réanimation 215. Pr. KADDOURI Noureddine Chirurgie – Pédiatrique 216. Pr. KANOUNI NAWAL Physiologie
217. Pr. KOUTANI Abdellatif Urologie
218. Pr. LAHLOU Mohamed Khalid Chirurgie Générale 219. Pr. MAHRAOUI CHAFIQ Pédiatrie
220. Pr. NAZZI M’barek* Cardiologie 221. Pr. OUAHABI Hamid* Neurologie
222. Pr. SAFI Lahcen* Anesthésie Réanimation 223. Pr. TAOUFIQ Jallal Psychiatrie
224. Pr. YOUSFI MALKI Mounia Gynécologie Obstétrique
Novembre 1998
225. Pr. BENKIRANE Majid* Hématologie 226. Pr. KHATOURI Ali* Cardiologie
227. Pr. LABRAIMI Ahmed* Anatomie Pathologique
Novembre 1998
228. Pr. AFIFI RAJAA Gastro - Entérologie 229. Pr. AIT BENASSER MOULAY Ali* Pneumo-phtisiologie 230. Pr. ALOUANE Mohammed* Oto- Rhino- Laryngologie 231. Pr. LACHKAR Azouz Urologie
232. Pr. LAHLOU Abdou Traumatologie Orthopédie 233. Pr. MAFTAH Mohamed* Neurochirurgie
234. Pr. MAHASSINI Najat Anatomie Pathologique 235. Pr. MDAGHRI ALAOUI Asmae Pédiatrie
236. Pr. MANSOURI Abdelaziz* Neurochirurgie
237. Pr. NASSIH Mohamed* Stomatologie Et Chirurgie Maxillo Faciale 238. Pr. RIMANI Mouna Anatomie Pathologique
l
239. Pr. ROUIMI Abdelhadi Neurologie
Janvier 2000
240. Pr. ABID Ahmed* Pneumo-phtisiologie 241. Pr. AIT OUMAR Hassan Pédiatrie
242. Pr. BENCHERIF My Zahid Ophtalmologie 243. Pr. BENJELLOUN Dakhama Badr.Sououd Pédiatrie
244. Pr. BOURKADI Jamal-Eddine Pneumo-phtisiologie 245. Pr. CHAOUI Zineb Ophtalmologie 246. Pr. CHARIF CHEFCHAOUNI Al Montacer Chirurgie Générale 247. Pr. ECHARRAB El Mahjoub Chirurgie Générale 248. Pr. EL FTOUH Mustapha Pneumo-phtisiologie 249. Pr. EL MOSTARCHID Brahim* Neurochirurgie 250. Pr. EL OTMANYAzzedine Chirurgie Générale 251. Pr. GHANNAM Rachid Cardiologie
252. Pr. HAMMANI Lahcen Radiologie
253. Pr. ISMAILI Mohamed Hatim Anesthésie-Réanimation 254. Pr. ISMAILI Hassane* Traumatologie Orthopédie 255. Pr. KRAMI Hayat Ennoufouss Gastro-Entérologie 256. Pr. MAHMOUDI Abdelkrim* Anesthésie-Réanimation 257. Pr. TACHINANTE Rajae Anesthésie-Réanimation 258. Pr. TAZI MEZALEK Zoubida Médecine Interne
Novembre 2000
259. Pr. AIDI Saadia Neurologie 260. Pr. AIT OURHROUIL Mohamed Dermatologie 261. Pr. AJANA Fatima Zohra Gastro-Entérologie 262. Pr. BENAMR Said Chirurgie Générale 263. Pr. BENCHEKROUN Nabiha Ophtalmologie
264. Pr. BOUSSELMANE Nabile* Traumatologie Orthopédie 265. Pr. BOUTALEB Najib* Neurologie
266. Pr. CHERTI Mohammed Cardiologie
267. Pr. ECH-CHERIF EL KETTANI Selma Anesthésie-Réanimation 268. Pr. EL HASSANI Amine Pédiatrie
m
270. Pr. EL KHADER Khalid Urologie 271. Pr. EL MAGHRAOUI Abdellah* Rhumatologie
272. Pr. GHARBI Mohamed El Hassan Endocrinologie et Maladies Métaboliques 273. Pr. HSSAIDA Rachid* Anesthésie-Réanimation
274. Pr. MANSOURI Aziz Radiothérapie 275. Pr. OUZZANI CHAHDI Bahia Ophtalmologie
276. Pr. RZIN Abdelkader* Stomatologie et Chirurgie Maxillo-faciale 277. Pr. SEFIANI Abdelaziz Génétique
278. Pr. ZEGGWAGH Amine Ali Réanimation Médicale
PROFESSEURS AGREGES : Décembre 2001
279. Pr. ABABOU Adil Anesthésie-Réanimation 280. Pr. AOUAD Aicha Cardiologie
281. Pr. BALKHI Hicham* Anesthésie-Réanimation 282. Pr. BELMEKKI Mohammed Ophtalmologie
283. Pr. BENABDELJLIL Maria Neurologie 284. Pr. BENAMAR Loubna Néphrologie
285. Pr. BENAMOR Jouda Pneumo-phtisiologie 286. Pr. BENELBARHDADI Imane Gastro-Entérologie 287. Pr. BENNANI Rajae Cardiologie 288. Pr. BENOUACHANE Thami Pédiatrie 289. Pr. BENYOUSSEF Khalil Dermatologie
290. Pr. BERRADA Rachid Gynécologie Obstétrique 291. Pr. BEZZA Ahmed* Rhumatologie
292. Pr. BOUCHIKHI IDRISSI Med Larbi Anatomie 293. Pr. BOUHOUCH Rachida Cardiologie 294. Pr. BOUMDIN El Hassane* Radiologie 295. Pr. CHAT Latifa Radiologie 296. Pr. CHELLAOUI Mounia Radiologie
297. Pr. DAALI Mustapha* Chirurgie Générale 298. Pr. DRISSI Sidi Mourad* Radiologie
299. Pr. EL HAJOUI Ghziel Samira Gynécologie Obstétrique 300. Pr. EL HIJRI Ahmed Anesthésie-Réanimation 301. Pr. EL MAAQILI Moulay Rachid Neuro-Chirurgie
n
302. Pr. EL MADHI Tarik Chirurgie-Pédiatrique 303. Pr. EL MOUSSAIF Hamid Ophtalmologie 304. Pr. EL OUNANI Mohamed Chirurgie Générale 305. Pr. EL QUESSAR Abdeljlil Radiologie
306. Pr. ETTAIR Said Pédiatrie 307. Pr. GAZZAZ Miloudi* Neuro-Chirurgie 308. Pr. GOURINDA Hassan Chirurgie-Pédiatnique 309. Pr. HRORA Abdelmalek Chirurgie Générale 310. Pr. KABBAJ Saad Anesthésie-Réanimation 311. Pr. KABIRI EL Hassane* Chirurgie Thoracique 312. Pr. LAMRANI Moulay Omar Traumatologie Orthopédie
313. Pr. LEKEHAL Brahim Chirurgie Vasculaire Périphérique 314. Pr. MAHASSIN Fattouma* Médecine Interne
315. Pr. MEDARHRI Jalil Chirurgie Générale 316. Pr. MIKDAME Mohammed* Hématologie Clinique 317. Pr. MOHSINE Raouf Chirurgie Générale 318. Pr. NABIL Samira Gynécologie Obstétrique 319. Pr. NOUINI Yassine Urologie
320. Pr. OUALIM Zouhir* Néphrologie 321. Pr. SABBAH Farid Chirurgie Générale
322. Pr. SEFIANI Yasser Chirurgie Vasculaire Périphérique 323. Pr. TAOUFIQ BENCHEKROUN Soumia Pédiatrie
324. Pr. TAZI MOUKHA Karim Urologie
Décembre 2002
325. Pr. AL BOUZIDI Abderrahmane* Anatomie Pathologique 326. Pr. AMEUR Ahmed* Urologie
327. Pr. AMRI Rachida Cardiologie 328. Pr. AOURARH Aziz* Gastro-Entérologie 329. Pr. BAMOU Youssef * Biochimie-Chimie 330. Pr. BELGHITI Laila Gynécologie Obstétrique
331. Pr. BELMEJDOUB Ghizlene* Endocrinologie et Maladies Métaboliques 332. Pr. BENBOUAZZA Karima Rhumatologie
333. Pr. BENZEKRI Laila Dermatologie
o
335. Pr. BERADY Samy* Médecine Interne 336. Pr. BERNOUSSI Zakiya Anatomie Pathologique 337. Pr. BICHRA Mohamed Zakarya Psychiatrie
338. Pr. CHOHO Abdelkrim * Chirurgie Générale 339. Pr. CHKIRATE Bouchra Pédiatrie
340. Pr. EL ALAMI EL FELLOUS Sidi Zouhair Chirurgie Pédiatrique 341. Pr. EL ALJ Haj Ahmcd Urologie
342. Pr. EL BARNOUSSI Leila Gynécologie Obstétrique 343. Pr. EL HAOURI Mohamed * Dermatologie
344. Pr. EL MANSARI Omar* Chirurgie Générale 345. Pr. ES-SADEL Abdelhamid Chirurgie Générale 346. Pr. FILALI ADIB Abdelhai Gynécologie Obstétrique 347. Pr. HADDOUR Leila Cardiologie
348. Pr. HAJJI Zakia Ophtalmologie 349. Pr. IKEN Ali Urologie
350. Pr. ISMAEL Farid Traumatologie Orthopédie 351. Pr. JAAFAR Abdeloihab* Traumatologie Orthopédie 352. Pr. KRIOULE Yamina Pédiatrie
353. Pr. LAGHMARI Mina Ophtalmologie
354. Pr. MABROUK Hfid* Traumatologie Orthopédie 355. Pr. MOUSSAOUI RAHALI Driss* Gynécologie Obstétrique 356. Pr. MOUSTAGHFIR Abdelhamid* Cardiologie
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359. Pr. OUJILAL Abdelilah Oto-Rhino-Laryngologie 360. Pr. RACHID Khalid * Traumatologie Orthopédie 361. Pr. RAISS Mohamed Chirurgie Générale 362. Pr. RGUIBI IDRISSI Sidi Mustapha* Pneumo-phtisiologie 363. Pr. RHOU Hakima Néphrologie
364. Pr. RKIOUAK Fouad* Endocrinologie et Maladies Métaboliques 365. Pr. SIAH Samir * Anesthésie Réanimation
366. Pr. THIMOU Amal Pédiatrie
367. Pr. ZENTAR Aziz* Chirurgie Générale 368. Pr. ZRARA Ibtisam* Anatomie Pathologique
p
Janvier 2004
369. Pr. ABDELLAH El Hassan Ophtalmologie
370. Pr. AMRANI Mariam Anatomie Pathologique 371. Pr. BENBOUZID Mohammed Anas Oto-Rhino-Laryngologie 372. Pr. BENKIRANE Ahmed* Gastro-Entérologie 373. Pr. BENRAMDANE Larbi* Chimie Analytique 374. Pr. BOUGHALEM Mohamed* Anesthésie Réanimation
375. Pr. BOULAADAS Malik Stomatologie et Chirurgie Maxillo-faciale 376. Pr. BOURAZZA Ahmed* Neurologie
377. Pr. CHERRADI Nadia Anatomie Pathologique 378. Pr. EL FENNI Jamal* Radiologie
379. Pr. EL HANCHI Zaki Gynécologie Obstétrique 380. Pr. EL KHORASSANI Mohamed Pédiatrie
381. Pr. EL YOUNASSI Badreddine* Cardiologie
382. Pr. HACHI Hafid Chirurgie Générale 383. Pr. JABOUIRIK Fatima Pédiatrie
384. Pr. KARMANE Abdelouahed Ophtalmologie
385. Pr. KHABOUZE Samira Gynécologie Obstétrique 386. Pr. KHARMAZ Mohamed Traumatologie Orthopédie 387. Pr. LEZREK Mohammed* Urologie
388. Pr. MOUGHIL Said Chirurgie Cardio-Vasculaire 389. Pr. NAOUMI Asmae* Ophtalmologie
390. Pr. SAADI Nozha Gynécologie Obstétrique 391. Pr. SASSENOU Ismail* Gastro-Entérologie 392. Pr. TARIB Abdelilah* Pharmacie Clinique 393. Pr. TIJAMI Fouad Chirurgie Générale 394. Pr. ZARZUR Jamila Cardiologie
Janvier 2005
395. Pr. ABBASSI Abdelah Chirurgie Réparatrice et Plastique 396. Pr. AL KANDRY Sif Eddine* Chirurgie Générale
397. Pr. ALAOUI Ahmed Essaid Microbiologie 398. Pr. ALLALI fadoua Rhumatologie 399. Pr. AMAR Yamama Néphrologie
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400. Pr. AMAZOUZI Abdellah Ophtalmologie 401. Pr. AZIZ Noureddine* Radiologie 402. Pr. BAHIRI Rachid Rhumatologie 403. Pr. BARAKAT Amina Pédiatrie
404. Pr. BENHALIMA Hanane Stomatologie et Chirurgie Maxillo Faciale
405. Pr. BENHARBIT Mohamed Ophtalmologie 406. Pr. BENYASS Aatif Cardiologie 407. Pr. BERNOUSSI Abdelghani Ophtalmologie 408. Pr. BOUKALATA Salwa Radiologie 409. Pr. CHARIF CHEFCHAOUNI Mohamed Ophtalmologie 410. Pr. DOUDOUH Abderrahim* Biophysique 411. Pr. EL HAMZAOUI Sakina Microbiologie 412. Pr. HAJJI Leila Cardiologie 413. Pr. HESSISSEN Leila Pédiatrie 414. Pr. JIDAL Mohamed* Radiologie 415. Pr. KARIM Abdelouahed Ophtalmologie 416. Pr. KENDOUSSI Mohamed* Cardiologie
417. Pr. LAAROUSSI Mohamed Chirurgie Cardio Vasculaire 418. Pr. LYACOUBI Mohammed Parasitologie
419. Pr. NIAMANE Radouane* Rgumatologie
420. Pr. RAGALA Abdelhak Gynécologie Obstétrique 421. Pr. REGRAGUI Asmaa Anatomie Pathologique
422. Pr. SBIHI Souad Histo Embryologie Cytogénétique 423. Pr. TNACHERI OUAZZANI Btissam Ophtalmologie
424. Pr. ZERAIDI Najia Gynécologie Obstétrique
Avril 2006
425. Pr. ACHEMLAL Lahsen* Rhumatologie 426. Pr. AFIFI Yasser Dermatologie 427. Pr. AKJOUJ Said* Radiologie 428. Pr. BELGNAOUI Fatima Zahra Dermatologie 429. Pr. BELMEKKI Abdelkader* Hematologie 430. Pr. BENCHEIKH Razika O.R.L 431. Pr. BIYI Abdelhamid* Biophysique
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433. Pr. BOULAHYA Abdellatif* Chirurgie Cardio-Vasculaire 434. Pr. CHEIKHAOUI Younes Chirurgie Cardio-Vasculaire 435. Pr. CHENGUETI ANSARI Anas Gynécologie Obstétrique 436. Pr. DOGHMI Nawal Cardiologie
437. Pr. ESSAMRI Wafaa Gastro-Entérologie 438. Pr. FELLAT Ibtissam Cardiologie
439. Pr. FAROUDY Mamoun Anesthésie Réanimation 440. Pr. GHADOUANE Mohammed* Urologie
441. Pr. HARMOUCHE Hicham Médecine Interne 442. Pr. HNAFI Sidi Mohamed* Anesthésie Réanimation 443. Pr. IDRISS LAHLOU Amine Microbiologie
444. Pr. JROUNDI Laila Radiologie 445. Pr. KARMOUNI Tariq Urologie 446. Pr. KILI Amina Pédiatrie 447. Pr. KISRA Hassan Psychiatrie
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456. Pr. SEFIANI Sana Anatomie Pathologique 457. Pr. SOUALHI Mouna Pneumo-Phtisiologie 458. Pr. ZAHRAOUI Rachida Pneumo-Phtisiologie
ENSEIGNANTS SCIENTIFIQUES PROFESSEURS
1. Pr. ALAMI OUHABI Naima Biochimie 2. Pr. ALAOUI KATIM Pharmacologie
3. Pr. ALAOUI SLIMANI Lalla Naïma Histologie – Embryologie
4. Pr. ANSAR M'hammed Chimie Organique et Pharmacie Chimique 5. Pr. BOUKLOUZE Abdelaziz Applications Pharmaceutiques
s
7. Pr. DRAOUI Mustapha Chimie Analytique 8. Pr. EL GUESSABI Lahcen Pharmacognosie 9. Pr. ETTAIB Abdelkader Zootechnie 10. Pr. FAOUZI Moulay El Abbes Pharmacologie 11. Pr. HMAMOUCHI Mohamed Chimie Organique 12. Pr. REDHA Ahlam Biochimie
13. Pr. TELLAL Saida* Biochimie 14. Pr. TOUATI Driss Pharmacognosie 15. Pr. ZELLOU Amina Chimie Organique
t
DEDICACE
Je dédie ce modeste travail à :
Mes très chers parents et grands parents, source d’amour et de compréhension inépuisable. Aucune dédicace ne saurait exprimer mon grand amour, mon estime, ma vive gratitude, mon intime attachement et ma profonde affection envers eux. Que Dieu leur accorde longue vie.
Mes frères Abdallah et Abderrahman, en témoignage de leur solide fraternité. Que Dieu leur accorde succès et bonheur.
Ma belle sœur et cousine Lalla Hajar et sa petite famille.
Tous les membres de ma famille et des familles proches : Skiredj, Ammor, Zemmouri, Khaoulani, Jabrane, Benjelloun, Tlemssani, Debbarh, Fassi Fihri et Tssouli.
Toutes mes amies et collègues.
Tous les professeurs et corps administratif de la faculté de médecine et de pharmacie de Rabat
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Remerciements
Mes sincères remerciements s’adressent tout d’abord au Professeur El Guessabi Lahcen, pour la confiance qu’il m’a accordée, son soutien, ses critiques constructives et ses conseils qui m’ont permis d’évoluer dans la présente recherche. Je tiens à le remercier aussi pour le temps qu’il a consacré à ma thèse afin de la garnir de rigueur.
Je remercie aussi le Professeur Abdelkader Ettaïb, pour avoir accepté de présider ce jury. Qu’il trouve ici ma profonde reconnaissance.
J’adresse toute ma gratitude à tous les membres de jury pour le soin avec lequel ils ont lu mon rapport et l’intérêt qu’ils ont porté à mon travail ; je tiens à les remercier pour avoir accepté de juger cette thèse.
Je tiens aussi à remercier sincèrement tous les professeurs qui ont contribué à ma formation, pour leurs conseils pertinents, soutiens, moral et scientifique et pour leur disponibilité.
J’exprime aussi mes vifs remerciements aux chercheurs de l’entreprise pharmaceutique canadienne SemBioSys pour leur documentation et la permission qu’ils m’ont accordée à utiliser les photos de leurs publications. Qu’ils trouvent ici le témoignage de ma reconnaissance.
Je remercie également tous ceux qui m’ont guidée et aidée de près ou de loin à élaborer ce modeste travail.
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Liste des figures
Intitulé Page
Fig. 1- Graines de Carthame 6
Fig. 2- a- Fleurs sèches de Carthame ; 2-b- portrait de Carthame 8
Fig. 3- Culture de Carthame 9
Fig. 4 : Glycosylation de l’anticorps Guy’s 13 46
Fig. 5 : Biosynthèse, transport et maturation des protéines dans la cellule végétale 51
Fig. 6- Structure chimique de l’insuline 64
Fig. 7- Le pancréas 71
Fig. 8- Section d’une graine de Carthame. Localisation des protéines 121 Fig. 9- Structure d’un corps lipidique d’une graine de Carthame 121 Fig. 10 a et b- Introduction du gêne d’oléosine fusionné avec le gène d’intérêt 122
Fig. 11- Carte d’un système biologique de stratosome 123
Fig. 12- Technologie d’extraction d’un corps lipidique d’une graine de Carthame 123
Fig. 13- Représentation schématique de l’insuline humaine 124
Fig. 14- Détermination chromatographique des protéines d’une graine de Carthame 124
Fig. 15- Test de tolérance de l’insuline 125
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Table des matières
Intitulés Page
Introduction et problématique 1
But et objectifs de la recherche 3
Méthodologie 4
Chapitre I – Le carthame (Safran bâtard) : 1-1- Plante. 1-2- Fleur. 1-3- Graine. 5 1-4- Principales espèces botaniques connues. 1-5- Historique. 6
1-6- Propriétés médicinales et alimentaires. 7
1-7- Culture. 8
1-8- Culture au Maroc. 9
1-9- Carthame génétiquement modifié pour produire la pro insuline humaine. 10
Conclusion 12
Chapitre II : L’agriculture moléculaire, une nouvelle orientation en confrontation à la
mondialisation : 2-1- Introduction
13
2-2- Les 3 générations de l’agriculture moléculaire végétale 14 2-3- Historique de la production pharmaceutique à partir d’OGM 16
2-4- Réglementation de l’agriculture moléculaire 17
2-5- Les avantages de la moléculture 19
2-6- Les plantes, nouveaux vaccins comestibles 22
2-7- Rentabilité de l’agriculture moléculaire… Conclusion 23
Conclusion 26
Chapitre III : Les risques soulevés par la moléculture. 3-1- Introduction 27 3-2- Les voies d’introduction des biomolécules dans l’environnement ainsi que dans
l’alimentation humaine et animale
28
3-3- Risques pour la santé humaine et animale. 3-4- Les consommateurs face à l’agriculture moléculaire végétale.
33
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Chapitre IV : Particularités des protéines à usage pharmaceutique dans les plantes
transgéniques. 4-1- Introduction.
36
4-2- La machinerie de glycosylation 39
4-3- Retouches protéolytiques 44
4-4- Caractère immunogène des glycanes des « planticorps » 45
4-5- Humanisation des glycoprotéines recombinantes d’origine végétale. 4-6- Rétention de la protéine recombinante dans le réticulum endoplasmique
47
4-7- Conclusion et perspectives 49
Chapitre V : Ingénierie moléculaire et étapes de production des oléosines modifiées
pour la production de l’insuline humanisée. 5.1- Introduction.
50
5.2- Voies d’amélioration de la synthèse des protéines 51
5-3- La transcription 53
5-4- Les étapes post- transcriptionnelles 54
5-5- La traduction 56
5-6- Étapes post-traductionnelles 57
5-7- Technologie de l’extraction de la protéine d’intérêt 60
Conclusion 61
Chapitre VI : L’Insuline. 6-1- Introduction. 6-2- La pro insuline et la maturation de
l’insuline
62
6-3- Structure biochimique de l’insuline et son historique 64
6-4- Normes et pratique d’utilisation de l’insuline par le diabétique. 65
6-5- Impact de l’insuline sur le métabolisme cellulaire 67
6-6- Conclusion 68
Chapitre VII : Généralités sur le diabète. Impact d’une alimentation raisonnée. 7-1-
Introduction. 7-2- Généralités.
69
7-3- Diabète, problèmes de l’insulino- résistance, maladies cardio-vasculaires secondaires, rôle d’une alimentation équilibrée.
73
y
7-3-2- Lutte contre l’insulino résistance 83
7-3-3- Une alimentation raisonnée 86
7-3-4- Recommandations alimentaires 87
7-3-5- Un sport adapté 91
7-3-6- Conclusion 93
Chapitre VIII : Synthèse et discussion 94
Conclusion générale 102
Résumés (français, anglais, arabe) 104
Références bibliographiques 107
Annexes 1 : Correspondances avec Sembiosys 116
Annexes 2 : Illustrations 121
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Introduction et problématique
Actuellement, environ 150 millions de personnes dans le monde sont atteintes de diabète de type 1 et ont besoin d’injection d’insuline. Des experts estiment que le nombre de personnes concernées doublera dans les 25 prochaines années (M. Lang & A. Baum, 2005). Des scientifiques testent actuellement de nouvelles méthodes moins pénibles que les piqûres, à l’aide desquelles les patients pourraient avaler l’insuline ou la faire pénétrer par les muqueuses du nez ou des poumons (Guevara CA., 2007 ; Morishita M. et al, 2007). Etant donné qu’une telle absorption est moins efficace, des doses cinq à dix fois supérieures seraient indispensables. Compte tenu de ce fait, la demande en insuline augmentera considérablement dans les prochaines années (M. Lang & A. Baum, 2005). De même, la technologie actuelle de production de l’insuline humaine qui utilise des microorganismes (cultures de bactéries et de levures dans des bioréacteurs) n’est plus adaptée à cette forte demande en insuline à cause du coût élevé de sa production. Une alternative possible, nettement plus économique, serait la production d’insuline à base de plantes (Nykiforuk CL, 2006).
Afin de pouvoir déterminer si la nouvelle méthode est techniquement et commercialement rentable, des chercheurs canadiens ont effectué des essais en laboratoire sur une mauvaise herbe particulière, l’arabette ou plante d’Arabidopsis (Nykiforuk CL, 2006). Les scientifiques de
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l’entreprise canadienne (SemBioSys, 2005) ont travaillé de la manière suivante :
Ils ont identifié une protéine autour des corps lipidiques présents dans les graines d’arabidopsis et de carthame : l’oléosine.
Ils ont lié un gène hybride (codant pour l’insuline humaine) au génome de ces plantes, menant à la production d’une protéine composée d’oléosine et d’insuline.
Cette protéine s’accumule autour des corps lipidiques dans les graines et peut être recueillie après centrifugation et traitement à la trypsine, une enzyme qui sert à séparer l’insuline humaine de l’oléosine.
Après une dernière étape de purification, les chercheurs ont finalement réussi à extraire de l’insuline humaine biologiquement active.
Grâce à sa petite taille et à son maniement simple, l’arabidopsis se prête parfaitement aux expériences en laboratoire. En revanche, elle ne serait pas appropriée à une production de produits pharmaceutiques en grande quantité. C’est pourquoi les chercheurs de SemBioSys ont testé avec succès le carthame des teinturiers (Carthamus tinctorius). Ces plantes permettent une culture à grande échelle et sont une source abondante de corps lipidiques, et par conséquent, d’insuline humaine (Nykiforuk CL, 2006).
bb
La méthode de production de l’insuline humaine à l’aide des plantes de carthame est actuellement optimisée. Des essais cliniques ont été conduits sur trois années et ont prouvé la réussite du choix de cette plante pour la production de l’insuline et la facilité de sa purification. La méthode traditionnelle qui se sert de microorganismes génétiquement modifiés s’avère plus coûteuse de 40 à 60 % que celle du carthame. En visant l'objectif d’avoir un rapport « quantité d’insuline/ quantité de protéines totales de la graine » de un pourcent, le rendement de production pourrait être de deux kilos d'insuline par hectare de Carthame, ce qui représente une quantité suffisante pour assurer le traitement de 2500 patients pendant un an. Les chercheurs pensent être capables de répondre aux besoins mondiaux dès 2010, en exploitant moins de 8000 hectares de plants de carthame (M. Lang & A. Baum, 2005 ; J. Guth et al, 2006). Ce mode de production de médicaments ou d’intermédiaires pharmaceutiques dans les plantes est connu sous le nom de “pharming” ou de “moléculture”. Il a depuis longtemps séduit les industriels de la pharmacie et des biotechnologies. En effet, plusieurs classes de médicaments peuvent être produites dans des plantes et sont en cours de développement : vaccins (cholera, hépatite B), enzymes (lipase), anticorps (traitement du cancer, du paludisme), hormones (insuline, hormone de croissance), protéines de structure (collagène), etc. Le « pharming » porte en germe la promesse de médicaments moins chers, pouvant être produits dans des pays en développement, là où ils sont le plus nécessaires. Certaines molécules ont vu ainsi leurs coûts de production diminués d’un facteur de 10 à 100. Un autre avantage très important pour les industriels réside dans le fait que la quantité de
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protéines produites peut être facilement modulée avec des investissements limités dans les moyens de production (Moschini, G. et al, 1999). De plus, les plantes permettent la production de certaines protéines complexes qui ne sont actuellement pas synthétisées de façon fonctionnelle dans des microorganismes (levures, bactéries, champignons…).
But et objectifs de la recherche
Le but de cette recherche est de faire le point sur le fort potentiel de production de l’insuline par les graines de carthame génétiquement modifié. Les objectifs spécifiques et les chapitres du présent travail bibliographique sont les suivants :
1. Le carthame génétiquement modifié, plante prometteuse dans la production d’insuline : Fiche technique, historique, utilisations médicinales et culture.
2. Les cultures moléculaires, les modifications génétiques, les anticorps et l’éthique dans l’utilisation des OGM.
3. La technologie de l’oléosine pour la production de l’insuline.
4. Analyse bibliographique sur la pro insuline, l’insuline et les produits analogues : Aspects biochimiques et physiologiques.
5. Analyse bibliographique sur le diabète et impact du sport et d’une alimentation à base végétale, particulièrement de fruits et de légumes sur la maladie.
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Méthodologie
Le présent travail est bibliographique. Il épuise ses sources de références principalement des sites web de l’Internet, des articles de recherche et des thèses des mémorisants de la Faculté de Médecine et de Pharmacie de Rabat. Une correspondance particulière a été établie avec les chercheurs de la société canadienne SemBioSys. En communicant par e-mail, différentes explications et éclaircissements ont été apportés à ce rapport. Une autorisation particulière a été reçue de leur part (annexe 1) afin d’inclure dans le présent document les photos de leur découverte (annexe 2).
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Chapitre I
Le carthame (Safran Bâtard)
1.1- La plante : Le carthame est une plante annuelle, de la famille des Astéracées (composées). Elle est légèrement épineuse, apparentée au cardon et mesure 0,60 à 1,50 m de hauteur. Elle est originaire des zones chaudes et sèches (Zone méditerranéenne, Mexique, Australie, Iran, Inde, Chine, etc…). La plante est buissonneuse, ornée de fleurs nombreuses de couleur jaunes, oranges et rouges. Ces fleurs sont tubuleuses et groupées en capitules solitaires en haut des rameaux. Chaque capitule, comme pour les autres cardons, comprend de nombreuses fleurs, chacune pouvant produire potentiellement une seule graine. Chaque capitule, contenant une centaine de fleurs, peut produire de 20 à 100 graines de forme semblable à celle des petites graines de riz. La graine est composée d'une masse entourée d'une coque fibreuse épaisse, difficile à enlever. Les farines de carthame sont produites à partir de graines non décortiquées.
1.2- La fleur est le plus souvent jaune foncé, mais, selon le génotype, elle peut être rouge orangé, rouge, jaune citron ou même blanche. Le carthame est généralement une plante autogame. Pendant la phase de maturité, les plantes se dessèchent complètement et les graines peuvent être récoltées sans problème à la fin du mois d’Août. Le fruit du carthame est un akène, dont le poids de mille grains est d’environ 30 grammes (30 mg/graine).
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1.3- Les graines sont de la grosseur d’un gros grain d’orge, de couleur blanche, brunâtre ou blanc, rayée de gris, de brun ou de noir. Elles contiennent environ 17% de protéine brute et 35% de matière grasse brute, dont 70% d’acide linoléique et 20% d’acide oléique ; le reste sous forme d’acide palmitique (5%) et d’autres acides gras. La graine de carthame s’appelle « Cardy ». Elle est aussi appelée « Graine de Perroquet, Safran Bâtard, Safran des Prés, Safran des teinturiers ». En Anglais, la plante est appelée « Safflower, Saffron Thistle, False Saffron » (Wikipedia, the free encyclopedia, 2007).
Fig. 1 : Graines de Carthame
1.4- Principales espèces botaniques connues :
Carthamus arborescens L. (carthame arborescent), plante du sud de l'Espagne et du nord-ouest de l'Afrique.
Carthamus boissieri Halácsy, plante des îles grecques.
Carthamus dentatus, plante des Balkans et de la Turquie.
Carthamus lanatus L. (carthame laineux), présent dans tout le bassin méditerranéen.
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1.5- Historique : Le carthame est connu depuis la plus haute Antiquité. Les Égyptiens l’utilisaient comme colorant allant du jaune au rouge extrait de ses fleurs pour l’imprégnation des bandelettes entourant les momies car on lui attribuait une action contre les moisissures. Il est utilisé également en Inde dans la cuisine pour colorer les aliments en jaune (à la place du vrai safran). Les fleurs de carthame contiennent de la carthamine (C14 H16 O7), un colorant de type flavonoïde. Au XIXe siècle on a abandonné ses propriétés colorantes à l’avènement des colorants synthétiques (aniline) et on le cultive désormais davantage pour extraire de ses graines une huile très appréciée. Actuellement, il est cultivé comme plante génétiquement modifiée (PGM) afin de produire de l’insuline humaine.
1.6- Propriétés médicinales et alimentaires : Les fleurs de carthame sont utilisées contre les douleurs musculaires. L’huile de carthame est considérée comme un anticoagulant qui fait circuler le sang et disperse les amas de cholestérol. La richesse en acide gras oléique le rend nécessaire dans des cas d’artériosclérose, maladies cardiovasculaires, arthrite, rhumatismes. Les graines contiennent de l'acide linoléique (70%) et de l'acide oléique (20%) ; ce dernier, avec la même teneur élevée en vitamine E (310 ppm), est responsable de la bonne réputation d'huile de carthame parmi les nutritionnistes. L’huile de carthame peut être consommée directement ou entrer dans la fabrication de corps gras (margarine). Les graines sont aussi utilisées directement pour la
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nourriture des oiseaux et entrent dans la composition d’aliments pour le bétail (Quillet & Larousse, Encyclopédies 2007).
Fig 2. a- Fleurs sèches de Carthame Fig 2.b- Portrait du carthame
1.7- Culture : Le carthame est une culture qui s'adapte à des sols peu fertiles, à différents climats et il a besoin de peu d'eau. La culture ressemble à celle du cardon vulgaire. La plante supporte bien les gelées au début de son développement et également bien la sécheresse une fois arrivée à maturité. La plante commence à croître en hauteur en Mai, puis les pousses latérales se développent. Les plantes sont très résistantes à la verse grâce à leurs racines pivotantes. Les feuilles sont plus ou moins épineuses selon le génotype de la plante. La floraison commence environ à la mi-juillet et la pousse principale fleurit avant les pousses latérales.
Dans la réalisation de l’objectif d’une forte production du carthame, les itinéraires techniques sont relativement assez bien connus, mais sont encore mal maîtrisés pour élaborer une qualité donnée dans la graine, telle que sa richesse en protéines. En effet, la composition des graines en protéines varie selon les conditions environnementales (température, eau...), les conduites culturales (régime hydrique, apport azoté, date de
ii
semis…) et aussi selon les génotypes. Tout stress de sécheresse et de déficit hydrique agit en faveur d’une augmentation du taux des protéines dans la graine. La connaissance des caractéristiques génomiques, biochimiques et agrophysiologiques liées à la qualité de la graine, doit permettre de progresser dans l’identification des meilleures combinaisons génotypes – environnement - pratiques culturales pour la production d’une qualité recherchée (Roche J. & Bouniols A., 2005).
Fig. 3 : Culture de Carthame
1.8- Culture au Maroc : Le carthame, généralement limité à moins de 1.000 ha, est presque abandonné par les agriculteurs marocains à cause des problèmes de faible rendement, de difficulté d'écoulement de la production et de sa faible valorisation. Les rendements réalisés sont de moins de 6 qx/ha de graines pour cette culture conduite en bour ; c’est le rendement le plus faible de toutes les oléagineuses (Bamouh et al, 2001). La culture n’est pas réalisée en irriguée à cause de sa faible rentabilité. L'incitation à la culture du carthame au niveau des zones arides (Oujda, Guerssif) et semi-arides (Taounate, Saïs, Haouz) pour une utilisation pharmaceutique valoriserait ces régions et pourrait contribuer à l’amélioration du revenu du producteur. Le carthame détient aussi
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l’attention des chercheurs. En effet, à l’INRA, dans le cadre du programme de développement variétal, une collection de plus de 200 variétés de différentes origines est présente à Meknès et les travaux de caractérisation de ces variétés sont en cours de réalisation (Bamouh et al, 2001).
1.9- Le Carthame génétiquement modifié pour produire la pro insuline humaine: La société canadienne SemBioSys, découvrant la possibilité de produire de l’insuline humaine à partir de graines de Carthame (Carthamus tinctorius) transgénique (portant le code secret de la société 4438-5A), a voulu être à l’abri des critiques des environnementalistes et a présenté à l’organisme officiel américain USDA-APHIS une demande d’évaluation des effets néfastes de cette plante « Carthame génétiquement modifié » sur l’environnement.
Certains avis des scientifiques ont été pour cette découverte, qualifiée d’extraordinaire, pouvant bouleverser le monde, en mettant à la disposition des diabétiques une insuline qui coûte la moitié de son prix actuel. Les arguments avancés présument que la pro insuline humaine est très rapidement dégradée pour qu'elle perde de son activité une fois ingérée par les animaux du milieu. D’autres avis contre, présument que l’inhalation de la pro insuline contenue dans les débris des graines dispersées au champ de culture constitue l’une des options possibles pour la thérapie humaine (Ruhlman et al, 2007).
kk
Les chercheurs de SembioSys écartent la possibilité que les débris inhalés et la poussière du carthame transgénique puissent être actifs, mais ils ne fournissent aucune preuve expérimentale à l'appui de cette conclusion. Ils supposent aussi que des animaux sauvages ne seraient pas affectés par l'insuline humaine. Or, contrairement à cet avis, les lapins comptent parmi les animaux utilisés lors de la découverte de l'insuline et ils continuent à être employés comme animaux d'expérience dans des études courantes sur l'action de cette hormone protéique (Guevara, 2007).
En outre, les oiseaux (Remage-Healey & Romero, 2001) et les serpents (Sidorkiewicz E & Skoczylas R., 1974) répondent également à l'insuline humaine. Il est probablement prudent de dire que toutes les espèces menacées et les êtres humains peuvent être des victimes potentielles de la dissémination de plantes vivrières génétiquement modifiées pour produire l'insuline humaine.
Le rapport des chercheurs de SembioSys note que les plantes à graines, entourant la parcelle de terrain de carthame transgénique des essais, fourniront « une source de nourriture libre et ouverte » plus attrayante pour les oiseaux et les mammifères que le carthame transgénique. Or, d’après certains environnementalistes d’avis contre les OGM, la bande de jachère autour de la parcelle de terrain d'essai est peu susceptible de décourager des animaux mobiles tels que les lapins qui s’alimentent la nuit pour éviter les prédateurs. De même, des protéines fusionnées de pro insuline et de toxine cholérique ont aussi été produites dans des plantes de laitue et de tabac (Ruhlman et al, 2007); lorsque des préparations de ces
ll
plantes transgéniques en poudre sont administrées à des souris diabétiques, la tolérance orale à l'insuline est produite, par conséquent, la pro insuline est restée active.
mm
Conclusion : Le rapport de l’organisme officiel américain USDA-APHIS a donc présenté différents arguments contrastés, en faveur et en défaveur de la production de l’insuline humaine par le carthame génétiquement modifié, mais l’avis favorable l’a emporté et la société canadienne SembioSys a été autorisée à effectuer cette production.
Par ailleurs, la culture de Carthame est prometteuse ; elle pourrait, lorsqu’elle est génétiquement modifiée, valoriser le terrain et les intrants pour une utilisation pharmaceutique. Cependant, le risque de la modification génétique est réel, mais il doit être suivi et contrôlé afin de le surmonter.
nn
Chapitre II : L’agriculture moléculaire
Une nouvelle orientation en confrontation à la
mondialisation
2-1- Introduction : Confrontée à la mondialisation des marchés, l’agriculture et les secteurs industriels qui lui sont associés doivent renforcer leur compétitivité et assumer les nouvelles exigences du marché en terme de qualité, modes de production, diversification et transformation. D’une part, les consommateurs des produits non alimentaires, notamment pharmaceutiques, recherchent des produits peu coûteux et respectant l’environnement. D’autre part, les industriels de la transformation de la matière agricole exigent des produits de composition stable et à forte valeur ajoutée. Les agriculteurs, quant à eux, demandent des produits rentables, permettant de valoriser les intrants et leur assurant un revenu conséquent. Ainsi, il ne suffit plus d’améliorer la productivité, il apparaît nécessaire d’ouvrir la voie à de nouveaux débouchés de la production agricole en répondant aux exigences de la qualité et des cahiers des charges. Les progrès génétiques et des pratiques culturales respectueuses de l’environnement permettent de progresser dans cette voie. Ainsi, ces préoccupations environnementales et économiques poussent le monde agricole vers un mode de production efficace dans l’obtention du produit ciblé et de la qualité désirée; les organismes de Recherche et de Développement accompagnent cette démarche.
Dans le secteur des oléagineuses, malgré une demande croissante en huiles végétales au niveau mondial, la filière du carthame produisant
oo
uniquement de l’huile s’est fragilisée, notamment par la concurrence d’autres cultures oléagineuses, comme le colza. Toutefois, une meilleure valorisation des produits et co-produits de la récolte et une diversification des utilisations permettrait à la culture de rester compétitive vis-à-vis des autres espèces oléagineuses. Un atout de la graine du carthame est sa grande diversité de composition en acides gras et en protéines. Ceci conduit à des utilisations variées aussi bien en nutrition humaine que dans l’utilisation non alimentaire. Dans le secteur non alimentaire, principalement le secteur pharmaceutique, les graines du Carthame conduisent à la production de l’insuline, hormone de plus en plus demandée dans le monde pour résoudre le problème du diabète. Par ailleurs, le tourteau de carthame est utilisé pour l’alimentation animale.
2-2- Les 3 générations de l’agriculture moléculaire végétale (moléculture ou pharming) : L’agriculture moléculaire végétale ou moléculture ou pharming désignent la production de composés pharmaceutiques ou industriels par des végétaux génétiquement manipulés.
Cette production est passée par trois phases :
Une première génération a manipulé les plantes pour qu’elles résistent aux insectes et aux maladies.
La deuxième génération a modifié les végétaux pour qu’ils puissent offrir des caractéristiques agronomiques améliorées (résistance des
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plantes à la sécheresse et au froid) et nutritionnelles précises (production d’un maïs riche en lysine, par exemple).
Pour la troisième génération, les scientifiques continuent à s’intéresser à la production de biomolécules utiles sur les plans pharmaceutique et industriel. Cette production est économe et devient de plus en plus généralisée. En effet, aujourd’hui, environ 57 % des 150 médicaments les plus connus contiennent au moins un composé actif majeur originalement extrait d’une plante (Grifo, 1997). Les chercheurs ont donc identifié, avec le temps, plusieurs protéines humaines ainsi que les gènes qui codent leur production. Les protéines forment la défense du corps humain contre les maladies. Ces protéines sont habituellement synthétisées dans des bactéries modifiées, des cellules de mammifères et d’insectes, des levures et, plus récemment, dans des plantes modifiées génétiquement. La technique consiste à transférer un gène spécifique dans les cellules des végétaux. La production de composés pharmaceutiques par les plantes (moléculture), représente la troisième génération des biotechnologies en agriculture. Plusieurs substances peuvent être obtenues des plantes génétiquement modifiées destinées à l’agriculture moléculaire végétale :
Produits primaires : Anticorps, fragments d’anticorps, enzymes (industrielles, thérapeutiques, diagnostiques, cosmétiques), protéines structurales, antigènes (vaccins), agents thérapeutiques, médicaments, inhibiteurs enzymatiques.
Produits dérivés : Bioplastiques, vitamines, cofacteurs, métabolites secondaires (composés phénoliques, glucosinolates tannins, amidons, sucres, parfums, arômes, alcaloïdes), fibres.
Actuellement, au moins 350 plantes génétiquement modifiées pour produire des composés pharmaceutiques sont en développement clinique au Canada et aux États-Unis (Lamoureux, 2002). Dans les documents bibliographiques, on dénombre environ 34 protéines synthétisées par les plantes : des anticorps (que l’on appelle aussi « planticorps » dans le nouveau langage de la moléculture), des protéines sanguines comme l’albumine ou l’hémoglobine, des enzymes, des hormones comme l’érythropoïétine, ainsi que des protéines immunogènes servant à vacciner, comme la glycoprotéine de la rage (Faye et al, 2001).
2-3- Historique de la production pharmaceutique à partir d’OGM : Dans les années 1970, les médicaments de nature protéique n’étaient disponibles qu’en très faible quantité. Depuis, les protéines pharmaceutiques et les enzymes industrielles sont principalement produites à partir de bactéries génétiquement modifiées. Les premiers composés pharmaceutiques « OGM » ont été l’insuline et les interférents, produits à partir de la célèbre bactérie E.Coli. Cette bactérie a l’avantage de se reproduire très rapidement à très faibles coûts en comparaison avec les cultures en fermentation. Néanmoins, les bactéries ne peuvent pas produire des molécules aussi complexes que peuvent le faire les levures et
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les insectes. Actuellement, elles ne suffisent plus à la production de protéines recombinantes.
Les premières expériences avec des plantes destinées à l’agriculture moléculaire ont été réalisées avec du maïs et du tabac. Le maïs est utilisé parce qu’il se cultive facilement et le tabac parce qu’il se manipule facilement sur le plan génétique, produit de nombreuses graines et possède de larges feuilles générant une grande biomasse. D’autres plantes sont aussi utilisées en moléculture, comme le riz, le carthame, le soja, la luzerne et la pomme de terre. Ce n’est pas un hasard si ces plantes ont été choisies en premier pour des essais en agriculture moléculaire végétale et dans le domaine des biotechnologies. De plus, des recherches ont été faites sur leur pollinisation, leur génétique et la dormance de leurs semences. Ces informations deviennent cruciales lorsque vient le temps d’établir le mouvement du pollen et la possibilité de transfert des gènes entre les plantes conventionnelles et celles issues du génie génétique. Toutes ces informations sont alors utilisées afin d’isoler au maximum les essais en champ (Felsot, 2002).
Actuellement, les médicaments issus d’AMGM (Anticorps Monoclonaux provenant de plantes Génétiquement Modifiées) qui ont été approuvés et autorisés ont été principalement préparés à partir de cultures cellulaires. A titre indicatif, on peut citer les exemples suivants :
Des souris de laboratoire OGM ont été modifiées génétiquement pour produire des anticorps humains.
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Des anticorps monoclonaux humains ont déjà été produits à des niveaux relativement élevés à partir d’oeufs de poulet.
Des tabacs ont été transformés avec un vecteur viral pour produire des anticorps visant le lymphome non-hodgkinien.
Des plantes OGM ont été transformées pour produire les anticorps utilisables en prophylaxie contre la rage et d'autres états pathogènes (Marie-France Huot, 2003).
2-4- Réglementation de l’agriculture moléculaire: Cette réglementation change d’un pays développé à un autre, mais en général, les plantes destinées à la moléculture sont considérées comme toute autre plante transgénique et sont étudiées au cas par cas, selon leurs caractéristiques. Les demandes pour les essais en milieux confinés (serres, laboratoires) par les promoteurs, en France, par exemple, sont déposées auprès de la Commission du génie génétique (CGG) qui relève du ministère de la Recherche. Les demandes pour les essais en champ se font auprès de la Commission du génie biomoléculaire (CGB). Cette dernière a pour mission d’évaluer les risques liés à la dissémination des OGM sur la santé publique et l’environnement. La CGG et la CGB sont des instances consultatives sans pouvoir de décision. Ces commissions émettent un avis et le ministère dont elles dépendent octroie ou non un agrément ou une autorisation. Ainsi, la CGB, composée de membres nommés (scientifiques, environnementalistes, spécialistes de la santé, consommateurs) examine le dossier et présente un avis au ministère de l’Agriculture, de l’Alimentation, de la Pêche et des Affaires rurales ainsi
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qu’au ministère de l’Écologie et du Développement, qui autorisent ou non l’essai. Cet avis contient des recommandations sur les mesures de confinement (distance d’isolement, rangs de bordures, etc.) à prendre par le ministère. La Commission base sa décision, entre autres, sur les caractéristiques de l’implantation de l’essai, sa localisation et le biotope concerné ainsi que sur les caractéristiques des séquences introduites et des plantes considérées.
Enfin, le ministère de l’Agriculture publie sa décision à travers les formulaires d’information du public, mis sur son site Internet à l’adresse suivante : http://www.agriculture.gouv.fr. En effet, la procédure d’information du public est obligatoire pour toute dissémination volontaire de plantes transgéniques. Cependant, seule la liste des communes dans lesquelles sont réalisés les essais est diffusée sur Internet. Les références cadastrales ne sont pas révélées. L’Agence du médicament humain (EMEA), s’occupe de l’évaluation des médicaments en général, dont ceux issus de plantes génétiquement modifiées. En effet, le promoteur doit enregistrer son médicament auprès de l’EMEA. Le produit, comme tout médicament conventionnel, doit faire l’objet d’une panoplie de tests cliniques qui évaluent sa qualité, sa tolérance et son efficacité.
2-5- Les avantages de la moléculture : L’agriculture moléculaire végétale est perçue comme étant une alternative viable à la production actuelle de molécules biopharmaceutiques. En effet, les coûts élevés limitent actuellement la production de médicaments par des méthodes
