Epithelial folding and migration

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Aurelien Villedieu

To cite this version:

Aurelien Villedieu. Epithelial folding and migration. Cellular Biology. Sorbonne Université, 2019. English. �NNT : 2019SORUS400�. �tel-03139853�

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Fig.3. Neck invagination is associated with a contractile acto-myosin cable. Neck invagination leading edge is marked

by a linear enrichment in MyosinII, labelled by sqh::3XGFP, blue line represents the region used for reslicing (A). Neck MyosinII cable is marked by an enrichment in activated MyosinII, labelled by anti-phospho-Squash (p-Sqh) immunostai-ning (B). This enrichment corresponds to a 2 to 3-fold increase in cortical p-Sqh levels, error bars represent standard error to the mean, n: number of analyzed stainings (B’). F-actin, labelled with utrophin::GFP, is also enriched in the Myo-sinII cable (C). Mosaic expression of sqh::GFP and sqh::RFP reveals that the cable is composed of MyoMyo-sinII cortical enrichment of both head and thorax cells (D). Quantification of MyosinII enrichment at the cable, on the head and thorax sides, n: number of analyzed junctions. T-tests have been performed to assess whether mean of each distribution is different from 1 (*** p-value<0.001, * pvalue<0.05), and a Welch test has been performed to compare pooled head with pooled thorax enrichments measurements (n.s. pvalue<0.05 (p-value=0.77), D’). The acto-myosin cable is located at the precise boundary between Antennapedia and Deformed homeotic expression domains (E). Recoil velocities after abla-tion are higher in the cable than in neighbouring juncabla-tions (either in juncabla-tions in the head or in the thorax which are parallel to the cable, or in junctions in the head that are perpendicular to the cable), and recoil velocities after ablation in the cable are higher during invagination (20-22hAPF) than prior to invagination (14-16hAPF). Welch tests have been performed to compare distribution means (*** pvalue<0.001, **pvalue<0.1, F).

[(A), (B), (B’), (C), (D) and (E)] red arrows indicate head-to-thorax boundary acto-myosin cable location. Scale bars : 25µm. Ecad::3XGFP p-Sqh Ecad::3XGFP p-Sqh B sqh::GFP sqh::RFP sqh::GFP sqh::RFP D sqh::GFP Antp Dfd SqhAntpDfd E 17hAPF 19hAPF 23hAPF 21hAPF

Top view Reslice

sqh::3XGFP A 14-16hAPF 20-22hAPF Cable Thorax Head A-P Head -40 -30 -20 -10 0 10 20 30 40 Antero-posterior position (µm) 0 100 200 300 400 500 600 700

Fluorescence intensity (u.a.)

B’ p-Sqh n=8 F B_C utr::GFP D’

Head (sqh::GFP)Head (sqh::RFP)_Thorax (sqh::GFP)_Thorax (sqh::RFP)

n=18 n=5 n=31 n=21 M yoII enr ichmen t a t the cable In tensit y (u .a.) PositionAP (µm) CableHeadThor ax Head A -P CableHeadThor ax Head A -P

B "5 " * 0 " " " " C * " "0 5 " D & ' $ # ' $5 B ' % ' # 5 # C ' ' 9 5 % D7 $ )EA $ B $ $ C' ' ' $ B ' % 5 B $ ' D7 $ )% G $ EA ) " % 9+ # B 5 ' C ' " A < ' % C C # 9+ # $ ' $ B ' $ B $ D7 $ .9 EA $ 5% ' $ $ B $ $ $ ' 9+ C' $ D7 $ EA -' % ' 9 5 # ' $ $ B $ % C' ' 5 5 9 5 % $ C' G # $ A F ' $ 5% ' B G # G # $A ) # # $ ' C # 5 BB % $ 5 G 6 B $ 5% ' B B ' 5 G $ 5 C B ' # # $% 5 ' B ' 5 B ' C $' D7 $ &EA F ' ' G # B N 9 5 G $OA B ' G # $' 5 C B % $ G # $ 5 $ ' ' D7 $ &EA W