Immunohistochimie nouvelle génération

Immunohistochimie nouvelle génération

Virginie Marty – Pr Jean-Yves Scoazec

Plateforme Pathologie Expérimentale et TRAnslationnelle (PETRA) Gustave Roussy

AFTLM 28 novembre 2019

Structure

Colorations

Protéines

IHC

ARN / ADN

ISH

PHENOTYPE

GENOTYPE

TISSU NORMAL

TUMEUR

IHC : Comment ça marche ?

QUANTITATIVE

Nucléaire

Substrat Enz.

DESCRIPTIVE

Cytoplasmique Membranaire

Protéine

Applications de l’IHC ?

Pathologie diagnostique

Marqueurs Exploratoires

Comprendre et Prédire la sensibilité / résistance aux traitements Nouvelles cibles thérapeutiques

Mécanismes de développement et de prolifération Marqueurs diagnostiques

Diagnostic Classification des tumeurs Pronostic

Traitement

Biomarqueurs thérapeutiques Mise en évidence

d’éventuelles cibles thérapeutiques

Recherche Clinique et translationnelle

Validation de marqueurs pour une utilisation en diagnostic

IHC Multiparamétrique

Substrat

Enz. Fluo Substrat

Enz.

Fluo

Enz. Fluo

LT

Substrat

Enz. Fluo

Protéine + Protéine + Protéine + Protéine

CT

: IHC Multiplex

Multiplex et Immunothérapie

Description de l’infiltrat immunitaire

Descriptive

Topographique Quantitative

FOXP3 / CD8/ CD3

Lymphocytes Lymphocytes T8 cytotoxiques /

Macrophages

CD8 / CD68 / CD163

Et en fluorescence alors ?

CD4

CD8 FoxP3

Cytokératine

Autre exemple d’IHC multiplex

LT8 : prolifération ? Localisation LT8

Intra / péritumorale Nombre LT8

Cellules tumorales PD-L1 +

Ki67 / CD8 / PD-L1 / CK

CT

Exemple 2

LT CT

Exemple 1

IHC Fonctionnelle

Protéine

?

Substrat

CT

?

Protéine

CT

< 40nm

< 40nm

: Protein Ligation Assay

Exemple PLA : Complexe de récepteurs

Formation d’un complexe entre deux récepteurs : facteur prédictif de résistance à certains traitements ?

Récepteur 1

Récepteur 2

PLA + IHC

Outil en thérapeutique :

Pas de surexpression de HER2

Pas d’Herceptin

Récepteur HER2

Tumeur du sein Établir le statut HER2 :

HER2 surexprimé ? _IHC

Score 0 Score 1+ Score 2+ Score 3+

Surexpression de HER2

Herceptin

ISH ADN

ISH : Principe _ADN

Substrat

Enz.

GPA : Gene Protein Assay

Protéine

ADN +

IHC ISH

Substrat

Enz.

ENZ Substrat

ISH

IHC

HER2 : cible thérapeutique

Et l’ISH ARN ?

ARN

Substrat

ARN

+

Substrat

PD-L1 – CD8

RNAscope

De l’ARN à la protéine

ENZ Substrat

Substrat

Protéine

ARN +

IHC ISH

Conclusion

Biomarqueurs

TEMPS I

H C

Evolution de l’IHC dans le temps

Echantillon tumoral

ADN / ARN

Protéines

Carte Identité Tumeur

+

MERCI