ETUDE DES TRIGLYCERIDES COMME UN DES FACTEURS DU RISQUE CARDIO-VASCULAIRE.

MINISTERE D’ETAT CHARGE DE L’ENSEIGNEMENT SUPERIEUR ET DE LA RECHERCHE SCIENTIFIQUE

**********

UNIVERSITE D’ABOMEY-CALAVI

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ECOLE POLYTECHNIQUE D’ABOMEY-CALAVI

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DEPARTEMENT DE GENIE DE BIOLOGIE HUMAINE

Option :

RAPPORT DE FIN DE FORMATION DU PREMIER CYCLE POUR L’OBTENTION DU

DIPLOME DE LICENCE PROFESSIONNELLE THEME :

Réalisé et soutenu par :

Pascal AGBEGNINOU.

Sous la direction de :

Rapporteur : Dr. Nicolas AÏKOU.

Examinateur : Dr. Casimir D. AKPOVI.

Année académique : 2014-2015

8

promotion.

Tuteur de stage :

Mr. Jean-Eudes DEGBELO

Ingénieur en analyses biomédicales à l’hôpital de zone d’Abomey- Calavi/ Sô-Ava.

Superviseur : Dr. Nicolas AÏKOU

Maître-assistant des Universités de CAMES,

Enseignant à l’Université de Parakou.

ETUDE DES TRIGLYCERIDES COMME UN DES FACTEURS DU

RISQUE CARDIO-VASCULAIRE.

Réalisé et soutenu par Pascal AGBEGNINOU LP/EPAC/GBH. Page i

REPUBLIQUE DU BENIN

………

MINISTERE DE L’ENSEIGNEMENT SUPERIEUR ET DE LA RECHERCHE SCIENTIFIQUE

………..

UNIVERSITE D’ABOMEY-CALAVI

………...

ECOLE POLYTECHNIQUE D’ABOMEY-CALAVI

………

DEPARTEMENT DE GENIE DE BIOLOGIE HUMAINE ………

DIRECTEUR

Professeur Félicien AVLESSI ………….

DIRECTEUR ADJOINT Docteur Clément BONOU …………

CHEF DE DEPARTEMENT Docteur Casimir D. AKPOVI

…………

Année académique : 2014-2015

8

promotion.

Réalisé et soutenu par Pascal AGBEGNINOU LP/EPAC/GBH. Page ii LISTE DES ENSEIGNANTS DU DEPARTEMENT DU GENIE DE BIOLOGIE HUMAINE

(GBH)

I. ENSEIGNANTS PERMANENTS N° Nom et Prénoms Matières enseignées

01 Feu ADISSODA Cyrille Anglais

02 AHOYO Théodora Angèle Microbiologie Générale et Médicale 03 AKPOVI D. Casimir

Biologie cellulaire et physiologie Biochimie Générale et Clinique

04 ALITONOU Guy Chimie Générale et Organique

05 ANAGO Eugénie Biochimie Générale et Clinique 06 ANAGONOU Sylvère Education Physique et Sportive 07 ATCHADE Pascal Parasitologie Générale et Médicale 08 AVLESSI Félicien Chimie Générale et Organique

09 BANKOLE Honoré

Microbiologie Générale et Médicale, Bactériologie Appliquée et Virologie

10 DOSSOU Cyriaque Techniques d’Expression et Méthodes de Communication

11 HOUNSOSSOU Hubert

Biométrie-Biostatistique

Epidémiologie et Anatomie Générale 12 LOKO S. Frédéric Biochimie Générale et Clinique 13 LOZES Evelyne

Immunologie Générale Equipements Biomédicaux

14 SEGBO A. G. Julien Biochimie Clinique et Biologie Moléculaire

15 SECLONDE Hospice Immuno-Hématologie et Transfusion Sanguine, Esprit de Leadership

16 SOCLO Henri Chimie Générale

17 YANDJOU Gabriel Techniques d’Expression et Méthodes de Communication 18 YOVO K. S. Paulin Physiologie Humaine, Pharmacologie et Toxicologie 19 DOUGNON T.

Victorien

Microbiologie générale, Bactériologie appliquée (Travaux Pratiques) et Méthodologie de la recherche

Réalisé et soutenu par Pascal AGBEGNINOU LP/EPAC/GBH. Page iii II. ENSEIGNANTS VACATAIRES

N° Nom et Prénoms Matières enseignées

01 ABLEY Sylvestre Déontologie Médicale

02 AKOWANOU Christian Physique

03 AGBANGLA Clément Génétique Moléculaire et Génie Génétique 04 AGOSSOU Gilles Législation et Droit du Travail

05 AKOGBETO Martin Entomologie Médicale

06 BINAZON Claude César Soins Infirmiers et Phlébotomie

07 DARBOUX Raphaël Histologie Spéciale

08 DESSOUASSI Noël Biophysique

09 DOSSEVI Lordson Techniques Instrumentales

10 FOURN Léonard Santé Publique

11 HOUNNON Hyppolite Mathématiques

12 MASLOKONON Vincent Histologie Générale

13 SENOU Maximin Histologie Spéciale

14 TOPANOU Adolphe Hématologie et Hémostase

Réalisé et soutenu par Pascal AGBEGNINOU LP/EPAC/GBH.

DEDICACES

Réalisé et soutenu par Pascal AGBEGNINOU LP/EPAC/GBH. Page iv A tous ceux qui se battent chaque jour pour un lendemain meilleur malgré leur condition de vie difficile, misérable et précaire, courage, car le succès n’a jamais été l’effet du hasard, la chance ne sourit qu’à ceux qui la force.

Merci !

Pascal AGBEGNINOU

Réalisé et soutenu par Pascal AGBEGNINOU LP/EPAC/GBH.

REMERCIEMENTS

Réalisé et soutenu par Pascal AGBEGNINOU LP/EPAC/GBH. Page v Le travail effectué n’aurait pas eu une fin heureuse sans l’aide et l’apport de certaines personnes qui malgré leurs diverses occupations nous ont apporté leur soutien, ont consenti des efforts pour nous voir réussir. Ainsi nos sincères remerciements à :

 Dieu, l’Eternel Tout-Puissant de nous avoir accordé le privilège d’embrasser ce domaine.

Pour toutes les grâces d’intelligence, de force, d’assistance et de protection dont tu nous as gratifiées durant tout notre cursus scolaire et universitaire. Que toute gloire te soit rendue ;

 A mon cher père AGBEGNINOU D. T. Cyprien, grande est maintenant ma joie de comprendre que vous aviez pris les bonnes décisions et à temps. Vos encouragements, votre soutien sans faille durant mes études et ce travail de soutenance, ainsi que votre implication au quotidien. Je ne sais pas si j’y serais arrivé sans vous. Vous avez été, êtes et serez toujours là pour moi, et je n’ai pas les mots pour vous dire combien je vous aime.

Que Dieu nous donne aussi la force de mieux faire à nos futurs enfants, qu’il vous accorde une vieillesse bénie ! Merci papa !

Que Dieu vous donne de longue vie!

 A ma chère mère BESSANH Houandagbé, jamais je ne saurais vous remercier pour m’avoir donné la vie, élevé et éduqué avec autant d’amour et de dévotion. Que ce travail soit pour vous le témoignage de l’amour et de la profonde gratitude que mes frères et moi vous portons. Merci pour vos conseils et prières.

Longue vie à vous maman.

 A tous les professeurs de l’EPAC, et en particulier à ceux qui ont participé à notre formation, pour la richesse de leurs enseignements. Je tiens à vous exprimer ici mes sincères reconnaissances.

 A tous les personnels du département de génie de biologie humaine à l'EPAC. Merci de nous avoir inculqué le savoir-faire professionnel dans l'exercice de notre fonction de biologiste.

 A mon oncle AGBEGNINOU D. Athanase, pour votre soutien indéfectible

 A mes frères et sœurs, Je suis fier d’être votre frère. Que l’ETERNEL exauce toujours nos prières ! avec lui, nous ferons plus des exploits ! Que ceci reste un exemple à suivre et à surpasser. Merci pour votre soutien. Soyez bénis !

Réalisé et soutenu par Pascal AGBEGNINOU LP/EPAC/GBH. Page vi

 A mes cousins, tantes,… toute ma famille, pour votre affection et votre présence. Je suis chanceux de vous avoir !

 A mon cousin KOUHAGNI A. Julien, tu as toujours été là, m’offrant ton soutien inconditionnel. Que la volonté de DIEU soit faite !

 A mon amie ALISSOU Agnès, vraiment que Dieu soit loué!

 A tous nos camarades de la promotion pour ces moments passés ensemble. Puisse ce travail, être un souvenir pour nous. Brillante carrière à nous.

 A mon cher David C. AGUIDA, ce fut un plaisir de traverser cette rivière avec toi. Merci pour l’esprit d’équipe dont tu as fait preuve.

 A tous ceux, qui de près ou de loin, ont contribué de diverses manières à la réalisation de ce travail, Merci et que Dieu Tout-Puissant, le Miséricordieux vous bénisse.

 Recevez-en mes sincères remerciements.

Pascal AGBEGNINOU

Réalisé et soutenu par Pascal AGBEGNINOU LP/EPAC/GBH. Page vii Nous exprimons aussi nos sincères remerciements:

 Au Docteur Nicolas AÏKOU. Vous avez spontanément accepté de superviser notre travail et depuis, vous n’avez cessé de sacrifier votre précieux temps afin de nous venir en aide.

Nous vous en savons gré. Sincères merci, pour tous vos apports qui ont amélioré la qualité scientifique de ce travail. Que le Seigneur Dieu Tout-Puissant vous le rend au centuple.

 A monsieur Jean-Eudes DEGBELO pour nous avoir permis d’effectuer notre stage au laboratoire de l’hôpital de zone d’Abomey-Calavi/Sô-Ava.

 A tout le personnel du laboratoire HZ-AS pour l’accueil et les enseignements que vous nous avez donnés.

 A Monsieur Rodrigue BEBADA qui, malgré ses multiples occupations, a pu consacrer son temps pour la réalisation de ce document; Sincères remerciements.

 A tous ceux qui, d’une manière ou d’une autre, nous ont aidés à la réalisation de ce document.

Pascal

AGBEGNINOU

Réalisé et soutenu par Pascal AGBEGNINOU LP/EPAC/GBH.

HOMMAGE

Réalisé et soutenu par Pascal AGBEGNINOU LP/EPAC/GBH. Page viii

 A son excellence, Monsieur le Président du jury

Nous sommes honorés quand vous avez accepté de présider le jury de soutenance de ce rapport. Vos observations et remarques seront prises en compte et contribueront à l’amélioration de ce travail. Permettez-nous d’exprimer nos grandes considérations à votre endroit.

 Aux honorables membres du jury

Pour avoir accepté de siéger dans ce jury et de juger ce rapport à sa juste valeur, nos hommages à vous. Nous serons ravis de vos observations qui certainement contribueront à parfaire la présentation de ce travail. Veuillez trouver ici, l’expression de notre profonde gratitude et de nos sincères considérations.

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LISTE DES ABREVIATIONS ET SIGLES

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acylcoA : AcylcoenzymeA.

AVC : Accident Vasculaire Cérébral

CT : Cholestérol total

CL : Cholestérol libre

CE : Cholestérol estérifié

EPAC : Ecole Polytechnique d’Abomey-Calavi.

FABpm : plasma membrane Fatty Acid-Binding protein

g/h : Gramme par heure

g/l : Gramme par litre

HDL : Lipoprotéines de Haute Densité HTA : Hypertension Artérielle

HZ-AS : Hôpital de Zone d’Abomey-Calavi/Sô-Ava LDL : Lipoprotéines de faible Densité

MCV : Maladies Cardio-vasculaires

MTP : Microsomal Triglycéride Transfer protein Mmol/l : millimole par litre

OMS : Organisation Mondiale de la Santé TG : Triacylglycérol (triglycéride).

Trs/minutes : Tours par minutes

VLDL : Lipoprotéines de très faible Densité

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LISTE DES FIGURES

Réalisé et soutenu par Pascal AGBEGNINOU LP/EPAC/GBH. Page xi

Figure 1: Structure du cholestérol. ... 2

Figure 2: Cycle des HDL et le transport reverse du cholestérol ... 3

Figure 3: le rôle protecteur des HDL ... 4

Figure 4: Formules des mono, di et triacyls glycérols ... 5

Figure 5: Structure d’une artère ... 7

Figure 6: Structure et composition cellulaire d’une artère saine ... 7

Figure 7 : Plaque athéromateuse occupant la moitié du diamètre de l’artère. ... 8

Figure 8: Schéma d’une artère sclérosée. ... 9

Figure 9: Photo d’une artère sclérosée ... 9

Figure 10: Coupe schématique d’une artère sclérosée ... 9

Figure 11 : Les facteurs de risque cardiovasculaire ... 11

Figure 12: Genèse de la plaque athéroscléreuse, séquence proposée par H.C. STARY. ... 13

Figure 13 : Population d’étude en fonction du sexe ... 21

Figure 14 : Répartition de la population d’étude selon l’âge. ... 21

Figure 15 : Répartition de la population selon la norme de triglycéridémie et la proportion du risque d’athérogénicité ... 22

Figure 16: Relation entre triglycéridémie et le risque d’athérogénicité. ... 22

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LISTE DES TABLEAUX

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Tableau 1: Mode opératoire manuel du dosage cholestérol total ... 16

Tableau 2 : Mode opératoire manuel de la précipitation ... 18

Tableau 3: Mode opératoire manuel du dosage de HDL cholestérol après précipitation. ... 18

Tableau 4 : Mode opératoire manuel du dosage de triglycéride. ... 20

Tableau 5: Relation entre hypertriglycéridémie et risque athérogène... 23

Tableau 6: Valeurs du cholestérol total, HDL cholestérol et des triglycérides obtenues après dosage et de l’indice d’athérogénicité (IA)………..……….29

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SOMMAIRE

Réalisé et soutenu par Pascal AGBEGNINOU LP/EPAC/GBH. Page xiii

Dedicaces ... iv

Remerciements ... v

Hommage ... ix

Liste des abreviations et sigles ... x

Liste des figures ... xii

Liste des tableaux ... xii

Sommaire ... xiv

Resumé ... xiv

Abstract ... xv

Introduction ... 1

1^ERE PARTIE :SYNTHESE BIBLIOGRAPHIQUE ... 2

1.1- Cholestérol: ... 2

1.2-Lipoprotéines de haute densité (HDL). ... 3

1.3-Triglycérides. ... 4

1.4-Structure de vaisseaux sanguins. ... 6

1.5-Mécanismes de la survenue du risque cardiovasculaire... 7

1.6- Facteurs de risque cardiovasculaires. ... 10

2^EME PARTIE :CADRE, MATERIEL ET METHODES D’ETUDE ... 13

2.1 Cadre. ... 13

2.2 Matériel d’étude. ... 14

2.3-Méthodes d’étude. ... 15

3^EME PARTIE :RESULTATS ET DISCUSSION ... 21

3.1 Résultats. ... 21

3.2 Discussion. ... 24

Conclusion et suggestions ... 26

References ... 287

Annexes ... 29

Table des matieres ... 31

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RESUME

Réalisé et soutenu par Pascal AGBEGNINOU LP/EPAC/GBH. Page xiv Les maladies cardiovasculaires représentent un problème majeur de santé publique. Malgré la connaissance de nombreux facteurs de risque impliqués dans la genèse des MCV, une diminution de mortalité liée à la cardiopathie n’est toujours pas observée. Le nombre total de patient manifestant des signes cliniques de maladies cardiovasculaire a augmenté. L’objectif de cette étude est de montrer l’implication des triglycérides dans la survenue du risque cardiovasculaire. Il s’agit d’une étude transversale et prospective. Le spectrophotomètre a servi au dosage des triglycérides, du cholestérol total, du HDL cholestérol. Le logiciel EpiData version 3.1 et le logiciel Excel 2010 ont servi au traitement des données à savoir : l’âge, le sexe, la triglycéridémie, le cholestérol totale, HDL cholestérol et au calcul du rapport de l’indice athérogène (cholestérol total/HDL cholestérol). Cette étude a pris en compte 46 patients venus consulter à l’hôpital de zone d’Abomey-Calavi et présentant des signes d’une cardiopathie. Il ressort de l’analyse des données, 52% de femmes et 48% d’hommes ont un âge moyen respectivement 61ans et 48 ans. Environ 8,7% de la population d’étude possèdent une hypertriglycéridémie avec un risque d’athérogénicité supérieur à 4,5 ; signe d’une prédisposition sévère au développement des plaques d’athéromes. Le dosage des triglycérides s’avère donc indispensable pour le diagnostic et la prévention des risques cardiovasculaires.

Mots clés : Triglycérides, cholestérol total, HDL cholestérol, risque d’athérogène, plaques d’athéromes.

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ABSTRACT

Réalisé et soutenu par Pascal AGBEGNINOU LP/EPAC/GBH. Page xv Cardiovascular disease is a major public health problem. Despite the knowledge of

many risk factors involved in the genesis of CHD, mortality reduction associated with heart disease is still not observed. The total number of patients exhibiting clinical signs of cardiovascular disease increased. The objective of this study is to show the involvement of triglycerides in the occurrence of cardiovascular risk. This is a transversal and prospertive study. The spectrophotometer was used to assay triglycerides, total cholesterol, and HDL cholesterol. The EpiData version 3.1 software and Excel 2010 software was used for data processing namely: age, sex, triglycerides, total cholesterol on HDL cholesterol and calculating the ratio of the atherogenic index (total cholesterol / HDL cholesterol). This study included 46 patients who came to visit the hospital area of Abomey and signs of heart disease. It appears from the data analysis, 52% women and 48% men with a mean age 61 years and 48 years respectively. Approximately 8.7% of the study population have hypertriglyceridemia with atherogenic risk greater than 4.5; signs of a severe predisposition to the development of atheromatous plaques. Triglyceride is therefore essential for the diagnosis and prevention of cardiovascular risks.

Keywords: Triglycerides, total cholesterol, HDL cholesterol, atherogenic risk, atheroma plaques

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INTRODUCTION

Réalisé et soutenu par Pascal AGBEGNINOU LP/EPAC/GBH. Page 1 La Biochimie Clinique est une des plus importantes disciplines qui s’occupe de la mesure et de l’interprétation de l’état physiologique et biochimique de l’homme sain et de l’homme malade. Elle contribue aussi à la surveillance de l’évolution, à l’explication physiopathologique, à l’adaptation thérapeutique et aussi, à la prophylaxie, au diagnostic et à la recherche des maladies [1]. Aujourd’hui, les maladies non transmissibles notamment les maladies cardiovasculaires représentent la première cause de mortalité mondiale [2].

Les maladies cardiovasculaires qui jadis étaient l’apanage des pays industrialisés occidentaux, sont devenues de nos jours un problème de santé publique en Afrique et particulièrement dans les grandes villes. En effet, les Africains et les Orientaux n’étaient pas prédisposés aux maladies coronaires. Mais avec l’occidentalisation de la vie des Africains, cette pathologie chronique et de surcroît meurtrière est non seulement apparue mais avec une prévalence élevée [2,3]. Au Bénin, la prévalence des maladies cardiovasculaires est de 15% [3]. La cardiopathie ischémique représente la première cause d’hospitalisation dans les cliniques de cardiologie et de neurologie [2]. Les maladies de l’appareil circulatoire sont la conséquence clinique des complications survenant au niveau des lésions athéromateuses des artères. Le processus d’athérogénèse se déroule progressivement pendant plusieurs décennies avant la survenue des manifestations cliniques. L’infarctus myocardique et cérébral, l’oblitération d’une artère des membres inférieurs sont les plus fréquentes de ces manifestations. C’est dire l’importance d’une prévention précoce qui devrait idéalement être instaurée avant la constitution des lésions où celles-ci peuvent encore régresser. Cette prévention nécessite la connaissance des facteurs déclenchant l’athérogénèse. Un de ces facteurs, c’est l’hypertriglycéridémie. Ce qui justifie le choix de ce thème intitulé : « Etude des triglycérides comme un des facteurs du risque cardiovasculaire».

 Objectif général

 Déterminer si les triglycérides constituent un des facteurs du risque cardiovasculaire.

 Objectifs spécifiques

 Déterminer le taux du cholestérol total, HDL cholestérol et celui des triglycérides.

 Calculer l’indice athérogène : cholestérol total / HDL cholestérol.

 Identifier le lien qui existe entre les triglycérides et risque d’athérogénicité après calcul du rapport cholestérol total / HDL cholestérol.

 Montrer l’implication des triglycérides dans la survenue du risque cardiovasculaire.

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1 ^ERE PARTIE :

SYNTHESE BIBLIOGRAPHIQUE

Réalisé et soutenu par Pascal AGBEGNINOU LP/EPAC/GBH. Page 2

1.1- Cholestérol

Le terme cholestérol est issu du grec : « kholê » qui signifie bouillie et « stéréos » qui veut dire solide, car il fut découvert sous forme solide dans les calculs biliaires en 1758 par François Poulletier de La Salle. Mais, ce n'est qu'en 1814 que le chimiste français Eugène Chevreul lui donna le nom de cholestérine. D’où le cholestérol est un genre de bouillie endurcie. Principale graisse circulant dans le sang, le cholestérol est utilisé dans l’organisme comme matière première notamment pour l’enveloppe des cellules, la synthèse des hormones stéroïdes et des acides biliaires.

Le cholestérol appartient à la famille des lipides. Il doit cette attribution à son caractère fortement hydrophobe, bien que sa structure diffère totalement de celle des lipides les plus courants, que sont par exemple les huiles et les graisses alimentaires. Son unique groupement hydroxyle (-OH) peut être estérifié par le groupement carboxyle (-COOH) d’un acide gras.

C’est sous cette forme que la majeure partie du cholestérol est transportée dans le plasma sanguin [4].

Figure 1: Structure du cholestérol [5].

Le cholestérol a une double origine: exogène et endogène. Les besoins de l’organisme en cholestérol (1,2g/24h) sont couverts en faible partie (0,2g) par l’alimentation (produits d'origine animale, charcuterie, viandes grasses, fromages, beurre, œufs...): origine exogène et surtout par la synthèse endogène (1g) qui a lieu dans le foie (les 4/5), dans l’intestin (le 1/5) et un peu dans la peau [4]

Cholestérol total: Les valeurs normales varient de 1,50 à 2,60 g/l.

Il a un rôle :

- structural : le cholestérol est au côté des phospholipides, l’un des constituants lipidiques (10% du poids sec) des membranes cellulaires chez les animaux, (et non chez les végétaux, où l’on trouve d’autres stérols comme le sigmastérol et le b-sitostérol) et, dans une moindre

Réalisé et soutenu par Pascal AGBEGNINOU LP/EPAC/GBH. Page 3 mesure, de la membrane des organites. Sa molécule est amphiphile et s’intercale entre les molécules de phospholipides dans la bicouche lipidique. De part sa structure tétracyclique rigide, le cholestérol dans une biomembrane en réduit la fluidité.

- métabolique : le cholestérol est le précurseur :

* de la synthèse des acides biliaires, dans le foie, indispensables à la digestion des lipides

* des hormones stéroïdes dans les organes stéroïdogéniques (corticosurrénales, gonades et placenta)

* de la vitamine D, dans la peau.

1.2-Lipoprotéines de haute densité (HDL).

Les HDL proviennent de différentes sources telles que le foie et l'intestin. D’après Mahley en 1982, les HDL sont impliquées dans le transport inverse du cholestérol, une voie métabolique par laquelle les HDL acquièrent du cholestérol provenant des tissus périphériques et ensuite transportent le cholestérol, de façon directe ou indirecte, jusqu'au foie afin de l'éliminer de la circulation.

Figure 2: Cycle des HDL et le transport reverse du cholestérol [6].

Réalisé et soutenu par Pascal AGBEGNINOU LP/EPAC/GBH. Page 4 Figure 3: le rôle protecteur des HDL [7].

Hypothèses sur le rôle anti-athérogène des HDL : (1) Inhibition de l'oxydation des LDL ; (2) Stimulation de l'efflux du cholestérol à partir des macrophages transformés en cellules spumeuses ; (3) Inhibition de la sécrétion des molécules d'adhésion produites par les cellules endothéliales [8].

HDL cholestérol : Valeur normale: 0.45 à 0.70 g/l. Les taux physiologiques de HDL cholestérol varient dans une large fourchette. La détermination des HDL cholestérol a un intérêt lorsque la cholestérolémie totale est élevée.

1.3-Triglycérides.

Les triglycérides (aussi appelés triacylglycérols, triacylglycérides ou TG) sont des glycérides dans lesquels les trois groupes hydroxyle du glycérol sont estérifiés par des acides gras. Ils sont le constituant principal des graisses animales et des huiles végétaux. Ce sont des esters du glycérol et de trois acides gras à longue chaine. Les triglycérides se décomposent en acides gras libres, ce qui va soit produire une source d'énergie instantanée pour le corps, soit être recyclé en triglycérides et être stocké dans le tissu adipeux [9].

Structure et synthèse.

Les triacylglycérols sont des lipides neutres, non polaires. Étant hydrophobes, ils peuvent être emmagasinés dans un environnement anhydre et non solvatés par l’eau. De cette façon ils occupent moins d’espace et ajoutent moins de masse; augmentant l’efficacité de l’emmagasinage [10]. Les huiles et les graisses sont des mélanges de triacylglycérols. Le fait qu’un mélange de triacylglycérols soit solide (graisse) ou liquide (huile) dépend de la composition ou de la nature de ces acides gras et de la température. Les triacylglycérols qui contiennent seulement de longues chaînes d’acides gras saturés tendent à être solides à la

Réalisé et soutenu par Pascal AGBEGNINOU LP/EPAC/GBH. Page 5 température du corps, tandis que ceux contenant de petites chaînes insaturées tendent à être liquides. La synthèse comporte trois étapes : formation de l’acide phosphatidique, déphosphorylation de ce dernier en diglycéride et estérification de la dernière fonction alcool du glycérol [10]. Deux acyl-CoA réagissent sur le glycérol 3 –Phosphate pour donner l'acide phosphatidique. Les fonctions alcool primaire et secondaire du glycérol 3 –Phosphate sont estérifiées grâce à l'action de l'acyl transférase. Formation du diacylglycérol ou diglycéride est le résultat du départ du groupement phosphate de l’acide phosphatidique. La réaction est catalysée par une hydrolase appelée phosphatidate phosphatase. Le diacylglycérol réagit avec un acylCoA pour donner le triglycéride grâce à une acyl-CoA transférase [9].

Figure 4:

Les triglycérides circulants proviennent de 2 sources : l’intestin qui absorbe les graisses alimentaires, surtout constituées de triglycérides et le foie qui synthétise des triglycérides, à partir des nutriments absorbés en période postprandiale et à partir des lipides de réserve en période de jeûne. Si le régime alimentaire est pauvre en graisse et riche en hydrate de carbone, les concentrations de triglycérides et de VLDL augmentent, à la fois chez les sujets normolipidémiques et chez les hypertriglycéridémiques car le foie synthétise de VLDL, et celles-ci sont plus riches en triglycérides que les VLDL normales.

Le rôle athérogène des triglycérides semble indirect :

- l’augmentation de leur concentration plasmatique est le plus souvent associée à une diminution de celle des LDL anti-athérogènes.

- l’hypertriglycéridémie est associée à des effets délétères non pathogènes mais suspectées d’intervenir dans la pathogénie des maladies cardiovasculaires.

Réalisé et soutenu par Pascal AGBEGNINOU LP/EPAC/GBH. Page 6 Les hypertriglycéridémies endogènes sont très fréquentes (près de 10% de la population) mais il s’agit beaucoup plus souvent de formes secondaires que familiales (0,5 à 0,8 % de la population générale). Comme les facteurs d’environnement sont ici très intriqués avec les facteurs génétiques, il est difficile de savoir si les premiers créent un type IV secondaire ou s’ils ne font que révéler un authentique type IV génétique latent. Ainsi le type IV est fréquemment associé à l’obésité, à l’intolérance aux glucoses, à l’hyperuricémie (40 à 50%

des cas). Le signe biologique essentiel est une augmentation des triglycérides et des VLDL, augmentation qui varie en fonction du régime alimentaire (augmentation parfois très importante lors de régime riche en sucre ou sous l’effet de l’alcool). L’hypertriglycéridémie est habituellement modérée (2,30 à 5,5 mmol/l) dans le type IV familiale authentique sous régime iso calorique. La cholestérolémie reste normale lorsque l’hypertriglycéridémie est modérée (inférieur à 3,5 mmol/l) mais peut s’élever par augmentation du cholestérol transporté par les VLDL. Cette augmentation est toujours faible par rapport à celle des triglycérides. Le cholestérol LDL est en règle normal à la différence du type IIb. Par contre le cholestérol HDL est régulièrement diminué, il s’élève lorsque les triglycérides diminuent mais reste habituellement en dessous des valeurs normales [11].

1.4-Structure de vaisseaux sanguins.

Le cœur est un muscle creux composé de 4 cavités : deux oreillettes qui reçoivent le sang et 2 ventricules qui renvoient le sang. Des valvules, sortes de soupapes, empêchent le sang de revenir en arrière et le forcent à suivre le sens de la circulation. Le cœur est séparé en deux parties (oreillette et ventricule gauches - oreillette et ventricule droits) par une cloison;

cela empêche le sang oxygéné de se mélanger avec le sang non oxygéné. Il reçoit du sang désoxygéné par la veine cave supérieur. Ce sang est conduit au poumon par l’artère pulmonaire et est revenu au cœur grâce à la veine pulmonaire. Ce sang devient oxygéné et distribué aux autres organes par l’artère aorte.

 Une artère est un vaisseau sanguin qui transporte du sang riche en oxygène à partir du cœur à travers tout le corps afin d'assurer la nutrition des cellules tissulaires. Les artères coronaires qui irriguent le cœur se ramifient en vaisseaux de plus petit diamètre (les vaisseaux coronaires) ; le diamètre des plus fins est inférieur à celui des hématies.

Réalisé et soutenu par Pascal AGBEGNINOU LP/EPAC/GBH. Page 7 Figure 5: Structure d’une artère [11].

Figure 6: Structure et composition cellulaire d’une artère saine [12].

1.5-Mécanismes de la survenue du risque cardiovasculaire.

Les maladies cardiovasculaires résultent du dépôt de graisses sur les parois des artères [13].

Ces dépôts forment des plaques d’athérome et finissent par gêner la circulation du sang qui alimente tous les organes et en particulier des organes vitaux comme le cerveau ou le cœur.

C’est l’athérosclérose [14]. Elles regroupent les affections liées à l’athérosclérose. Il peut s’agir des maladies coronariennes, des accidents vasculaires cérébraux, des pathologies vasculaires périphériques et de l’insuffisance cardiaque. Les complications de l’athérosclérose représentent la première cause de mortalité et de morbidité dans la plupart des pays [3,15].

Réalisé et soutenu par Pascal AGBEGNINOU LP/EPAC/GBH. Page 8 Athérosclérose

L’OMS en 1954 en donne une définition descriptive : « l’athérosclérose est une association en proportion variable de remaniements de l’intima des artères, consistant en une accumulation locale de lipide, de complexes glucidiques et de produits d’origine sanguine, de tissus fibreux et de dépôts calcaires, le tout accompagné de modification de la média ».

Figure 7 : Plaque athéromateuse occupant la moitié du diamètre de l’artère [12].

Artériosclérose: Terme générique désignant l'épaississement de l'intima artérielle avec amincissement fibreux de la media, alors que l'athérosclérose ne touche que la media. De plus, l'artériosclérose touche aussi les artères de petit calibre et les artérioles [9].

Athérome : Portion lipidique des plaques artérioscléreuses. Il s’agit d’une pathologie chronique qui se développe à bas bruit en réponse à des lésions vasculaires subtiles qu’on attribue habituellement à certaines lipoprotéines. L’évolution des lésions qui conduit de l’artère saine à l’artère athéroscléreuse a été étudiée par de nombreux auteurs [9, 16].

L’artère athéroscléreuse : L’athérosclérose est définie anatomiquement comme une variété de sclérose artérielle caractérisée par l’accumulation de lipides amorphes (athérome) dans la tunique interne du vaisseau. Elle atteint surtout les grosses et les moyennes artères (aorte, artères coronaires et cérébrales, artères des membres inférieurs) dont elle peut provoquer l’oblitération [9].

Réalisé et soutenu par Pascal AGBEGNINOU LP/EPAC/GBH. Page 9 Structure anatomopathologique d’une artère sclérosée

Figure 11: schéma d’une artère sclérosée.

Figure 8: Schéma d’une artère sclérosée [12].

j

Figure 9: Photo d’une artère sclérosée [17].

Figure 10: Coupe schématique d’une artère sclérosée [18]

Réalisé et soutenu par Pascal AGBEGNINOU LP/EPAC/GBH. Page 10

1.6- Facteurs de risque cardiovasculaires.

Le risque cardiovasculaire est la probabilité de survenue d’une maladie ou d’un accident cardiovasculaire (maladies du cœur et des artères). Un certain nombre de facteurs sont à l’origine de ce risque et favorisent le développement des maladies cardiovasculaires [19].

Plus les facteurs de risque sont cumulés, plus la probabilité de développer un jour une maladie cardiovasculaire augmente. On parle de « risque cardiovasculaire global » [20].

Un facteur de risque est défini comme une condition associée à une augmentation de l’incidence de la maladie avec un lien supposé causal, contrairement aux marqueurs de risque qui est une condition associée à la maladie mais sans nécessairement de lien causal.

Ils correspondent à un état physiologique, pathologique ou une habitude de vie corrélée à une incidence accrue d'une maladie cardiovasculaire [21]. Les facteurs de risque cardiovasculaire sont des facteurs de risque de l'athérome. L'athérome consiste en l'atteinte des artères, entraînant leur rétrécissement et pouvant aboutir à leur occlusion. Cette maladie artérielle est responsable:

_ de l'angine de poitrine ou de l'infarctus du myocarde si elle atteint les artères coronaires ; _ de 80 % des accidents vasculaires cérébraux si elle atteint les artères à destinée encéphalique ;

_ d'une artériopathie oblitérante des membres inférieurs en cas d'atteinte des artères des membres inférieurs. Les hémorragies cérébrales sont responsables de 20 % des accidents vasculaires cérébraux. Les autres hémorragies internes ou extériorisées peuvent aussi être mortelles, mais le sont moins fréquemment que les hémorragies cérébrales [22].

Ces facteurs de risque sont de deux types :

• ceux sur lesquels on ne peut pas agir tels que l’âge, le sexe, l’existence de maladies cardiovasculaires dans la famille (facteurs de risque non modifiables) ;

• ceux sur lesquels on peut agir pour les supprimer ou les diminuer : tabagisme, diabète, HTA, excès de cholestérol/lipides, surpoids, consommation d’alcool, la sédentarité (facteurs de risque modifiables) [19, 23].

Réalisé et soutenu par Pascal AGBEGNINOU LP/EPAC/GBH. Page 11

« J’agis sur la santé de mon cœur et de mes artères », Assurance Maladie, 2009

©cnamts 2010

Figure 11 : Les facteurs de risque cardiovasculaire [22]

 Développement avec l’âge et topographie des lésions athéroscléreuses (physiopathologie).

Pour comprendre les nombreux et complexes mécanismes qui provoquent la formation d’un ou plusieurs athéromes (donc l'athérogenèse qui mène à l’athérosclérose), il faut d’abord avoir une idée assez précise de la structure des artères. La paroi artérielle est formée de 3 couches ou tuniques : l’intima (interne) comprenant l’endothélium et l’espace sous endothélial, la média formée essentiellement de cellules musculaires lisses et l’adventice externe. Entre l’intima et la média se trouve une membrane souple : la limitante élastique interne, alors que la limitante élastique externe sépare la média de l’adventice.

Les IDL (intermediate density lipoprotein ou IDL cholestérol ou cholestérol de moyenne densité), les LDL (low density lipoprotein ou LDL cholestérol ou cholestérol basse densité) et les VLDL (very low density lipoprotéines) sont des transporteurs du cholestérol qui, en cas de déséquilibre, peuvent s’accumuler dans l’intima des artères : c’est l’infiltration lipidique.

D’où l’importance de surveiller régulièrement son taux de LDL sanguin. A noter que cette infiltration peut se produire dès les premières années de la vie (stade I). La phase suivante est l’oxydation de ce LDL dans les structures mêmes de l’intima, sous l’action de certaines enzymes. Les LDL oxydés vont activer la formation de molécules d’adhésion à la surface des cellules de l’intima (celles qui sont en contact avec le sang), ce qui va attirer des monocytes,

Réalisé et soutenu par Pascal AGBEGNINOU LP/EPAC/GBH. Page 12 gros globules blancs qui participent à la défense immunitaire, dans l’intima. Au niveau de l’intima, des protéines spécifiques vont jouer le rôle de « molécules d’adhésion » et permettre ainsi cette adhésion des monocytes : VCAM-1 pour vascular cell adhesion molecule et ICAM-1 pour intercellular adhesion molecule. Ces molécules d’adhésion vont s’accrocher à des intégrines présentes à la surface des monocytes. Il s’ensuit passage des monocytes dans l’espace sous endothélial grâce à une protéine MCP-1 (monocyte chemotactic protein) en passant entre les jonctions des cellules endothéliales et c’est dans cet espace qu’ils vont subir leur transformation en macrophages, en présence d’un facteur indispensable : le MCSF (monocyte colony stimulating factor), puis capter des molécules de LDL oxydées. A partir de ce moment, les macrophages vont créer et entretenir sous l'endothélium artériel une réaction inflammatoire qui va précipiter la suite des événements. Ils produisent des cytokines proinflammatoires, dont le TNF-alpha et l’interleukine 1 (Il-1) et certains se transforment en cellules spumeuses (qui ont un aspect mousseux, écumeux) en se chargeant de vésicules lipidiques. Ces cytokines ont également le pouvoir de provoquer la fabrication par la plaque athéromateuse, lorsqu’elle est constituée, de métalloprotéinases qui vont agir sur la matrice extracellulaire en la dégradant. A ce stade, on observe souvent des stries lipidiques (stade II) qui sont des dépôts longitudinaux de couleur jaunâtre et qui ne présentent pas encore de danger. Dans certains cas, on a même observé une régression de ces stries. Le centre de l’athérome se constitue (stade III) progressivement par accumulation de lipides dans et hors des cellules : c’est le cœur lipidique ou centre athéromateux, véritable point de départ de la plaque. Par la suite, ce cœur lipidique va progressivement se couvrir d’une chape fibreuse ou fibromusculaire, constituée de cellules musculaires lisses de la média, de protéines extracellulaires, collagène, élastine et protéoglycanes, de facteur de croissance qui va entretenir cette formation (stades IV et V). Cette chape fibromusculaire va, dans un premier temps, isoler le centre athéromateux de la circulation sanguine, mais aussi contribuer à réduire encore la lumière artérielle. Les plaquettes ou thrombocytes activés vont également venir s’agglutiner à ce niveau, entrainant une thrombose [9, 24,25].

D’après les plus récentes descriptions anatomopathologiques, la plaque d’athérosclérose apparait comme une lente métamorphose de l’intima artérielle. H.C. STARY a proposé en 1994 une séquence des différentes étapes de la genèse de la plaque, en divisant cette évolution en huit stades:

 Un épaississement fibromusculaire de l’intima, présent dès la vie fœtale, se charge durant l’enfance et l’adolescence, de cellules spumeuses (stade I)

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 pour devenir une strie graisseuse (stade II) ;

 chez le jeune adulte, le stade III (pré-athérome) précède

 la plaque simple fibro-lipide (stades IV et V).

 Alors, des accidents de rupture avec thrombose et infiltration hémorragique peuvent survenir (plaque compliquée, stade VI).

 Aux âges avancés de la vie s’observent les plaques lourdement calcifiées (stade VII) ou presque exclusivement scléreuse (stade VIII)

Figure 12: Genèse de la plaque athéroscléreuse, séquence proposée par H.C. STARY [22].

 L’indice athérogène.

Les valeurs des différents paramètres biochimiques ne permettent pas de détecter la présence ou non de risque athérogène chez un sujet avec précision, ce qui implique que l’utilisation des rapports de l’indice d’athérogénicité est indispensable. Plusieurs indices ont été proposés.

Parmi ces indices, le rapport CT/ HDL-c permet d’apprécier au mieux le risque d’athérogène chez un sujet et n’est lié qu’aux maladies coronariennes d’ après Xclairou en 2010 [26]. Le rapport CT/ HDL-c est le plus fréquemment utilisé pour exprimer les influences respectives des fractions de cholestérol qui ont des effets cardio-vasculaires néfastes ou bénéfiques. Un nombre important et varié d’études a démontré la supériorité de du rapport comme un indice de risque de MCV en comparaison au LDL-c ou au cholestérol [27]. Il est un facteur de risque encore plus puissant du fait qu’il combine deux indices fortement associés au risque.

Cependant, la présence du HDL-c n’est probablement pas la seule explication de la supériorité

Réalisé et soutenu par Pascal AGBEGNINOU LP/EPAC/GBH. Page 14 du rapport comparativement aux mesures de lipides simples. Le CT inclut aussi le cholestérol associé à une autre sous-classe de lipoprotéine (VLDL). Celles-ci augmentent également le risque de maladie coronarienne. Le cholestérol associé aux VLDL augmente parallèlement avec les taux de triglycérides. Ainsi, l’inclusion du cholestérol total dans la formule permettrait en partie de tenir compte du cholestérol-VLDL et les triglycérides qui sont des paramètres liés au syndrome métabolique. Ce lien a été proposé par Lemieux et coll., après les analyses des données du « Quebec cardiovasculaire study ». Ils ont démontré une association significative entre le rapport CT/ HDL-c et différents marqueurs du syndrome métabolique.

Les auteurs proposent que ceci puisse contribuer à la supériorité d ce dernier en comparaison au rapport LDL-c/HDL-c comme indice de risque de maladie coronarienne dans cette population. Un rapport supérieur à 4,5 traduit un risque d’athérogène significativement important [28].

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2

PARTIE :

CADRE, MATERIEL ET METHODES D’ETUDE.

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2.1 Cadre.

2.1.1 Cadre institutionnel

Nous avons été formés à l’Ecole Polytechnique d’Abomey-Calavi qui dispose plusieurs départements dont le département de Génie de Biologie Humaine, option Analyses Biomédicales où les études ont été effectuées.

2.1.2 Cadre technique.

Notre étude s’est déroulée à l’Hôpital de zone d’Abomey-Calavi / Sô-Ava.

 Historique et présentation de l’hôpital.

*Historique de l’Hôpital

Selon la pyramide sanitaire du BENIN, chaque zone sanitaire doit être dotée d’un centre de référence. C’est dans ce cadre qu’il a été démarré dans la zone sanitaire d’Abomey-Calavi, au cours de l’année 2000, la construction d’un Hôpital de zone qui couvrira les communes d’Abomey-calavi et de Sô- Ava. Inauguré le 12 mai 2003 par Madame Céline seignon KANDISSOUNON Ministre de la Santé, il n’a été mis en service que le 18 Aout 2003, et est dirigé actuellement par le Dr Daouda YESSOUFOU. Il convient de préciser que l’hôpital de zone d’Abomey-Calavi est une structure périphérique qui dépend directement de la direction départementale de la Santé de l’Atlantique et du Littoral.

*Situation géographique

Implanté dans le département de l’Atlantique et plus précisément dans la commune

d’Abomey-Calavi au quartier Zopah, l’hôpital de zone d’Abomey- Calavi est situé à moins d’un kilomètre du carrefour Arconville en face de la station terrienne de l’ex OPT. Il s’étend sur une superficie de six hectares soixante-dix-sept ares.

*Structure de l’hôpital de zone L’HZ-AS est divisé en deux blocs à savoir:

*Le bloc administratif

Au sein de ce bloc, nous avons plusieurs services notamment: le service des affaires administratives et le secrétariat.

*Le bloc technique

Ce bloc regroupe les services cliniques et para cliniques

! Services cliniques

Nous pouvons citer: la Médecine, la Pédiatrie, la Chirurgie, la Maternité, le Bloc opératoire, l’Ophtamologie, la Stomatologie, la Kinésithérapie, les Urgences, le Service social.

Réalisé et soutenu par Pascal AGBEGNINOU LP/EPAC/GBH. Page 14

! Services para - cliniques

Ils aident les services cliniques dans l’accomplissement de leurs tâches. On note: l’Imagerie médicale, la Pharmacie et le Laboratoire d’analyses médicales où nous avons effectué notre stage. Ce laboratoire comporte plusieurs sections :

2.1.2.1 Section de la parasitologie;

où les examens sont réalisés sur le sang total et sur les selles.

2.1.2.2 Section de la biochimie

dans laquelle les examens sont réalisés sur le plasma ou sur le sérum et visent à doser les différents paramètres du sang.

2.1.2.3 Section de l’Immuno-hématologie

les examens sont réalisés sur le sang total et sur le plasma.

2.1.2.4 Section de la sérologie

dans cette section les examens sont réalisés sur le sérum.

2.1.2.5 Section de la bactériologie

les examens sont réalisés sur le crachat, les selles, les urines, les spermes, le liquide céphalorachidien (LCR), le prélèvement vaginal (PV).

2.1.2.6 Banque de sang,

dans cette section les poches de sang sont stockées dans le réfrigérateur et cédées en cas de besoin.

2.2 Matériel d’étude.

Pour mener à bout notre étude, nous avons utilisés divers matériels d’ordre biologique que technique.

2.2.1 Matériel biologique.

Echantillons de sang veineux prélevés chez les patients dans des tubes sans anticoagulant (tubes secs).

2.2.2 Matériel technique.

Comme matériel technique, nous avons : des aiguilles, des tubes secs, du coton hydrophile, un garrot, une boite de sécurité, de l’alcool à 90°, du sparadrap, une poubelle, chronomètre, eau

Réalisé et soutenu par Pascal AGBEGNINOU LP/EPAC/GBH. Page 15 distillée, des marqueurs, des portoirs, des micropipettes, des cônes, de la compresse, des réactifs dont le coffret est Cypress Diagnostics, spectrophotomètre de model AP3000M.

2.3-Méthodes d’étude.

2.3.1 Type d’étude.

Il s’agit d’une étude transversale et prospective. Elle a été effectuée du 18 Mai au 18 Août 2015 à l'hôpital de zone d’Abomey-Calavi.

2.3.2- Echantillonnage.

Taille de notre échantillon est de 46 patients ayant consulté en médecine générale et présentant des signes de cardiopathie.

2.3.3 Critères d’inclusion.

Tous les patients soupçonnés porteurs d’une cardiopathie.

2.3.4 Critères d’exclusion.

Tout patient diabétique, hypertendu et sous traitement d’une cardiopathie.

2.3.5- Mode opératoire.

 Le prélèvement : Le prélèvement est fait par ponction d’une veine au pli du coude ou d’une veine située au dos de la main. Après avoir posé un garrot et désinfecté l’endroit à piquer avec l’alcool iodé, le sang est recueilli par piqûre dans un tube sec.

 Traitement des prélèvements : Le sang recueilli par piqûre dans un tube sec est centrifugé à 3000 trs /min pendant 5minutes. Le sérum servira à la détermination du Cholestérol Total, HDL cholestérol, des triglycérides et les résultats obtenus ont permis au calcul de l’indice d’athérogénicité (rapport CT/ HDL-c).

 Méthode de dosage des différents paramètres.

 Dosage du cholestérol total.

Réactif: Cypress Diagnostics.

Méthode Enzymatique en point final.

Principe du dosage.

Détermination enzymatique du cholestérol suivant les réactions :

Réalisé et soutenu par Pascal AGBEGNINOU LP/EPAC/GBH. Page 16 Cholestérides + 2H2O cholestérol + Acide gras

Cholestérol + O2 cholestene-4-one-3 + H2O2

2H2O2 + Phénol +4AAP Quinonimine + 2H2O 4AAP= Amino-4-antipyrine

Réactifs:

Réactif 1: Tampon

Pipes pH 6.9 90 mmol/l Phénol 26 mmol/l Réactif 2: Enzymes

Cholestérol estérase: 300U/l Peroxydase: 1250U/l Cholestérol oxydase: 300U/l 4-aminophenonazone: 0.4mmol/l, Standard: 200 mg/dl, Gardés au frais à 2-8°C jusqu’à la date de péremption.

Echantillon: Sérum.

Longueur d’onde: 505 nm.

Trajet optique: 1,0 cm

Zéro de l’appareil: Blanc réactif.

Tableau 1: Mode opératoire manuel du dosage cholestérol total Pipeter dans les tubes à essais propre suivants:

Blanc Standard Dosage

Solution de travail 1000µl 1000µl 1000µl

Eau distillée 10µl

Etalon 10µl

Echantillon 10µl

Réalisé et soutenu par Pascal AGBEGNINOU LP/EPAC/GBH. Page 17 Mélanger et lire la concentration au spectrophotomètre après 5 min d’incubation à 37°C ou pendant 10mn à la température du laboratoire. Le zéro de l’appareil est fait avec le blanc réactif. La coloration est stable au moins 1heure.

 Dosage du cholestérol HDL

Réactif : Cypress Diagnostique ;

Méthode : Précipitation à l’acide phosphotungstique.

Principe du dosage

Les chylomicrons, les lipoprotéines de faible densité (LDL) et les lipoprotéines de très faible densité (VLDL) contenus dans le sérum sont précipites par addition d’acide phosphotungstique en présence d’ions magnésium.

Apres centrifugation, le cholestérol lié aux lipoprotéines de haute densité(HDL) est dosé dans le surnageant. L’HDL en présence du réactif de cholestérol donne un complexe coloré rose dont l’intensité lue au spectrophotomètre est proportionnelle à la concentration en cholestérol- HDL.

Réactifs:

Réactif A, prêt à l’emploi:

Acide phosphotungstique: 14 mmol/l Chlorure de magnésium: 2 mmol/l Réactif B, réactif du cholestérol total:

Cholestérol estérase: 300U/l Peroxydase: 1250U/l Cholestérol oxydase: 300U/l 4-aminophenonazone: 0.4mmol/l Standard 2g/l, Gardés au frais à 2-8°C jusqu’à la date de péremption.

Réalisé et soutenu par Pascal AGBEGNINOU LP/EPAC/GBH. Page 18 Echantillon : Sérum.

Longueur d’onde : 505 nm.

Trajet optique : 1,0 cm Zéro de l’appareil : Blanc réactif.

Tableau 2 : Mode opératoire manuel de la précipitation Pipeter dans un tube à essais, propre:

Réactif A Sérum

Volume 500µl 50µl

Bien mélanger et attendre 10mn à la température du laboratoire puis centrifuger pendant 15mn a 5000 tours/min. Utiliser le surnageant pour le dosage du cholestérol HDL proprement dit.

NB : Le réactif de travail ou de dosage est le même que celui du cholestérol total.

Tableau 3: Mode opératoire manuel du dosage de HDL cholestérol après précipitation.

Pipeter dans les tubes à essais propre suivants:

Blanc Standard Dosage

Réactif B 1000µl 1000µl 1000µl Eau distillée 10µl

Etalon 10µl

Echantillon 10µl

Mélanger et après 5min d’incubation à 37°C au bain marie marie ou à température ambiante pendant 10mn, lire la concentration au spectrophotomètre à 505 nm. Le zéro de l’appareil est fait avec le blanc réactif. La coloration est stable au moins 1heure.

Réalisé et soutenu par Pascal AGBEGNINOU LP/EPAC/GBH. Page 19

 Dosage des triglycérides

Réactif : Cypress Diagnostics.

Méthode : Enzymatique-Colorimétrique.

Principe du dosage.

Les triglycérides sont hydrolysés en glycérol et en acide gras par la lipoprotéine lipase (LPL).

Le glycérol libéré réagit avec la glycérolkinase et la glycérol-3-phosphate oxydase en libérant de l’eau oxygénée (H2O₂) par la réaction de Trinder. D’où formation d’un dérivé coloré dont l’intensité de la coloration lue au spectrophotomètre à 505 nm est proportionnelle à la concentration des triglycérides dans l’échantillon.

Triglycéride +H2O Glycérol + acide gras

Glycérol + ATP Glycérol-3-phosphate + ADP Glycérol-3-phosphate + o2 Dihydroxy-acétone phosphate + H2O2

H2O2 + 4 amino-antipyrine + p-chorophénol Quinonimine + H2O Réactifs:

Réactif 1: Tampon

GOOD Tampon pH 7.5 50 mmol/l p-chlorophenol 2 mmol/l Réactif 2: Enzymes

Lipoprotéine lipase 150000 U/l Glycérol Kinase 500 U/l Glycérol-3-oxydase 2500 U/l Peroxydase 440 U/l 4-aminophénazone 0.1 mmol/l ATP 0.1 mmol/l

Standard: Triglycérides aqueux 200 mg/dl

Réalisé et soutenu par Pascal AGBEGNINOU LP/EPAC/GBH. Page 20 Gardés au frais à 2-8°C jusqu’à la date de péremption.

Echantillon: Sérums.

Longueur d’onde: 505 nm.

Trajet optique: 1,0 cm

Tableau 4 : Mode opératoire manuel du dosage de triglycéride.

Introduire dans les tubes à hémolyse :

Blanc Standard Dosage

Solution de travail 1000µl 1000µl 1000µl Eau distillée 10µl

Etalon 10µl

Echantillon 10µl

Mélanger et après 5min d’incubation à 37°C au bain marie ou à température ambiante pendant 10mn, lire la concentration au spectrophotomètre à 505 nm. Le zéro de l’appareil est fait avec le blanc réactif. La coloration est stable pendant 2 heures.

2.3.6 – Phase de traitement de donnée.

Le traitement de donnée a été réalisé à l’aide du logiciel EpiData version 3.1 et du logiciel Excel 2010.

Réalisé et soutenu par Pascal AGBEGNINOU LP/EPAC/GBH.

3 ^EME PARTIE :

RESULTATS ET DISCUSSION

Réalisé et soutenu par Pascal AGBEGNINOU LP/EPAC/GBH. Page 21

3.1 Résultats.

3.1.1 Répartition de la population d’étude en fonction du sexe.

Figure 13 : Population d’étude en fonction du sexe

52% de femmes et 48% d’hommes ont été identifié des 46 patients de l’étude.

3.1.2 Répartition de la population d’étude selon l’âge.

Figure 14 : Répartition de la population d’étude selon l’âge.

La majeur partir de la population ayant participé à l’étude a un âge compris entre 40 et 60 ans soit un pourcentage de 52,17%. Ce pourcentage représente également les patients en margeur parti présentant une cardiopathie ischémique.

Réalisé et soutenu par Pascal AGBEGNINOU LP/EPAC/GBH. Page 22

0 2 4 6 8 10 12 14 16 18

1 3 5 7 9 11 13 15 17 19 21 23 25 27 29 31 33 35 37 39 41 43 45 Triglycérides (en g/l) Indice d’athérogénicité (IA)

3.1.3 Répartition de la population suivant la norme de triglycéridémie et la proportion de risque d’athérogénicité.

Figure 15 : Répartition de la population selon la norme de triglycéridémie et la proportion de risque d’athérogénicité.

8,7% de la population totale présentent une hypertriglycéridémie avec un risque d’athérogénicité de 100%. Tandis que 86,95% de la population présentent une normo- triglycéridémie avec un risque d’athérogénicité de 27,50%. Environ 4,35% de cette population présentent un faible taux de triglycéride dans le sang.

3.1.4 Relation entre triglycérides et risque d’athérogénicité

Figure 16: Relation entre triglycéridémie et le risque d’athérogénicité.

Patients

Réalisé et soutenu par Pascal AGBEGNINOU LP/EPAC/GBH. Page 23 De cette figure, l’indice d’athérogénicité calculé varie en fonction du taux des triglycérides. Il en ressort que plus les triglycéridémies sont élevées plus les indices athérogènes sont supérieurs à 4,50.

Tableau 5: Relation entre hypertriglycéridémie et risque athérogène.

VALEURS DES

HYPERTRIGLYCERIDEMIES

VALEURS DU RISQUE D’ATHEROGENE

1,61 4,72

1,84 5,00

2,08 7,57

2,90 6,33

Tous ceux qui ont une hypertriglycéridémie ont l’indice d’athérogécinité supérieur à 4,50.

Réalisé et soutenu par Pascal AGBEGNINOU LP/EPAC/GBH. Page 24

3.2

DISCUSSION.

L’objectif de cette étude est de montrer l’implication des triglycérides dans la survenue du risque cardiovasculaire par la formation des plaques d’athéromes. Cela paraissait important parce que le dosage des triglycérides, en plus d’autres paramètres lipidiques sont demandés en clinique pour le diagnostic et le traitement des maladies cardiovasculaires.

Le dosage du cholestérol total, du HDL cholestérol et des triglycérides des différents patients ont été effectués.

Dans notre étude, nous avons 52% et 48% respectivement de femmes et d’hommes. Cette prédominance des femmes trouvée au cours de notre étude est due au fait que le type de patients fréquentant le cadre d’étude (hôpital de zone d’Abomey-Calavi/Sô-Ava) est majoritairement féminin.

Dans notre étude, l’âge moyen des patients est de 48ans environ chez l’homme et de 61ans chez la femme reçus au laboratoire de l’hôpital zone d’Abomey-Calavi/Sô-Ava admis en médecine général pour une consultation. Des études similaires ont trouvé que dans de nombreux pays industrialisés, la mortalité cardiovasculaire a atteint son apogée dans les années 60 et au début des années 70 pour diminuer ensuite, de plus de 50% dans certains pays [29]. Elles demeurent toutefois, la cause principale de mortalité chez les hommes de plus de 45 ans et chez les femmes de plus de 65 ans rapporté par Sans S et al. [29]. Ces résultats observés sont conformes à la littérature qui stipule que la maladie cardiovasculaire est multifactorielle et plusieurs facteurs de risque dont l’âge est irrémédiable rapporté par Plaza et al. [30].

L’indice d’athérogénicité dont le rapport CT/ HDL-c permettant de mieux apprécier le risque d’athérogénicité a été établi par Lemieux et coll. [28]. Une valeur supérieur à 4,50 de cet indice est un signe révélateur d’un risque élevé de survenu des plaques d’athéromes et de l’athérosclérose.

La comparaison des individus ayant une hypertriglycéridémie à leur rapport CT/ HDL-c montre que ces patients ont un risque calculé très supérieur à 4,5. Ces résultats obtenus s’expliquent par le fait que nos patients présentent une hypercholestérolémie.

Dans notre population d’étude, 86,95% ont une triglycéridémie normale, avec un risque d’athérogénicité de 27,5 % et 4,35% ont une hypotriglycéridémie avec de traces de risque d’athérogénicité. Baltimore en 1978 affirmait que lorsque les taux de triglycérides sont normaux et même inférieur à la limite, une diminution significative des risques est observée.

Réalisé et soutenu par Pascal AGBEGNINOU LP/EPAC/GBH. Page 25 Nos résultats ne nous permettent pas de confirmer cette affirmation car cela peut être dû aux autres facteurs de risques (modifiables et non modifiables) favorisant cette affection et qui ne sont pas pris en compte dans cette étude.

Les patients ayant une hypertriglycéridémie (8,7%), le risque d’athérogénicité est de 100%

(figure 15 et le tableau 5). Ces résultats nous confirment qu’une hypertriglycéridémie est aussi importante dans la survenue du risque d’athérogénicité. Ces résultats sont en accord avec ceux rapportés par les auteurs Stampfer et al. [31] qui ont montré que le taux de triglycérides élevés permettait l’identification des individus à haut risque cardiovasculaire; et de même Alaupovic et al. [32] ont mis en évidence le rôle distinct des triglycérides dans le processus athérogène.

Plaza et al. [30] ont aussi montré que les triglycérides sont impliqués dans la survenue des cardiopathies. Il a été également montré que des taux élevés de triglycérides sont étroitement liés à des risques d’infarctus du myocarde rapportés par Gaziano et al. [33]. Miller et al. [34]

ont aussi rapporté qu’une hypertriglycéridémie entraine un risque supplémentaire de manifestations coronariennes.

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CONCLUSION ET SUGGESTIONS