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UNIVERSITE MOHAMMED V DE RABAT
FACULTE DE MEDECINE ET DE PHARMACIE - RABAT
DOYENS HONORAIRES :
1962 – 1969 : Professeur Abdelmalek FARAJ 1969 – 1974 : Professeur Abdellatif BERBICH
1974 – 1981 : Professeur Bachir LAZRAK
1981 – 1989 : Professeur Taieb CHKILI
1989 – 1997 : Professeur Mohamed Tahar ALAOUI 1997 – 2003 : Professeur Abdelmajid BELMAHI
2003 – 2013 : Professeur Najia HAJJAJ - HASSOUNI
ADMINISTRATION :
Doyen : Professeur Mohamed ADNAOUI
Vice Doyen chargé des Affaires Académiques et estudiantines
Professeur Mohammed AHALLAT
Vice Doyen chargé de la Recherche et de la Coopération
Professeur Taoufiq DAKKA
Vice Doyen chargé des Affaires Spécifiques à la Pharmacie
Professeur Jamal TAOUFIK
Secrétaire Général : Mr. Mohamed KARRA
1- ENSEIGNANTS-CHERCHEURS MEDECINS
ET
PHARMACIENS
PROFESSEURS :
Décembre 1984
Pr. MAAOUNI Abdelaziz Médecine Interne – Clinique Royale
Pr. MAAZOUZI Ahmed Wajdi Anesthésie -Réanimation
Pr. SETTAF Abdellatif pathologie Chirurgicale
Novembre et Décembre 1985
Pr. BENSAID Younes Pathologie Chirurgicale
Janvier, Février et Décembre 1987
Pr. CHAHED OUAZZANI Houria Gastro-Entérologie
Pr. LACHKAR Hassan Médecine Interne
Pr. YAHYAOUI Mohamed Neurologie
Décembre 1988
Pr. BENHAMAMOUCH Mohamed Najib Chirurgie Pédiatrique
Pr. DAFIRI Rachida Radiologie
Décembre 1989
Pr. CHAD Bouziane Pathologie Chirurgicale Pr. OUAZZANI Taïbi Mohamed Réda Neurologie
Janvier et Novembre 1990
Pr. CHKOFF Rachid Pathologie Chirurgicale
Pr. HACHIM Mohammed* Médecine-Interne
Pr. KHARBACH Aîcha Gynécologie -Obstétrique
Pr. MANSOURI Fatima Anatomie-Pathologique
Pr. TAZI Saoud Anas Anesthésie Réanimation
Février Avril Juillet et Décembre 1991
Pr. AL HAMANY Zaîtounia Anatomie-Pathologique
Pr. AZZOUZI Abderrahim Anesthésie Réanimation –Doyen de la FMPO
Pr. BAYAHIA Rabéa Néphrologie
Pr. BELKOUCHI Abdelkader Chirurgie Générale
Pr. BENCHEKROUN Belabbes Abdellatif Chirurgie Générale
Pr. BENSOUDA Yahia Pharmacie galénique
Pr. BERRAHO Amina Ophtalmologie
Pr. BEZZAD Rachid Gynécologie Obstétrique
Pr. CHABRAOUI Layachi Biochimie et Chimie
Pr. CHERRAH Yahia Pharmacologie
Pr. CHOKAIRI Omar Histologie Embryologie
Pr. KHATTAB Mohamed Pédiatrie
Pr. SOULAYMANI Rachida Pharmacologie – Dir. du Centre National PV
Pr. TAOUFIK Jamal Chimie thérapeutique V.D à la pharmacie+Dir du
CEDOC
Décembre 1992
Pr. AHALLAT Mohamed Chirurgie Générale V.D Aff. Acad. et Estud
Pr. BENSOUDA Adil Anesthésie Réanimation
Pr. BOUJIDA Mohamed Najib Radiologie
Pr. CHAHED OUAZZANI Laaziza Gastro-Entérologie
Pr. CHRAIBI Chafiq Gynécologie Obstétrique
Pr. DEHAYNI Mohamed* Gynécologie Obstétrique
Pr. EL OUAHABI Abdessamad Neurochirurgie
Pr. FELLAT Rokaya Cardiologie
Pr. GHAFIR Driss* Médecine Interne
Pr. JIDDANE Mohamed Anatomie
Pr. TAGHY Ahmed Chirurgie Générale
Pr. ZOUHDI Mimoun Microbiologie
Mars 1994
Pr. BENJAAFAR Noureddine Radiothérapie
Pr. BEN RAIS Nozha Biophysique
Pr. CAOUI Malika Biophysique
Pr. CHRAIBI Abdelmjid Endocrinologie et Maladies Métaboliques Doyen de la FMPA
Pr. EL AMRANI Sabah Gynécologie Obstétrique
Pr. EL BARDOUNI Ahmed Traumato-Orthopédie
Pr. EL HASSANI My Rachid Radiologie
Pr. ESSAKALI Malika Immunologie
Pr. ETTAYEBI Fouad Chirurgie Pédiatrique
Pr. HADRI Larbi* Médecine Interne
Pr. HASSAM Badredine Dermatologie
Pr. IFRINE Lahssan Chirurgie Générale
Pr. JELTHI Ahmed Anatomie Pathologique
Pr. MAHFOUD Mustapha Traumatologie – Orthopédie
Pr. RHRAB Brahim Gynécologie –Obstétrique
Pr. SENOUCI Karima Dermatologie
Mars 1994
Pr. ABBAR Mohamed* Urologie
Pr. ABDELHAK M‟barek Chirurgie – Pédiatrique
Pr. BELAIDI Halima Neurologie
Pr. BENTAHILA Abdelali Pédiatrie
Pr. BENYAHIA Mohammed Ali Gynécologie – Obstétrique
Pr. BERRADA Mohamed Saleh Traumatologie – Orthopédie
Pr. CHAMI Ilham Radiologie
Pr. CHERKAOUI Lalla Ouafae Ophtalmologie
Pr. JALIL Abdelouahed Chirurgie Générale
Pr. LAKHDAR Amina Gynécologie Obstétrique
Pr. MOUANE Nezha Pédiatrie
Mars 1995
Pr. ABOUQUAL Redouane Réanimation Médicale
Pr. AMRAOUI Mohamed Chirurgie Générale
Pr. BAIDADA Abdelaziz Gynécologie Obstétrique
Pr. BARGACH Samir Gynécologie Obstétrique
Pr. CHAARI Jilali* Médecine Interne
Pr. DIMOU M‟barek* Anesthésie Réanimation
Pr. DRISSI KAMILI Med Nordine* Anesthésie Réanimation
Pr. EL MESNAOUI Abbes Chirurgie Générale
Pr. ESSAKALI HOUSSYNI Leila Oto-Rhino-Laryngologie
Pr. HDA Abdelhamid* Cardiologie - Directeur HMI Med V
Pr. IBEN ATTYA ANDALOUSSI Ahmed Urologie
Pr. OUAZZANI CHAHDI Bahia Ophtalmologie
Pr. SEFIANI Abdelaziz Génétique
Pr. ZEGGWAGH Amine Ali Réanimation Médicale
Décembre 1996
Pr. AMIL Touriya* Radiologie
Pr. BELKACEM Rachid Chirurgie Pédiatrie
Pr. BOULANOUAR Abdelkrim Ophtalmologie
Pr. EL ALAMI EL FARICHA EL Hassan Chirurgie Générale
Pr. GAOUZI Ahmed Pédiatrie
Pr. MAHFOUDI M‟barek* Radiologie
Pr. OUADGHIRI Mohamed Traumatologie-Orthopédie
Pr. OUZEDDOUN Naima Néphrologie
Pr. ZBIR EL Mehdi* Cardiologie
Novembre 1997
Pr. ALAMI Mohamed Hassan Gynécologie-Obstétrique
Pr. BEN SLIMANE Lounis Urologie
Pr. ERREIMI Naima Pédiatrie
Pr. FELLAT Nadia Cardiologie
Pr. HAIMEUR Charki* Anesthésie Réanimation
Pr. KADDOURI Noureddine Chirurgie Pédiatrique
Pr. KOUTANI Abdellatif Urologie
Pr. LAHLOU Mohamed Khalid Chirurgie Générale
Pr. MAHRAOUI CHAFIQ Pédiatrie
Pr. TAOUFIQ Jallal Psychiatrie
Pr. YOUSFI MALKI Mounia Gynécologie Obstétrique
Novembre 1998
Pr. AFIFI RAJAA Gastro-Entérologie
Pr. BENOMAR ALI Neurologie – Doyen de la FMP Abulcassis
Pr. BOUGTAB Abdesslam Chirurgie Générale
Pr. ER RIHANI Hassan Oncologie Médicale
Pr. BENKIRANE Majid* Hématologie
Pr. KHATOURI ALI* Cardiologie
Janvier 2000
Pr. ABID Ahmed* Pneumophtisiologie
Pr. AIT OUMAR Hassan Pédiatrie
Pr. BENJELLOUN Dakhama Badr.Sououd Pédiatrie
Pr. BOURKADI Jamal-Eddine Pneumo-phtisiologie
Pr. CHARIF CHEFCHAOUNI Al Montacer Chirurgie Générale
Pr. ECHARRAB El Mahjoub Chirurgie Générale
Pr. EL FTOUH Mustapha Pneumo-phtisiologie
Pr. EL MOSTARCHID Brahim* Neurochirurgie
Pr. ISMAILI Hassane* Traumatologie Orthopédie- Dir. Hop. Av. Marr. Pr. MAHMOUDI Abdelkrim* Anesthésie-Réanimation Inspecteur du SSM
Pr. TACHINANTE Rajae Anesthésie-Réanimation
Pr. TAZI MEZALEK Zoubida Médecine Interne
Novembre 2000
Pr. AIDI Saadia Neurologie
Pr. AJANA Fatima Zohra Gastro-Entérologie
Pr. BENAMR Said Chirurgie Générale
Pr. CHERTI Mohammed Cardiologie
Pr. ECH-CHERIF EL KETTANI Selma Anesthésie-Réanimation
Pr. EL HASSANI Amine Pédiatrie Directeur Hop. Chekikh Zaied
Pr. EL KHADER Khalid Urologie
Pr. EL MAGHRAOUI Abdellah* Rhumatologie
Pr. GHARBI Mohamed El Hassan Endocrinologie et Maladies Métaboliques
Pr. MAHASSINI Najat Anatomie Pathologique
Pr. MDAGHRI ALAOUI Asmae Pédiatrie
Pr. ROUIMI Abdelhadi* Neurologie
Décembre 2000
Décembre 2001
Pr. BALKHI Hicham* Anesthésie-Réanimation
Pr. BENABDELJLIL Maria Neurologie
Pr. BENAMAR Loubna Néphrologie
Pr. BENAMOR Jouda Pneumo-phtisiologie
Pr. BENELBARHDADI Imane Gastro-Entérologie
Pr. BENNANI Rajae Cardiologie
Pr. BENOUACHANE Thami Pédiatrie
Pr. BEZZA Ahmed* Rhumatologie
Pr. BOUCHIKHI IDRISSI Med Larbi Anatomie
Pr. BOUMDIN El Hassane* Radiologie
Pr. CHAT Latifa Radiologie
Pr. DAALI Mustapha* Chirurgie Générale
Pr. DRISSI Sidi Mourad* Radiologie
Pr. EL HIJRI Ahmed Anesthésie-Réanimation
Pr. EL MAAQILI Moulay Rachid Neuro-Chirurgie
Pr. EL MADHI Tarik Chirurgie-Pédiatrique
Pr. EL OUNANI Mohamed Chirurgie Générale
Pr. ETTAIR Said Pédiatrie Directeur. Hop.d’Enfants
Pr. GAZZAZ Miloudi* Neuro-Chirurgie
Pr. HRORA Abdelmalek Chirurgie Générale
Pr. KABBAJ Saad Anesthésie-Réanimation
Pr. KABIRI EL Hassane* Chirurgie Thoracique
Pr. LAMRANI Moulay Omar Traumatologie Orthopédie
Pr. LEKEHAL Brahim Chirurgie Vasculaire Périphérique
Pr. MAHASSIN Fattouma* Médecine Interne
Pr. MEDARHRI Jalil Chirurgie Générale
Pr. MIKDAME Mohammed* Hématologie Clinique
Pr. MOHSINE Raouf Chirurgie Générale
Pr. NOUINI Yassine Urologie Directeur Hôpital Ibn Sina
Pr. SABBAH Farid Chirurgie Générale
Pr. SEFIANI Yasser Chirurgie Vasculaire Périphérique
Pr. TAOUFIQ BENCHEKROUN Soumia Pédiatrie Décembre 2002
Pr. AL BOUZIDI Abderrahmane* Anatomie Pathologique
Pr. AMEUR Ahmed * Urologie
Pr. AMRI Rachida Cardiologie
Pr. AOURARH Aziz* Gastro-Entérologie
Pr. BAMOU Youssef * Biochimie-Chimie
Pr. BELMEJDOUB Ghizlene* Endocrinologie et Maladies Métaboliques
Pr. BENZEKRI Laila Dermatologie
Pr. BENZZOUBEIR Nadia Gastro-Entérologie
Pr. BERNOUSSI Zakiya Anatomie Pathologique
Pr. BICHRA Mohamed Zakariya* Psychiatrie
Pr. CHOHO Abdelkrim * Chirurgie Générale
Pr. CHKIRATE Bouchra Pédiatrie
Pr. EL ALAMI EL FELLOUS Sidi Zouhair Chirurgie Pédiatrique
Pr. EL HAOURI Mohamed * Dermatologie
Pr. HAJJI Zakia Ophtalmologie
Pr. IKEN Ali Urologie
Pr. JAAFAR Abdeloihab* Traumatologie Orthopédie
Pr. KRIOUILE Yamina Pédiatrie
Pr. LAGHMARI Mina Ophtalmologie
Pr. MABROUK Hfid* Traumatologie Orthopédie
Pr. MOUSSAOUI RAHALI Driss* Gynécologie Obstétrique
Pr. OUJILAL Abdelilah Oto-Rhino-Laryngologie
Pr. RACHID Khalid * Traumatologie Orthopédie
Pr. RAISS Mohamed Chirurgie Générale
Pr. RGUIBI IDRISSI Sidi Mustapha* Pneumophtisiologie
Pr. RHOU Hakima Néphrologie
Pr. SIAH Samir * Anesthésie Réanimation
Pr. THIMOU Amal Pédiatrie
Pr. ZENTAR Aziz* Chirurgie Générale
Janvier 2004
Pr. ABDELLAH El Hassan Ophtalmologie
Pr. AMRANI Mariam Anatomie Pathologique
Pr. BENBOUZID Mohammed Anas Oto-Rhino-Laryngologie
Pr. BENKIRANE Ahmed* Gastro-Entérologie
Pr. BOUGHALEM Mohamed* Anesthésie Réanimation
Pr. BOULAADAS Malik Stomatologie et Chirurgie Maxillo-faciale
Pr. BOURAZZA Ahmed* Neurologie
Pr. CHAGAR Belkacem* Traumatologie Orthopédie
Pr. CHERRADI Nadia Anatomie Pathologique
Pr. EL FENNI Jamal* Radiologie
Pr. EL HANCHI ZAKI Gynécologie Obstétrique
Pr. EL KHORASSANI Mohamed Pédiatrie
Pr. EL YOUNASSI Badreddine* Cardiologie
Pr. HACHI Hafid Chirurgie Générale
Pr. JABOUIRIK Fatima Pédiatrie
Pr. KHARMAZ Mohamed Traumatologie Orthopédie
Pr. MOUGHIL Said Chirurgie Cardio-Vasculaire
Pr. OUBAAZ Abdelbarre* Ophtalmologie
Pr. TARIB Abdelilah* Pharmacie Clinique
Pr. TIJAMI Fouad Chirurgie Générale
Pr. ZARZUR Jamila Cardiologie
Janvier 2005
Pr. ABBASSI Abdellah Chirurgie Réparatrice et Plastique
Pr. AL KANDRY Sif Eddine* Chirurgie Générale
Pr. ALLALI Fadoua Rhumatologie
Pr. AMAZOUZI Abdellah Ophtalmologie
Pr. AZIZ Noureddine* Radiologie
Pr. BAHIRI Rachid Rhumatologie
Pr. BARKAT Amina Pédiatrie
Pr. BENYASS Aatif Cardiologie
Pr. BERNOUSSI Abdelghani Ophtalmologie
Pr. DOUDOUH Abderrahim* Biophysique
Pr. EL HAMZAOUI Sakina* Microbiologie
Pr. HESSISSEN Leila Pédiatrie
Pr. JIDAL Mohamed* Radiologie
Pr. LAAROUSSI Mohamed Chirurgie Cardio-vasculaire
Pr. LYAGOUBI Mohammed Parasitologie
Pr. NIAMANE Radouane* Rhumatologie
Pr. RAGALA Abdelhak Gynécologie Obstétrique
Pr. SBIHI Souad Histo-Embryologie Cytogénétique
Pr. ZERAIDI Najia Gynécologie Obstétrique
Décembre 2005
Pr. CHANI Mohamed Anesthésie Réanimation
Avril 2006
Pr. ACHEMLAL Lahsen* Rhumatologie
Pr. AKJOUJ Said* Radiologie
Pr. BELMEKKI Abdelkader* Hématologie
Pr. BENCHEIKH Razika O.R.L
Pr. BIYI Abdelhamid* Biophysique
Pr. BOUHAFS Mohamed El Amine Chirurgie - Pédiatrique Pr. BOULAHYA Abdellatif* Chirurgie Cardio – Vasculaire
Pr. CHENGUETI ANSARI Anas Gynécologie Obstétrique
Pr. DOGHMI Nawal Cardiologie
Pr. FELLAT Ibtissam Cardiologie
Pr. FAROUDY Mamoun Anesthésie Réanimation
Pr. HARMOUCHE Hicham Médecine Interne
Pr. HANAFI Sidi Mohamed* Anesthésie Réanimation
Pr. IDRISS LAHLOU Amine* Microbiologie
Pr. JROUNDI Laila Radiologie
Pr. KARMOUNI Tariq Urologie
Pr. KILI Amina Pédiatrie
Pr. KISRA Hassan Psychiatrie
Pr. KISRA Mounir Chirurgie – Pédiatrique
Pr. LAATIRIS Abdelkader* Pharmacie Galénique
Pr. LMIMOUNI Badreddine* Parasitologie
Pr. MANSOURI Hamid* Radiothérapie
Pr. OUANASS Abderrazzak Psychiatrie
Pr. SAFI Soumaya* Endocrinologie
Pr. SEKKAT Fatima Zahra Psychiatrie
Pr. SOUALHI Mouna Pneumo – Phtisiologie
Pr. TELLAL Saida* Biochimie
Pr. ZAHRAOUI Rachida Pneumo – Phtisiologie
Octobre 2007
Pr. ABIDI Khalid Réanimation médicale
Pr. ACHACHI Leila Pneumo phtisiologie
Pr. ACHOUR Abdessamad* Chirurgie générale
Pr. AIT HOUSSA Mahdi* Chirurgie cardio vasculaire
Pr. AMHAJJI Larbi* Traumatologie orthopédie
Pr. AOUFI Sarra Parasitologie
Pr. BAITE Abdelouahed* Anesthésie réanimation Directeur ERSM
Pr. BENZIANE Hamid* Pharmacie clinique
Pr. BOUTIMZINE Nourdine Ophtalmologie
Pr. CHARKAOUI Naoual* Pharmacie galénique
Pr. EHIRCHIOU Abdelkader* Chirurgie générale
Pr. ELABSI Mohamed Chirurgie générale
Pr. EL MOUSSAOUI Rachid Anesthésie réanimation
Pr. EL OMARI Fatima Psychiatrie
Pr. GHARIB Noureddine Chirurgie plastique et réparatrice
Pr. HADADI Khalid* Radiothérapie
Pr. ICHOU Mohamed* Oncologie médicale
Pr. ISMAILI Nadia Dermatologie
Pr. KEBDANI Tayeb Radiothérapie
Pr. LALAOUI SALIM Jaafar* Anesthésie réanimation
Pr. LOUZI Lhoussain* Microbiologie
Pr. MADANI Naoufel Réanimation médicale
Pr. MAHI Mohamed* Radiologie
Pr. MARC Karima Pneumo phtisiologie
Pr. MASRAR Azlarab Hématologie biologique
Pr. MRABET Mustapha* Médecine préventive santé publique et hygiène
Pr. MRANI Saad* Virologie
Pr. OUZZIF Ez zohra* Biochimie-chimie
Pr. RABHI Monsef* Médecine interne
Pr. RADOUANE Bouchaib* Radiologie
Pr. SEFFAR Myriame Microbiologie
Pr. SEKHSOKH Yessine* Microbiologie
Pr. SIFAT Hassan* Radiothérapie
Pr. TABERKANET Mustafa* Chirurgie vasculaire périphérique
Pr. TACHFOUTI Samira Ophtalmologie
Pr. TAJDINE Mohammed Tariq* Chirurgie générale
Pr. TANANE Mansour* Traumatologie orthopédie
Pr. TLIGUI Houssain Parasitologie
Pr. TOUATI Zakia Cardiologie
Décembre 2007
Pr. DOUHAL ABDERRAHMAN Ophtalmologie
Décembre 2008
Pr ZOUBIR Mohamed* Anesthésie Réanimation
Pr TAHIRI My El Hassan* Chirurgie Générale
Mars 2009
Pr. ABOUZAHIR Ali* Médecine interne
Pr. AGDR Aomar* Pédiatre
Pr. AIT ALI Abdelmounaim* Chirurgie Générale
Pr. AIT BENHADDOU El hachmia Neurologie
Pr. AKHADDAR Ali* Neuro-chirurgie
Pr. AMINE Bouchra Rhumatologie
Pr. ARKHA Yassir Neuro-chirurgie
Pr. BELYAMANI Lahcen* Anesthésie Réanimation
Pr. BJIJOU Younes Anatomie
Pr. BOUHSAIN Sanae* Biochimie-chimie
Pr. BOUI Mohammed* Dermatologie
Pr. BOUNAIM Ahmed* Chirurgie Générale
Pr. BOUSSOUGA Mostapha* Traumatologie orthopédique
Pr. CHAKOUR Mohammed * Hématologie biologique
Pr. CHTATA Hassan Toufik* Chirurgie vasculaire périphérique
Pr. DOGHMI Kamal* Hématologie clinique
Pr. EL MALKI Hadj Omar Chirurgie Générale
Pr. EL OUENNASS Mostapha* Microbiologie
Pr. ENNIBI Khalid* Médecine interne
Pr. FATHI Khalid Gynécologie obstétrique
Pr. HASSIKOU Hasna * Rhumatologie
Pr. KABBAJ Nawal Gastro-entérologie
Pr. KABIRI Meryem Pédiatrie
Pr. KARBOUBI Lamya Pédiatrie
Pr. L‟KASSIMI Hachemi* Microbiologie Directeur Hôpital My Ismail
Pr. LAMSAOURI Jamal* Chimie Thérapeutique
Pr. MARMADE Lahcen Chirurgie Cardio-vasculaire
Pr. MESKINI Toufik Pédiatrie
Pr. MESSAOUDI Nezha * Hématologie biologique
Pr. MSSROURI Rahal Chirurgie Générale
Pr. NASSAR Ittimade Radiologie
Pr. OUKERRAJ Latifa Cardiologie
Pr. RHORFI Ismail Abderrahmani * Pneumo-phtisiologie
PROFESSEURS AGREGES :
Octobre 2010
Pr. ALILOU Mustapha Anesthésie réanimation
Pr. AMEZIANE Taoufiq* Médecine interne
Pr. BELAGUID Abdelaziz Physiologie
Pr. BOUAITY Brahim* ORL
Pr. CHADLI Mariama* Microbiologie
Pr. CHEMSI Mohamed* Médecine aéronautique
Pr. DAMI Abdellah* Biochimie chimie
Pr. DARBI Abdellatif* Radiologie
Pr. DENDANE Mohammed Anouar Chirurgie pédiatrique
Pr. EL HAFIDI Naima Pédiatrie
Pr. EL KHARRAS Abdennasser* Radiologie
Pr. EL MAZOUZ Samir Chirurgie plastique et réparatrice
Pr. EL SAYEGH Hachem Urologie
Pr. ERRABIH Ikram Gastro entérologie
Pr. LAMALMI Najat Anatomie pathologique
Pr. MOSADIK Ahlam Anesthésie Réanimation
Pr. MOUJAHID Mountassir* Chirurgie générale
Pr. NAZIH Mouna* Hématologie biologique
Mai 2012
Pr. AMRANI Abdelouahed Chirurgie Pédiatrique
Pr. ABOUELALAA Khalil* Anesthésie Réanimation
Pr. BELAIZI Mohamed* Psychiatrie
Pr. BENCHEBBA Driss* Traumatologie Orthopédique
Pr. DRISSI Mohamed* Anesthésie Réanimation
Pr. EL ALAOUI MHAMDI Mouna Chirurgie Générale
Pr. EL KHATTABI Abdessadek* Médecine Interne
Pr. EL OUAZZANI Hanane* Pneumophtisiologie
Pr. ER-RAJI Mounir Chirurgie Pédiatrique
Pr. JAHID Ahmed Anatomie pathologique
Pr. MEHSSANI Jamal* Psychiatrie
Pr. RAISSOUNI Maha* Cardiologie
Février 2013
Pr. AHID Samir Pharmacologie – Chimie
Pr. AIT EL CADI Mina Toxicologie
Pr. AMRANI HANCHI Laila Gastro-Entérologie
Pr. AMOUR Mourad Anesthésie Réanimation
Pr. AWAB Almahdi Anesthésie Réanimation
Pr. BELAYACHI Jihane Réanimation Médicale
Pr. BELKHADIR Zakaria Houssain Anesthésie Réanimation
Pr. BENCHEKROUN Laila Biochimie-Chimie
Pr. BENKIRANE Souad Hématologie biologique
Pr. BENNANA Ahmed* Informatique Pharmaceutique
0.
Pr. BENSGHIR Mustapha* Anesthésie Réanimation
Pr. BENYAHIA Mohammed* Néphrologie
Pr. BOUATIA Mustapha Chimie Analytique
Pr. BOUABID Ahmed Salim* Traumatologie Orthopédie
Pr. BOUTARBOUCH Mahjouba Anatomie
Pr. CHAIB Ali* Cardiologie
Pr. DENDANE Tarek Réanimation Médicale
Pr. DINI Nouzha* Pédiatrie
Pr. ECH-CHERIF EL KETTANI Mohamed Ali Anesthésie Réanimation Pr. ECH-CHERIF EL KETTANI Najwa Radiologie
Pr. ELFATEMI Nizare Neuro-Chirurgie
Pr. EL GUERROUJ Hasnae Médecine Nucléaire
Pr. EL HARTI Jaouad Chimie Thérapeutique
Pr. EL JOUDI Rachid* Toxicologie
Pr. EL KABABRI Maria Pédiatrie
Pr. EL KHANNOUSSI Basma Anatomie Pathologie
Pr. EL KHLOUFI Samir Anatomie
Pr. EL KORAICHI Alae Anesthésie Réanimation
Pr. EN-NOUALI Hassane* Radiologie
Pr. ERRGUIG Laila Physiologie
Pr. FIKRI Meryim Radiologie
Pr. IMANE Zineb Pédiatrie
Pr. IRAQI Hind Endocrinologie et maladies métaboliques
Pr. KABBAJ Hakima Microbiologie
Pr. KADIRI Mohamed* Psychiatrie
Pr. LATIB Rachida Radiologie
Pr. MAAMAR Mouna Fatima Zahra Médecine Interne
Pr. MEDDAH Bouchra Pharmacologie
Pr. MELHAOUI Adyl Neuro-chirurgie
Pr. MRABTI Hind Oncologie Médicale
Pr. NEJJARI Rachid Pharmacognosie
Pr. OUBEJJA Houda Chirurgie Pédiatrique
Pr. OUKABLI Mohamed* Anatomie Pathologique
Pr. RAHALI Younes Pharmacie Galénique
Pr. RATBI Ilham Génétique
Pr. RAHMANI Mounia Neurologie
Pr. REDA Karim* Ophtalmologie
Pr. REGRAGUI Wafa Neurologie
Pr. RKAIN Hanan Physiologie
Pr. ROSTOM Samira Rhumatologie
Pr. ROUAS Lamiaa Anatomie Pathologique
Pr. ROUIBAA Fedoua* Gastro-Entérologie
Pr. SALIHOUN Mouna Gastro-Entérologie
Pr. SAYAH Rochde Chirurgie Cardio-Vasculaire
Pr. SEDDIK Hassan* Gastro-Entérologie
Pr. ZERHOUNI Hicham Chirurgie Pédiatrique
Pr. ZINE Ali* Traumatologie Orthopédie
Avril 2013
Pr. EL KHATIB Mohamed Karim* Stomatologie et Chirurgie Maxillo-faciale
Pr. GHOUNDALE Omar* Urologie
Pr. ZYANI Mohammad* Médecine Interne
MARS 2014
ACHIR ABDELLAH Chirurgie Thoracique
BENCHAKROUN MOHAMMED Traumatologie- Orthopédie
BOUCHIKH MOHAMMED Chirurgie Thoracique
EL KABBAJ DRISS Néphrologie
EL MACHTANI IDRISSI SAMIRA Biochimie-Chimie
HARDIZI HOUYAM Histologie- Embryologie-Cytogénétique
HASSANI AMALE Pédiatrie
HERRAK LAILA Pneumologie
JANANE ABDELLA TIF Urologie
JEAIDI ANASS Hématologie Biologique
KOUACH JAOUAD Génécologie-Obstétrique
LEMNOUER ABDELHAY Microbiologie
MAKRAM SANAA Pharmacologie
OULAHYANE RACHID Chirurgie Pédiatrique
RHISSASSI MOHAMED JMFAR CCV
SABRY MOHAMED Cardiologie
SEKKACH YOUSSEF Médecine Interne
TAZL MOUKBA. :LA.KLA. Génécologie-Obstétrique
*
Enseignants MilitairesDECEMBRE 2014
ABILKACEM RACHID' Pédiatrie
AIT BOUGHIMA FADILA Médecine Légale
BEKKALI HICHAM Anesthésie-Réanimation
BENAZZOU SALMA Chirurgie Maxillo-Faciale
BOUABDELLAH MOUNYA Biochimie-Chimie
BOUCHRIK MOURAD Parasitologie
DERRAJI SOUFIANE Pharmacie Clinique
DOBLALI TAOUFIK Microbiologie
EL AYOUBI EL IDRISSI ALI Anatomie
EL GHADBANE ABDEDAIM HATIM Anesthésie-Réanimation
EL MARJANY MOHAMMED Radiothérapie
FE]JAL NAWFAL Chirurgie Réparatrice et Plastique
JAHIDI MOHAMED O.R.L
LAKHAL ZOUHAIR Cardiologie
OUDGHIRI NEZHA Anesthésie-Réanimation
Rami Mohamed Chirurgie Pédiatrique
SABIR MARIA Psychiatrie
SBAI IDRISSI KARIM Médecine préventive, santé publique et Hyg. *Enseignants Militaires
AOUT 2015
Meziane meryem Dermatologie
Tahri latifa Rhumatologie
JANVIER 2016
BENKABBOU AMINE Chirurgie Générale
EL ASRI FOUAD Ophtalmologie
ERRAMI NOUREDDINE O.R.L
NITASSI SOPHIA O.R.L
2- ENSEIGNANTS – CHERCHEURS SCIENTIFIQUES
PROFESSEURS / PRs. HABILITESPr. ABOUDRAR Saadia Physiologie
Pr. ALAMI OUHABI Naima Biochimie – chimie
Pr. ALAOUI KATIM Pharmacologie
Pr. ALAOUI SLIMANI Lalla Naïma Histologie-Embryologie
Pr. ANSAR M‟hammed Chimie Organique et Pharmacie Chimique
Pr. BOUHOUCHE Ahmed Génétique Humaine
Pr. BOUKLOUZE Abdelaziz Applications Pharmaceutiques
Pr. BOURJOUANE Mohamed Microbiologie
Pr. CHAHED OUAZZANI Lalla Chadia Biochimie – chimie
Pr. DAKKA Taoufiq Physiologie
Pr. DRAOUI Mustapha Chimie Analytique
Pr. EL GUESSABI Lahcen Pharmacognosie
Pr. ETTAIB Abdelkader Zootechnie
Pr. FAOUZI Moulay El Abbes Pharmacologie
Pr. HAMZAOUI Laila Biophysique
Pr. HMAMOUCHI Mohamed Chimie Organique
Pr. IBRAHIMI Azeddine Biologie moléculaire
Pr. KHANFRI Jamal Eddine Biologie
Pr. OULAD BOUYAHYA IDRISSI Med Chimie Organique
Pr. REDHA Ahlam Chimie
Pr. TOUATI Driss Pharmacognosie
Pr. ZAHIDI Ahmed Pharmacologie
Pr. ZELLOU Amina Chimie Organique
Mise à jour le 14/12/2016 par le
A ma chère mère
Pour l’affection, la tendresse et l’amour dont tu m’as toujours entouré,
Pour le sacrifice et le dévouement dont tu as toujours fait preuve,
Pour l’encouragement sans limites que tu ne cesses de manifester.
Aucun mot, aucune phrase ne peut exprimer mes sentiments profonds
d’amour, de respect et de reconnaissance.
Puisse le grand puissant te donner bonne santé et longue vie…
A ma chère tante
Ma deuxième mère, Qui a toujours été là pour moi et m’ont guidé depuis tout
petit. Pour tous ces instants heureux passés ensemble et ceux à venir. Que Dieux
te guérisse.
A mon cher père
Pour tes encouragements qui m’ont incité à aller de l’avant.
Merci
A mes frères
Nous étions toujours très proches et nous le serons pour toute la vie, je vous
souhaite une vie heureuse et un avenir prospérant.
A tous mes amis
Pour les nombreux moments partagés avec vous, pour votre soutien et pour tous
ces moments de plaisir en votre compagnie.
Aux membres des clubs et organismes dans lesquelles j'ai fait partie,
J'ai vécu beaucoup de belles choses et de bons moments, grâce à l’energie
inspirante qu'emet chacun d'entre vous, n’oubliez pas une chose c'est tous
A notre Maître et Président de thèse
Monsieur le Professeur EL JAOUDI Rachid
Vous m’avez fait l’honneur de bien vouloir assurer la présidence de cette thèse.
J’espère que vous trouverez dans ce travail le témoignage de ma reconnaissance
A Notre maître et rapporteur de thèse
Le professeur IBRAHIMI Azeddine
Qu’il me soit permis, monsieur, de vous exprimer ma profonde gratitude et mes
sincères remerciements. Merci pour votre sympathie, votre gentillesse et votre
A notre maître et juge de thèse
Madame le professeur EL HAFIDI Naima
Je vous remercie de m’avoir fait l’honneur de juger mon travail. Soyez assuré de
mon grand respect et de ma profonde gratitude.
A Madame le professeur HASSANI Amal
C’est pour nous un immense plaisir de vous voir siéger le jury de notre thèse.
Vous avez suscité notre grande admiration par votre compétence, votre
A Madame le professeur LAKHLILI Wiam
Je vous remercie énormément de m’avoir si bien aidé à mener à bien ce travail,
vous n’avez jamais lésiné ni sur votre temps ni sur votre savoir tout le long de ce
Liste des abréviations
Ac : Anticorps
AcM : Anticorps monoclonaux ADN : Acide désoxyribonucléique
AMM : Autorisation de mise sur le marché ARN: Acide ribonucléique
BCP : La banque de cellules primaire BCT : La banque de cellules de travail CDR: Complementary determinig region CFU-E: Colony forming unit-erythoid CHO: Chinese hamster ovary
EPO: Erythropoïétine
CSF: colony stimulating factors
DCI : Dénomination commune
internationale
EBV : Epstein Barr virus
EMA : European Medicines Agency Fab : Fragment antigène binding Fc : Fragment cristallisable
Fragment Fab : Fragment antigène binding FSH : L‟hormone folliculo-stimulante GP : Glycoprotéine
HAT : Hypoxantine, Aminoptérine et Thymidine
Hb : Hémoglobine
HBsAg : Antigène de surface HB
HCG : L‟hormone gonadotrophines chorionique
HNF : L‟héparine non fractionnée Ig : Immunoglobulines IL : Interleukines IM : Intramusculaire INF : Interférons IV : Intraveineux LH : L‟hormone lutéinisante
OGM : Organismes génétiquement modifiées
SDR: Specificity Determining Residues STH: La somatotrophine
Tc: Transchromosomique
TIH : Thrombopénies induite par l‟héparine
TNF : Tumer necrosis factor UE : Union européenne
VIH : Virus d‟immunodéficience humaine
YACs : Yeast Artificial
Liste des figures
Figure 1: Les étapes de production des biosimilaires (système clos)……….8 Figure 2 : Schéma représentatif des différentes étapes de purification des protéines thérapeutiques...12 Figure 3 : Procédé global de production des protéines thérapeutiques...……….13 Figure 4 : Représentation schématique de la construction de gènes recombinants capables de diriger la sécrétion de protéines thérapeutiques dans le lait………..14 Figure 5 :Les différentes étapes de la formation des érythrocytes………23 Figure 6 : Schéma typique d‟une immunoglobuline (anticorps monoclonal)………..29 Figure 7 : Structure de base des immunoglobulines……….43 Figure 8 : Présentation d‟anticorps chimériques et humanisés……….45 Figure 9 : production d‟anticorps monoclonaux selon la technique des hybridomes de G. Kohler et C. Milstein (Bellet, 2002)……….49 Figure 10 : Immortalisation des cellules B mémoires humaines………..52 Figure 11 : Technique de phage display………...53 Figure 12 : Différentes étapes d‟un tour de bio-panning………..55 Figure 13 : Principe de la technique du ribosome display………56 Figure 14: Séquences d‟immunoglobulines humaines introduites dans le génome de souris transgéniques……….58 Figure 15: Coût et durée de développement des biosimilaires par rapport aux génériques…145 Figure 16: Risques et vitesse d'adoption des biosimilaires……….147
Liste des tableaux
Tableau I: Comparaison entre les médicaments chimiques et biologiques………..32 Tableau II: Nomenclature internationale détaillée des différents types d‟anticorps monoclonaux, tenant également compte de la cible potentielle………....47 Tableau III: Les anticorps monoclonaux commercialisés au Maroc……….…128-153
Table des matières
Liste des abréviations ... 1 Liste des figures ... 2 Liste des tableaux ... 3 INTRODUCTION ... 1 CHAPITRE I. Médicament biotechnologique ... 3 I. Historique des médicaments biotechnologiques et leur concept ... 3 I.1. Historique ... 3 I.2. Définitions & Concept ... 4 I.2.1. Définitions ... 4 I.2.2. Concept ... 5 II. Chaîne de fabrication d’un Médicament de l’ADNr ... 6 II.1. Production en système clos ... 6 II.1.1. La sélection de la séquence d‘ADN appropriée ... 8 II.1.2. Préparation de banque de cellules primaires ... 9 II.1.3. La banque de cellules de travail (BCT) ... 9 II.1.4. La production... 10 II.1.5. La purification ... 11 II.1.6. L’analyse ... 12 II.1.7. La formulation ... 12 II.2. Production en système ouvert ... 13 III. Classes des médicaments biotechnologiques issus de la technologie de l’ADNr ... 15 III.1. Les hormones ... 15 III.1.1. L’insuline recombinante ... 15 III.1.2. L’hormone de croissances humaine: somatotropine (STH) ... 16 III.1.3. Les gonadotrophines ... 16 III.1.4. Protéines sanguines et plasmatiques ... 18
III.1.5. L’albumine humaine ... 18 III.1.6. L’hémoglobine humaine ... 18 III.1.7. Facteurs de coagulation ... 19 III.1.8. Protéines anticoagulantes ... 20 III.1.9. Les cytokines... 20 III.1.9.1. Les interférons ... 21 III.1.9.2. Les interleukines ... 22 III.2. Les facteurs de croissance hématopoïétiques ... 22 III.2.1. L’érythropoïétine humaine ... 23 III.2.2. G-CSF (Granulocyte-colony stimulating factor) ... 25 III.2.3. GM-CSF (granulocyte macrophage colony stimulating factor) ... 25 III.3. Les vaccins ... 26 III.4. Les anticorps monoclonaux ... 28 IV. Les biosimilaires ... 31 IV.1. Le concept du biosimilaire ... 31 IV.2. Enregistrement du Médicament biotechnologique et son biosimilaire... 33 IV.2.1. En Europe ... 33 IV.2.2. Au Maroc ... 35 IV.3. Perspectives du médicament biotechnologique ... 36 IV.3.1. Nouvelles stratégies vaccinales ... 36 IV.3.2. Exploitations nouvelles des liquides biologiques des bioréacteurs animaux pour la production des protéines recombinantes ... 37 IV.3.3. Les xénogreffes ... 37 V. Thérapies innovantes ... 38 V.1. Thérapie génique ... 38 V.2. Thérapie cellulaire ... 39 V.2.1. Cellules souches adultes ... 39 V.2.2. Cellules souches embryonnaires ... 40 CHAPITRE II. Les anticorps monoclonaux thérapeutiques ... 41 I. Définition ... 41 II. Structure d’une immunoglobuline ... 41
III. Fonctions des anticorps ... 43 IV. Types et nomenclature des anticorps monoclonaux ... 44 IV.1. Types des anticorps monoclonaux ... 44 IV.2. Nomenclature des anticorps monoclonaux ... 46 V. Techniques de production des anticorps monoclonaux ... 47 V.1. Anticorps murins ... 47 V.2. Anticorps chimériques et humanisés ... 49 V.2.1. Construction d’anticorps chimérique ... 49 V.2.2. Construction d’anticorps humanisés ... 50 V.3. Anticorps entièrement humain ... 51 V.3.1. Immortalisation des cellules B mémoires humaines ... 51 V.3.2. Technique de Phage display ... 52 V.3.3. Technique de Ribosomes display ... 55 V.3.4. Technique de souris transgéniques ... 57 VI. Fiches des anticorps monoclonaux thérapeutiques ... 60 VI.1. Abciximab ... 60 VI.2. Adalimumab ... 62 VI.3. Alemtuzumab ... 63 VI.4. Basiliximab ... 65 VI.5. Belimumab ... 66 VI.7. Brentuximab vedotin ... 69 VI.8. Canakinumab ... 71 VI.9. Certolizumab pegol ... 72 VI.10. Denosumab ... 75 VI.11. Eculizumab... 76 VI.12. Golimumab ... 78 VI.13. Ibritumomab ... 81 VI.14. Infliximab ... 83 VI.15. Ipilimumab ... 86 VI.16. Natalizumab... 87
VI.17. Obinutuzumab ... 90 VI.18. Ofatumumab ... 92 VI.19. Omalizumab ... 94 VI.20. Palivizumab ... 96 VI.21. Panitumumab ... 97 VI.22. Pertuzumab ... 99 VI.23. Ranibizumab ... 101 VI.24. Rituximab ... 102 VI.25. Siltuximab ... 105 VI.26. Tocilizumab ... 106 VI.27. Trastuzumab ... 108 VI.28. Trastuzumab emtansine ... 111 VI.29. Ustekinumab ... 113 VI.30. Vedolizumab ... 115 DES RECEPTEURS SOLUBLES THERAPEUTIQUES ... 117 VI.31. Abatacept ... 117 VI.32. Aflibercept ... 119 VI.33. Anakinra ... 121 VI.34. Belatacept ... 123 VI.35. Etanercept ... 124 VII. Fiche technique des anticorps monoclonaux commercialisés au Maroc ... 127 CHAPITRE III. Challenges concernant les médicaments biotechnologiques ... 134 I. Risques liés à la chimie et à la biologie du médicament ... 134 I.1. Sécurité ... 134 I.2. Toxicité ... 135 I.3. Immunogénicité ... 135 II. Problèmes de substitution, dénomination et étiquetage ... 137 II.1. Substitution et interchangeabilité ... 137 II.1.1. Interchangeabilité ... 137 II.1.2. Substitution ... 138
II.2. Pharmacovigilance ... 140 II.3. Dénomination et étiquetage ... 141 III. Limites économiques ... 143 A. Coût d’entrée élevé ... 143 B. Complexité d’expertise ... 144 C. Essais cliniques ... 144 D. Questions juridiques ... 145 E. Stratégies de défenses des laboratoires innovants ... 145 CONCLUSION ... 148 Résumé ... 149 Abstract ... 150 صخلم ... 151 REFERENCES BIBLIOGRAPHIQUES ... 152
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INTRODUCTION
Les médicaments biothérapeutiques ou les protéines thérapeutiques sont un élément important et intégral de la médecine moderne qui cible de nombreux domaines de maladies chroniques et aiguës avec des traitements hautement spécifiques. Ces médicaments complexes permettent à la fois au patient, grâce à une meilleure qualité de vie, et aussi, à la société de bénéficier de leur utilisation.
En 1982, l'insuline humaine était le premier médicament produit par la technologie de l'ADN recombinant autorisé et commercialisé. Depuis lors, plusieurs protéines recombinantes et de nombreux anticorps monoclonaux (MonoclonalAntibodies MABs) ont été commercialisés. Les protéines thérapeutiques sont devenues une modalité thérapeutique standard pour les maladies graves.(1)
Les protéines thérapeutiques montrent une croissance rapide du marché. L'industrie biotechnologique relativement jeune représente déjà 20% du marché pharmaceutique mondial total (2). L‟environnement de l‟industrie biotechnologique a toujours été dynamique et stimulé intellectuellement. Bien que les premières protéines thérapeutiques produites soient des "non-anticorps" (Insuline-rh, interféron alfa2a ou époétine A), les anticorps monoclonaux dominent aujourd'hui les dix médicaments les plus vendus. (2)
La percée des anticorps monoclonaux peut s‟expliquer par plusieurs démarches biotechnologiques: la découverte de la technologie des hybridomes par Koehler et Milstein(1), la technologie des phages display par Smith (3), l‟humanisation par Winter (4) et les améliorations techniques de la fermentation et de la purification (2).
Les anticorps monoclonaux présentent plusieurs avantages par rapport à d'autres protéines recombinantes, telles que les demi-vies sériques longues, principalement médiées par le recyclage du FcRn (5), et la spécificité de la cible. La possibilité d'adapter la liaison de l‟anticorps monoclonal à n'importe quelle cible biologique a conduit au développement de produits commercialisés dans différents domaines de maladies, en mettant l'accent sur l'oncologie et les maladies auto-immunes.
Étant donné la nature complexe des protéines thérapeutiques et les défis de caractérisation qui en résultent, des tests spécialisés sont nécessaires pour assurer leur sécurité et leur efficacité.
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Par conséquent, les protéines thérapeutiques similaires (ou biosimilaires) sont réglementées par des voies distinctes de celles qui sont traditionnellement utilisées pour les médicaments génériques.
Compte tenu de l‟évolution rapide du domaine des biothérapies en général et des anticorps monoclonaux en particulier, ce document a pour but de faire une synthèse des anticorps monoclonaux (AcM) et dérivés à usage thérapeutique ayant obtenu une AMM en Europe et au Maroc. Après quelques généralités sur les anticorps et le mode d‟obtention de ces molécules, les AcM thérapeutiques seront présentés sous forme de fiches résumées où seront notamment détaillés les mécanismes d‟action et les cibles thérapeutiques.
En fin, citer les défis et challenges aussi nombreux qui concernent ce domaine ayant à la fois un rapport avec la chimie et biologie de ces molécules, avec la substitution, l‟interchangeabilité et la pharmacovigilance, et puis concernant les limites économiques.
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CHAPITRE I. Médicament biotechnologique
I. Historique des médicaments biotechnologiques et leur concept
I.1. Historique
En 3000 Av J .C.A cette époque déjà les hommes sélectionnaient et croisaient naturellement des espèces végétales ou animales à fin de les rendre plus productives. Les Egyptiens utilisaient des microorganismes tels que les levures pour fabrique leur pain et différents types d‟alcool mais ils ignoraient encore à cette époque les propriétés de la fermentation. (6)
A partir du 18éme siècle: Le développement exponentiel de la chimie et de la biologie
amenaient à des connaissances théoriques et à la compréhension de phénomènes jusque-là attribués à la magie. (6)
Louis Pasteur décrit et développa le principe de la fermentation.
En 1872:Le biologiste bâlois Johann Friedrich Miescher, suite à des études en 1869 où il
isola des noyaux cellulaires, observa la présence d‟une substance non lipidique et non protéique qu‟il va nommer nucléine.(6)
Il va donc en 1872, démontrer sa présence dans plusieurs espèces de spermatozoïdes ce qui va le pousser à développer l‟hypothèse de son rôle dans la transmission de l‟hérédité.(6)
Il ne le sait pas mais il vient de découvrir l‟ADN. (6)
Le 25 avril 1953:Les deux chercheurs Franckis Crick (physicien) et James Watson (biologiste) publient, suite à leur recherche, dans la revue «Nature» un article sur la découverte de la structure de l‟ADN à double hélice. (6)
De 1960 à 1966:Le chercheur américain Marshall W. Nirenberg découvre qu‟un ARN messager formé de trois uridines (UUU) déclenche la synthèse d‟une chaine d‟un acide aminé (phénylalanine) qui forme une protéine. Il conclut donc qu‟une série de trois nucléotides (UUU) aussi appelées codon, codaient cette acide aminé.
En parallèle, Khorana Har Gobind et son équipe développe la synthèse polynucléotide (l‟alignement des acides aminés dicté par la séquence des ARN messagers). Cela permit en 1966 de découvrir le code génétique. (6)
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En 1973:La mise au point de la technologie de recombinaison de l‟ADN, permettant aux scientifiques de modifier les caractéristiques génétiques des animaux, des végétaux, des micro-organismes ou encore de l‟homme en transférant une certaine partie du matériel génétique d‟un organisme à un autre. (7)
En 1977: Production de la première hormone peptidique la somatostatine en utilisant E. coli.
Dès 1980: JON GORDON et ses collègues de l'université YALE avaient montré comment on peut introduire des segments d'ADN dans les chromosomes des souris. Peu après, THOMAS WAGNER et ses collègues de l'université de l‟OHIO montrèrent qu‟un gène de lapin restait fonctionnel chez une souris. Le gène était exprimé chez la souris qui a avait, dans son sang, de l‟hémoglobine de lapin... (8,9)
I.2. Définitions & Concept
I.2.1. Définitions
Médicament biologique: Un médicament biologique est un produit dont la substance active est une substance biologique. Une substance biologique est une substance qui est produite à partir d'une source biologique ou en est extraite et dont la caractérisation et la détermination de la qualité nécessitent une combinaison d'essais physico-chimio-biologiques, ainsi que la connaissance de son procédé de fabrication et de son contrôle.(10)
Médicament biotechnologique; médicaments issus de la technologie de l’ADNr: Le terme d‟«ADN recombinant» désigne le transfert d‟un gène ou d‟un fragment de gêne dans de l‟ADN étranger.
Les produits biotechnologiques sont des substances produites par génie génétique par des cellules vivantes. Pour produire ces médicaments, des gènes humains sont intégrés dans des bactéries ou dans d‟autres cellules. Lors de la synthèse de la protéine, les informations mémorisées dans les gènes sont lues et la protéine constituée par assemblage séquentiel des différents acides aminés. Les gènes lus pour la synthèse des produits biologiques étant d‟origine humaine sont très largement identiques à celles produites par le corps humain. On choisit des systèmes cellulaires qui se multiplient rapidement et produisent des
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quantités particulièrement abondantes de la substance souhaitée. Ce sont généralement des bactéries ou des cultures de cellules animales/humaines.(7)
Thérapie innovante: Quatre types de médicaments de thérapie innovante sont définis par les textes européens:
Les médicaments de "thérapie génique"
Les médicaments de "thérapie cellulaire somatique"
Les médicaments "issus de l‟ingénierie cellulaire ou tissulaire" Les médicaments "combinés de thérapie innovante"(11)
I.2.2. Concept
Les protéines recombinantes tels certains facteurs de la coagulation, érythropoïétines, facteur stimulant les colonies de granulocytes (G-CSF), gonadotrophines, hormone de croissance, interférons, interleukines et anticorps monoclonaux font partie des plus importants médicaments issus de la biotechnologie commercialisés durant les dernières décennies. Ce procédé de production est toutefois sensible car il fait appel aux systèmes biologiques vivants, qui présentent des sources de variabilité significatives à prendre en compte dans le contrôle de la qualité finale des lots de production.
L‟irruption de la biotechnologie durant les dernières décennies a ainsi permis de concevoir de nouveaux outils permettant de mieux caractériser, diagnostiquer, cibler, prévenir ou traiter de plus en plus de pathologies (protéines recombinantes, thérapie cellulaire, thérapie génique).Les médicaments issus des biotechnologies sont des molécules complexes, tant par leur taille que par leur structure primaire, secondaire et tertiaire. Ces molécules ne peuvent pas être obtenues par synthèse chimique, compte tenu de leur complexité et des limites liées à ce type de synthèse. Aussi, un mode de production dans des systèmes cellulaires est utilisé. Cependant, contrairement à une petite molécule obtenue par synthèse chimique, qui permet d‟obtenir une population moléculaire homogène et reproductible, un système de production biologique conduit à une population mixte de la molécule active sous forme de différentes variantes moléculaires.(12)
Cette complexité moléculaire impose le recours à de nombreuses méthodes d‟analyses physico-chimiques et biologiques qui, combinées, permettront d‟évaluer et vérifier au mieux que chaque lot du médicament produit répond à des normes de qualité prédéfinies (intégrité
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de la structure primaire, secondaire et tridimensionnelle de la molécule d‟intérêt, profil de puretés/impuretés, activité biologique…). Il s‟agit de garantir in fine, une activité thérapeutique et un profil de tolérance identiques à chaque utilisation.(12)
Cependant, malgré la réalisation de l‟ensemble de ces analyses très complexes, il reste impossible de garantir que le profil de la molécule ait pu être totalement vérifié à la différence des médicaments chimiques. C‟est pourquoi une attention toute particulière est portée au procédé de production.(12)
Enfin, sur le plan de la tolérance et de l‟efficacité clinique, il faut rappeler que les substances actives d‟origine biologique doivent avoir conservé, tout au long du procédé de production du médicament, leurs propriétés biologiques afin de pouvoir exercer leur activité dans l‟organisme et de ne pas induire de réactions d‟intolérance liées à la présence d‟impuretés ou de produits de dégradation.
Si la plupart des produits issus de la biotechnologie sont encore protégés, les brevets et autres certificats complémentaires de protection de nombreux médicaments de référence issus de la biotechnologie tomberont prochainement dans le domaine public. Ces produits représentent un marché européen potentiel de plusieurs dizaines de milliards d‟euros pour des médicaments biologiques similaires à ces médicaments de référence, portant le nom de biosimilaires. (12)
II.
Chaîne de fabrication d’un Médicament de l’ADNr
Le médicament biologique est défini à la fois par sa source de production, sa caractérisation, ses tests physicochimiques et biologiques et par son procédé de fabrication.
Ce procédé doit être développé et optimisé à l‟aide des méthodes de pointe les plus performants, notamment en termes de systèmes d‟expression, cultures cellulaires, purification, formulation. (13)
II.1.
Production en système clos
La production industrielle des médicaments issus des bio- technologies comporte de multiples étapes auxquelles sont associées des possibilités de variations. Avant de pouvoir transformer et amplifier l‟ADN au sein de systèmes cellulaires procaryotes ou eucaryotes, il est nécessaire de préparer ces systèmes cellulaires eux-mêmes. Classiquement, la lignée cellulaire
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sélectionnée (encore nommée inoculum ou banque cellulaire) est placée dans un milieu de culture stérile, puis soumise à une fermentation afin d‟obtenir une biomasse suffisante. En pratique, on utilise des clones d‟une banque cellulaire maîtresse. Viennent ensuite les cycles de production de la protéine d„intérêt au sein de cuves spéciales (les bioréacteurs), puis la protéine brute est extraite par concentration et diafiltration. Plusieurs étapes supplémentaires (élution, filtration stérile) permettent de produire la protéine brute qui sera purifiée par des étapes de chromatographie hydrophobes, d„échanges d„anions et de cations, puis ensuite conditionnée pour être délivrée comme médicament (13).
Le procédé de production en système clos comporte généralement sept phases (14)(figure 1): 1) La sélection de la séquence d„ADN appropriée
2) Préparation de banque de cellules primaires 3) Préparation de banque de cellules de travail 4) Production
5) Purification 6) Analyses 7) Formulation
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Figure 1: Les étapes de production d’un médicament d’ADNr (système clos) (14)
II.1.1.
La sélection de la séquence d‘ADN appropriée
La première étape du processus de production de la protéine recombinante consiste à l„identification, et la sélection de la séquence d‟ADN codant pour la protéine voulue, après cette sélection, la séquence isolée doit être incorporé dans un système d‟expression :
Les stratégies d'expression des protéines doivent assurer l'obtention de la protéine la plus proche possible de la protéine naturelle particulièrement en ce qui concerne ses propriétés physicochimiques, catalytiques et immunologiques. (15)
C‟est ainsi que seront essentiels les choix concernant :
- La cellule hôte (une bactérie, une levure ou une cellule animale).
- Le vecteur d'expression dans lequel est introduit le gène ou l'ADN complémentaire correspondant à la protéine à produire.
- Le promoteur qui régulera le niveau d'expression de cette protéine.
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- Les possibilités offertes par la cellule de modifier la protéine après sa traduction (glycosilation, carboxylation, clivage protéolytique) sachant que seules les cellules animales et en partie la levure sont capables d'assurer une maturation convenable de la protéine.
- Des critères économiques, sachant qu'une culture à grande échelle d'Escherichia coli est moins onéreuse que s'il s'agit de cellules animales, lesquelles croissent lentement et nécessitent des milieux complexes et coûteux (15).
II.1.2.
Préparation de banque de cellules primaires
Une banque de cellules est un ensemble d‟ampoules de composition uniforme conservées dans des conditions définies et qui contient une fraction aliquote d‟un même pool de cellules. La banque de cellules primaire (BCP) est généralement constituée à partir du clone cellulaire sélectionné qui renferme le vecteur d‟expression. (16)
Il faut décrire en détail les antécédents de la lignée cellulaire utilisée et le processus par lequel les banques de cellules ont été constituées, en indiquant notamment les méthodes et les réactifs employés durant la culture, l‟âge cellulaire in vitro et les conditions de conservation. Toutes les banques de cellules doivent être caractérisées par des marqueurs phénotypiques et génotypiques pertinents pouvant inclure l‟expression de la protéine recombinante ou la présence du vecteur d‟expression. (16)
Le vecteur d‟expression présent dans la BCP devrait être analysé après. Si la BCP ne peut être soumise directement aux analyses, il faut analyser chaque BCT. Pour réaliser cette analyse, différentes techniques sont préconisés comme la cartographie de restriction (restriction endonuclease mapping) ou d‟autres techniques appropriées(16). Le but de ces analyses effectuées sur le vecteur d„expression est de déterminer le nombre de copies, la présence d‟insertions ou de délétions et le nombre de sites d‟intégration. Dans le cas des systèmes d„expression extrachromosomiques, il faut déterminer le pourcentage des cellules hôtes contenant le vecteur d‟expression (16).
II.1.3.
La banque de cellules de travail (BCT)
La banque de cellules de travail est obtenue par la multiplication des cellules d„une ou de plusieurs ampoules de la BCP. Pour cette banque de cellules il faut décrire en détail les antécédents de la lignée cellulaire utilisée et le processus par lequel la banque de cellules a été
10
constituée, en indiquant notamment les méthodes et les réactifs employés durant la culture, l„âge cellulaire in vitro et les conditions de conservation (16).
II.1.4.
La production
La production des médicaments issus de la biotechnologie se fait essentiellement grâce à des procédés de fermentation. Ils sont constamment développés afin de cultiver les microorganismes dans les conditions optimales pour qu'ils puissent produire les produits désirés.
Il existe 3 grands systèmes de fermentation (bioréacteurs). (17)
Le premier système de fermentation appelé fermentation « batch » ou discontinue:
Dans le cas du mode discontinu ("batch"), le système est fermé, le milieu n'est pas renouvelé. La concentration en substrat diminue tandis que celle du produit augmente avec la croissance cellulaire. Le milieu, une fois épuisé et enrichi en sous-produits (métabolites), n'assure plus son rôle nutritif. La croissance cellulaire est stoppée. (18)
On peut observer 4 phases de croissance : - Une phase de latence
- Une phase exponentielle de croissance - Une phase stationnaire
- Une phase de mortalité. (18)
Le deuxième système de fermentation semi-continu appelé fermentation « fed-batch » ou fed-batch alimenté:
En mode semi-continu ("fed-batch"), le substrat est apporté au fur et à mesure de sa consommation par les micro-organismes (Ce système est employé dans la production de la pénicilline. En effet, celle-ci est soumise à une répression catabolique lors de la présence d'une forte concentration de substrat carboné (le glucose)) On procède à l'ajout du substrat au fur et à mesure de sa consommation ce qui permet de maintenir la concentration en substrat et de prolonger la phase de production des cellules. (18)
Le troisième système de fermentation appelé fermentation continue ou système ouvert (CSTR: continuous stirred tank reactor):
11
La solution de nutriment est apportée en continue au réacteur mais une quantité équivalente de solution fermentée est prélevée. Le volume est donc constant. (18)
II.1.5.
La purification
La purification d„une protéine est un processus qui consiste à extraire cette substance depuis un mélange initial de tissus biologiques ou cultures cellulaires. Pour séparer la protéine des autres composantes cellulaires, il faut passer par plusieurs étapes de purification nécessitant différents traitements de l„échantillon de départ (19) :
a) séparation et clarification :
Le but de cette opération est de séparer les cellules du surnagent et conserver la fraction d„intérêt selon que le produit est intracellulaire ou extracellulaire, les méthodes les plus usuelles sont la centrifugation, et la microfiltration.
b) Homogénéisation du mélange :
L„objectif de cette opération est de briser les cellules pour récupérer le produit si sa production se fait au niveau intracellulaire, les méthodes les plus utilisées pour l„homogénéisation sont : la gélification et la dégélification, les ultrasons, les contraints hydrodynamiques.
c) la concentration :
Cette opération a pour but de réduire le volume du produit obtenu. d) Raffinage de la pureté de la protéine extraite :
C„est la purification proprement dite se fait à l„aide des techniques chromatographiques, combinées souvent au tamisage moléculaire ou l'isofocalisation qui permettent de raffiner la pureté (20).
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Figure 2 : Schéma représentatif des différentes étapes de purification des protéines thérapeutiques(20)
II.1.6.
L’analyse
Cette étape a pour objectif de contrôler la qualité du produit final obtenu, fait recours à différentes techniques analytiques, et doit être réalisée conformément aux normes internationales. (Guidelines de l„EMEA, GMP, SOP (protocoles d‟opérations standardisés). L„application de ces normes doit se faire d‟une manière plus stricte pour les produits biologiques étant donné que les réactions menant à la formation du produit final ne sont pas bien définies (21).
II.1.7.
La formulation
La formulation est l„étape terminale de la production, c„est l„étape clé pour obtenir une protéine stable, le choix des excipients est déterminant car il peut affecter la nature de la protéine et donc avoir un impact sur l„efficacité et l„innocuité de la protéine thérapeutique. Des études de formulation doivent être effectuées au cours du développement d‟une forme pharmaceutique adaptée pour le médicament biologique, même si les excipients sont quantitativement et qualitativement les mêmes que ceux du produit de référence. Elles doivent notamment démontrer que la formulation proposée est appropriée à la stabilité et à l„intégrité du principe actif pour son indication thérapeutique, ainsi qu‟à sa compatibilité, en particulier avec les excipients ou les diluants et les matériaux de conditionnement (22).
13
Figure 3 : Procédé global de production des protéines thérapeutiques(22)
II.2.
Production en système ouvert
Certaines protéines ont une composition trop complexe pour être synthétisées sous une forme active par les bactéries. C‟est le cas de l„érythropoïétine par exemple qui doit être synthétisée par des cellules animales génétiquement modifiées. Le problème avec ces cellules animales en culture est qu‟elles ne peuvent pas synthétiser des quantités importantes de cette protéine à un coût acceptable. L‟idée d„exploiter les animaux et les plantes transgéniques s‟est donc rapidement imposée. (23)
Le procédé de production en système ouvert consiste à isoler le gène codant pour la protéine d‟intérêt, à l‟associer à des éléments régulateurs capables de diriger la synthèse et la sécrétion de la protéine et d‟introduire le gène dans un embryon au stade une cellule. Les organismes transgéniques ainsi obtenus sécréteront la protéine, dans divers tissus biologiques faciles d‟accès, tels que :
- Le lait, le sang, le plasma germinal du sperme de porc, le blanc d„œufs ce sont les tissus les plus explorées pour les animaux. (figure 4)
14
- Pour les plantes, les protéines d„intérêt thérapeutique se trouvant dans les feuilles ou les graines selon les cas (23).
Figure 4 : Représentation schématique de la construction de gènes recombinants capables de diriger la sécrétion de protéines thérapeutiques dans le lait. (23)
15
III. Classes des médicaments biotechnologiques issus de la technologie
de l’ADNr
III.1.
Les hormones
Les hormones étaient obtenues par extraction sur l‟être humain, ou sur des espèces animales en raison des quantités requises. La biotechnologie permet de les produire en beaucoup plus grande quantités.
III.1.1. L’insuline recombinante
Avant d‟apprendre à produire l‟insuline par des micro-organismes, on utilisait celle, semblable à l‟insuline humaine, que fabriquent les chiens, les porcs ou les bœufs. Cette pratique nécessitait de purifier l‟hormone produite par ces animaux. Ces insulines d‟origines animales ont été administrées sans danger pendant de nombreuses années. (24)
Avec le nombre de cas de personnes diabétiques augmentant continuellement, il a fallu trouver une autre méthode afin de produire de l‟insuline en grande quantité et à faible coût. Avec le développement du génie génétique, on s‟est donc tourné vers les micro-organismes. Depuis 1983, la production à grande échelle de l‟insuline est réalisée commercialement avec la bactérie E. Coli. En 1987, on a également commencé à produire de l‟insuline avec les levures Saccharomyces cerevisiae.
Le procédé de fabrication de l‟insuline est le même chez la levure et la bactérie; Le gène (brin d‟ADN) de l‟insuline Humaine est d‟abord inséré dans le micro-organisme, la levure ou la bactérie, produit alors l‟insuline qui par la suite sera récoltée puis purifiée pour sa mise en marché. La première insuline humaine issue de l‟application des biotechnologies, appelée insuline humaine recombinante (biosynthétique) a été fabriquée par Eli lilly et sa vente a été approuvée au canada en 1983. Par la suite, une autre insuline humaine biosynthétique fabriquée par Novo Nordisk a été homologuée en 1993.(24)
Il est intéressant de noter que la production d‟insuline fut la première application industrielle de ce genre, ce fut la première fois qu‟une bactérie possédant un gène humain a été utilisée comme moyen de production d‟une molécule dont l‟usage est accepté chez l‟Humain.(24)
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Des variantes de l‟insuline humaine à résorption et action rapide (Lispro et Aspart) ou à action prolongée (Glargine et Detomir) sont aussi préparées selon la technique recombinante; ce sont des analogues d‟insuline.
III.1.2. L’hormone de croissances humaine: somatotropine (STH)
La somatotropine est une hormone peptidique de 191 acides aminés produite par la glande hypophyse qui a un rôle fondamental dans de nombreux processus physiologiques importants, y compris l‟arrêt et même l‟inversion du vieillissement. Cette hormone régule la croissance et le développement normal chez l‟enfant.(25–27)
La première extraction d‟hypophyse a été identifiée en 1920 par un chercheur californien à partir d‟hypophyse de bovin. Utilisée sur des jeunes rongeurs, la préparation a développé leur capacité de croissance de telle façon qu‟ils ont doublé la taille de leurs congénères adultes, avant même d‟être arrivés à maturité sexuelle (25,26). L‟hormone de croissance a été découverte isolée, purifiée, puis produite à partir de cadavres humains, elle a ensuite été utilisée à partir des années 50 pour le traitement d‟enfants atteints de nanisme hypophysaire. Cependant, au stade adulte certains de ces enfants ont développé la maladie de creutzfeld-jakob en raison de la transmission de particules protéiques des prions au moment de l‟injection du produit.
Ce n‟est qu‟en 1987 que l‟hormone extractive a été remplacée en totalité par des hormones biosynthétiques, obtenues par les techniques de biotechnologie, empêchant toute transmission de la maladie de creutzfeld-jakob.
La somatotropine est produite dans des chloroplastes transgéniques de tabac (27) à partir des bactéries modifiées génétiquement ou à partir de cellules modifiées de souris (25,26) ; La somatropine thérapeutique est produite dans des cellules d'Escherichia coli par la technique de l'ADN recombinant.
III.1.3. Les gonadotrophines
Les gonadotrophines humaines : l‟hormone gonadotrophines chorionique (hCG = human chorionic gonadotropin), l‟hormone lutéinisante (LH) et l‟hormone folliculo-stimulante (FSH) jouent un rôle essentiel dans la gamétogenèse, la synthèse des hormones stéroïdiennes
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sexuelles et le maintien de la grossesse. Les études de recherche clinique ont démontré l‟intérêt de leur utilisation à des fins thérapeutiques pour le traitement d‟infertilité (28,29).
Durant plus de quarante ans, les gonadotrophines extraites de l‟urine ont aidé des centaines de couples infertiles. En recours à la technologie de l‟ADN recombinant, on a continué à le faire d‟une manière plus sure et plus efficace grâce à ces produits (30–32).
La recherche sur la production des gonadotrophines (hormones de fertilité) par la biotechnologie a débuté au milieu des années 80. Des cellules bactériennes telles Escherichia coli étaient jugées représenter le système ultime de production des médicaments de type protéine recombinante. Toutefois, ceci ne s‟est vérifié que pour de petites protéines simples et non pour des protéines thérapeutiques plus longues et plus complexes telle que l‟hormone folliculo-stimulante humaine (h-FSH), l‟hormone lutéinisante humaine (h-LH) et la gonadotrophine chorionique humaine (hCG). Les cellules de mammifères se sont avérées constituer des cellules hôtes convenables pour la production des gonadotrophines biologiquement actives. (34,35).
a. L‟hormone folliculo-stimulante humaine recombinante(r-hFSH) Extraite par biotechnologie, la r_hFSH ou corifollitropine alpha a exactement le même effet que la FSH produite par l‟hypophyse: une stimulation des ovaires, un accroissement de la maturation ovocytaire. (36)
b. L‟hormone lutéinisante recombinante (r-hLH). La plus part des femmes ayant recours à l‟aide médicale à la procréation ne nécessitent généralement que la FSH pour permettre le développement de follicules multiples. Toutefois, la LH est également une hormone clé durant ce processus.
c. La gonadotrophine chorionique humaine recombinante (r-hCG): La gonadotrophine chorionique humaine, principale hormone du placenta, est l‟hormone de grossesse par excellence. Comme la structure chimique de la hCG ne diffère que très peu de celle de la LH et donc déclencher l‟ovulation.
La hCG recombinante, obtenue à partir des cellules CHO, est utilisée après stimulation ovarienne pour déclencher l‟ovulation chez les femmes infertiles en raison d‟un trouble de
