Le faible succès de reproduction obtenu par les géniteurs de Landéda nous a
menés à une nouvelle sélection de géniteurs. Celle-ci a été effectuée sur des
individus ayant connu une meilleure croissance. En effet, les animaux avaient
un âge un peu plus avancé que précédemment et leur site de culture
privilégié est plus propice à leur croissance. Les géniteurs provenaient des
Iles Chausey, un des rares sites de production de la partie Nord de la France,
où la MAB n’a pas été recensée au cours des dernières années.
L’état physiologique pour une meilleure défense face à l’attaque de V. tapetis
est un critère pour la sélection des géniteurs. Ainsi, plusieurs paramètres
hémolymphatiques ont été analysés afin d’en isoler un ou plusieurs pour
permettre de discriminer les palourdes suivant leur état hémocytaires et de
faire des corrélations entre ces paramètres. Cependant, le nombre final de
tests biologiques sur les géniteurs devait être limité pour ne pas influer sur
leur maturation et leur survie.
Les tests ont été effectués sur des individus du même lot R que celui de
Landéda et d’un autre lot standard S. Les paramètres analysés concernent la
concentration et la viabilité des cellules de l’hémolymphe, l’activité
phagocytaire, la production de ROS et l’adhérence.
La limite d’hémolymphe prélevée était de 1000µl pour faire un maximum de
tests.
Cependant, la quantité d’hémolymphe n’a pas été suffisante pour tous les
individus et certains individus ne sont donc pas représentés dans certains
tests particulièrement pour la production de ROS.
Les analyses ont été effectuées au mois de juin pendant la période de
maturation des palourdes. Le sexe ratio a donc pu être déterminé sur les deux
lots. Il est proche de 1. La taille des palourdes est de l’ordre de 33.3 mm (+/-
0.8) pour le lot R et 36.8 mm (+/- 2.2) pour le lot S.
2-1 Résultats moyennés des paramètres hémocytaires pour les deux
lots R et S (Tab.7).
Tab 7 : Paramètres physiologique de l’hémolymphe des lots R et S. [THC] concentration totale en hémocytes cellules.ml-1, viabilité en % de cellules vivantes, Phago= activité phagocytaire en % de cellules phagocytaires, CNA : pourcentage de cellules non adhérées en EMSF et avec V. tapetis (Vt), ratio d’adhérence ; production de ROS entre les deux conditions EMSF et Vt en U. A. ns et s pour différence statistique non significative et significative à p<0.05.
Paramètre
hémocytaire Lot (PJ-06-10) Lot S (PJ-06-9)
THC x105 4,7 (+/- 0,9) 3,8 (+/- 0,7) ns Viab 97,0 (+/- 0,7) 96,3 (+/- 0,8) ns Phago 24,9 (+/- 5,0) 23,2 (+/- 4,4) ns %cell EM 4,3 (+/- 1,9) 6,9 (+/- 1,4) s %cell Vt 7,6 (+/- 2,5) 11,8 (+/- 2,3) s Ratio 2,7 (+/- 0,8) 1,9 (+/- 0,4) s ROS prod 102,6 (+/- 11,2) 111,5 (+/- 14,0) ns
Concentration hémocytaire
Aucune différence entre les deux lots n’a été observée avec une moyenne
générale de 4.3 10
5(+/- 5.8 10
4) hémocytes/ml.
Viabilité cellulaire
La viabilité est élevée, sa valeur générale est estimée à 96.6 % +/-0.6 de
cellules vivantes.
Nous n’obtenons pas de différence significative entre les lots. Cependant, une
variabilité plus importante est notée dans le lot standard.
Activité phagocytaire
Les valeurs moyennes des lots R et de S ne diffèrent pas statistiquement. La
moyenne générale donne 24% (+/-3.2) de cellules phagocytaires.
Production de ROS
Les valeurs moyennes des lots R et de S ne diffèrent pas statistiquement
avec une moyenne de 106 U.A (+/- 8.9).
Adhérence
Le pourcentage moyen de cellules non adhérentes (CNA) en contact avec
l’EMSF (état basal) montre une tendance plus faible pour le lot R que pour le
lot S (4.3 % +/-1.9 et 6.9% +/-1.4 respectivement). De plus, le pourcentage de
CNA augmente avec le contact du V. tapetis pour les deux lots R et S (7.6%
est obtenue pour les deux conditions EMSF et V. tapetis. De plus, les erreurs
standards sont fortes à cause de la variabilité interindividuelle dans chacune
des populations.
La valeur du ratio du lot R est plus forte que celui du lot S (2.7 et 1.9
respectivement).
2-2 Corrélations entre paramètres hémocytaires
Les moyennes de chaque paramètres n’étant pas significativement différents
entre les deux lots des analyses de corrélations entre paramètres et donc plus
au niveau individuel ont permis d’observer des différences entre les deux lots.
Les corrélations significatives (p<0.05) obtenues entre les paramètres
hémocytaires ne se retrouvent pas d’un lot à l’autre (Tab. 8). En effet, des
corrélations entre la THC et le pourcentage de CNA en EMSF et la production
de ROS observées dans le lot R n’existent pas dans le lot S. Inversement, le
ratio entre cellules non adhérées et la phagocytose ainsi que les
pourcentages de CNA en EMSF et en contact avec V. tapetis sont corrélés
dans le lot S et non corrélés dans le lot R. Cependant des corrélations
persistent au niveau des deux lots : Ratio-THC et Ratio-pourcentage cellules
non adhérées en EMSF.
D’autre part, la tendance observée pour la droite de régression entre la
phagocytose et le nombre de cellules non adhérées en EMSF est inversée
entre les deux lots. Elle est positive pour le lot R (0.36) et négative pour le lot
S (-0.38). Lorsque le nombre de CNA en EMSF augmente, la phagocytose
augmente pour le lot R mais elle diminue pour le lot S.
Tab.8: Coefficients de corrélation entre les paramètres hémocytaires pour les lots R et S. [THC] concentration totale en hémocytes cellules.ml-1, viabilité en % de cellules vivantes, Phago= activité phagocytaire en % de cellules phagocytaires, production de ROS entre les deux conditions EMSF et Vt en U. A, CNA : pourcentage de cellules non adhérées en EMSF et avec V. tapetis (Vt), ratio d’adhérence. * indique une corrélation significative pour P<0.05.
R
Viabilité CNA
EMSF CNA Vt Ratio Phago
ROS EMSF ROS Vt ROS production THC x105 0,38 (-)0,52 * (-)0,06 0,46 * (-)0,15 (-)0,75 * (-)0,40 0,54 * Viab (-)0,36 0,2 0,35 0,62* (-)0,55 (-)0,08 0,63 * CNA EMSF 0,27 (-)0,63 * 0,36 0,47 0,02 (-)0,43 CNA Vt 0,43 * 0,34 0,32 0,44 (-)0,35 Ratio 0,27 (-)0,27 (-)0,41 (-)0,09 Phago 0,22 0,36 (-)0,06 ROS EMSF 0,86 * (-)0,68 ROS Vt (-)0,42 S THC 0,29 (-)0,32 0,03 0,43* 0,31 (-)0,75 * (-)0,67 * 0,5 Viab (-)0,34 0,1 0,61* 0,26 (-)0,39 (-)0,32 0,18 CNA EMSF 0,71* (-)0,45* (-)0,38 0 (-)0,10 (-)0,26 CNA Vt 0,26 0,1 (-)0,22 (-)0,31 (-)0,25 Ratio 0,66* (-)0,41 (-)0,29 0,17 Phago (-)0,31 (-)0,33 (-)0,03 ROS EMSF 0,87 * (-)0,46 ROS Vt 0