Présentation du laboratoire

Le laboratoire du CHD Mono/Couffo dispose d’un bureau ; de toilettes ; d’une salle de garde ; d’une laverie et d’une salle de prélèvement où l’on reçoit les patients provenant des différents services du centre et de l’extérieur, tous les jours ouvrables de 08 heures à 10 heures. Les prélèvements biologiques effectués sont ensuite répartis en trois sections :

 Section Hématologie-Parasitologie où se déroulent les examens hématologiques tels que : NFS (Numération Formule Sanguine), VS (Vitesse de Sédimentation), TS (Temps de Saignement), TC (Temps de coagulation), TE (Test d’Emel) et les examens parasitologiques tels que : GE-DP (Goutte Epaisse + Densité Parasitaire), AKOP (Amibes KystesŒufs et Parasites), FS-DP (Frottis Sanguin + Densité Parasitaire).

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 Section Bactériologie où se déroulent les principaux examens cytobactériologiques complétés par l’antibiogramme, le cas échéant : ECBU (Examen Cytobactériologique des Urines), PV (Prélèvement Vaginal), PU (Prélèvement Urétrale), spermogramme et coproculture.

 Section Biochimie-Sérologie où se sont déroulés nos travaux pour le rapport de stage. On y effectue : la glycémie, l’urémie, la créatinémie, la calcémie, la magnésémie, l’uricémie, la protidémie, le dosage des triglycérides des transaminases (TGO-TGP), du cholestérol (Total et HDL) et de la bilirubine, le ionogramme, SDW (Sérodiagnostic de Widal et Félix), la recherche de ASLO (Anticorps anti-Streptolysine O) et de la CRP (Protéine C Réactive), sérologie HIV.

2.2. MATERIEL

Matériel analytique

Appareil d’ionogramme à électrodes spécifiques de marque Humalyte Plus³ Human, centrifugeuse, micropipettes, tubes aliquotés.

Réactif

Matériel biologique : sérum Autres matériels

Registre de biochimie ; dossiers des patients reçus en cardiologie ; gants ; marqueurs; stylos; cônes jaunes et bleus stériles (embouts jaunes et bleus); papier hygiénique.

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2.3. METHODE D’ETUDE 2.3.1. Type d’étude

Il s’agit d’une étude analytique rétrospective, prospective, transversale et cas-témoin.

2.3.2. Echantillonnage

Notre échantillon est composé de deux sous populations (la sous-population témoin et la sous-sous-population cas :

- La sous-population témoin est composée de sujets venus au laboratoire pour un bilan systématique de santé

- La sous-population cas est composée de patients reçus en consultation dans le service de cardiologie.

L’une des étapes les plus importantes a été la sélection des échantillons.

Critères d’inclusion de la sous-population témoin

Tous les patients ayant un bilan systématique de santé et n’ayant pas pour antécédents médicaux une pathologie cardiovasculaire.

Critères d’inclusion de la sous population-cas

Tous les patients reçus en consultation en service de cardiologie et qui présentent une pathologie cardiaque.

Critère de non inclusion de la sous population-témoin

Tous les patients ayant un bilan systématique de santé et ayant pour antécédents médicaux une pathologie cardiovasculaire ou toute autre affection susceptible d’influencer le ionogramme sanguin.

Critères de non inclusion de la sous population-cas

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Il s’agit des patients présentant d’autres pathologies susceptibles d’influencer l’ionogramme sanguin comme l’insuffisance rénale, les troubles digestives (diarrhée, vomissement…) etc.

2.3.3. Manipulation

Etude rétrospective

Elle a consisté à recueillir les données cliniques des patients après étude minutieuse de leurs dossiers médicaux dans le service de cardiologie à l’aide d’un questionnaire d’enquête (voir fiche d’enquête en annexe).

Etude prospective

Lors de cette étude nous avons effectué des prélèvements veineux chez les patients reçus en consultation dans le service de cardiologie et chez des patients venus pour un bilan systématique dans la période du 02 Juin au 05 Septembre 2014. Ces échantillons, après centrifugation, sont utilisés pour déterminer le ionogramme sanguin.

 Phase pré analytique :

Les prélèvements sont faits chez les malades à jeun le matin. Il s’agit de prélèvements veineux. A cet effet il faut :

- apprêter le matériel de prélèvement ;

- identifier le tube de prélèvement (tube sec) ; - installer le patient ;

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- rechercher et choisir la veine à ponctionner au pli du coude ou au dos de la main ;

- désinfecter la partie de la peau à ponctionner à l’aide d’un tampon d’alcool iodé ;

- adapter l’aiguille au corps vacuténaire ;

- retirer le couvercle de protection de l’aiguille ;

- réaliser la ponction en respectant la quantité de sang correspondant au tube ;

- placer le tampon au niveau de la partie ponctionnée ; - retirer délicatement l’aiguille ;

- attendre l’arrêt du saignement pour mettre un pansement.

Les différents échantillons recueillis sont acheminés en biochimie, puis centrifugés à 3000 tours/min pendant 10 minutes en vue de séparer le sérum du culot. Le matériel de travail réuni ; la fiche de paillasse est ensuite réalisée : elle comporte les numéros d’enregistrement des patients à inclure dans l’étude.

 Phase analytique

La méthode de dosage utilisée est celle potentiométrique utilisant des électrodes spécifiques. Ainsi, pour le dosage, on dispose dans un portoir, les sérums recueillis suivant l’ordre des numéros des prélèvements. Après avoir allumé l’automate, on lui présente d’abord la solution de nettoyage qu’il aspire grâce à son aspirateur automatique

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puis la solution de conditionnement. Après cette étape, on réalise le calibrage de l’appareil. Ensuite, on lui fait aspirer le contrôle et lorsque les valeurs du contrôle sont dans l’intervalle de confiance indiqué par le fabricant, on démarre les dosages. On passe ensuite la solution de nettoyage à la fin des manipulations et l’automate passe en stand-by.

N.B. : Après une série de dosages, il est important de revérifier les valeurs du contrôle, afin de s’assurer que l’on demeure dans l’intervalle de confiance.

 Phase post-analytique

Après chaque dosage, les valeurs trouvées sont relevées dans le cahier de paillasse. Le matériel est alors rangé et la paillasse nettoyée.

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