p40, GATA-3 et d'uroplakin II : (169)

L'analyse immunohistochimique (IHC) du carcinome urothélial présente un intérêt diagnostique dans plusieurs contextes, tels que l'exclusion de l'atteinte secondaire de la vessie par un carcinome survenant sur un autre site ou l'identification du site d'origine des lésions métastatiques d’une tumeur primaire inconnue. Historiquement, de nombreux anticorps utilisés dans ce contexte montrent un manque de spécificité, mais conservent leur utilité lorsqu'ils sont utilisés en tant que un panneau de diagnostic. Ces anticorps comprennent les cytokératines de haut poids moléculaire, la cytokératine 7, la cytokératine 20, la p63, la thrombomoduline et le GATA-3 (170). Des anticorps plus spécifiques ont été mieux acceptés, notamment le S100P, qui est exprimé dans les lésions urothéliales et pancréatico-biliaires, et l'uroplakine III (UPIII), qui semble spécifique à l'origine urothéliale (171). Cependant, la sensibilité plus faible à la fois du S100P et de l'UPIII dans le cancer de la vessie infiltrant de haut grade (172–174) a incité le développement de nouveaux marqueurs d’IHC.

Biocare Medical a récemment mis au point un anticorps commercial UPII et plusieurs études ont évalué sa sensibilité par rapport à UPIII, ainsi que son utilité en tant que marqueur diagnostic d’IHC avec GATA-3 (175-179). Les protéines uroplakiniques sont des protéines transmembranaires hautement conservées qui jouent un rôle clé dans la plaque urothéliale (180–182). L’expression relativement restrictive de ces protéines dans l’urothélium suscite depuis longtemps un intérêt pour les applications diagnostiques du carcinome urothélial (183,184) .Par exemple, le premier anticorps primaire anti-UPII a été développé chez le lapin et ciblait un épitope d’UPII bovin conservé en 1995 ; cet anticorps a montré une forte immuno-réactivité contre la couche cellulaire superficielle d'urothélium humain normal et une spécificité pour le carcinome urothélial par rapport aux carcinomes survenant dans d'autres sites. (183)

L'anticorps UPII nouvellement commercialisé présente une spécificité similaire, mais avec une sensibilité améliorée par rapport à UPIII. La sensibilité UPII versus UPIII dans le carcinome urothélial invasif de la vessie a été montrée dans une étude sur 16 cas avec une sensibilité de 63% contre 19% et dans une autre étude portant sur 174 cas de grades et de stades variés, une sensibilité de 77% contre 54 % (177,179). Dans les carcinomes urothéliaux non invasifs allant de tumeur urothéliale papillaire à faible potentiel de malignité (PUNLMP) à un carcinome papillaire urothélial de haut grade, UPII a été rapporté comme colorant > 90% des cas (175), bien qu'un cas distinct semble avoir été détecté dans le tractus supérieur retenus principalement dans les couches cellulaires superficielles des lésions de bas grade (178). L’UPII a également montré une sensibilité améliorée par rapport à l’UPIII dans les carcinomes urothéliaux plasmacytoïdes, micropapillaires et sarcomatoïdes, bien que le nombre des cas de plasmacytoïde ait été quelque peu limité dans deux études (178,179). Les

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carcinomes urothéliaux invasives présentent une gamme de fréquences d'immuno-réactivité, avec 44 à 78% des cas étant positifs pour UPII (175, 178,179). Cependant, dans toutes les comparaisons, la sensibilité de l’UPII était supérieure à celle de l’UPIII.

LEIVO et al (169) ont identifié des patients atteints d'une TVIM grâce à une recherche dans la base de données de l'Université de Californie à San Diego. Ils ont évalué l'application diagnostique et pronostique des anticorps anti-uroplakine II et p40 plus récemment développés dans le cadre d'un carcinome urothélial métastatique et infiltrant et ont testé la valeur supplémentaire de l'incorporation de GATA-3 dans ce panneau.

Donc, ils se sont principalement intéressés à l'utilisation de l'UPII dans le cadre du diagnostic avancé du cancer infiltrant de la vessie et ont utilisé des métastases ganglionnaires couplées pour évaluer les changements d'expression au sein d'un patient donné. Quel que soit le niveau d'immuno-réactivité utilisé, 80% des carcinomes urothéliaux infiltrant le muscle étaient positifs pour l'UPII, mais cette proportion est tombée à 74% lorsque seule une immuno-réactivité modérée à intense a été envisagée. Utilisés conjointement avec GATA-3 et p40, aucun carcinome primitif de la vessie ou lésion métastatique n'était négatif pour les trois marqueurs. Ceci suggère qu'une combinaison de GATA-3, UPII et p40 utilisée avec des marqueurs immuno-histochimiques plus conventionnels, mais moins spécifiques, peut être utile pour identifier l'origine urothéliale dans les cas difficiles et peut être immuno-réactive dans un pourcentage plus élevé du carcinome urothélial invasif que précédemment rapporté (176). Cependant, contrairement à GATA-3 et p40, les métastases ganglionnaires étaient moins susceptibles de perdre l'expression de l'UPII, rendant ainsi l'addition de l'UPII à l'évaluation des métastases d'origine inconnue de valeur potentielle. (Figure 24)

Figure 24: Histologie d'un carcinome urothélial invasif utilisant l'hématoxyline et l'éosine et marqueurs IHC présentant des profils positifs (score 3+), où GATA-3 et p40 présentaient une coloration nucléaire et UPII présentait une expression membraneuse et

cytoplasmique diffuse.

Parallèlement à l'analyse de l'étude de l’UPII, on a également incorporé un autre anticorps monoclonal de souris récemment développé contre la p40 (∆Np63) par Biocare Medical (BC28), dont la variabilité est inférieure à celle des anticorps commerciaux existants (185). P40 représente un isoforme plus court du produit du gène TP63 auquel manque le domaine de trans-activation situé dans la région N-terminale (∆Np63) (186). Des études sur des échantillons de cancer du poumon ont montré que l'expression de p40 était limitée au carcinome épidermoïde et était fortement associée aux altérations de p53 (185 ,187-190). Plus récemment, BC28 a montré une immuno-réactivité dans > 80% des cas de cancer de la peau, de carcinome épidermoïde cervico-facial et de carcinome urothélial, mais absence d’expression dans d’autres cancers,

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notamment l’adénocarcinome de la prostate et le cancer du sein (185). L'ampleur de la différenciation squameuse dans cette population du carcinome urothélial n'a pas été décrite, bien que l'expression de p63 et son isoforme de p40 partagent probablement des profils d'expression similaires dans ces populations tumorales. Malgré que l'utilisation de p40 en tant que partie d'un panneau de diagnostic puisse être utile dans le carcinome urothélial, son application unique dans ce contexte peut être limitée. En outre, l'utilisation de ce panneau peut également être utile dans des contextes de diagnostic difficiles, tels que la distinction entre le carcinome urothélial métastatique et le carcinome épidermoïde du poumon. (176)

On a testé la capacité de GATA-3, UPII et p40 à prédire la récidive et la survie globale, ce qui incluait une maladie métastatique progressive chez 43 patients sur 89 et le décès par la maladie chez 55 patients sur 89. Etant donné l’expression fréquente de GATA-3 et d’UPII dans cette population, aucune différence significative dans les modèles d'expression de ces deux marqueurs n'a été observée, avec un seuil de n'importe quelle expression par rapport à aucune expression ou une expression de bas niveau (0–1 +) par rapport à une expression de haut niveau (2–3 +). En revanche, l’expression de forte intensité de p40 dans le cancer de la vessie primitive était associée à une survie sans récidive et à une survie globale raccourcie de manière significative. Bien que non significative dans l'analyse univariée, l'intensité de 3+ de la coloration p40 était significative dans l'analyse multivariée, ce qui peut être le résultat d'une taille d'échantillon déséquilibrée, d'une variation de groupe ou de la présence d'une interaction. (191,192)

Des études antérieures évaluant le rôle pronostique de p63 et p40 ont donné des résultats mixtes. Plusieurs études ont évalué le rôle pronostique de p63 chez les patients atteints d'un cancer de la vessie, présentant une rétention de p63 associée à l'absence d'effet ou à un pronostic plus sombre (193–195). Deux études ont montré que l’expression de la protéine p40 (∆Np63) conférait une probabilité plus élevée de progression de la maladie dans la TVIM (193,195), bien qu'une étude récente portant sur des patients avec pT1 tumeur ait montré que la perte d'expression de p40 est associée à un risque plus élevé de progression (194). Les données de LEIVO et al étude suggèrent que la rétention de p40, du moins dans le contexte de tumeur infiltrant de vessie, était associée à une probabilité accrue de progression et de décès par la maladie, quel que soit le statut des ganglions lymphatiques. (Figure 25)

Figure 25: Réduction de la survie globale des patients à forte expression de p40 (intensité 3+), quelle que soit la métastase ganglionnaire.(A) Patient avec métastase

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Le mécanisme oncogène de p40 (∆Np63) n’est pas bien défini, bien qu’une étude récente ait démontré une explication plausible (196) et proposé que p40 puisse augmenter les niveaux d’ARNm et de protéines de la MTSS1, une protéine impliquée dans la promotion de la migration cellulaire et l'invasion par la réorganisation du cytosquelette d'actine. Tandis que la capacité de pro-migratoire in vitro n’a été démontrée que dans les lignées cellulaires du cancer du sein, l’analyse de 138 échantillons de cancer de la vessie a également montré une forte corrélation entre l’expression de l’isoforme ∆Np63 et l’expression de MTSS1, ce qui suggère que l’axe p40 / MTSS1 pourrait également être impliqué dans la migration cellulaire et l’invasion du cancer de vessie. Une autre étude suggère que le p40 retenu et / ou élevé pourrait être associé à un sous-ensemble de carcinomes urothéliaux agressifs qui maintiennent l'expression de la famille miR200 et de l’E-cadhérine. (193,197)

Enfin, l'expression de p40 dans le carcinome urothélial peut être liée aux sous-types moléculaires responsables du cancer de la vessie, bien que cela n'ait pas été exploré dans LEIVO et al étude. Plus précisément, l'expression des marqueurs baso-cellulaires tels que p63 et probablement p40 a été associée à une probabilité accrue de maladie agressive (198). Des études évaluant l'expression persistante des marqueurs épithéliaux dans le cancer invasive de la vessie, et leur relation avec le processus de TEM et la réponse thérapeutique, sont nécessaires pour répondre à cette question.

En conclusion, les anticorps UPII et p40 récemment développés peuvent être des outils additionnels utiles dans les carcinomes urothéliaux métastatiques et invasifs de la vessie. Des études supplémentaires évaluant une population prospective plus importante des patients présentant un cancer de vessie infiltrant le muscle pourraient être utiles, en particulier dans le contexte du rôle de p40 dans la progression de la maladie.