BACTEC
L’appareil utilisé au sein de notre laboratoire pour l’analyse des hémocultures, est le BD BACTEC™ 9050. L’automate requiert des milieux de culture perfectionnés, contenant un milieu de culture liquide enrichi. Il assure une agitation continuelle des flacons et une lecture automatique, toutes les 10 minutes, basée sur la mesure du CO2 produit par le métabolisme des micro-organismes. Ainsi, plus le délai d’acheminement du prélèvement est retardé, plus les quantités de CO2 déjà produites par les éventuels microorganismes présents, ne seront pas mesurées par le BACTEC et plus le risque de faux négatifs augmente.
Matériel
Flacons d’hémoculture : [38]
BBDDBBAACCTTEECC™™MMyyccoossiissIICC//FF, étiquette verte. Milieu ppoouurrllaarreecchheerrcchheeeettllaammiissee eenn ccuullttuurree de levures et champignons. Ces milieux ccoonnttiieennnneenntt ddeess aannttiibbiioottiiqquuees s évitant la prolifération bactérienne. Le ffllaaccoonnccoonnttiieenntt4400mmL deL bouillon trypticase soja enrichi, avec agents lytiques.
BBDD BBAACCTTEECC™™ PPeeddss PPlluuss//FF, étiquette rose. Adaptés aux prélèvements
pédiatriques, pour des volumes de prélèvements inférieurs à 3mL. Le flacon contient 40mL de bouillon trypticase soja enrichi avec résines.
Assortiment de dispositifs pour prélèvement sanguin.
Thermomètre.
Traitement anti-infectueux Avant la mise en route du traitement pour identifier le microbe en cause; ou au cours du
traitement pour vérifier son efficacité. Température corporelle
De préférence au moment du pic fébrile ou des frissons; ou en cas d'hypothermie. Supicion d'infection sur dispositif Directement sur une chambre implantable ou un
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Technique
Désinfection cutanée correcte à base d’alcool et/ou d’un antiseptique iodé.
Prélèvement par ponction veineuse directe périphérique, ou dans certains cas par voie veineuse centrale (chambre implantable, cathéter veineux central).
Volumes de prélèvement : 10-30mL chez l’adulte, 5mL chez l’enfant et 2mL chez le nouveau-né.
Nombre de prélèvements (à raison de deux flacons par prélèvement) : 3 chez l’adulte, ou plus en cas d’endocardite infectieuse. Chez le nouveau-né, il est admis de se contenter d’un seul prélèvement pour dépister une infection néonatale. [39]
Conservation et transport
Conservation à température ambiante.
Délai d’acheminement : le plus rapidement possible. Le risque de faux négatifs est nul si le délai de pré-incubation est <12h. [30]
Précautions de prélèvement
Le volume sanguin recueilli et la qualité de l’antisepsie sont des facteurs clés pour un prélèvement réussi.
Eviter de prélever directement dans un cathéter.
Désinfecter l’opercule du flacon d’hémoculture (à l’alcool 70°).
Remplir la demande de l’examen en précisant l’heure du prélèvement, la température du malade et la nature du traitement anti-infectieux éventuel.
Identifier le flacon d’hémoculture, et éviter de cacher son code à barre nécessaire pour la lecture du flacon par l’automate.
PR E L E VE M EN T DE S A N G C HE Z UN E NF A NT O U U N N O U VE A U-N E En pédiatrie, le prélèvement sanguin se réalise souvent au doigt ou au talon, également appelé prélèvement capillaire ou ponction cutanée. Le choix du site de prélèvement, dépend de l’âge et du poids de l’enfant.
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TABLEAU 9: CRITERES DE CHOI X ENTRE UN PRELEVEMENT AU DOIGT O U AU TALON[3 2 ]
Recommandations Prélèvement au talon Prélèvement au doigt Age De la naissance à environ 6 mois ≥ 6mois
Poids 3-10 kg > 10kg
Positionnement de la lancette
Sur la face plantaire médiale ou latérale
Sur le côté de la partie charnue du doigt, perpendiculairement aux lignes de l’emprunte digitale.
Doigt
recommandé
_ 2ème et 3ème doigt (le médium et l’annulaire) ; éviter le pousse et l’index en raison des callosités, ainsi que le petit doigt car les tissus sont très fins.
L’immobilisation du patient est cruciale pour la sécurité de l’enfant.
Ne pas utiliser de la povidone iodée pour une ponction capillaire chez un patient pédiatrique. Appliquer de l’alcool au site d’entrée et laisser sécher à l’air.
Perforer la peau avec un mouvement rapide, continu et mesuré.
Essuyer la première goutte de sang car elle peut être contaminée.
Une fois le prélèvement achevé, appuyer fermement sur le site de ponction pour stopper le saignement.
7. P
R ELE VEME NT S DES LIQUID ES BIOL OGI Q UESLI Q U I D E C EP H A L O-R A C HI DI E N [ 6 4 ] ; [ 6 5 ]
Le prélèvement de liquide céphalo-rachidien (LCR) se fait habituellement par ponction lombaire dans l’espace L4-L5 ou L5-S1. [44]
Indications
[44] Syndrome méningé ;
Infection materno-fœtale pour éliminer toute atteinte méningée secondaire ;
Contrôle de l’efficacité d’un éventuel traitement anti-infectieux (48 à 36 heures après le début du traitement).
L’aide soignant tient l’enfant délicatement pour l’immobiliser
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Matériel
Aiguille à ponction lombaire
Aiguilles de calibre 25G et de calibre 22G
Tubes de prélèvements à fond conique stériles
Compresses de gaze stériles
Pansement adhésif
Gants de soins stériles
Masque
Container à objets piquants
Technique
Position du patient :
En décubitus latéral OU
En position assise
POSI TION E N DE CUBIT US L AT ER AL- PO SITION ASSI SE
La ponction lombaire est effectuée dans l’espace interépineux L4-L5 ou L5-S1.
Nettoyer la zone de ponction et aseptiser rigoureusement, d’un geste centrifuge, 3 fois à partir du site de ponction.
Anesthésie locale : [66] ; [67]
A l’aide d’une aiguille de calibre 25G, créer un bouton intradermique au point d’insertion en injectant de la lidocaïne 1%.
A l’aide d’une aiguille de calibre 22G, injecter 3mL de lidocaïne dans la région sous-cutanée et l’espace interépineux.
Attendre 1 à 2 minutes pour que l’anesthésie fasse effet.
Le dos est arrondi en « position fœtale », assurant une flexion maximale de la colonne
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Insertion de l’aiguille :
Prévenir le patient au moment de l’insertion pour qu’il reste immobile.
Diriger le biseau de l’aiguille vers le haut, si le patient est en décubitus latéral, ou vers le côté s’il est assis.
Insérer l’aiguille avec un angle d’environ 10° en direction céphalique, jusqu’à ce que la résistance se relâche soudainement, signifiant que la dure-mère a été franchie.
Il faut attendre 2 secondes pour que le LCR commence à s’écouler.
Prélever une quantité moyenne de 3mL, recueillie dans trois tubes stériles numérotés 1, 2 et 3 servant respectivement à l’examen biochimique, microbiologique et cytologique.
Retrait de l’aiguille :
Replacer entièrement le mandrin dans l’aiguille spinale.
Retirer l’aiguille, et appliquer une pression sur le site de ponction avec une compresse de gaze.
Désinfecter et mettre un pansement adhésif.
Conservation et transport
Immédiatement (en moins de 30 minutes), en raison de la lyse rapide des polynucléaires (jusqu’à 50% en 2 heures), à température ambiante (l’abri du froid en raison de la fragilité de certains microorganismes).