La synthèse directe de nanoparticules en solution aqueuse fournit des nanoobjets directement dispersés dans l’eau ce qui est une condition sine qua non pour toute application en milieu biologique. Cette voie de synthèse a été utilisée pour de nombreux systèmes (Au, Fe3O4, Co,
Ni, CdTe)20, 21, 22, 23 et 24 mais le contrôle en taille reste limité, ce qui est contraignant pour l’obtention de nanoparticules aux propriétés bien définies (e.g. semi-conducteurs, nanoparticules magnétiques, …). En revanche, la synthèse d’hybrides IO et IIO en solution organique par décomposition de précurseurs métal-organique conduit à des objets mieux définis en taille et en forme. Néanmoins, la couche organique hydrophobe dont ces hybrides sont recouverts doit être modifiée notamment pour permettre leur dispersion en milieu aqueux. Nous nous intéresserons donc, aux travers d’exemples marquants, aux différentes stratégies mises en œuvre pour transférer en milieu aqueux des nanomatériaux hybrides synthétisés en solution organique.
2-1-Synthèse directe
Il est possible d’accéder directement à des nanoparticules solubles dans l’eau en choisissant judicieusement le type de tensioactifs utilisé. Ainsi, Thanh et al. ont pu synthétiser des nanoparticules de cobalt en décomposant thermiquement Co2(CO)8 dans le toluène en
présence d’un peptide capable à la fois de contrôler la taille et la forme des nanoparticules mais aussi de permettre leur transfert dans l’eau sans fonctionnalisation ultérieure.25 Le même groupe a par la suite développé la synthèse one-pot de nanoparticules de Co ou de γ-Fe2O3 par
décomposition thermique de Co2(CO)8 ou Fe(CO)5 respectivement dans le 1,2-
dichlorobenzène et le dioctyléther en présence d’un polymère dont la solubilité est dépendante de la température. Ainsi, ce dérivé du poly(N-isopropyl-co-t-butylacrylamide) est soluble à chaud dans les solvants organiques et facilite la synthèse de nanoparticules monodisperses. En revanche, lorsque la solution colloïdale est refroidie en dessous d’une température critique le polymère devient hydrophile et les nanoparticules précipitent. Le solvant organique peut alors directement être remplacé par de l’eau et permettre l’obtention d’une solution colloïdale stable dans des conditions normales de température (< 37 °C).26
Au sein, de notre équipe des nanoparticules de Ru et de Pt solubles dans l’eau ont pu être obtenues par réduction sous pression de dihydrogène de précurseur organométallique dans le THF en présence de PTA (fig. 4-1). La coordination de l’atome de phosphore à la surface des nanoparticules de Ru ou Pt permet, après retrait du THF et ajout d’eau, l’obtention de solution colloïdale.27
Figure 4-1: Synthèse directe de nanoparticules monodisperses de Ru et Pt solubles dans l’eau
L’obtention par synthèse directe de nanoparticules solubles dans l’eau est une méthode attrayante mais n’est envisageable que pour certains systèmes. Dans la majorité des cas, le transfert de nanoparticules n’est possible qu’en modifiant la couche organique après synthèse.
2-2-Transfert par modification des ligands de surface
Comme nous avons pu le voir au travers de nombreux exemples, l’acide oléique est un ligand largement utilisé pour la synthèse et la stabilisation de cœurs métalliques et d’oxydes métalliques en phase organique. Récemment, Herranz et al. ont proposé de modifier les ligands hydrophobes passivant la surface de nanoparticules de Fe2O3 après synthèse,
en oxydant la double liaison de l’acide oléique par le permanganate de potassium (KMnO4).
Les nanoparticules ainsi modifiées comportent des groupements acides en surface assurant la dispersion en milieu aqueux et permettant une fonctionnalisation ultérieure par réaction entre ces groupements acides carboxyliques et des amines (fig. 4-2).28
Figure 4-2 : Transfert dans l’eau de nanoparticules d’oxyde de fer par oxydation des ligands acide oléique à la surface suivie de leur fonctionnalisation dans l’eau.
Cette technique pourrait être étendue à d’autres cœurs oxyde. C’est une alternative aux approches d’échange et d’addition de ligands communément utilisées pour le transfert de nanoparticules en phase aqueuse, que nous allons présenter par la suite.
2-3-Transfert par échange de ligands
La stratégie de transfert dans l’eau par échange de ligands tire parti de l’équilibre rapide qui s’établit entre les ligands liés à la surface des nanoparticules et les ligands en solution. Ce processus permet de remplacer les tensioactifs originels par des ligands ou des polymères ayant une meilleure affinité pour la nanoparticule et dotés d’une partie hydrophile assurant le transfert en milieu aqueux (Cf. Chap. 1 § 2-3).
Les groupements acide carboxylique ont une bonne affinité pour les oxydes métalliques et notamment les oxydes de fer, 29 cette affinité est meilleure dans le cas d’une accroche bidentate. Ainsi, Chen et al. ont remplacé l’acide oléique recouvrant les nanoparticules d’oxyde de fer Fe3O4 par le ligand DMSA (HOOC-CH(SH)-CH(SH)-COOH). Alors que les
groupements acides se substituent aux ligands d’origines, une double couche se forme par réactions intermoléculaires (formation de ponts disulfure entre les molécules de DMSA), ce qui contribue à la stabilité de la couche organique nouvellement formée. Les groupements carboxylates orientés vers l’extérieur facilitent le transfert des particules dans l’eau et permettent également une fonctionnalisation ultérieure (fig. 4-3).30
Figure 4-3 : Echange de ligands acide oléique par le DMSA à la surface de nanoparticules de Fe3O4.30
Les ligands fonctionnalisés par des thiols qui présentent une énergie de liaison forte à la surface des métaux tels que Au, Ag, Pt, Pd, …, sont couramment utilisés pour le transfert des nanoparticules. Ainsi, Kumagai et al. ont décrit la synthèse d’hybrides IIO γ-Fe2O3@Au
stabilisés par les ligands oleylamine et acide oléique issus de la synthèse. Ces tensioactifs hydrophobes sont échangés par des ligands thiolés dérivés du polyéthylène glycol (MeO- PEG-SH, M=2000 g.mol-1) ce qui permet le transfert de ces hybrides en milieu aqueux.31 Les nanocristaux semi-conducteurs présentent un potentiel certain pour des applications dans le domaine biomédical (détection, imagerie, …)32 et sont couramment synthétisés à haute température en présence d’oxyde de trioctylphosphine (TOPO) ou de trioctylphosphine (TOP). Afin de solubiliser ces particules dans l’eau, l’échange de ligands par des molécules hydrophiles comme les acides mercaptocarboxylique (HS-(CH2)n-COOH n=1-15) est courant
(fig. 4-4). De même l’utilisation de molécules naturelles comme des peptides composés de motifs cystéine (acide aminé comportant une fonction thiol) a été expérimentée avec succès.33,
34
Comme nous l’avons vu dans le chapitre 1, l’échange de ligands par des molécules organosilylées pour former une couche de silice protectrice et biocompatible est également envisageable (cf. fig. 4-4 et chap. 1 § 3-3-2-3).35 Toutefois dans le cas des QD, l’interaction directe de ligands avec la surface des nanoparticules provoque, dans la plupart des cas, une altération du rendement quantique.
Figure 4-4 : Schéma d’échange des ligands TOPO à la surface de nanocristaux semi- conducteurs par des espèces organosilylées ou des acides mercaptocarboxyliques.35
C’est pourquoi, Kim et al. ont développé un polymère oxyde de phosphine substitué par des groupements poly(éthylèneglycol) (PEG, voir fig. 4-5), les nanoparticules semi-conductrices CdSe/ZnS ainsi fonctionnalisées conservent leur propriétés de luminescence. De plus, ce polymère permet également le transfert d’autres types de nanoparticules (Au, Pd, Fe2O3) en
solution aqueuse.36 Plus récemment, Na et al ont décrit la synthèse de ligands oxyde de phosphine-PEG par simple réaction de POCl3 et PEG et ont réalisé avec succès l’échange de
ligands à la surface de diverses nanoparticules synthétisées en solution organique (Fe3O4,
CoO, NiO, MnO et TiO2) et leur transfert dans l’eau.37
Figure 4-5 : Polymère oxyde de phosphine PEGylé.36
Les groupements phosphate et phosphonate ont également la capacité de se lier avec le même type de nanoparticules oxyde métallique que les ligands oxydes de phosphine cités préalablement et sont de bons groupements d’accroche pour les oxydes de fer. Ainsi, Daou et al. ont développé des dendrons PEGylés comportant des groupements phosphonate capables de fonctionnaliser et stabiliser des nanoparticules d’oxyde de fer en milieu aqueux.38
D’autres types d’accroches existent pour fonctionnaliser la surface de SPION pour des applications biomédicales (dopamine, silane,…).39
De nombreuses molécules ont été développées pour le transfert en milieu aqueux par échange de ligands. Cependant il n’existe pas de méthode universelle, l’efficacité de ce mode de transfert est dépendant de la nature de la nanoparticule et des ligands présents à sa surface, c’est pourquoi le ligand substituant doit être développé en conséquence. L’un des inconvénients de cette technique est que l’échange par un ligand plus coordinant peut affecter la chimie de surface de la nanoparticule, dans certains cas, un transfert par addition de ligands sera privilégié pour ne pas modifier les propriétés des nanoobjets.
2-4-Transfert par addition de ligands
Le transfert par addition de ligands, également évoqué au chapitre 1 (§ 2-3), consiste à modifier la surface des nanoparticules tout en conservant les ligands issus de la synthèse. Ainsi, une première approche consiste à utiliser des polymères synthétiques hydrosolubles qui pourront s’adsorber sur les nanoparticules de façon non covalentes : la polyvinylpyrrolidone PVP,40 le poly(acétate de vinyle) PVA,41 sont quelques exemples parmi d’autres (cf. revue42).
Une technique originale proposée par Wang et al. consiste à modifier la surface de nanoparticules par addition de α-cyclodextrine (oligosaccharide cyclique). La formation de complexes hôte-invité entre les macromolécules cycliques hydrophiles et les ligands acide oléique présents à la surface de la nanoparticule d’Ag (ou Fe2O3) permet la dispersion des
nanoparticules en phase aqueuse (fig. 4-6).43
Figure 4-6 : Représentation schématique de l’α-cyclodextrine et de son action sur les nanoparticules passivée par l’acide oléique en milieu biphasique.43
Plus généralement, l’addition de ligands met en jeu la partie hydrophobe (chaînes carbonées) des ligands issus de la synthèse pour former, après addition de ligands ou de polymères, une double couche par interaction hydrophobe-hydrophobe, la solubilité en phase aqueuse étant engendrée par les parties hydrophiles orientées vers l’extérieur. Cette approche est prometteuse, notamment dans le cas des nanocristaux semi-conducteurs, puisqu’il n’y a pas d’interactions directes supplémentaires avec les atomes de surface, les propriétés de luminescence ne sont alors pas altérées (fig. 4-7)
Figure 4-7 : Schéma d’encapsulation de nanocristaux semi-conducteurs(QD) par interaction hydrophobe entre les ligands TOPO à la surface et des polymères à longues chaînes alkyles.35
Zhang et al. ont développé une méthode pour fonctionnaliser des QD de CdTe synthétisés dans l’eau sans en affecter les propriétés. Ainsi, les QD obtenues dans l’eau ont une couche organique recouverte d’acide 3-mercaptocarboxylique. Les fonctions carboxylates orientées vers l’extérieur sont dans un premier temps fonctionnalisées par le bromure de diméthyldioctadécylammonium permettant le transfert des QD dans le chloroforme. Dans une deuxième étape, l’addition de tensioactifs à longues chaînes alkyles permet la formation d’une double couche et le retour des QD en phase aqueuse. Le type de tensioactif utilisé permet de faire varier les fonctions chimiques à la surface des nanocristaux semi-conducteurs (fig. 4- 8).44
Figure 4-8 : Schéma de la fonctionnalisation de nanocristaux semi-conducteurs CdTe modifiés par un bromure de diméthyldioctadécylammonium. Avec R le groupement
fonctionnel de divers tensioactifs.44
L’addition de ligands peut permettre également le transfert dans l’eau de nanoobjets possédant des chimies de surface différentes. Ainsi, Kim et al. ont pu transférer en milieu aqueux l’hétérodimère Fe3O4-Au stabilisé initialement par l’oleylamine. Pour ce faire,
l’hybride IIO a été modifié par l’adjonction de polymère poly(DMA-r-mPEGMA-r-MA) comportant des chaînes carbonées hydrophobes capables d’interagir par liaison de Van Der Waals avec les ligands d’origine pour former une double couche et des parties PEG hydrophiles (fig. 4-9).6
Figure 4-9 : Transfert en phase aqueuse d’hétérodimères Au-Fe3O4 par adsorption de
poly(DMA-r-mPEGMA-r-MA).6
La formation d’une double couche entre des chaînes hydrophobes n’est pourtant pas une méthode universelle pour le transfert en phase aqueuse. En effet, dans certains cas, les interactions hydrophobe-hydrophobe ne sont pas le moteur de l’adsorption de ligands et d’autres mécanismes doivent être considérés comme la formation de liaisons covalentes entre les ligands ou de liaisons hydrogènes avec les groupements à la surface de la particule. Ainsi, au sein de notre équipe, Rubio-Garcia et al. ont synthétisé des nanoparticules de ZnO hydrophobes stabilisées par de l’oleylamine. Une série de ligands anionique et cationique à longues chaînes alkyles (C12) a été évaluée pour la formation d’une double couche avec
l’oleylamine, mais aucun ligand n’a permis le transfert des nanoparticules dans l’eau suggérant l’absence d’interactions de Van Der Waals. Un transfert efficace n’a pu être réalisé que par l’adsorption d'acide glycolique éthoxylate d’éther CH3-(CH2)m-O-(CH2-CH2-O)n-
CH2-COOH (avec m=11-13 et n = 2, 5 ou 10). La caractérisation de la couche organique par
DLS (Dynamic Light Scattering), mesure du potentiel zeta et expérience RMN (DOSY et NOESY) confirme la formation d’une double couche organique composée du ligand originel et du ligand à base acide glycolique et suggère fortement une interaction spécifique entre ce dernier et la surface de la particule.45
De par les interactions qu’elle met en jeu, la méthode par addition de ligands possède le double avantage de : 1) pouvoir transférer en milieu aqueux de nombreux systèmes hydrophobes en utilisant des tensioactifs ou des polymères commerciaux et donc ne nécessite pas la conception de ligands spécifiques comme c’est le cas pour le transfert par échange de
ligands. 2) conserver les propriétés des hybrides IO et IIO ainsi fonctionnalisés. Toutefois, comme nous l’avons vu dans ce dernier exemple, l’adsorption des ligands n’est pas simplement régit par les interactions hydrophobes et n’est parfois pas aussi direct que ce que la littérature laisse présager.
Comme nous avons pu le voir tout au long du paragraphe 2, les dérivés du poly(éthylène glycol) (PEG) sont largement utilisés pour améliorer la solubilité des nanomatériaux en phase aqueuse. En plus d’augmenter l’hydrophilie des hybrides, le PEG empêche aussi les interactions non spécifiques avec d’autres molécules (e.g. les protéines). Les propriétés du PEG permettent une meilleure furtivité vis-à-vis des macrophages et allongent le temps de circulation dans l’organisme.46 Les glucides tout comme le PEG, ont également la capacité de minimiser certaines interactions spécifiques et leurs réponses immunitaires associées. Cette famille de biomolécules est importante dû à son abondance dans notre organisme, c’est pourquoi nous évoquerons particulièrement ce type de fonctionnalisation organique.