Depuis le début des années 2000, de nombreuses expérimentations in vivo ont été réperto- riées dans la littérature a n de caractériser le pouvoir ostéoconducteur de scaolds en titane. Les caractéristiques des scaolds spéci ques à chaque étude (i.e. porosité, tailles des pores, technique de fabrication, module d'Young et application) sont répertoriées dans les Tableaux I.1, I.2 et I.3). La plupart de ces études ont utilisé les rongeurs tels que les lapins ou les rats comme modèle animal (Takemoto et al., 2005; Otsuki et al., 2006; Lopez-Heredia et al., 2008; Willie et al., 2010; Pattanayak et al., 2011; de Wild et al., 2013; Van der Stok et al., 2013; Zhang et al., 2014). Parmi elles, seulement deux études concernent la reconstruction de defects interrupteurs (Van der Stok et al., 2013; Zhang et al., 2014). Les autres portent sur la reconstruction de defects cylindriques non-interrupteurs. La Figure I.18 présente les deux types de defects répertoriés dans la littérature.
Figure I.18. a) Reconstruction de defects interrupteurs réalisés sur le radius de lapins (Zhang et al., 2014) et b) reconstruction de defects cylindriques réalisés sur le crâne de lapins (de Wild et al., 2013).
Cependant, comme nous le verrons dans le chapitre suivant (chapitre II), bien que leur coût et leur taille rendent le protocole expérimental plus aisé, leur processus de régénération osseuse est très éloigné de celui de l'humain. Il est alors di cile d'extrapoler les résultat à un cas clinique humain. Les gros animaux tels que les chiens ou les ovins sont quant à eux des modèles plus appropriés pour l'étude de la régénération au sein de scaold en titane.
A notre connaissance, très peu d'études concernent l'implantation de scaold en titane poreux pour la reconstruction de defects osseux chez de gros animaux (Wieding et al., 2015; Faria et al., 2010; Ponader et al., 2010; Fan et al., 2012; Palmquist et al., 2013). La Figure I.19 montre les deux types de defects répertoriés dans la littérature.
Figure I.19. a) Reconstruction de defects interrupteurs réalisés sur le métatarse de moutons (Wieding et al., 2015) et b) reconstruction de defects cylindriques réalisés sur le fémur de chiens (Fan et al., 2012).
Parmi elles, seule une étude concerne la reconstruction d'un defect interrupteur réalisé sur un os mécaniquement chargé (Wieding et al. (2015), Figure I.19a). Au cours de cette étude, des defects interrupteurs de 2 cm ont été réalisés sur les métatarses de moutons puis reconstruits à l'aide de scaolds en titane. Des plaques d'ostéosynthèse en titane ont été utilisées a n de xer les scaolds. Bien que de telles xations soient nécessaires pour écarter le risque de fracture, il est probable qu'elles aient compromis la transmission des contraintes entre les scaolds et l'os adjacent. Il est alors di cile de déterminer les eorts supportés par le scaold durant l'implantation.
2.
L
ES
SUBSTITUTS
OSSEUX
Table I.1. Etudes expérimentales sur des scaolds en titane.
Référence Porosité pores (µm)Taille des Technique defabrication Traitement Module d'Young(GPa) Application Fujibayashi et al. (2004) 40-60% 2 tailles : 60-500 50-450 2 procédés : Projection plasma Fritage Diérents traitement : aucun ou traitement à
la soude (NaOH) Non renseigné
Etude in vivo a n de quanti er le pouvoir ostéoinducteur du titane poreux : implantation
des scaolds dans le muscle dorsal de chiens. Takemoto et al.
(2005) 40% 300-500 Projection plasma Traitement thermique etchimique 4,7 (compression)13,8 ( exion) Etude in vivo : implantation de scaolds dans lescondyles fémoraux de lapins. St-Pierre et al. (2005) renseignéNon 3 tailles : 336 376 557.
Frittage Traitement thermique Non renseigné Etude in vitro ( pré-ostéoblastes de souris) del'in uence de la taille des pores sur l'activité cellulaire.
Otsuki et al. (2006) 2 porosités :50% 70% 2 tailles : 250-500 500-1500 Métallurgie des poudres Traitement à la soude (NaOH) + traitement thermique 5,3
Etude in vivo : implantation de scaolds dans les condyles fémoraux de lapins.
Xue et al. (2007) 5 porosités : 17% 20% 27% 40% 58% 5 tailles : <100 300 450 550 800 Prototypage rapide (Laser engineered
net shaping) aucun
44 42 24,3
7,7 2,6
Etude in vitro a n d'évaluer l'in uence de la taille des pores sur l'activité cellulaire (OPC1).
Lopez-Heredia et al.
(2008) 50% 1000 Prototypage rapide Hydroxyapatite 2,7 Etude in vitro puis in vivo chez le rat. Cachinho et Correia (2008) 75% 100-600 Métallurgie des poudres (sacri ced polymeric sponge) Traitement thermique et revêtement par la
méthode "sole gel" 0,03
Etude in vitro a n de quanti er la bio-activité de l'implant.
I.
CONTEXTE
Table I.2. Etudes expérimentales sur des scaolds en titane.
Référence Porosité pores (µm)Taille des Technique defabrication Traitement Module d'Young(GPa) Application
Warnke et al. (2009) 50-80% Diérentes tailles de pores entre 450 et 1200 Prototypage rapide (Selective Lazer
Melting) Aucun Non renseigné
Etude in vitro a n d'évaluer l'in uence de la taille des pores sur l'activité cellulaire
(ostéoblastes d'humains).
Ponader et al. (2010) 61.3% 450 Prototypage rapide(Selective Electron
Beam Melting) Aucun
Orthotrope 12.9-3.9
Etude in vivo : implantation de scaolds au sein de defects cylindriques réalisés sur le crâne de cochons (comparaison poreux et non poreux).
Willie et al. (2010) 3 porosités : 34.3% 74.4% 79% 3 tailles : 117 300-900 200-600 Métalurgie des poudres aucun 103
Etude in vivo : implantation des 3 types de scaolds au sein de defects cylindriques réalisés
sur des fémurs de lapins.
Faria et al. (2010) renseignéNon 200-500 poudres (Ti foamMétallurgie des
fabrication) aucun Non renseigné
Etude in vivo : implantation des scaolds au sein de defects cylindriques réalisés sur des humérus
de chiens (comparaison titane et hydroxyapatite). Pattanayak et al. (2011) 55-75% 2 tailles : 500-1200 400-800 Prototypage rapide (Selective Lazer Melting) Traitement thermique + traitement à la soude (NaOH) + traitement à l'acide chlorhydrique (HCl)
Non renseigné Etude in vivo : implantation de scaolds dans lescondyles fémoraux de lapins (comparaison entre 3 types de scaold).
Fan et al. (2012) 70% 200-400 Métallurgie despoudres
Diérents traitements : aucun, anodisé et anodisé + traitement
thermique
Non renseigné
Etude in vivo : implantation de scaolds au sein de defects cylindriques réalisés sur des fémurs de
chiens a n de quanti er l'in uence de l'anodisation et du traitement thermique sur la
recolonisation osseuse.
2.
L
ES
SUBSTITUTS
OSSEUX
Table I.3. Etudes expérimentales sur des scaolds en titane.
Référence Porosité pores (µm)Taille des Technique defabrication Traitement Module d'Young(GPa) Application
de Wild et al. (2013) 83.5% 500-600 Prototypage rapide(Selective Lazer Melting)
Diérents traitements : aucun, avec sablage et
sablage + acide chlorhydrique (HCl)
0.8 Etude in vivo : implantation de scaolds au seinde defects cylindriques réalisés sur des crânes de lapin.
Palmquist et al.
(2013) 65-70% 500-700 Métallurgie despoudres Aucun Non renseigné
Etude in vivo : implantation de scaolds au sein de defects cylindriques réalisés sur des fémurs de moutons (comparaison implants poreux et non
poreux). Van der Stok et al.
(2013) 2 porosités : 68% 88% 240-730 Prototypage rapide (Selective Lazer melting) aucun 1.56 30.38
Etude in vivo : implantation de scaolds pour la reconstruction de defects interrupteurs réalisés
sur des fémurs de rats.
Zhang et al. (2014) 68.8% 100-700 poudres (foam slurryMétallurgie des
method) aucun Non renseigné
Etude in vivo : implantation de scaolds pour la reconstruction de defects interrupteurs réalisés sur des radius de lapins (comparaison scaolds
en titane et en hydroxyapatite). Wieding et al. (2015) 63% 700 Prototypage rapide(Selective Lazer
Melting) aucun 8.22
Etude in vivo : implantation de scaolds pour la reconstruction de defects interrupteurs réalisés
sur des métatarse de moutons.
3 Conclusion
Ce chapitre a permis de mettre en évidence l'ensemble des enjeux de l'ingénierie tissulaire lors du développement d'un scaold. Par exemple, la porosité, l'interconnexion des pores ou encore la taille des pores sont autant de facteurs in uençant le pouvoir ostéoconducteur d'un scaold.
On a également montré qu'à ce jour, aucun scaold en titane n'a été utilisé réellement sous des conditions de chargement mécanique pour la reconstruction de defects osseux inter- rupteurs.
En n, tous les concepts d'anatomie et de biologie introduits dans ce chapitre sont né- cessaires à la compréhension des diérents processus biologiques qui interviennent lors de l'ostéointégration d'un scaold et seront indispensables pour modéliser l'activité cellulaire au sein de celui-ci.
CHAPITRE
II
PARTIE EXPÉRIMENTALE
La conception de scaolds pour la reconstruction de tissus osseux est un processus com- plexe et long qui nécessite la collaboration de diérents acteurs tels que les chirurgiens et les ingénieurs. Chaque acteur apporte les connaissances propres à sa spécialité et joue un rôle clé lors des diérentes étapes de la conception comme la dé nition du cahier des charges, la réalisation et la fabrication du scaold, les essais in vitro et in vivo, etc...
Le scaold utilisé dans cette étude a était développé par OBL (Paris), une PME française spécialisée dans la fabrication d'implants pour la chirurgie maxillo-faciale, dans le cadre de la thèse d'Alexandre Barbas (Barbas, 2011). Ainsi les premières étapes de son développement, à savoir la réalisation du cahier des charges et sa fabrication, ont déjà été réalisées. Les diérents procédés de fabrication capables de produire une structure poreuse en titane ayant des propriétés élasto-plastiques correctes ont été étudiées. Le procédé retenu a été le Selective Laser Melting (SLM), procédé de fabrication additive. Ensuite, à l'aide de modèles numériques combinés à des essais mécaniques, la géométrie de la maille du scaold a été dé nie a n que le comportement mécanique de celui-ci soit proche de celui de l'os cortical humain.
L'objectif de ce chapitre est de présenter les essais in vivo qui ont été réalisés a n de quan- ti er et de comparer le pouvoir ostéoconducteur de ce scaold avec celui d'un implant contrôle. Nous décrirons alors le protocole expérimental animal ainsi que les diérentes analyses qui ont permis d'évaluer la recolonisation osseuse au sein des implants.
Sommaire
1 Expérimentation in vivo . . . 27 1.1 Les modèles animaux dans la littérature . . . 27 1.1.1 Les petits animaux . . . 27 1.1.2 Les gros animaux . . . 27 1.1.3 Modèle ovin pour la reconstruction mandibulaire . . . 28 1.2 Notre modèle animal . . . 32 1.3 Réalisation des implants . . . 32 1.3.1 Procédé de fabrication . . . 32 1.3.2 Maille de l'implant . . . 33 1.3.3 Implants rigides . . . 34 1.3.4 Implants éxibles . . . 35 1.3.5 Fixations des implants . . . 36 1.3.6 Traitement de surface . . . 37 1.4 Le protocole opératoire . . . 37 1.5 Détails des opérations . . . 38 2 Essais de exion . . . 40 2.1 Protocole . . . 41 2.2 Corrélation d'images . . . 41
2.3 Méthode de post-traitement des données . . . 42 2.3.1 Résultats bruts de l'analyse par corrélation d'image . . . 43 2.3.2 Recalage des courbes de déformations . . . 43 2.3.3 Modèle poutre . . . 44 3 Microtomographie à rayons X . . . 47 3.1 Les paramètres d'acquisition . . . 48 3.1.1 Résolution . . . 49 3.1.2 Energie . . . 49 3.1.3 Temps d'intégration et intensité . . . 50 3.1.4 Les paramètres retenus . . . 51 3.2 Post-traitement des µCT . . . 52 3.2.1 Méthode simple . . . 52 3.2.2 Prise en compte des artefacts . . . 55 3.3 Artefacts . . . 56 3.4 Analyse statistique des données . . . 57 4 Histologie . . . 58 5 Résultats . . . 58 5.1 Etude pilote . . . 59 5.1.1 Observations générales . . . 59 5.1.2 Histologie . . . 60 5.1.3 Essai de exion . . . 61 5.2 Implants rigides . . . 62 5.2.1 Observations générales . . . 62 5.2.2 Essai de exion . . . 62 5.2.3 Analyse microtomographique . . . 63 5.3 Implants exibles . . . 65 5.3.1 Observations générales . . . 65 5.3.2 Analyse microtomographique . . . 65 5.4 Implants souples avec traitement de surface à la soude . . . 67 5.4.1 Observations générales . . . 67 5.4.2 Essai de exion . . . 67 5.4.3 Analyse microtomographique . . . 68 5.5 Rigide versus exible . . . 70 5.6 Anodisé versus Anodisé + NaOH . . . 73 6 Discussion . . . 75 6.1 Le pouvoir ostéoconducteur . . . 75 6.2 Les propriétés mécaniques . . . 75 6.3 Le traitement de surface . . . 76 6.4 Les limites . . . 77 6.4.1 L'analyse microtomographique . . . 77 6.4.2 Les fractures d'implants . . . 77 6.4.3 L'essai de exion . . . 78 6.4.4 Les autres limites . . . 78 7 Conclusion et perspectives . . . 79
1. EXPÉRIMENTATION IN VIVO
1 Expérimentation in vivo
Dans l'étude du processus de régénération osseuse au sein d'un scaold, l'expérimen- tation in vivo est une étape importante. Elle permet de mieux appréhender les diérentes phases du phénomène d'ostéogenèse mais permet également, en complément de modèles nu- mériques/analytiques, de dé nir les propriétés optimales d'un scaold comme la taille de ses pores, la rugosité de sa surface, etc...
Dans cette première section, après une brève revue de la littérature concernant les modèles animaux utilisés pour la reconstruction mandibulaire, le modèle animal retenu pour notre expérimentation in vivo sera présenté. Puis, la réalisation et les diérents designs d'implants seront décrits. En n, le protocole opératoire réalisé par le Dr Thomas Schouman à l'hôpital Georges Pompidou sera détaillé.