Etude des effets du fluorène après administration répétée par voie orale

III. Résultats

III.2. Etude des effets du fluorène après administration répétée par voie orale

III.2.1. Analyse comportementale

III.2.1.1. Labyrinthe en croix surélevé

L’ANOVA à 1 facteur a détecté des variations significatives du temps passé dans les BF et dans la

ZC du labyrinthe (Tableau 18). L’analyse post hoc des différences a montré que les animaux traités à 1

mg/kg/j ont passé significativement plus de temps dans la ZC et moins de temps dans les BF comparé

aux témoins (Tableau 18). Une augmentation non significative mais concomitante du temps passé dans

les BO a également été observée chez ces animaux en comparaison des rats témoins (Tableau 18).

Aucune différence n’a par ailleurs été observée concernant les autres variables relevées dans ce test

(Tableau 18). Ces résultats montrent ainsi que l’administration répétée par voie orale de 1 mg/kg/j de

fluorène induit une diminution du niveau d’anxiété chez les rongeurs.

III.2.1.2. Open-field

L’analyse statistique n’a révélé aucun effet du traitement au fluorène sur l’ensemble des variables

relevées dans l’open-field (Tableau 19).

III.2.1.3. Labyrinthe radial à 8 branches

L’ANOVA à 2 facteurs a détecté une tendance statistique à un effet du traitement sur le nombre de

branches visitées avant la 1^ère erreur dans ce labyrinthe (Tableau 20). Ainsi, les animaux traités au

fluorène semblent avoir commis une erreur plus rapidement que les témoins après le début du test

(Tableau 20).

Par ailleurs, l’analyse statistique a montré un effet du jour de test sur le nombre de branches

visitées par minute et le temps d’exécution du test (Tableau 20). Une augmentation significative du

61a Tableau 18 : Effets du fluorène après administration répétée par voie orale sur le comportement lié à l'anxiété dans le labyrinthe en croix surélevé

Les résultats sont présentés sous forme de moyenne ± E.S.M. Les effets étudiés par l'ANOVA à 1 facteur sont présentés avec les valeurs de F obtenues et la probabilité correspondante. Le test a posteriori de Dunnett a été utilisé pour comparaisons multiples.

: p < 0,05 ; : p < 0,01 différence statistiquement significative par rapport aux Témoins

n.s. : non significatif

Abréviations : BO, branches ouvertes; BF, branches fermées; ZC, zone centrale

F_{[3, 35]} p

Entrées en BO 2,1 ± 0,4 3,0 ± 0,6 2,2 ± 0,7 2,3 ± 0,6 0,4 n.s. Entrées en BF 6,0 ± 0,8 6,9 ± 0,6 7,1 ± 0,7 7,0 ± 0,7 0,5 n.s. Nombre de passages en ZC 7,3 ± 0,8 8,8 ± 0,9 7,9 ± 1,1 8,2 ± 0,9 0,4 n.s. Pourcentages d'entrées en BO 25,5 ± 4,1 29,9 ± 5,9 19,7 ± 4,9 23,0 ± 5,7 0,7 n.s. Nombre total d'entrées 8,1 ± 1,0 9,9 ± 0,7 9,3 ± 1,2 9,3 ± 0,9 0,6 n.s. Temps en BO (s) 33,8 ± 10,3 59,5 ± 16,2 29,8 ± 10,2 46,2 ± 15,5 1,0 n.s. Temps en BF (s) 235,0 ± 6,5 177,3 ± 19,5 232,6 ± 13,3 203,4 ± 17,5 3,0 < 0,05 Temps en ZC (s) 40,4 ± 4,3 63,3 ± 5,9 37,67 ± 4,7 43,6 ± 4,4 5,6 < 0,01 Tentatives d'entrées en BO 3,8 ± 0,8 4,5 ± 0,7 3,67 ± 0,5 4,2 ± 0,6 0,3 n.s. Nombre total de redressements 13,9 ± 1,3 14,8 ± 1,0 17,1 ± 1,3 12,7 ± 0,8 2,7 n.s. Redressements en BF (%) 97,4 ± 1,3 93,5 ± 3,1 98,6 ± 0,9 96,9 ± 2,0 1,2 n.s. Nombre total de head dipping 7,0 ± 1,6 10,6 ± 1,8 6,2 ± 1,6 8,2 ± 1,4 1,4 n.s. Head dipping en BO (%) 33,4 ± 10,4 41,2 ± 7,7 21,4 ± 9,4 32,1 ± 9,5 0,7 n.s. Nombre total d'étirements 8,6 ± 0,7 9,6 ± 1,3 10,1 ± 1,2 10,1 ± 0,9 0,5 n.s. Etirements en BO (%) 36,2 ± 8,5 52,8 ± 9,4 32,6 ± 9,7 35,2 ± 10,4 0,9 n.s. ANOVA 100 mg/kg 10 mg/kg 1 mg/kg Témoins

61b Tableau 19 : Effets du fluorène après administration répétée par voie orale sur le comportement lié à l'activité dans l'open-field

Les résultats sont présentés sous forme de moyenne ± E.S.M. Les effets étudiés par l'ANOVA à 1 facteur sont présentés avec les valeurs de F obtenues et la probabilité correspondante.

n.s. : non significatif

Abréviations : ZC, zone centrale; ZI, zone intermédiaire; ZP, zone périphérique

F_{[3, 35]} p

Temps en ZC (s) 18,1 ± 2,8 15,0 ± 3,0 15,2 ± 2,3 20,2 ± 3,0 0,8 n.s. Temps en ZI (s) 37,6 ± 7,7 36,3 ± 4,7 24,0 ± 2,8 25,1 ± 2,3 2,2 n.s. Temps en ZP (s) 244,3 ± 9,3 248,8 ± 5,0 260,8 ± 3,8 254,7 ± 3,4 1,5 n.s. Nombre total de cases traversées 119,6 ± 8,0 117,8 ± 8,9 116,3 ± 9,2 117,7 ± 9,5 0,0 n.s. Cases traversées en ZC (%) 5,4 ± 0,7 5,9 ± 0,8 5,7 ± 1,0 6,2 ± 0,9 0,2 n.s. Cases traversées en ZI (%) 14,3 ± 1,8 18,2 ± 2,8 12,8 ± 2,1 13,0 ± 1,7 1,3 n.s. Cases traversées en ZP (%) 80,2 ± 1,9 76,0 ± 3,4 81,5 ± 2,9 80,7 ± 2,4 0,8 n.s. Nombre total de redressements 17,8 ± 1,7 16,8 ± 2,1 16,7 ± 2,5 16,7 ± 1,6 0,1 n.s. Témoins 1 mg/kg 10 mg/kg 100 mg/kg ^ANOVA

61c Tableau 20 : Effets du fluorène après administration répétée par voie orale sur les capacités d'apprentissage

spatial dans le labyrinthe radial à 8 branches

Les résultats sont présentés sous forme de moyenne ± E.S.M. Les effets étudiés par l'ANOVA à 2 facteurs en mesures répétées sur 1 facteur sont présentés avec les valeurs de F obtenues et la probabilité correspondante.

n.s. : non significatif F_{[3, 35]} p F_{[3, 35]} p F_{[3, 35]} p Temps total (s) Témoins 158,6 ± 16,9 148,7 ± 14,6 170,9 ± 26,6 122,0 ± 7,3 113,2 ± 12,4 1 mg/kg 148,1 ± 12,7 151,6 ± 13,9 146,8 ± 23,7 149,6 ± 23,5 131,1 ± 22,2 10 mg/kg 145,1 ± 9,5 151,7 ± 12,7 145,4 ± 18,9 130,4 ± 14,7 121,4 ± 12,3 100 mg/kg 145,4 ± 12,7 159,4 ± 21,5 226,8 ± 60,1 175,3 ± 19,9 140,4 ± 15,8 Nombre total de branches visitées

Témoins 11,1 ± 0,8 10,8 ± 1,0 10,8 ± 1,1 9,7 ± 0,6 9,8 ± 0,7 1 mg/kg 11,3 ± 0,7 11,3 ± 0,8 11,1 ± 0,8 11,4 ± 0,9 12,0 ± 1,8 10 mg/kg 11,2 ± 0,5 11,1 ± 0,6 11,0 ± 1,1 10,8 ± 0,8 10,4 ± 0,9 100 mg/kg 10,6 ± 0,8 10,0 ± 0,7 13,2 ± 2,0 12,7 ± 1,2 11,2 ± 0,9 Nombre de branches visitées avant la 1^ère erreur

Témoins 6,8 ± 0,1 6,1 ± 0,6 5,7 ± 0,7 6,7 ± 0,4 6,3 ± 0,7 1 mg/kg 5,9 ± 0,5 5,4 ± 0,7 5,8 ± 0,6 5,1 ± 0,9 6,0 ± 0,5 10 mg/kg 4,6 ± 0,4 4,9 ± 0,5 6,1 ± 0,7 5,9 ± 0,7 6,1 ± 0,6 100 mg/kg 5,7 ± 0,5 6,1 ± 0,4 4,2 ± 0,6 4,2 ± 0,6 4,6 ± 0,8 Nombre de branches visitées / min

Témoins 4,5 ± 0,4 4,5 ± 0,4 4,1 ± 0,4 4,8 ± 0,3 5,5 ± 0,4 1 mg/kg 5,7 ± 0,2 4,6 ± 0,4 4,8 ± 0,3 5,0 ± 0,4 5,7 ± 0,2 10 mg/kg 4,8 ± 0,3 4,5 ± 0,3 4,7 ± 0,3 5,2 ± 0,4 5,3 ± 0,3 100 mg/kg 4,6 ± 0,4 4,1 ± 0,4 4,2 ± 0,5 4,6 ± 0,2 5,0 ± 0,3 0,7 p=0,098 2,3 n.s. 0,9 n.s. 0,8 n.s. n.s. 7,9 < 0,01 0,5 n.s. 0,3 n.s. 1,9 < 0,05 n.s. Jour de test 1,5 Groupe × Jour 2,6 p=0,074 0,8 n.s. Groupe Jour 1 Jour 2 Jour 3

0,4 Jour 4 Jour 5 ^Groupe

62 été observée chez tous les animaux au cours des 5 jours, montrant une amélioration de leurs capacités d’apprentissage (Tableau 20).

Une interaction entre les deux facteurs testés a également été mise en évidence concernant le nombre de branches visitées avant la 1^ère erreur (Tableau 20). Ainsi, au cours des 5 jours de test, les animaux traités au fluorène ont moins efficacement que les témoins amélioré leurs performances

d’apprentissage (Tableau 20).

III.2.1.4. Test d’évitement d’un stimulus lumineux aversif

L’analyse des données par l’ANOVA à 2 facteurs a montré une tendance à un effet du traitement

sur le nombre total d’appuis sur les leviers (Tableau 21). Les animaux traités à 1 mg/kg ont sensiblement

effectué plus d’appuis que les témoins sur les deux leviers (Tableau 21). En revanche, aucune différence

concernant les capacités de discrimination des deux leviers et de la période active n’a été observée sous l’effet de ce facteur (Tableau 21).

Par ailleurs, l’analyse statistique a révélé un effet du jour de test sur le pourcentage de

discrimination de la période active et le nombre total d’appuis (Tableau 21). Entre les deux jours, les

animaux ont globalement amélioré leurs performances de discrimination de la période active et significativement diminué leur nombre d’appuis sur les leviers. Cette baisse d’activité est caractéristique de l’habituation des animaux au dispositif de test, ceux-ci étant généralement plus actifs

lorsqu’ils sont confrontés à l’exploration de nouveaux espaces (Tableau 21).

III.2.2. Mesures physiologiques

III.2.2.1. Poids corporel

L’analyse statistique a permis de détecté un effet du traitement sur la prise de poids des animaux

après la 1^ère administration de fluorène (Figure 8). Les animaux traités à 100 mg/kg/j ont

significativement perdu du poids après la 1^ère administration, compte tenu d’une diminution

significative du pourcentage de variation de la prise de poids de ces animaux comparé aux témoins

(Figure 8). En revanche, aucune différence significative n’a plus été détectée les jours suivants. Comme

dans l’étude précédente, l’écart de poids induit au début du traitement a été maintenu sur toute le

62a Tableau 21 : Effets du fluorène après administration répétée par voie orale sur les capacités d'apprentissage dans

le TESLA

n.s. : non significatif

F_{[3, 35]} p F_{[3, 35]} p F_{[3, 35]} p

Discrimination du levier actif (%)

Témoins 31,0 ± 6,6 24,1 ± 4,8 1 mg/kg 48,4 ± 7,0 35,9 ± 5,1 10 mg/kg 52,8 ± 6,6 42,6 ± 4,8 100 mg/kg 45,9 ± 6,6 39,9 ± 4,8 Discrimination de la période active (%)

Témoins 74,2 ± 3,6 68,2 ± 3,7 1 mg/kg 70,9 ± 3,8 67,9 ± 3,9 10 mg/kg 64,6 ± 3,6 74,8 ± 3,7 100 mg/kg 64,1 ± 3,6 71,5 ± 3,7 Discrimination du levier et de la période actifs (%)

Témoins 48,9 ± 4,0 61,0 ± 5,6 1 mg/kg 39,7 ± 4,3 56,7 ± 6,0 10 mg/kg 44,2 ± 4,0 48,4 ± 5,6 100 mg/kg 51,7 ± 4,0 50,5 ± 5,6 Nombre total d'appuis

Témoins 71,0 ± 3,6 65,7 ± 4,7 1 mg/kg 76,2 ± 3,8 69,1 ± 5,0 10 mg/kg 69,2 ± 3,6 67,0 ± 4,7 100 mg/kg 59,2 ± 3,6 66,2 ± 4,7 17,7 < 0,01 0,5 n.s. 1,6 n.s. 0,5 n.s. 1,3 n.s. 2,6 p=0,073 n.s. 1,1 n.s. 5,3 < 0,05 1,3 n.s. 0,6 n.s. 2,0 Groupe × Jour Groupe Habituation Test ^Groupe ^{Jour de test}

n.s. 0,3

62b

Les résultats sont présentés sous forme de moyenne ± E.S.M. Les effets ont été étudiés par une ANOVA à 1 facteur. Le test a posteriori de Dunnett a été utilisé pour comparaisons multiples.

: p < 0,01 différence statistiquement significative par rapport aux Témoins

Figure 8 : Effets du fluorène après administration répétée par voie orale sur l’évolution du pourcentage de variation de la prise de poids des animaux

-10 -5 0 5 10 15 20 25 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 P o urce nta g e Jours Témoins 1 mg/kg/j 10 mg/kg/j 100 mg/kg/j

63 III.2.2.2. Poids des organes

L’ANOVA à 1 facteur a montré une tendance à l’augmentation du poids relatif du cerveau des

animaux traités au fluorène, en particulier à 10 et 100 mg/kg/j, comparé aux témoins (Tableau 22).

Par ailleurs, une variation significative du poids relatif du foie a été observée à l’issue du

traitement (Tableau 22). Une augmentation significative du poids relatif du foie a été observée chez les

animaux des trois groupes traités au fluorène en comparaison des rats témoins (Tableau 22).

III.2.3. Quantification des concentrations cérébrales de fluorène et de ses métabolites

Le traitement statistique des données a montré des variations significatives des concentrations de fluorène et de ses trois métabolites dosés au niveau cérébral entre les animaux traités au fluorène à 100

mg/kg/j et les témoins (Tableau 23). En particulier, des niveaux de concentration significativement plus

élevés ont été mis en évidence chez ces animaux comparés aux témoins (Tableau 23).

III.2.4. Conclusion

L’administration répétée de fluorène par voie orale a induit une diminution du niveau d’anxiété et une augmentation de l’activité chez les animaux traités à 1 mg/kg/j. Une perturbation de la mémoire immédiate a également été observée chez les animaux traités au fluorène comparé aux témoins, mais aucune atteinte des capacités d’apprentissage à long terme et des capacités de discrimination n’a été révélée.

Au plan physiologique, une perte de poids après le 1^er jour de traitement et une augmentation des

concentrations de fluorène et de ses trois métabolites au niveau cérébral ont, de même que dans l’étude précédente, significativement été observées chez les animaux traités à 100 mg/kg/j. Une augmentation dose-dépendante du poids du foie a par ailleurs été révélée suite à l’administration du polluant par voie orale.

63a Tableau 22 : Effets du fluorène après administration répétée par voie orale sur le poids relatif des organes (% du poids corporel)

: p < 0,05 ; : p < 0,01 différence statistiquement significative par rapport aux Témoins

F_{[3, 35]} p

Cerveau 0,51 ± 0,01 0,51 ± 0,01 0,53 ± 0,01 0,55 ± 0,01 2,6 p=0,074 Foie 2,61 ± 0,03 2,81 ± 0,06 3,07 ± 0,05 3,63 ± 0,07 62,3 < 0,01

63b Tableau 23 : Concentrations cérébrales de fluorène et de 3 de ses métabolites mono-hydroxylés après administration répétée par voie orale (ng/g de tissu)

: p < 0,01 différence statistiquement significative par rapport aux Témoins

F_{[3, 35]} p Fluorène 24,1 ± 1,1 90,1 ± 15,1 105,4 ± 12,5 379,9 ± 45,8 40,7 < 0,01 9-OH fluorène 1,0 ± 0,4 0,9 ± 0,1 10,9 ± 2,5 398,2 ± 90,6 17,4 < 0,01 3-OH fluorène 0,0 ± 0,0 0,1 ± 0,0 0,1 ± 0,1 0,6 ± 0,1 16,0 < 0,01 2-OH fluorène 0,2 ± 0,1 1,6 ± 0,2 21,3 ± 2,6 176,3 ± 24,8 42,4 < 0,01 Témoins 1 mg/kg 10 mg/kg 100 mg/kg ^ANOVA

Dans le document Étude de la neurotoxicité d’un Polluant Organique Persistant chez le rat : effets à court et à long terme de l’inhalation répétée de fluorène sur le développement sensori-moteur du jeune et le comportement à l’âge adulte (Page 127-137)