Chapitre I : Description de la station de traitement des eaux
I- 5 : Conclusion
a produção de fitormônios (GLICKMANN et al. 1991), solubilização de fosfatos naturais (SYLVESTER-BRADLEY et al., 1982) e antagonismo a fitopatógenos (YASUDA et al., 2009). Uma alta diversidade de BDs, pertencentes aos gêneros
Azospirillum, Burkholderia, Herbaspirillum, Paenibacillus, Enterobacter, dentret al., tem sido relatada em associações com palmeiras (FERNANDES et al., 2001; AZLIN et al., 2005).O objetivo deste estudo foi isolar BDs de coqueiros e avaliar o potencial destas quanto a bioprocessos de interesse agrícola.
Material e Métodos
Amostras de raiz, folha e pedúnculo de seis genótipos de coqueiro (anão-verde-de-Jequi, anão-vermelho-de-Gramami, anão-vermelho-da-Malásia, anão-vermelho-de-Camarões, anão-amarelo-da-Malásia) e coqueiro-gigante-do- Brasil-da-Praia-do-Forte) foram empregadas para o isolamento. Os procedimentos de isolamento em meios semissólidos sem N (LGI, NFb e JNFb, pH 5,0) foram realizados de acordo com DOBEREINER et al. (1995). A atividade diazotrófica dos isolados foi confirmada pela análise de redução do acetileno (ARA). A afiliação taxonômica foi determinada pela identidade entre sequências do gene 16S DNAr dos isolados e as do GenBank utilizando-se Blast N (ALTSCHUL et al., 1990). Os isolados foram avaliados quanto à produção de ácido indolacético (AIA) (Glickmann et al. 1991), solubilização de fosfatos (SYLVESTER-BRADLEY et al., 1982) e antagonismo a Xanthomonas campestris pv. campestris e Thielaviopsis paradoxa (MAIA et al., 2001), in vitro. Um experimento em blocos ao acaso, com quatro repetições, foi conduzido em casa-de-vegetação para avaliar a resposta de plantas de sorgo (híbrido BRS 655) à inoculação com os isolados de BDs. As sementes foram inoculadas por submersão em suspensão bacteriana (D.O. = 0,7, 30 min) e semeadas em vasos com 300 ml de solo (Argissolo Amarelo) não-estéril. Trinta dias após o plantio, determinaram-se o índice de conteúdo de clorofila, com clorofilômetro CCM-200 (Opti-Science), e as massas secas de raízes e parte aérea. O teste de Dunnett (P < 0,05) foi empregado para comparar tratamentos com inoculação com controles negativo (sem N e sem inoculação) e positivos (100 e 200% do N recomendado para sorgo).
Resultados e Discussão
Dos 169 isolados endofíticos obtidos, 33 foram caracterizados como diazotróficos. Todos estes foram classificados como Proteobacteria, com representantes nas classes Alfa, Beta e Gama deste filo, sendo esta última a
com maior frequência de isolados (66%). A alta ocorrência de isolamento de Gamaproteobacteria diazotróficas em meio semissólido sem N tem sido relatada na literatura (FERNANDES et al., 2001; JAH et al., 2009). Sob condições in vitro, 44% dos isolados produziram AIA, 40% solubilizaram fosfato, 52% foram antagônicos a X. campestris, 70% a T. paradoxa e 30% aos dois patógenos. Oito isolados apresentaram atividade para pelo menos três dos quatro fatores de promoção do crescimento avaliados (Tabela 1). Com exceção de DAT 14 e DAT 29, afiliados às famílias Alcaligenaceae e Burkholderiaceae, respectivamente, os demais foram pertencentes à Enterobacteriaceae. Dois isolados com alta identidade filogenética com Salmonella enterica (DAT 4 e DAT 16) foram ativos em todos os quatro fatores, inclusive com alta inibição do crescimento de X. campestris. Treze isolados, com destaque para DAT4, apresentaram crescimento de raiz de sorgo (Figura 1) similar ao da dose de 200% de N, embora também não diferiram do controle sem N. Incrementos (P < 0,05) na parte aérea e no ICC não foram observados em resposta à inoculação com BDs, comparativamente ao controle sem N (dados não apresentados).
Tabela 1. Desdobramento da interação significativa entre os fatores iscas vegetais e concentrações da suspensão de Thielaviopsis paradoxa adicionadas ao solo para a variável porcentagem de recobrimento das iscas pelo fitopatógeno.
Isolado1/ (Afiliação)
Antagonismo contra
AIA SFN campestrisX. T. paradoxa
DAT4 (Salmonella enterica) +2/ + ++ +
DAT5 (Pantoea dispersa) + + ++ -
DAT14 (Achromobacter sp.) - + + +
DAT16 (Salmonella enterica) + + ++ +
DAT22 (Enterobacter oryzae) + + ++ -
DAT25 (Salmonella enterica) + - ++ +
DAT29 (Burkholderia phenazinium) + - ++ +
DAT31 (Pantoea sp.) + - ++ +
1/ Apenas os isolados com atividade para pelo menos três dos quatro fatores de cresci-
mento avaliados foram apresentados. 2/ Para produção ácido indolacético (AIA) e solubili-
zação de fosfato natural (SFN), + e – referem-se à presença e ausência destas atividades pelos isolados. Para atividade antagonista, -, + e ++ representam classes de atividade nula, média e alta, comparativamente ao controle sem antagonista.
Conclusão
BDs endofíticas de coqueiro possuem potencial de promoção do crescimento vegetal, apresentando atividades de FBN, produção de AIA e antagonismo a fitopatógenos.
Referências
ALTSCHUL, S.F.; GISH, W.; MILLER, W.; MYERS, E.W.; LIPMAN, D.J. Basic local alignment search tool. Journal of Molecular Biology, v.215, p.403-410, 1990.
AZLIN, C.O.; AMIR, H.G.; CHAN, L.K. Isolation and characterization of diazotrophic rhizobacteria of oil palm roots. Malaysian Journal of Micorbiology, v.1, p. 31-35, 2005.
DÖBEREINER, J.; BALDANI, J.I.; BALDANI, V.L.D. Como isolar e identificar bactérias diazotróficas de plantas não leguminosas. Brasília: EMBRAPA, SPI.; Itaguaí: EMBRAPA, CNPAB, 1995. 60p.
Figura 1. Crescimento radicular de sorgo (híbrido BRS655) inoculado com isolados de bactérias diazotróficas do coqueiro. N0, N100 e N200 correspondem a 0, 100 e 200% das doses de N-ureia recomendadas para o sorgo. Médias seguidas de mesma letra, não diferem entre os tratamentos inoculados e os controles N0, N100 e N200 pelo teste de Dunnett (p<0,05).
FERNANDES, M.F.; FERNANDES, R.P.M.; RODRIGUES, L.S. Bactérias diazotróficas associadas a coqueiros (Cocos nucifera L.) em região de baixada litorânea de Sergipe. Pesquisa Agropecuária Brasileira, v.36, p.1509-1517, 2001.
JHA B., THAKUR M. C., GONTIA I., STOFFELS M., SCHMID M., HARTMANN A. Isolation, partial identification and application of diazotrophic rhizobacteria from traditional Indian rice cultivars. European Journal of Soil Biology v.45, p.62 – 72, 2009.
MAIA O.B., DUARTE R., SILVA A.M, NICOLIA J.R. Evaluation of the components of a commercial probiotic in gnotobiotic mice experimentally challenged with Salmonella enterica subsp. enterica ser. typhimurium. Veterinary Microbiology, v.79, p.183-189, 2001.
SYLVESTER-BRADLEY, R.; ASAKAWA, N.; TORRACA, S.; OLIVEIRA, L.A.; PEREIRA, R.M. Quantitative survey of phosphate solubilizing microorganisms in the rhizosphere of grasses and legumes in the Amazon. Acta Amazonica, v.12, p.15-22, 1982.
YASUDA M., ISAWA T., SHINOZAKI S., MINOMISAWA K., NAKASHITA H. Effects of colonization of a bacterial endophyte, Azospirillum sp. B510, on disease resistance in rice. Bioscience, Biotechnology and Biochemistry, v.73, p.2595-2599, 2009.
Ísis Bruna de Jesus Vieira1, Marcelo Araújo Resende2, Clivia Rolemberg
Andrade3, Paulo de Albuquerque Silva4, Walane Maria Pereira de Mello Ivo5,
Marcelo Ferreira Fernandes5
Resumo
O objetivo desse trabalho foi avaliar a resposta do funcionamento microbiológico do solo (FMS), analisado como resposta agrupada de dez variáveis microbianas, à quantidade de palhada remanescente em área de cana-de-açúcar colhida crua. O experimento foi conduzido na Usina Coruripe (AL), em um Argissolo Amarelo, e foi disposto no delineamento em blocos casualizados, com cinco proporções de palhada remanescente em relação à quantidade máxima produzida (0, 25, 50, 75 e 100%) e quatro repetições. Amostras de solo foram coletadas de 0 a 10 cm de profundidade, após o segundo corte da cultura, e analisadas quanto às variáveis microbiológicas C da biomassa (CBM), respiração basal (RB), quociente metabólico (qCO2), atividade das enzimas fosfatase ácida, β-glicosidase, aril- sulfatase, celulase, sacarase, lacase e atividade enzimática total pela hidrólise do diacetato de fluoresceína (FDA). Com exceção de lacase e qCO2, a remoção dos resíduos de cana-de-açúcar da superfície do solo reduziu o CBM, RB, FDA e a atividade de enzimas dos ciclos do C, P e S. No entanto, essa resposta não foi linear, já que o FMS não diferiu entre 75 e 100% de palha remanescente. O FMS decresce com a remoção de palhada da superfície do solo, porém, não difere entre os níveis de 75% e 100% de palhada remanescente.
Palavras-chave: Biomassa microbiana, manejo do solo, palhada, Saccharum officinarum.
1 Ciências Biológicas, bolsista PIBIC, Universidade Federal de Sergipe, São Cristóvão, SE, isis- [email protected].
2 Agronomia, bolsista DTI, UFS, [email protected]
3 Bióloga, MS, Biotecnologia, Embrapa Tabuleiros Costeiros, Aracaju, SE, [email protected]. br.
4 Agrônomo, Doutor, Fitotecnia, Embrapa Tabuleiros Costeiros, paulo.de-Albuquerque@ embrapa.br, 5 Agrônomo, Doutor, Ciência do Solo, Embrapa Tabuleiros Costeiros, walane.Ivo@ embrapa.br, [email protected].