COMPARATIF TISSU SURRENAL ET NEUROBLASTOMES

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 Enfin  la  différenciation  en  fonction  du  stade  (et  donc  de  l’évolution  clinique)  se  fait  par  la  concentration  relative  en  N‐acétyl‐aspartate,  acide  aspartique,  asparagine,  arginine,  proline,  β  glucose, tCho pour les cas de stade 4 (correspondant aussi aux cas décédés). Les cas de stade 1 sont,  eux, corrélés à une prédominance du lactate, du β glucose, des lipides, du glutamate, de la glutamine  et du malate.    Figure 65 : Classification PLS DA en fonction de l’évolution clinique (survie en bleu versus décès en rouge).  a) Classification dans un espace PLS‐DA 2D. b) Variables métaboliques d’intérêt du modèle PLS DA.    3.3.5. CONCLUSIONS    3.3.5.1. COMPARATIF TISSU SURRENAL ET NEUROBLASTOMES   

En  comparant  les  deux  modèles  (ganglioneuroblastomes  et  neuroblastomes  par  rapport  au  tissu surrénal sain), on note des valeurs statistiques de validation du modèle comparables (R² > 0.95  et  Q²  environ  0.8).  Néanmoins,  conformément  à  l'hypothèse  établie  précédemment,  le  fait  d'augmenter la population étudiée dans le cas des neuroblastomes permet d'améliorer de manière  significative le paramètre de validation circulaire et donc de s'assurer de la non sur‐modélisation.  

La  validation  de  la  classification  est  générée  en  réintroduisant  les  cas  ayant  servi  à  bâtir  le  modèle  dans  ce  même  modèle.  Il  apparaît  alors  que  l'ensemble  des  neuroblastomes  soit  correctement  classifié  démontrant  une  bonne  spécificité  de  la  classification.  De  même  en  introduisant  les  cas  de  ganglioneuroblastomes  dans  ce  modèle,  ils  sont  tous  classifiés  comme  similaires  aux  NB,  impliquant  donc  un  profil  métabolique  plus  proche  du  tissu  pathologique  des  neuroblastomes que du tissu contrôle. 

L'analyse  par  anatomie  pathologique  réalisée  sur  les  tissus  surrénaux  a  néanmoins  mis  en  évidence  une  forte  prédominance  du  tissu  issu  du  cortex  surrénal  alors  que  les  tumeurs  ont  pour 

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origine  le  tissu  médullaire.  Ce  biais  important  dans  l'analyse  peu,  d'une  part,  expliquer  la  forte  concentration en lipides relevée lors de l'analyse des surrénaux. 

3.3.5.2  CONCLUSIONS :  COMPARAISON  DONNEES  CLINIQUES  ET  DONNEES 

METABOLIQUES.   

En  employant  une  technique  de  RMN  in  vitro  haute  résolution  sur  des  cultures  cellulaires  ainsi  que  des  analyses  chromatographiques,  C.L.  Florian  (Florian  et  al.,  1995a)  a  déterminé  les  caractéristiques  métaboliques  de  trois  types  de  tumeurs  du  système  nerveux  central,  à  savoir:  les  méningiomes, neuroblastomes, et glioblastomes. Il a ainsi décrit des signaux communs de la leucine,  de l'isoleucine, de la valine, de la thréonine, du lactate, de l'acétate, du glutamate, choline‐contenant  des composés et de la glycine. Nos résultats corroborent ceux rapportés par Florian dans son article.  Néanmoins,  même  si  des  composés  de  la  choline  étaient  largement  représentés  dans  le  tissu  de  neuroblastomes, en particulier dans des échantillons de neuroblastomes provenant des enfants plus  vieux  qu'un  an,  ces  métabolites  ont  aussi  semblé  être  particulièrement  abondants  dans  les  ganglioneuroblastomes  et  ganglioneuromes,  jouant  un  rôle  important  dans  l'analyse  discriminante  exécutée.  Néanmoins,  une  plus  grande  cohorte  des  patients  sera  nécessaire  pour  confirmer  cette  observation préliminaire.  

Des  pics  de  résonance  de  N‐acétyl‐aspartate  ont  été  noté  en  examinant  des  spectres  RMN  HRMAS des neuroblastomes. N‐acétyl‐aspartate est généralement trouvé dans le neurone normal et  on lui associé un rôle de marqueur neural. L'origine des neuroblastomes au niveau des cellules de la  crête  neurales  peut  expliquer  la  détection  de  N‐acétyl‐aspartate  dans  nos  enregistrements.  De  même,  des  signaux  du  complexe  de  GABA/glutamate/glutamine  ont  été  également  détectés  par  RMN  HRMAS  dans  le  tissu  de  neuroblastomes.  Une  explication  possible  est  que  quelques  lignés  cellulaires humaines de neuroblastomes ont des caractéristiques de type neurotransmetteur et que  de la sorte elles peuvent convertir le glutamate en GABA (Biedler et al., 1978). S. Roberts (Roberts et  al.,  2004)  a  ainsi  rapporté  pour  la  première  fois  l'association  entre  le  système  GABAergic  et  les  résultats  cliniques  dans  le  modèle  humain  de  neuroblastomes.  Ces  résultats  ont  montrés  que  des  niveaux plus bas d'expression des gènes du système GABAergic ont été associés à un âge plus élevé  au  moment  du  diagnostic,  suggérant  que  la  réduction  d'expression  de  gène  GABAergic  puisse  être  prédiseur du comportement agressif de tumeur. Ainsi, la limitation du potentiel inhibiteur exercé par  le  GABA  la  prolifération  et  la  différentiation  des  neuroblastes  pourrait  jouer  un  rôle  dans  le  développement des neuroblastomes. 

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à  un  an,  ont  été  caractérisés  des  niveaux  relativement  plus  élevés  de  GABA.  Ce  lien  entre  la  concentration de GABA et l'âge de patient devra être évalué dans une étude plus vaste, sur un temps  plus  long  et  un  plus  grand  nombre  de  cas  avant  que  le  niveau  intracellulaire  de  GABA  puisse  être  considéré comme prédiseur d’évolution clinique des patients. 

Le  mIBG  est  un  analogue  structural  de  noradrénaline,  qui,  marqué  par  du ¹³¹I,  a  été  le  premier  produit  radiopharmaceutique  utilisé  l’imagerie  clinqiue  des  cellules  chromaffines  (petites  cellules  présentes  dans  les  glandes  médullosurrénales  et  dans  les  ganglions  du  système  nerveux  sympathique,  elles  dérivent  de  la  crête  neurale  embryonnaire  et  font  partie  du  système  neuroendocrine)  et  du  tissu  adrénergique.  Sa  concentration  au  niveau  cellulaire  est  basée  sur  le  mécanisme du stockage et de réassimilation de catécholamines (Tobes et al., 1985). La scintigraphie  au  ¹²³I‐mIBG  est  aujourd’hui  largement  répandue  dans  l’établissement  du  diagnostic  des  neuroblastomes ainsi que pendant le suivi bien qu’il est été noté que quelques tumeurs ne montrent  pas  la  prise  de  radio‐traceur  ce  qui  pourrait  s’expliquer  par  la  différentiation  cellulaire  ou  la  modification  des  mécanismes  d’assimilation.  Parmi  les  sept  patients  ayant  subi  la  scintigraphie  au 

123I‐mIBG, ceux présentants une prise plus élevée de traceur ont principalement été caractérisés par  les marqueurs biochimiques de l'hypoxie et de la prolifération cellulaire comme le lactate, l'alanine,  la  choline,  la  phosphocholine  et  le  glycérol‐phosphocholine.  La  résonance  du  GABA  a  été  détectée  sur  des  tumeurs  avec  une  assimilation  de  radio‐traceur  inférieure.  Bien  qu’une  différenciation  de  profils  métaboliques  ait  été  montrée  entre  des  tumeurs  avec  le  degré  différent  de  prise  de  radio‐ traceur, le nombre très limité de cas ne permet pas poser des conclusions définitives. 

Enfin,  le  patient  avec  un  neuroblastome  au  stade  IV,  d’un  âge  supérieur  à  un  an  au  diagnostic,  présentant  une  tumeur  mal  différenciée,  considérée  en  tant  que  patient  avec  un  fort  risque,  une  histologie  défavorable  et  morte  pendant  le  suivi,  a  été  caractérisé  par  un  profil  métabolique  distinct  où  l’on  note  principalement  les  composés  totaux  de  la  choline.  Des  études  complémentaires, mettant en œuvre un cohorte de patients plus importante, avec notament des cas  où  le  suivi  des  patients  montre  un  nombre  de  décès  du  même  ordre  que  pour  la  survie,  est  nécessaire pour confirmer cette première observation attrayante.  

Comme  nous  avons  pu  le  voir  au  travers  de  cette  étude  prospective  préliminaire,  la  compréhension  des  facteurs  pronostiques  aujourd'hui  utilisés  pour  la  stratification  des  neuroblastomes est limitée et leur intérêt pronostique (spécificité et validité) est encore parfois sujet  à discussion. La compréhension des modifications métaboliques sous‐jacentes au processus tumoral  dans  un  premier  temps,  mais  aussi  et  surtout  liée  à  l'évolution  clinique  de  la  pathologie  peut,  à  terme,  conduire  à  l'amélioration  des  thérapeutiques  employées  en  ciblant  plus  finement  les  sites  d'actions.  

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dans  le  cas  des  tumeurs  neuroblastiques,  avec  les  profils  métaboliques,  acquis  par  RMN  HRMAS,  présente un grand intérêt. La mise en évidence de cohérences entre les métabolomes tumoraux et  les  indicateurs  pronostiques  devrait  permettre  de  caractériser  les  voies  métaboliques  altérées  par  une progression tumorale défavorable. Ainsi les résultats préliminaires obtenus dans cette étude ont  permis  de  mettre  en  évidence  une  concordance  entre  trois  facteurs  pronostiques  communément  employés  dans  la  stratification  d'évolution  des  neuroblastomes  et  leurs  profils  métaboliques  respectifs.  Un  certain  nombre  de  pistes  métaboliques  ont  ainsi  pu  être  mises  en  évidence  et  la  réalisation d'études complémentaires sur une population plus vaste est indispensable. 

En effet, le nombre de cas étudiés représentela principale critique à cette étude. De plus, ce nombre  de cas se trouve encore réduit lors de mise en corrélation avec certains facteurs pronostiques étudiés  (MYCN). A terme, l’augmentation de la population étudiée devra permettre d’obtenir des groupes de  patients  représentatifs  pour  chaque  facteur  pronostique  et  ainsi  conduire  à  l’établissement  de  modèles  statistiquement  fiables.  Cette  étape  est  obligatoire  afin  d’entériner,  ou  non,  les  résultats  préliminaires exposés ci‐avant. 

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3.3.  LES  LYMPHOMES :  SIGNIFICATION  METABOLIQUE  DE  LA  FIXATION  18F‐FDG