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Mécanique du transport intracellulaire

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Academic year: 2022

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M´ ecanique du transport intracellulaire

Guet David, Pinot Mathieu, Mandal Kalapana, Goud Bruno, & Manneville Jean-Baptiste

Compartimentation et dynamique cellulaires UMR 144 CNRS-Institut Curie, 26 rue d’Ulm 75246 Paris Cedex 05 Jean-Baptiste.Manneville@curie.fr

Les cellules eucaryotes contiennent des compartiments internes membranaires qui ´echangent des mol´ecules cargo via des interm´ediaires de transport. Ces interm´ediaires, le plus souvent de forme v´esiculaire, sont g´en´er´es par d´eformation puis fission de la membrane du compartiment donneur. Au cours de ces

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etapes initiales, le cargo `a transporter est concentr´e dans les interm´ediaires. Les v´esicules sont ensuite dirig´ees vers le compartiment accepteur `a l’aide de moteurs mol´eculaires se d´epla cant le long du cytos- quelette puis fusionnent avec le compartiment accepteur pour lib´erer le cargo.

Si de nombreux acteurs biologiques du transport membranaire ont ´et´e identifi´es, le rˆole des param`etres physiques, comme la tension ou la rigidit´e de la membrane des compartiments intracellulaires, reste tr`es mal connu. Nous avons montr´e `a l’aide d’exp´eriences in vitro que la tension de membrane limite les d´eformations induites par les prot´eines du manteau COPI, des prot´eines essentielles pour le transport entre deux compartiments intracellulaires, l’appareil de Golgi et le reticulum endoplasmique [1]. Les ´etudes sur cellules vivantes ont jusqu’`a pr´esent ´et´e centr´ees sur l’endocytose, transport depuis la membrane plasmique vers l’int´erieur de la cellule, et ont montr´e qu’une forte tension de membrane inhibe la d´eformation mais facilite la fission des v´esicules d’endocytose [2] [3] [4]. En revanche, aucune ´etudein cellulon’a port´e sur le rˆole de la tension de membrane des compartiments intracellulaires au cours du transport.

Nous avons mis au point une technique exp´erimentale combinant pi´egeage optique et microscopie confocale pour mesurer les effets d’une contrainte m´ecanique appliqu´ee sur l’appareil de Golgi. Nous utilisons ici cette technique pour montrer tout d’abord que l’appareil de Golgi est un compartiment d´eformable, que la contrainte m´ecanique a des effets `a longue port´ee et que le cytosquelette d’actine contribue `a la rigidit´e de l’appareil de Golgi. Nous montrons ensuite que la contrainte induit une diminu- tion du flux d’interm´ediaires de transport, conform´ement aux r´esultatsin vitro[1], mais aussi la formation de longs tubes membranaires `a partir de l’appareil de Golgi ce qui indique un d´efaut dans les m´ecanismes de fission. Mˆeme si la structure complexe de l’appareil de Golgi rend difficile une interpr´etation quantita- tive de nos r´esultats, nous mettons en ´evidence, pour la premi`ere fois `a notre connaissance, un rˆole direct de la m´ecanique des compartiments au cours du transport intracellulaire.

R´ ef´ erences

1. Manneville, J.-B., Casella, J.-F., Ambroggio, E., Gounon, P., Bertherat, J., Bassereau, P., Cartaud, J., Antonny, B., and Goud, B., COPI coat assembly occurs on liquid-disordered domains and the associated membrane deformations are limited by membrane tension,PNAS, 105, 16946-16951, 2008.

2. Sheetz, M. P., and Dai, J., Modulation of membrane dynamics and cell motility by membrane tension, Trends in Cell Biology, 6, 85-9, 1996.

3. Boulant, S., Kural, C., Zeeh, J.-C., Ubelmann, F., and Kirchhausen, T. Actin dynamics counteract membrane tension during clathrin-mediated endocytosis,Nature Cell Biology, 13, 1124-31, 2011.

4. Romer, W., Pontani, L. L., Sorre, B., Rentero, C., Berland, L., Chambon, V., Lamaze, C., Bassereau, P., Sykes, C., Gaus, K., et al. Actin dynamics drive membrane reorganization and scission in clathrin- independent endocytosis,Cell, 140, 540-553, 2010.

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