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TABLE DES MATIERES INTRODUCTION p 1

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Academic year: 2021

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TABLE DES MATIERES

INTRODUCTION p 1

1. L’alpha-foetoprotéine (AFP)

1.1 Gène de l’AFP p 1

1.2 Fonction de l’AFP p 3

2. Techniques d’invalidation de gènes chez la souris

2.1 Invalidation via recombinaison homologue p 5

2.2 Autres techniques p 7

2.3 Création d’une souris invalidée pour le gène de l’Afp. p 8

3. Contrôle de l’ovulation

3.1 L’axe hypothalamo-hypophysaire : généralités p 9

3.2 La GnRH p 11

3.3 L’ovulation : le fruit d’une communication hormonale entre l’ovaire

et l’axe hypothalamo-hypophysaire. p 14

3.4 Nomenclature des différentes phases du cycle sexuel chez la souris p 17

4. Phénotype de la souris invalidée pour le gène de L’AFP p 18

5. Différenciation sexuelle du cerveau p 19

BUT DU TRAVAIL p 22

RESULTATS p 23

I. Analyse du phénotype des souris invalidées : étude de la fonction de l’AFP. p 23

1. Etude des disfonctionnements de l’axe hypothalamo-hypophysaire.

1.1 Etude de l’hypophyse des souris AFP KO. p 23 1.2 Etude de l’hypothalamus des souris AFP KO. p 27

(2)

2. Correction du phénotype de stérilité des souris AFP KO : gestations sous inhibiteur d’oestrogènes.

2.1 Fertilité des souris traitées. p 29

2.2 Taux d’expression de gènes dans les souris AFP KO-ATD. p 31

II. Analyse de l’ARN messager AFP2 p 33

1. Clonage de l’ARN messager p 33

2. Analyse bioinformatique de la séquence p 34

3. Recherche de la protéine

3a. Analyses in vitro p 35

3b. Recherche de la protéine in vivo. p 37

4. Conclusion p 38

DISCUSSION ET PERSPECTIVES p 40

BIBLIOGRAPHIE p 45

ANNEXES

Annexe 1 : Matériel et méthodes p 55

Annexe 2 : Listes de gènes différentiellement exprimés Annexe 3 : Publications

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