TABLE DES MATIERES
INTRODUCTION p 1
1. L’alpha-foetoprotéine (AFP)
1.1 Gène de l’AFP p 1
1.2 Fonction de l’AFP p 3
2. Techniques d’invalidation de gènes chez la souris
2.1 Invalidation via recombinaison homologue p 5
2.2 Autres techniques p 7
2.3 Création d’une souris invalidée pour le gène de l’Afp. p 8
3. Contrôle de l’ovulation
3.1 L’axe hypothalamo-hypophysaire : généralités p 9
3.2 La GnRH p 11
3.3 L’ovulation : le fruit d’une communication hormonale entre l’ovaire
et l’axe hypothalamo-hypophysaire. p 14
3.4 Nomenclature des différentes phases du cycle sexuel chez la souris p 17
4. Phénotype de la souris invalidée pour le gène de L’AFP p 18
5. Différenciation sexuelle du cerveau p 19
BUT DU TRAVAIL p 22
RESULTATS p 23
I. Analyse du phénotype des souris invalidées : étude de la fonction de l’AFP. p 23
1. Etude des disfonctionnements de l’axe hypothalamo-hypophysaire.
1.1 Etude de l’hypophyse des souris AFP KO. p 23 1.2 Etude de l’hypothalamus des souris AFP KO. p 27
2. Correction du phénotype de stérilité des souris AFP KO : gestations sous inhibiteur d’oestrogènes.
2.1 Fertilité des souris traitées. p 29
2.2 Taux d’expression de gènes dans les souris AFP KO-ATD. p 31
II. Analyse de l’ARN messager AFP2 p 33
1. Clonage de l’ARN messager p 33
2. Analyse bioinformatique de la séquence p 34
3. Recherche de la protéine
3a. Analyses in vitro p 35
3b. Recherche de la protéine in vivo. p 37
4. Conclusion p 38
DISCUSSION ET PERSPECTIVES p 40
BIBLIOGRAPHIE p 45
ANNEXES
Annexe 1 : Matériel et méthodes p 55
Annexe 2 : Listes de gènes différentiellement exprimés Annexe 3 : Publications