Comparaison des méthodes d’extraction de polysaccharides à partir de trois algues : évaluation des activités antioxydante et antiparasitaire

(1)

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Ë-*..eL".È ËL'xJl qîra*l*l, _Bib.J.- Hè

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MINTSTTRE rDE LTNSETGNEMENT SrrPmrEUR,ET DE Lr\ RE|SHERCm, SCTHTTIFTaUE

UNTVENSITE

AKLI

MOHAND

OI'LHAI'J

_-

BOT'IRA

FACI'LIT

DES SCIENCTS IDE LI\NATT'RE ET DE

II\

YIE ET I'ES SCIENCTS I'D I.A TERRE DEPARTDMENT IDE

BIOIIrcIE

Réf

:

...

JIIAIIOB/F.SIW.ST/DEPJIO/2019

*..

6r::

MEMOIRE

DE

FIN

D'ETT]DES

EN

VIIE

DE

L'OBTENTION

DU

DIPLOME MASTER

Domeine

:

SNV

Filière

:

Sciences

Bi'ologiques

Speianff

: Biochimie Appliquée

Présenté

par

:

BELFADEL

Meriern

&

BOACEE^IE

nhem

Thème

;

Comparaison

des

méthodes

d'extraction

de

polysaccharides

à

partir

de

trois

algues : évaluation

des

activités antioxvdante et

Soutenu

le

zÙ610712019

NntctHswe

Devant

le

jury

comlnsé

de :

MIle.AITMIIufuaNENouua

MAA

Univ-deBouba

Presidante

MIle.BENSMAnfuuhilo MAA

Univ.deBouira

Promotrice Iône.

BOUIELDIARGiha MCB

Univ.

&Bouba

Co-Promotrice

Irûræ-

DIOUAHRA-FAIIEMDjaTûIa

MAA

Univ.

deBouba

Eroninarice

(2)

Table

des

matières

Table

des

matières

Liste des abréviations Liste des fïgures

&.

Liste des

tableaux

't

Introduction...

...'..

I

Partie

I

: Partie

bibliographique...

...

3

Ll.Généralités sur les

algues

3

I.2.Les grands groupes des

algues.

3

I.2.1.

Les algues vertes

(Chlorophycées).

3

1.2.2. Les algues brunes

(Phéophycées)....

3

I.2.3.

Les algues rouges (Rhodophycées).

L23.

Les algues bleues (Cyanobactéries).

II.

Utilisation des algues.

II.

1.

Industrie agroalimentaire,

II.2.

Industrie pharmaceutique et cosmétique

II.3.

Domaine médical.

II.4.

En agriculture.

II.5.

Autres

utilisations...

III.

La composition chimique des algues.

ilI.

1.

Les polysaccharides...

m.1.1.

Alginates.

III. 1.2. Carraghénanes.,...

III. 1.3. Agar (Gélose)....

III.2.

L'eau

III.3.

Les minéraux

IIL4.

Protéines ..

[I.5.

Vitamines ..

IIL6.

Autres composants

...

IV.

Activités biologiques des polysaccarides des algues

IV.1

.

Activité

anticoagulante et antithrombotique.

IV.2.

Activité

anti-infl ammatoire et anti-immunomodulatrice

4 4 4 4 4 .5 5 5 5 5 6 7 10 10 11 11 11 11 T2

t2

I2

(3)

IV.4.

Activité

antivirale

IV.5.

Activité

antiparasitaire, .

IV,6.

Activité

anti-tumorale et anticancéreuse. . . . .

IV.7. Activité a4lioxydante. . .

s:..

IV.8.

Autres actiktés. V. Kyste hydatique

V.1.

Définition du kyste hydatique. . .

V.2.

Cycle biologique d' Echinococcus granulosus...

Chapitre

II:

Matériels et

Méthodes...

Ll.

Matériels...

I.1. Matériels non biologique. I.2. Matériels

biologique,...

LZ.l_Zones d'échantillonnâge des algues L2.2. Les kystes hydatiques utilisés

I.2.3.

Identification des algues.

I.2.4.

Etude zoologique (classification d'Echinoeoccus granulosus). . . .

I.2.5.

Traitement des échantillons

...

II.

Méthodes...

II.2.

Méthodes d'extraction ..

tl'z.l.

Elimination partielle des lipides et des pigments.

IL2.2.

Extraction des polysaccharides par macération ...

IL2.3.

Extraction des polysaccharides par décoction...

II,2.4. Extraction des polysaccharides par ultrasons . ... . .

II.3.

Méthodes de Dosage.

II.3.1.

Dosage des sucres totaux. tr.3.2. Dosage des sucres réductetrs

IL3.3.

Dosage des protéines

.,..

III.

Evaluation des activités

biologiques

:...

III.1.

Activité

antioxydante (test de piégeage du radical DPPH).

IIL2.

Activité

antiparasitaire.

I$

I4

15 15 16

I7

t7

T7 18 20 20

24,

2t

2r

r, 22 t 22 :

23j

,

23:

24 24 24 25

)\

26

1 I 28 28 29 30 30 30 31 32 'l I I

11I.2.4. Test de fertilité.

(4)

Table

des

matières

III.2.5.

Test de viabilité des protoscolex au bleu de

Trypan.

32

III.2.6.

Effet

direct

des extraits

de

polysaccharides des algues

sur

la viabilité

des

₃₂

protoscolex

IV.

Analyse

statistigue.

33

T:

Itr.

Résultats et

disëussions

...:...

..

34

I.

Extraction des

polysaccharides.

34

I.l.

Dosage des sucres totaux.

.

34

I.2.

Dosage des sucres

réducteurs

36 '.f

I.3.

Dosage des

protéines...

37

I.4.

Efude comparative des méthodes d'extraction des polysaccharides

...

j....

38

IV.

Activités

biologiques...

40

IV.l.

Activité

antioxydante (test de piégeage du radical

DPPH).

40

IV.2.

Activité

antipmasitaire..

42

IV.2.1.

Test de

fertilité.

42

|

\r.2.2.

Test de viabilité des protoscolex au bleu de

Trypan.

43

'

_IV.2,3.

_Effet

_de

_contact

_direct

_entre

_les

_{extraits de}_{polysacchafides}

_et

_{l'échantillon}

,

parasitaire.

44

IV.2.3.1.

L'étude de I'effet des extraits polysaccharidiques sur le

parasite....

44

IV.2.3.2.

Test de

viabilité

des protoscolex après contact direct avec

les

extraits de

polysaccharides....

₄₇ Conclusion et

perspectves...,.

49 Références

bibliographiques...

51 Annexes Résumé

It'

.*l

(5)

L'objectif

de ce

travail est

de

d#erminer

la

meilleure méôode d'extractim des potysacchriles

(utfasm$ nace,ræim, dæoctim) et fénahrdim des activités dioxydanæ et mipæasiAfue

b

€xhaits de

potysacchides de trois espèc€s dalgues écoltées

su

les roches des

d€s

de la

Égim

d'Alger (Fræzs _ry.,

UIva lacuca) et le barrage de la région d'Ain Bessam (Chæmtnrpha

q.).

I-es résrltats des dosagps réalisés

mmt€nt

que la décoctim est la métùode de cboix porn I'extractim des

polysaccharides avæ de

âibbs

nivearn de

offiinatim

en protéines. L'extrait

tUlva

lætuca est le phs

ricb

en srcr€s totilu. (568*56,8 _ttglmg)-L'eff€t des e,lruaûts sur la réùrctim

ù

DPPH aÉ:vélé

rrc

frible

activité

dioxydme

des €rûaits

&

Fuans sp.

ûA.

Iænrca et absenæ toale dms le cas de Chætomorpha

sp.

IÆ

trois €xrdib de polysaccbuides à

l5

_@ûL

pésde,ff

rme activité amipæasiAire rcmquable assurdrt d€s

tdx

de moralité assez élevés c@Ee l'fuhirccocans

groaiaws

apès des

t€rys

de cmtact Éùrits sriæ

àdes mftiples

ddam*iom

dans lastrucffie depæasiæ.

MoA

dés:

polysaccharides, dgues ûrtrines, activité anrtioxydanæ,

DPPII, activité

mtiparasihires,

hhinocæczts groaiosus.

Summrry

The aim

of

fiis

wort

is to

determine

tre

best mslbod

of

e,lcrac'tion

of

polysacchrides (uttnsouA,

mac€ration, and decoction) and evaluæion ofthe antioxidant and antiparasitic activities of ûe polysacoharide exhacts of tforee species of algae harrcsted ûom the rocls of the coasb of Algiers (Fuats sp., Ulva lacûlca)

and ft€ dam of Ain Bessm (Chaaonnrpln

sp)-The resrlts of

tb

assrys cûried

ot

Sow

rhât

_te

_&octim

_{is lhe mettod}_of_choice_for_{the enhaction}

_of

polysaccharides with low levels of proûein contamination- Ulva lacarca exhact conains ûe highest level

of

total sugars (568 + 56.8 pg

/

nS). Effect of extacts

m

tùe

r€ùcti@

of DPPH revealed a low antioxidmt activity of extracS of Facvs sp. md U. Iæuca

da

total absence in tbe case _{of Chætonorpha ry.}

The

fuee

potysacctæide €xtracts 15 mg/ml- exhibit significert

dipmsitical

activity, pnoviding high

muality

raæs agqtn*.Echiwcocctts groaiæus aftera refuced cæhct lùne _ôrcto miltiple de,formatims in the parasite structrc.

Kcy

words: potpaccharides, seaweodg mtioxidam activity, DPPII, mtiparasfic activity, khittocæctts

groaiostts-O.ÉLl

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tfichinæoccus græulostts. Echittæocctts . ,'.raUi|-tl _{.rLà..11I'l,iill .}_DPPH_.