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Estimation du nombre le plus probable flPPldes coliformes en riviDreen r6alisant 96 ensemencementspar niveau de dilution

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(1)

Revue franeaise des SGIEilGES DE I'EAU, I ll9821 387-399

Estimation du nombre le plus probable flPPl des coliformes en riviDre

en r6alisant 96 ensemencements par niveau de dilution

E v a l u a t i o n o f c o l i f o r m s i n r i v e r w a t e r b y M P N m e t h o d

R e s u m 6

L ' e s t i m a t i o n d u n o m b r e Ie p l u s p r o b a b t e ( N . P . P . ) d e c o L i f o r m e s p a r [ a m 6 t h o d e d ' e n s e m e n c e m e n t e n m i t i e u [ ' i q u i d e a e t 6 t r d s s o u v e n t d 6 c r i 6 e c a r m a L u t i l i s 6 e , e n p a r t i c u t i e r e n e m p l o y a n t u n t r o p f a i - b t e n o m b n e d e t u b e s ) c h a q u e n i v e a u d e d i I u t i o n ( g 6 n 6 r a t e m e n t 3 , 5 o u 1 0 ) . C e p e n d a n t n o t r e t r a v a i L , r 6 a L i s 6 A L ' a i d e d e m i c n o p t a q u e s C e t j t r a t i o n p e r m e t t a n t s a n s d i f f i c u I t e s d ' e n s e m e n c e r 9 6 c u p u t e s d c h a q u e n i v e a u d e d j I u t i o n , d 6 m o n t r e t o u t [ ' i n t 6 r O t d e L a m e t h o d e . E n e f f e t , d a n s c e s c o n d i t i o n s , I e L o g a r i t h m e d u N . P . P . e s t n o r m a t e - m e n t d i s t r j b u 6 , L a p r 6 c i s i o n t h 6 o n i q u e e t e x p 6 n i m e n t a t e e s t b o n n e ( v o ' i s i n e d e 1 3 % ) e t p r a t i q u e m e n t i n d 6 p e n d a n t e d e I a d e n s i t e b a c t 6 - r i e n n e . c e s d e u x q u a L i t 6 s q u i n e s o n t , p a r c o n t r e , p a s s y s t 6 m a t j q u e - m e n t o b t e n u e s l o r s d ' u n e n u m 6 r a t i o n d ' u n i t 6 s f o r m a t r i c e s d e c o l o n i e s ( U . F . c . ) s u r m i L i e u g 6 t o s 6 , p e r m e t t e n t t a m i s e e n c e u v r e d e s s t a t i s - t i q u e s p a r a m 6 t r i q u e s ; e n p a r t i c u I i e r [ ' a n a L y s e d e v a r i a n c e p e u t 6 t n e r 6 a t . i s 6 e d a n s p r e s q u e t o u s t e s c a s . L a c o m p a r a i s o n e n t r e N - P . P , e n m j I i e u t i q u i d e e t U . F . c . s u r m i I i e u g 6 L o s 6 r n o n t r e u n e d i f f 6 r e n c e d e s t i t r e s d e c o t i f o r m e s t h e r m o t o t 6 r a n t s A 4 4 ' C e n r i v i d r e d ' e n v i r o n 1 1 t 6 Z e n f a v e u r d u N - P - P - C e t t e d i f f e r e n c e v a l i a b [ e s e t o n l e s e c h a n t i l L o n s e s t s a n s d o u t e L i 6 e d l - a m o i n d r e s e t e c t i v i t 6 d u m i L i e u d e c u l t u n e e m p t o y e ( 8 2 , 5 t 7 , 5 % s e u L e n e n t d e s c u p u L e s l a c t o s e + c o n t e n a i e n t E s c h e t : t c h i a c o L i ) -

S u m m a r y

T h e e s t i m a t i o n o f t h e m o s t D r o b a b I e n u m b e r ( M . P . N . ) o f c o l , i f o n m s b y i n o c u l a t i o n i n l i q u i d m e d ' i u m h a s o f t e n b e e n d i s c r e d j t e d b y a w r o n g u t i I i z a t i o n , p a r t i c u t a r [ y b y u s i n g a t o o r n u c h I o w n u m b e r o f t u b e s p e r d i I u t i o n ( g e n e r a I L y 3 , 5 o r 1 0 ) . H o w e v e r o u r e x p e l i m e n t a t j o n / c o n d u c - t e d w i t h 9 6 w e l L s m i c n o t i t r a t i o n p I a t e s p e r d i I u t i o n , d e m o n s t r a t e s

C e n t r e d e s S c i e n c e s d e I ' E n v i r o n n e m e n t , 1 , r u e d e s R 6 c o l l e t s 5 7 0 0 0 f t E T Z .

(2)

3 8 B

S c i e n c e s d e L ' e a u 1 , n o 4

a L l t h e i n t e r e s t o f t h e e s t j m a t o r . T h i s , i n t h e s e c o n d i t i o n s , t h e L o g a r i t h m o f t h e f i 1 - P - N . i s n o r m a U - y d i s t | i b u t e d , t h e t h e o l i t i c a t a n d e x p e r i m e n t a t p r e c i s i o n i s g o o d ( a b o u t 1 3 % ) a n d p r a c t i c a t L y i n d e p e n - d a n t f r o m t h e b a c t e r i a l d e n s ' i t y . T h e s e t w o q u a L i t i e s w h i c h a r e n o t , o n t h e c o n t r a r y , s y s t e m a t i c a L l y o b t a i n e d b y c o u n t i n g c o t o n y f o r m i n g u n i t s ( C . F . U - ) o n a g a n m e d i u m a t l o w t h e u s e o f p a r a m e t r i c s t a t i s t i c s a n d p a r t i c u I a r t y a n a I y s i s o f v a r i a n c e t h a t c a n b e c a r r i e d o u t . i n m o s t c a s e s . T h e c o m p a r i s o n b e t w e e n ll - P . N . i n I i q u i d m e d i u m a n d C . F . U - o n a g a r n e d i u m s h o w s a d i f f e r e n c e o l 1 4 + 6 % i n . 1 4 " C t h e r m o r e s i s t a n t c o t i f o r m n u m b e r i n r i v e r s a m p L e s j n f a v o u r o f t h e f i r s t m e t h o d - T h i s d i f f e r e n c e i s i n d e p e d e n t f r o m t h e s a m p [ e a n d o r o b a b t y d u e t o t h e [ a c k o f a b s o t u t e s p e c i f i c i t y o f t h e g r o w t h m e d i u m u s e d ( s o 8 2 . 5 ! 7 - 5 % o f t a c t o s e + w e t t s w e n e c o n f i r m a t e d a s E . c o l t ) .

L ' 6 v a l u a t i o n d u n i v e a u d e c o n t a m i n a t j - o n b a c t 6 r i e n n e d e s e a u x s u p e r f i - c i e l l e s s e h e u r t e i d e u x d i f f i c u l t 6 s m a j e u r e s :

a ) I ' i m p e r f e c t i o n d e s t e c h n i q u e s d e t i t r a g e , I e s q u e l l e s s e c a r a c t 6 - r i s e n t d a n s I ' e n s e m b l e p a r u n m a n q u e r e l a t i f d e p r 6 c i s i o n e t d e s p 6 c i - f i c i t 6 ;

b ) 1 ' h 6 t 6 r o g 6 n 6 i t 6 d e s m i l i e u x h y d r i q u e s q u i , e n l i m i t a n t I a r e p r 6 - s e n t a t i v i t 6 d e s 6 c h a n t i 1 l o n s , s ' o p p o s e A I ' e x t r a p o f a t i o n i l e s 1 6 s u l t a t s o b t e n u s d p a r t i r d ' u n f a i b l e v o l u m e d ' e a u .

E n c e q u i c o n c e r n e 1 e s t e c h n i q u e s d e t i t r a g e , I ' a n a l y s t e e s t c o n f r o n - t 6 a u n c h o i x a p p a r e m m e n t d i f f i c i l e e n t r e c e l l e s d e t y p e 6 n u m 6 r a t i f e t c e I l e s d e t y p e q u a n t i q u e q u i 6 v a l u e n t 1 a p r o p o r t i o n i l e r 6 p o n s e s p o s i t i v e s p a r r a p p o r t a u n o m b r e t o t a t d e r 6 p o n s e s p o s s i b l e s . C e p e n d a n t , I ' o p p o s i - t i o n e n t r e f e s d e u x t y p e s d e t i t r a g e e s t t o u t d f a i t r e l a t i v e . A i n s i I ' h a b i t u i l e v e u t q u ' d u n e m 6 t h o d e d ' e n s e m e n c e m e n t ( i ' e ' s u r m i r i e u 9 6 l o s 6 o u e n m i l i e u l i q u i d e ) s o i t a s s o c i 6 e s p S c i f i q u e m e n t u n e m 6 t h o d e d e c a l c u f d e s r 6 s u l t a t s ( r e s p e c t i v e m e n t t y p e 6 n u m 6 r a t i f o u t y p e q u a n t i q u e ) ' T o u t e - f o i s , i I c o n v i e n t d e r a p p e l e r q u e 1 a m 6 t h o d e d e c a l c u l d e s r 6 s u l t a t s e s t p a r f a i t e m e n t i - n d 6 p e n d a n t e d e l a m 6 t h o c l e d ' e n s e m e n c e m e n t ( B E Y T o I J T e t a l "

7 9 7 5 ; M A U L e t a L . , 7 g A 1 ) . D ' a u t r e p a r t , l e c h o i x d ' u n e m 6 t h o d e d e c a l - c u 1 e s t s o u v e n t f e f a i t d ' u n e m o d e . A t i t r e d ' e x e r n p l e s ' 6 5 t e n 1 9 0 8 e t

1 9 1 7 q u e P H E L P S p u i s M A C G R A D Y T G R E E M ^ I O O D e t Y U L E f i r e n t l e s p r e m i d r e s p r o p o s i t i o n s d e c a l c u l q u a n t i q u e c ' u n t i t r e b a c t 6 r i e n p a r 1 a m 6 t h o d e d i t e d u n o m b r e I e p l u s p r o b a b l e ( I : I . P . P . ) . P u i s H A L V O R S O N e t Z I E G L E R

( 1 9 3 3 a , 1 9 3 3 b ) a p r 6 s u n e 6 t u d e m i n u t i e u s e o n t p r 6 c i s 6 t a t h 6 o r i e d e l a m 6 t h o d e , 6 l a b o r 6 l e s t a b l e s d e N . P . P . e t l e s p r e m i e r s c a l c u l s d ' u n i n t e r v a l l e d e c o n f i a n c e . o r m a l g r 6 l e s d i f f 6 r e n t s t r a v a u x r 6 a l i s 6 s d e p u i s , l a m 6 t h o d e n ' a e u r 6 e l l e m e n t q u e p e u d e s u c c d s d u f a i t d e p l u s s o u v e n t d r u n e m a u v a i s e u t i f i s a t i o n , e n p a r t i c u l i e r u n t r o p f a i b l e n o m - b r e d ' a l i q u o t e s ( 3 o u 5 o u 1 0 ) e n s e m e n c 6 s a c h a q u e n i v e a u d e d i f u t i o n . P I u s r 6 c e m m e n t H U G U E S ( 1 9 8 1 ) p r o p o s a i t d ' u t i l i s e r e n v i r o l o g i e 9 6 e n s e - m e n c e m e n t s d c h a q u e n i v e a u d e d i l u t i o n e t 6 t u d i a i t I e N " P . P ' e n t a n t q u e v a r i a b t e a l 6 a t o i r e e n p r 6 c i s a n t s a f o i d e p r o b a b i l i t 6 a i n s i q u e l e s c o n d i t i o n s d ' a p p l i c a t i o n d e l , a r s e n a l p u i s s a n t d e s s t a t i s t i q u e s p a r a m 6 - t r i q u e s ( P R O S T et HUGUES, t9B2) . Cette perspective m o d i f i a n t c o n s i d 6 r a - b l e m e n t I ' e m p l o i d u N . P . P . , i I a s e m b f 6 i n t 6 r e s s a n t d ' a p p l i q u e r I a m 6 t h o d e a v e c 9 5 e n s e m e n c e m e n t s p o u r 6 v a f u e r I a c o l i m 6 t r i e d e s e a u x s u p e r -

f i c i e l f e s e n I a c o m p a r a n t a v e c l a c l a s s i q u e t e c h n i q u e d e s m e m b r a n e s f i f t r a n t e s . C e t t e c o m p a r a i s o n n ' a v a i t a u p a r a v a n t 5 t 5 r 6 a f i s 6 e q u e d a n s I e c a s d ' u n N . P . P . e f f e c t u 6 a v e c 5 o u 1 0 t u b e s ( T H O M A S et WOODI',IARD, 1 9 5 5 i V E L Z , I 9 7 O ; G R E E N e t L I T S K Y , 1 9 8 0 ) .

(3)

Ilombt:e Le pLus pt,obable (n.p.p.) des coLifovrnes en z'ioiDre

L ' 6 t u d e a 6 t 6 c o n d u i t e s u r u n e e a u d e r i v i d r e e n m e s u r a n t l a d e n s i t 6 e n c o l i f o r m e s t h e r m o t o l 6 r a n t s A , 4 4 o C . L e p l a n e x p 6 r i m e n t a l a 6 t 6 c o n g u d a n s f e b u t d e r 6 p o n d r e a u x q u a t r e q u e s t i o n s s u i v a n t e s :

. L e s r 6 s u l t a t s e x p 6 r i m e n t a u x s o n t - i f s c o m p a t i b l e s a v e c l e m o d 6 I e m a t h 6 m a t i q u e s u r l e q u e l s ' a p p u i e n t l e s d 6 v e l o p p e m e n t s t h 6 o r i q u e s d e s m 6 t h o d e s ?

. E x i s t e - t - i l u n e i . n t e r a c t i o n e n t r e l e f a c t e u r m 6 t h o d e e t 1 e f a c t e u r 6 e h a n f i l l o n . c n d r a u t r e s t e m c q - l c s 6 c a r t s 6 v e n t u e f s e n t r e l e s r 6 s u l - t a t s d e c h a q u e m 6 t h o d e s o n t - i l s i n d 6 p e n d a n t s d e 1 ' 6 c h a n t i l l o n a n a l y s 6 ?

. L e s r 6 s u l t a t s d e s d e u x n 6 t h o d e s p e u v e n t - i 1 s 6 t r e c o n s i d 6 r 6 s c o m r n e 6 q u i v a l e n t s e t d a n s I a n 6 g a t i v e , q u e l l e e s t I ' i m p o r t a n c e d e I ' 6 c a r t ?

. Quelle est ta proportion a ' E . t c h e n L e h , L a - c o U p a r m i l e s c o l i f o r m e s t h e r m o t o l 6 r a n t s d 4 4 o C a y a n t e n g e n d r 6 d e s r 6 p o n s e s p o s i t i v e s e n m i l i e u l i q u i d e ?

l { n r E n r E L E r M E T H o D E S

1 - E c h a n t i ' l I o n s d ' e a u

D e s 6 c h a n t i l l o n s d e 5 O O r n 1 d . ' e a u o n t 6 t 6 p r 6 l e v 6 s e n s u r f a c e d a n s 1 a r i v i e r e M o s e I I e e n a v a l d e I a v i l l e i l e M e t z a u m o y e n d e f l a c o n s e n v e r r e p r 5 a l a b l e n e n t s t 6 r i l i s 6 s i I ' a u t o c l a v e . H u i t 6 c h a n t i l f o n s n u m 6 r o t 6 s d e

1 d I o n t 6 t 6 p r 6 l e v 6 s d d e s j o u r s d i f f 6 r e n t s s u r u n e p 6 r i o d e t o t a l e d t e n v i r o n u n m o i s .

C e s 6 c h a n t i f f o n s o n t 6 t 6 r a m e n 6 s a u l a b o r a t o i r e i t e m p 6 r a t u r e a m b i a n - t e p o u r 6 t r e s o u m i s i 1 ' a n a l y s e a u p l u s t a r d 3 0 m i n u t e s a p r d s I e p r 6 1 6 - v e m e n t ( l a p6riode s ' 6 c o u l a n t e n t r e I e m o m e n t d u p r 6 l d v e m e n t e t 1 a f i n d u t i - t r a g e n ' a j a m a i s e x c 6 d 6 2 h 3 0 ) .

2 - N u m e r a t i o n d e s c o l i f o r m e s t h e r m o t o l d r a n t s s u r m i l ' i e u q 6 l o s 6

L e s c o l i f o r m e s t h e r m o t o l 6 r a n t s e 4 4 " C o n t 6 t 6 t i t r 6 s a p r d s d i l u t i o n d 6 c i m a l e d e s 6 c h a n t i l l o n s d ' e a u d a n s d e f ' e a u p h y s i o l o g i q u e s t 6 r i f e .

U n m i l f i l i t r e d e c h a q u e d i l u t i o n a i n s i o b t e n u e a 6 t 6 f i l t r 5 s u r m e m - b r a n e s t 6 r i f e d ' u n e p o r o s i t 6 d e 0 , 4 5 p n ( m i t t i p o r e H A W G o 4 7 ) . P o u r p e r - m e t t r e u n e m e i l l e u r e r 6 p a r t i t i o n d e I ' a l i q u o t e s u r I a m e m b r a n e , c e f u i - c i a 6 t 6 p r 6 a l a b l e m e n t t r a n s f 6 r 6 i l a n s 9 m l d ' e a u p h y s i o l o g i q u e .

( l h a o f r e m c m h r a n e a e n s r r i j ' t r 6 , - 6 d F n o e 6 e s u r m i l i e t t o 6 l o s 6 I a c t o S 6

( r . P . 5 4 0 4 1 ) c o n t e n a n t d u c h l o r u r e d e t r j - p h 6 n y f t 6 t r a z o f i u m ( r . P . 6 2 6 3 5 ) e t d u t e r g i t o f 7 ( I . P . 6 2 6 5 5 ) . S i x t i t r a g e s o n t 6 t 6 r 6 a l i s S s e n p a r a l - 1 6 I e p o u r c h a q u e 6 c h a n t i l f o n .

A n r F s i n e r r l r a f i o n i 4 4 o C n e n d a n t 2 4 h e " " ^ ^ 1 ^ - ^ ^ 1 ^ - r ^ ^ r e c o l o r a t i o n

h y ! L J r r r u u !

o r a n g 6 e e t a u r 6 o f 6 e s d ' u n h a l o j a u n e o n t 6 t 6 d 6 n o m b r 6 e s . E n f i n l e s c o l i - f o r m e s t h e r m o t o l 6 r a n t s o n t 6 t 6 e x p r i m 6 s e n n o m b r e d ' u n i t 6 s f o r m a t r i c e s d e c o f o n i e s p a r m i l l i l i t r e d e 1 ' 6 c h a n t i l l o n o r i g i n e l ( I J . p . 9 . 1 .

(4)

? o n

Sclences de L'eau 1, no4

L e s c a r a c t 6 r i s t i q u e s m a c r o s c o p i q u e s d e s c o l o n i e s t r a d u i s a n t u n e 1 6 - d u c t i o n d e t r i p h 6 n y l t 6 t r a z o l i u m e t u n e f e r m e n t a t i o n d u f a c t o s e a i n s i q u e l e s c o n d i t i o n s d e c u l t u r e n o u s o n t a m e n 6 s i c o n s i d 6 r e r c e s c o l o n i e s

comme 6tant repr6sentatives du genre E.tche,',-Lchie-aT. Cependant, Ies

c a r a c t d r e s b i o c h i m i q u e s d e s c o l o n i e s n ' o n t p a s 6 t 6 c o n f i r m 6 s l o r s d . ' u n e s u b c u l t u r e .

N u m d r a t ' i o n d e s c o l if o r m e s t h e r m o t o l 6 r a n t s e n m i l i e u 1 iq u i d e

L e s c o l i f o r m e s t h e r m o t o l 6 r a n t s d 4 4 " C o n t 6 t 6 t i t r 6 s a p r d s d i l u t i o n d 6 c i m a l e d a n s d e I ' e a u p h y s i o t o g i q u e s t 6 r i l e p a r e n s e m e n c e m e n t d a n s d u b o u i f f o n l a c t o s 6 a i l d i t i o n n 6 d e p o u r p r e d e b r o m o c r 6 s o l ( I . P . 6 4 0 4 1 ) . S i x t i t r a g e s o n t 6 t 6 r 6 a l i s 6 s e n p a r a l l d I e p o u r c h a q u e 6 c h a n t i l l o n s e f o n 1 e p r o t o c o l e p r o p o s 6 p a r H U G U E S ( 1 9 9 1 ) . A c e t e f f e t , c h a q u e d i l u t i o n a 6 t 6 r 6 p a r t i e d a n s u n e p f a q u e d e m i c r o t i t r a t i o n M i c r o t e s t I I c o m p o r t a n t 9 6 c u p u f e s d r a i s o n d e O , O 5 m I p o u r c h a c u n e i l e s 9 5 c u p u l e s , l e q u e l l e s o n t 6 t 6 p r 6 a l a b l e m e n t r e m p l i e s d e 0 , 2 r n l d e b o u i t f o n l a c t o s 6 ( F j . g u r e 1 ) -

A p r d s i n c u b a t i o n d 4 4 o C p e n d a n t 2 4 h e u r e s c o u v e r c l e , I e s c u p u l e s p r 6 s e n t a n t u n e c o u l e u r m e n t a t i o n d u l a c t o s e e t d e I r a c i d i f i c a t i o n d u

Frgw,e 1 Plaque de microtitTation

comportant 96 cupules

d e s p l a q u e s f e r m 6 e s p a r u n j a u n e r 6 s u l t a n t d e l a f e r - n i l i e u o n t 6 t 6 d 6 n o m b r S e s . L e n o m b r e l e p l u s p r o b a b l e d e c o l i f o r m e s t h e r m o t o l 6 - r a n t s c o n t e n u s d a n s u n : l i n r r o f c d e l e d i ' l u t i o n 1 a p : - u s f a i U l e a 6 t 6 c a l c u l 6 d p a r t i r d ' u n t r i p l e t d e 1 6 s u t t a t s 6 m a n a n t d e t r o i s n i v e a u x d e d i l u t i o n s u c c e s - s i f s . L e s c a f c u l s o n t 6 t 6 e f f e c t u 6 s p a r u n e c a l c u l a -

trice programm6e Hewlett-

P a c k a r d H P 4 1 C . F i n a l e m e n t I e t i t r e b a c t 6 r i e n d e I ' 6 c h a n t i l l o n i n i t i a l a 6 t 6 e x p r i m 6 e n n o m b r e I e p l u s p r o b a b l e d e c o l i f o r m e s t h e r m o t o l 6 r a n t s p a r m i l - f i l i t r e ( N . P . P . ) . A u c o u r s d ' u n c e r t a i n n o m b r e d ' e s s a i s , u n r e p i q u a g e s y s t S m a t i q u e d e c u p u l e s p o s i t i v e s ( c o u l e u r j a u n e ) a 6 t 6 p r a t i q u 6 a f i n d e c o n f i r m e r o u n o n l a p r 6 s e n c e i l e s b a c t 6 r i e s E . t c h e ' n i c b L a " c o I i . A c e t e f f e t , u n e 6 s e b o u c l d e d u c o n t e n u d ' u n e c u p u l e p o s i t i v e d e b o u i f l o n l a c t o s 6 a 6 t 6 e n s e m e n c 6 e s u r e a u p e p t o n 6 e s a n s i n d o l e , p a r a i l l e u r s , u n e o s e b o u c l 6 e d u c o n t e n u d e c e t t e m € m e c u p u l e a 6 t 6 p o r t 6 e d a n s u n t u b e d e b o u i l l o n l a c t o s 6 b i l i 6 a u v e r t b r i l l a n t ( t e s t d ' E r J K l , l A N m o d i f i 6 M A C K E N Z T E ) .

L e s d e u x t u b e s a i n s i i n o c u l 6 s o n t e n s u i t e 6 t 6 p 1 a c 6 s a 4 4 " C p e n d a n t 2 4 h e u r e s . L a m i s e e n 6 v i d e n c e d e I ' i n d o l e s u r e a u p e p t o n 6 e p a r l e r 6 a c - t i f d e K O V A C S e t u n e c r o i s s a n c e b a c t 6 r i e n n e d a n s I e t u b e c o n t e n a n t l e b o u i l l o n l a c t o s 6 a u v e r t b r i l l a n t o n t 6 t 6 r e t e n u e s p o u r c a r a c t 6 r i s e r

Etchuich,La coU.

A n a l y s e s t a t i s t i q u e d e s q u a n t i f i c a t i o n s b a c t , 6 r i e n n e s

P o u r c h a q u e 6 c h a n t i l l o n i n i t i a l e t p o u r c h a q u e m 6 t h o d e , s i x v a l e u r s d e 1 a d e n s i t 6 b a c t 6 r i e n n e o n t 6 t 6 o b t e n u e s . C e s v a l e u r s o n t f a i t I ' o b j e t

(5)

Nombre Le plus pz,obable (N.P.P.) des coLiformes en riuiAre

d ' u n e t r a n s f o r m a t i o n l o g a r i t h m i q u e a v a n t d ' 6 t r e s o u m i s e d I ' a n a l y s e d e v a r i a n c e a p r d s v d r i f i c a t i o n d e I ' h o m o g 6 n 6 i t 6 d e s v a r i a n c e s p a r l e t e s t de BARTLETT (SNEDECOR et COCHRAN, 1957) .

L e p r i n c i p e d e c e t e s t c o n s i s t e i c a l c u l e r i l a n s u n p r e m i e r t e m p s l a quantit€

o u M = f . L o g 1 0 . ( a l o g s - 2 - I r o 9 s f r )

6 t a n t l - e n o m b r e t o t a l d e s e s t i m a t i o n s i n d 6 p e n d a n t . "

" i d " l a v a r i a n c e c o n m u n e e t f I e n o m b r e d e d e q r 6 s d e f i b e r t S d e c h a c u n e d ' e I l e s ; e t

L a f o n c t i o n d i s c r j - m i n a n t e $ e s t e n s u i t e c o m p a r 6 e d l a d i s t r i b u t j . o n d u k h i - d e u x a v e c ( a - 1 ) c l e g r 6 i d e l i b e r t 6 .

L ' a b s e n c e d ' i n f l u e n c e d ' u n f a c t e u r c o n t r 6 l 6 e s t v 6 r i f i 5 e p a r I e t e s t d e S N E D E C O R . A c e t e f f e t , I e q u o t i e n t d u c a r r 6 m o y e n a s s o c i 6 a u f a c t e u r 6 t u i l i 6 p a r u n autre carr6 moyen impos6 par 1e tableau d ' a n a l y s e d e v a - r i a n c e e s t c o m p a r 6 d 1 a l i m i t e s u p 6 r i e u r e d u d o m a i n e d ' a c c e p t a t i o n d o n - n 6 p a r u n e t a b l e d e I a l o i d e S N E D E C O R p o u r u n r i s q u e d e p r e m i d r e e s p 6 - c e p r 6 a l a b l e m e n t f i x 6 .

R E s u l r n r s E T D r s c u s s r o N

L e t a b l e a u 1 d o n n e , p o u r c h a q u e 6 c h a n t i l l o n d ' e a u d e M o s e l l e , l e s r 6 s u l t a t s d e s t i t r a g e s d e s c o l i f o r m e s t h e r m o t o l 6 r a n t s o b t e n u s p a r l e s d e u x t e c h n i q u e s e t e x p r i m 6 s e n n o m b r e I e p l u s p r o b a b l e ( N . P . P . ) o u e n u n i t 6 s f o r m a t r i c e s d e c o l o n i e s ( U . F . C . ) . F i g u r e n t 6 g a l e m e n t , I ' e s t i m a - t i o n d e I a c o n c e n t r a t i o n b a c t € r i e n n e e x p r i m 6 e e n n o m b r e d e m i c r o o r g a - n i s m e s p a r m i l l i l i t r e i l e 1 ' 6 c h a n t i f l o n a i n s i q u e 1 a m o y e n n e g 6 o m 6 t r i q u e d e s v a l e u r s d e c h a q u e e n s e m b l e d e 6 t i t r a g e s r € a l i s 6 s p o u r c h a q u e 6 c h a n - t i l l o n . L e s r 6 s u l t a t s d e s d e u x p r e m i d r e s e x p 6 r i e n c e s p r o v i e n n e n t d e d i l u t i o n s d 6 c a 1 6 e s d r u n e p u i s s a n c e d . e 1 O p a r r a p p o r t a u s c h 6 m a a d o p t 6 p o u r l e s a u t r e s m a n i p u l a t i o n s ; I r e n s e m e n c e m e n t d e s p l a q u e s d u p r e m i e r n i v e a u d e i l i l u t i o n a y a n t 6 t 6 e f f e c t u 6 d p a r t i r c l e 1 ' e a u n o n d i f u 6 e . E n f i n , 1 e s n o m b r e s s o u l i g n 6 s c o r r e s p o n d e n t a u x p l a q u e s d o n t I e s c u p u l e s o n t f a i t 1 ' o b j e t d ' u n r e p i q u a g r e c o n f i r m a t i f .

1 - A p p r 6 c i a t i o n d u m o d e l e d e d i s t r i b u t i o n d e s U . F . C .

L a v a l j - d i t 6 d e 1 ' h y p o t h d s e s e f o n l a q u e l l e 1 e s u n i t 6 s f o r m a t r i c e s d e c o l o n i e s s o n t d i s t r i b u 6 e s a u h a s a r d a u s e i n d e l a s u s p e n s i o n b a c t 6 r i e n - n e t i t r 6 e ( m o d 6 l e d e P o i s s o n ) a 6 t 6 a p p r 6 c i 6 e p a r I e c o e f f i c i e n t d e d i s p e r s i o n d e F I S H E R ( P O O L E , 1 9 7 4 ) .

M

L C n h

. a + 1

J A I

(6)

2 0 q

Scierrces de L'eau 1, no4

TabLeau 1

Titres bactdriens obtenus par Les deun techniques de titrage

E c h a n t i l l o n M S t h o d e R 6 s u l t a t

C o n c e n t r a t i o n b a c t e r i e n n e p a r

n l ( u )

5 5 9 5 4 3 5 6 1 6 0 8

M o y e n n e g 6 o m 6 t ! i q u e ( p a r m 1 ) T r i p l e t

9 6 - 9 3 - 1 6 9 6 - 9 0 - 2 2 q 6 - q l - 1 7 9 6 - g o - 2 4 9 6 - a A - 2 9 9 6 - 9 0 - 2 9

5 1 0 4 1 0 520 5 4 0 3 5 0 5 0 0 5 4

5 0

N . P . P .

2 7 ,9 5

2 8 ,0 5 2'7 t95 3 0 , 4 0

N . P . P .

3 8 , 1 0 4 9 , 1 0 4 2 , 1 0 4 ' 7 , 3 5 4 1 , 2 5

N . P . P .

1 , 1 5 o , 9 9 1 t 2 O 1 , o 2 1 ,0 5 1 . 1 3

2 , ' 7 4 ' 7 2 , ' 1 3 4 2 , 4 6 9 2 , 7 4 9 2 , 7 4 7 2 , 7 4 4

2 . ' 1 O a 2 , 6 1 3 2 , 7 1 6 2 , 7 3 2 2 , 5 4 4

2 , 4 8 2

2 , 9 ' 1 6 2 , 9 1 6

2 , 4 6 3 2 , 9 2 4 2 , 9 2 4 2 , 9 2 9 2 , 4 4 6 Triplet

9 6 - 9 4 - 3 0 9 6 - 9 6 - 3 5

q 6 - q 4 - l s N . P . P .

; ; _ ; ; _ ; ; 9 6 - 9 4 - 3 4 9 6 - 9 6 - 3 5

' 1 6 2 9 9 4 4 4 2 9 4 7 4 2 5 9 0 9

7 3 A 4 4 0 4 4 0 8 3 0 8 5 0 '7'7 0

200 2 6 0 2 A O 2 a o 320

3 8 0 3 7 0 440 4 2 0 4 9 0 2 0

2 a 2 A

3 3 3 B 4 4 4 2 4 9 f r i p l e t 6 6 - 1 1 - 0 6 1 - 9 - 0 a 1 - 1 ) - i b q - o - u 6 2 - 1 1 - O

T r i p l e t 8 9 - 1 4 - a ) - ) 1 - N . P . P . : : : : 9 0 - 2 0 - 7 1 - 2 5 -

7 3 8 4 a 4 8 3 8 5 7'7

N . P . P .

2 , 3 4 2 , 0 9 2 , 0 2 2 , 6 2 1 ,6 0

464 4 1 4 4 0 4 4 ' 7 0 320

2 , 3 6 2 2 , 3 a O 2 , 3 1 0 2 , 3 2 2 2 t 3 5 4

z , x i t

2 , 4 1 5 2 , 4 4 7 2 , 4 4 7 2 , 5 0 5

2 t 6 ' 1 0 2 , 6 2 1 2 , 6 0 6 2 , 6 ' 7 2 2 , 5 O 5

2 , 5 A o 2 , 5 6 8 2 , 6 4 3 2 , 6 2 3 2 , 6 9 0 230

1 9 8 240 204 2 1 A 2 2 6

(7)

Nombv,e Le plus ptobable (N.P.P) des coliformes en z,iuiAre

? o ?

TabTeau 7 Titv,es bactr1riens obtenus pan

: (suite)

Les deurc techniques de titrage

E c h a n t i l l o n R E sulta t

9 6 - 4 5 - 1 9 2 - 4 1 - 3

-

g t - 1 g - z 9 5 - 3 7 - 6

e n c r a t b a c t 6 ! i e n n e p a r

n 1 ( u )

1 o 9 u g e o m e t r i q u e ( p a r n t )

N . P . P .

4 , 0 8 4 , 2 9 4 , 1 2 4 , A A 4 t ' 7 A

T ! i p l e t

_

N . P . P . g z - i d -

-

g t - i d - s 4 - 2 2 -

u . F . c .

Triplet 9 6 - 4 ' 7 - ' 7 9 6 - 4 5 - 1 1 9 6 - 4 1 - 1 N . P . P .

; ; _ ; ; _ ; 9 6 - 4 3 - 7 9 6 - 5 1 - 6

t 1 ' 7 6 3 , 0 7 0

8 1 6 2 t 9 1 2

8 5 8 2 , 9 3 3

9 2 4

a 2 4 2 , 9 1 6

9 ' 1 6 2 , 9 a 9

9 4 0 2 , 9 7 3

2 , a a 1 2 , A r 9 2 , a t 9 2 ,8 0 6

7 5 4 6 7 4

4 5 0 76

7 2 6 6

6 4

7 6 A 7 2 0 6 6 0

6 4 0

6 2 4 5 9 0 5 8 0 6 0 0 490 5 5

6 2 5 9 5 8 5 0 4 9

N . P . P . 3 , 7 ' 7 3 , 0 1 3 , 3 9 3 , t 8 3 , 1 4 2 , 2 5

6 , 9 1 ' 7

, O a 6 , 3 r 6 , 2 ' 7 7 , 4 9

2 , 8 ' 7 ' 7 2 , 7 a A 2 , a 3 1 2 , A O 3

2 , ' 7 4 A 2 t ' 7 9 2 2 , 7 7 1 2 , 7 6 3 2 , 1 1 A 2 , 6 9 0

3 , 1 4 1 3 , 1 5 1 3 , 0 4 5 3 , 1 0 1 3 , 0 9 8 3 , r 7 6

3 , 0 2 5 3 , 0 6 8 2 , 9 6 4 3 , O 4 9 3 , O 2 5 1382

t 4 1 6 1 1 1 0 1 2 5 4 I 4 9 8

1 0 6 0 1230 1 1 7 0 920 1 1 2 0 1 0 6 0

1 4 0 8 1 5 1 8 1 4 r O 1 6 1 8 1 6 4 8

1 1 4 0 122A 1 1 9 0 1 1 0 0 1 1 2 0 1 1 9 0 T r i p l e t N . P . P .

9 6 - 4 7 - A 7 , O 4 9 6 - 4 5 - 9 6 , 8 3 9 6 - 5 3 - 4 7 , 5 9 g o - E 6 - - 4 1 , o s 9 6 - 5 2 - 9 8 , 0 9 9 6 - 5 7 - 3 A , 2 4

1 0 6 1 2 3 11'7 9 2 t 1 2 1 0 6

1 2 2 1 1 9 1 1 0 1 1 2 1 1 9

3 , 1 4 9

1 t a 1

1 4 q r 3 , 1 4 9

3 , 2 0 9 3 , 2 1 7

3 , O 5 ' 1 3 , 0 8 6 2 , O ' 1 6 3 , O 4 l 3 , 0 4 9 3 , 0 7 6 U . P . C .

(8)

394 Sciences de Lteau 1, no4

I 1 a 6 t 6 c a l c u l 6 p o u r c h a q u e g r o u p e d e 6 r 6 s u l t a t s o b t e n u s p a r l a m 6 t h o d e d . e s m e m b r a n e s f i l t r a n t e s p a r I a r e l a t i o n

- 2 ( n - 1 ) s 2 m

o r i m r e p r 6 s e n t e l a m o y e n n e e t s 2 I a v a r i a n c e e m p i r i q u e d e s n r 6 s u l t a t s ( n = 6) . Ces coefficients o n t 6 t 6 c o r n p a r 6 s A 1 a c l i s t r i b u t i o n d u k h i - d e u x a v e c n - 1 = 5 d e g r 6 s d e t i b e r t 6 e t a u c u n e d e s v a l e u r s D ' t r o u v S e s p o u r c h a q u e E c h a n t i l l o n n ' 6 t a i t s i g n i f i c a t i v e a u n i v e a u i l e p r o b a b i l i t 6 d e 9 5 t ( T a b l - e a u 2 ) . C e r 6 s u l t a t e s t c o n f i . r n 6 p a r u n t e s t u n i q u e r 6 a l i s 6 s u r l a s o m m e d e s c o e f f i c i e n t s o 2 q u i e s t a L o r s c o n f r o n t 6 d I a d i s t r i - b u t i o n d u k h i - d e u x a v e c 4 O d e q r d s d e l i b e r t 6 -

TabLeau 2

Coefficient de dispersion de FISHER des numdratians sut'milieu gdlosd

caLcuLd Dout' chaoue 2chantilLon dt eau

( X t , r u = 17'1 at;ec 5 degrds de Libertd)

L ' a u g m e n t a t i - o n d u n o m b r e d e d e g r 6 s d e l i b e r t 6 c o n s 6 c u t i v e d f i n t 6 - g r a t i o n d e I ' e n s e m b l e d e t o u s f e s r 6 s u l t a t s p r 6 s e n t e 1 ' a v a n t a g e d ' a m 6 - I i o r e r I a p u i s s a n c e d e c e t e s t u n i q u e .

L e m o d d l e d e P o i s s o n s e m b l e p a r c o n s 6 q u e n t 6 t r e r e s p e c t 6 c e q u i t r a - d u i t u n e b o n n e h o m o g 6 n 6 i t 6 a u s e i n d e p e t i t s v o l u m e s ( b i e n agit6s a u m o m e n t d u t i t r a g e p a r l e s p i p e t a g e s ! ) . U n e o b s e r v a t i o n a n a l o g u e a d 6 j d 6 t 6 r a p p o r t 6 e p a r E L - S H A A R A W I e t a L . ( 1 9 8 1 ) t a n d i s q u e d ' a u t r e s a u t e u r s

( B R E T T T M A Y E R e t G A U T H T E R , 7 9 ' 7 9 ; KAPER et aL., 1 9 7 8 ) m e n t i o n n e n t p a r c o n t r e d e l a r g e s 6 c a r t s e n t r e l e s r 6 s u l t a t s e x p 6 r i m e n t a u x o b t e n u s p a r f i l t r a t i o n s u r m e m b r a n e e t l e m o d d l e t h 6 o r i q u e d e P o i s s o n .

E n f i n , 1 ' 6 c a r t - t y p e c a 1 c u 1 6 p o u r l e s 1 6 s u l t a t s o b t e n u s s u r m e m b r a n e f i l t r a n t e p r e n d l a v a l e u r O , 0 4 8 ' 1 c e q u i c o r r e s p o n d d u n c o e f f j - c i e n t d e v a r i a t i o n d e 1 7 , 2 z . C e r 6 s u l t a t p e r m e t , d a n s 1 e c a d r e 1 i m i t 6 d e c e t t e e x p 6 r i m e n t a t i o n , u n e c o m p a r a i s o n a i s 6 e d e s p r 6 c i s i o n s o b t e n u e s p a r l e s d e u x t e c h n i q u e s d e t i t r a g e . C e p e n d a n t , i I e s t s a n s s i g n i f i c a t i o n g 6 n 6 r a 1 e c a r f a m 6 t h o i l e s u r m e m b r a n e f i l t r a n t e n e p o s s d d e p a s d e v a r i a n - c e s p 6 c i f i q u e .

2 - C o m p a r a i s o n d e s r e s u l t a t s d e l l . P . P . a v e c le m o d e l e t h e O r i q u e

T . a r e n r o d r r e t i h i l i f 5 d p q r 6 q r r l f a f e e v n r i m 6 s e n N . P . P . a 6 t 6 a p p r 6 C i 6 e p a r l a v a f e u r d e 1 ' 6 c a r t - t y p e e m p i r i q u e s = O , 0 5 4 2 d l a q u e l l e e s t a s s o - c i 6 I e c o e f f i c i e n t d e v a r i a t i o n 1 2 , 5 % . L e c a l c u l d e s l i m i t e s i n f 6 r i e u - r e e t s u p 6 r i e u r e d ' u n i n t e r v a l l e d e c o n f i a n c e a 9 5 B c o n d u i t a u x v a l - e u r s O , 0 4 4 5 e t 0 , 0 5 9 4 d o n t I e s c o e f f i c i e n t s d e v a r i a t i o n r e s p e c t i f s s o n t 1 0 ' 3 % e t 1 6 , 1 % .

(9)

Nombre Le pLus probabLe (II.P.P.) des coLiformes en v.iuiDre

? o <

T , a c o m p a r a i s o n d e c e s c h i f f r e s a v e c 1 ' 6 c a r t - t y p e t h 6 o r i q u e d o n n 6 p a r l a r e l a t i o n

- I o q

= Y - r - - y'n

( l o r s q u e n = 9 6 c u p u l e s e n s e m e n c 6 e s , o l o q = 0 , 0 5 6 1 c e q u i c o r r e s p o n d a u n c o e f f i c i e n t d e v a r i a t i o n d e 1 3 % ) m o n t r e u n e + - r d s b o n n e s i m i l i t u d e . C e c i s e m b l e i n d i q u e r q u e , c o n m e p r 6 c 6 d e m m e n t , l e s f a c t e u r s s o n t c o n t r 6 f 6 s

( e r r e u r s l o r s c l e s p r 6 l d v e m e n t s d e l i q u i d e , o u b l i 6 v e n t u e l d e c e r t a i n e s c u p u l e s p e n d a n t 1 ' e n s e m e n c e m e n t , v a r a i b i l i t 6 d . u v o l u m e d e s g o u t t e s , . . . ) e t o n t p r o b a b l e m e n t u n i m p a c t r e l a t i v e m e n t f a i b l e s u r l e s r 6 s u l t a l s d e s

q u a n t i f i c a t i o n s . L a p r 6 c i s i o n d e 1 3 * p e u t p a r c o n s 6 q u e n t 6 t r e c o n s i d 6 -

r6e cornme un paramdtre caract6ristique de la m6thode propos6e ce qui

n r e s t p a s l e c a s p o u r I a m 6 t h o d e 6 n u m 6 r a t r : i c e s u r m i l i e u g 6 1 o s 6 o r ) I a p r 6 c i s i o n p r 6 s e n t e u n c a r a c t e r e a l S a t o i r e .

3 - C o m o a r a i s o n d e s t i t r e s b a c t 6 r i e n s o b t e n u s p a r l e s d e u x m 6 t h o d e s

L a f i g u r e 2 c o n c r 6 t i s e a u m o y e n d ' u n e r e p r 6 s e n t a t i o n g r a p h i q u e l e s d i f f 6 r e n c e s d e s r 6 s u l t a t s o b t e n u s p a r 1 e s d e u x t e c h n i q u e s d e t i t r a g e .

4 0 0

-

a

I

I a

a

E c

G

e c I

a I 2 3 4 5 6

n 6 c h a n t i i l o n

t l

N . P . P ,

U m P m b r a n F s f i I t r a n t e s

Figur.e 2

Cornpaz,a'tson des moyennes g2omdtriques des titres bactdt:iens obtenus pa! del& m€thodes de titrages

(P.P.D.S. d. 5 % = PLus Petite Dlffdrence Significatiue d 5 %)

(10)

Sciences de L'eau 1, no4

L e s r 6 s u l t a t s . o b t e n u s e n m i l i e u l i q u i d e s o n t c l a n s 7 c a s s u r 8 p l u s 6 f e v 6 s q r . r e c e u x obtenus sur membrane. Le calcul d e t a p l u s p e t i t e d i f - f 6 r e n c e s i g n i f i c a t i v e ( P . P . D . S . ) a u s e u i f 5 * a 6 t 6 r 6 a 1 i s 6 a p a r t i r d e l a v a r i a n c e c o m m u n e a c h a c u n d e s 1 6 g r o u p e s d e 6 t i t r a g e s ( l ' h o m o - 9 6 n 6 i t 6 d e s v a r i a n c e s a y a n t 6 t 6 v 6 r i f i 6 e p a r f e t e s t d e B a r t - l e t t ) . L a P . P . D . S . d 5 t a i n s i o b t e n u e e t s c h 6 m a t i s 6 e s u r I a f i g u r e 2 m o n t r e q u e s e u l e s 1 e s d i f f 6 r e n c e s d e t i t r a g e e n t r e l e s 6 c h a n t i l l o n s n o l , 3 , 5 , 7 e t I s o n t s i g n i f i c a t i v e s .

B i e n q u e t r d s c o m m o d e c e p r o c 6 d 6 n ' a u t o r i s e q u ' u n e c o m p a r a i s o n d e s r 6 s u l t a t s n u m d r i q u e s p r i s d e u x d d e u x . L r a n a l y s e d . e v a r i a n c e p e r m e t p a r c o n t r e u n e e x p l o i t a t i o n g l o b a l e d e s r 6 s u l - t a t s c e q u i a p o u r e f f e t d ' a u g - m e n t e r I a p o r t 6 e a i n s i q u e f a r i c h e s s e d e s c o n c l u s i o n s .

A p r d s v 6 r i f i c a t i o n d e I ' h o m o g 6 n 6 i t 6 d e s v a r i a n c e s a u m o y e n d u t e s t d e B a r t f e t t , 1 e c a l c u 1 d e s c a r r 6 s m o y e n s a p e r m i s d ' e x 6 c u t e r l e s t e s + - s d e s i g n i f i c a t i o n r e f a t i f s a u x d i v e r s f a c t e u r s c o n t r 6 1 6 s . L e t a b l e a u 3 r 6 c a p i t u l e l e s v a l e u r s d . e s c a r r 6 s m o y e n s a i n s i q u e l e s q u a n t i t 6 s e s t i - m 6 e s p a r c e u x - c i c o n f o r m 6 m e n t a u m o d 6 1 e d ' a n a l y s e d e v a r i a n c e a d a p t 6

( p 1 a n factorief a d e u x f a c t e u r s c o n t r 6 l 6 s : 6 c h a n t i l l o n e t m 6 t h o d e , a v e c r 6 p 6 t i t i o n s ) .

L ' a b s e n c e d ' e f f e t d G d u n f a c t e u r c o n t r 6 l 6 s e v 6 r i f i e e n a p p l i q u a n t l e t e s t d e S N E D E C O R .

Tableau 3

TabLeau d'anaLyse de uariance

S o u r c e d e v a r i a n c e

Somme

d e d e

l i b e r t 6 V

C a r r 6 m o y e n Q u a n t i t 6 e s t i m 6 e

s, = Q/^J par q

F a c t e u r A

6 c h a n t i l l o n 5 , 0 5 0 3 9

o , 7 2 7 4 a o 2 + 7 2 o o 2

F a c t e u r B

m6thode

o , o 7 3 9 3

0 , 0 7 3 9 3 o 2 + 6 o 2 +

R A R 48 0:

B

I n t e r a c t . i o n

AB o , 0 9 5 8 3

o , 0 1 3 6 9 o f r + e o f o

R 6 s i d u e l l e

o , 2 7 2 3 2

8 0

o , 0 0 2 6 5

o 2

R

TOTALE 5 , 4 3 2 4 7

a i n s i I ' i n f l u e n c e d u f a c t e u r A B ( i n t e r a c t i o n ) s e c o n t r 6 l e e n c o m p a - r a n t l e r a p p o r t

F = q i q = 5 . 1 7 i l e r i m l + a F ^ ^ . ( ? , e 0 ) = 2 , r 5

' a R n R

d e f a 1 o i d e S N E D E C O R a u s e u j - f d e p r o b a b i l i t 6 d e C , 9 5 a v e c r e s p e c t i v e m e n t

? o i R A d o n r 6 q u E Y r t r d a I i h e r t 6 . p r r i s o l r c F a n e s f c t t n 6 . r i e u r , i c e t t e I i m i t e ( e n

9 5

(11)

Nombre Le pLus probable (N.P.P.) des collfortnes en rio'tdre

f a i t F A B e s t m e m e s u p 6 r i e u r d F o , s g s ( 7 ; 8 0 ) ) c a t i - f e t - 1 ' e x i s t e n c e d ' u n e i n t e r a c t i o n e n t r e 1 o n ) e t B ( n 6 t h o d e ) e s t a d m i s e .

l e t e s t e s t t r d s s i g n i f i - I e s f a c t e u r s A ( 6 c h a n t i l -

L r i n f l u e n c e 6 v e n t u e l t e d u f a c t e u . r B ( m 6 t h o d e ) s e c o n t r 6 l e e n c o m p a -

r : n { - l a r ^ h h ^ r +

_ g B - .

" "

=

E ] ; = 5 , 4 O d 1 a l i m i - t e F 6 , e 5 ( 1 ; 7 ) = 5 . 5 9 .

B i e n q u e l 6 g d r e m e n t i n f 6 r i e u r d c e t t e l i m i t e F B e s t n 6 a n m o i n s s u p 6 r i e u r d F 6 , s a s ( 1 ; 7 ) . L ' i n f l u e n c e d u f a c t e u r B ( m 6 t h o d e ) e s t a d m i s e a v e c u n r i s q u e d ' e r r e u r i n f 6 r i e u r a 6 % -

L e c a r a c t e r e c o n s e r v a t e u r d e c e t e s t p e u t s u r p r e n d . r e m a i s s o n m a n q u e d e p u i s s a n c e d o i t 6 t r e a t t r i b u 6 a u f a i t q u e q B e s t c o m p a r d n o n p a s a l a v a r i a n c e r 6 s i d u e l f e m a i s a l a v a r i a n c e d r i n t e r a c t i o n , c e q u i a I ' a v a n t a - g e d . ' a u g m e n t e r consiil6rablement 1 a p o r t 6 e d u 1 6 s u l t a t : I a c o n c l u s i o n n r 6 t a n t p l u s s e u l e m e n t l i m i t 6 e a u x 8 6 c h a n t i l l o n s 6 t u d j . 6 s m a i s 6 t e n d u e d f ' e n s e m b f e d e t o u s l e s p r 6 l d v e m e n t s p o s s i b l e s d o n t i f s s o n t i s s u s .

E n f i n , n e r 6 p o n d a n t p a s a u n e q u e s t i o n p r 6 a l a b l e m e n t p o s 6 e , 1 ' 6 t u d e d e I ' i n f l u e n c e d u f a c t e u r A ( 6 c h a n t i f l o n ) n ' a i c i a u c u n i n t d r 6 t m a i s i I e s t 6 v i d e n t q u e l e s 6 c h a n t i f l o n s n r a v a i e n t p a s 1 a m d m e concentration b a c t 6 r i e n n e .

L e l o g a r i t h n e d 6 c i m a l c l u r a p p o r t m o y e n d e s e s t i r a t i o n s d o n n 6 e s p a r c h a q u e m 6 t h o d e e s t 6 g a l d l a d i f f 6 r e n c e m t - m 2 o u r n r € t m 2 d 6 s i g n e n t 1 a m o y e n n e a r i t h m 6 t i q u e d e s l o g a r i t h n e s d e t o u t e s 1 e s v a l e u r s t r o u v 6 e s r e s p e c t i v e m e n t a v e c 1 a m 6 t h o d e d u N . p . p . e t l a m 6 t h o d e d e s m e m b r a n e s f i l t r a n t e s .

A i n s i ,

6 3 0 + . . . + 1 9 0 4 0 = 2 , 8 4 2 e t m 2 = L 6

o L 2 + . . . + 1 8

3 8 5 l 6

4 8

m l = 4 A

= 2 , 1 8 6

d ' o i m r - m 2 = 0 , 0 5 5 5 c e q u i c o r r e s p o n d a u n r a p p o r t m o y e n d e 1 , 1 3 6 . L a d i f f 6 r e n c e e n t r e l e s d e u x n 6 t h o d e s e s t d o n c d e 1 4 % t 6 Z -

A n o t r e c o n n a i s s a n c e , t o u s f e s a u t e u r s a y a n t c o m p a r 6 l - e s d e u x m 6 t h o - d e s ( G R E E N e t L r T s K y , 1 9 8 0 ; M A C c i \ R T H y e t a L . , 1 9 6 7 ; V E L Z , l 9 7 O ;

THoMAS et WOoDWARD, 1955) ont cons'iat6 fe m6me ph6nomene avec une ampleur

v a r i a b l e s e L o n l r o r i g i n e e t l a n a t r : r e d e I ' e a u . H o r m i s 1 e f a i t q u e l e s m i c r o o r g a n i s m e s s e d 6 v e f o p p e n t e n g 6 n 6 r a 1 p l u s f a c i l e m e n t d a n s u n m i L i e u l i q u i d e q u e s u r u n s u p p o r t s o l i d e , l e s t r a v a u x d e G R E E N e t L I T S K Y , ( 1 9 8 0 ) o n t m o n t r 6 q u e I a d i f f 6 r e n c e s e m b l e s ' a c c e n t u e r p o u r f e s b a c t 6 r i e s p r o v e - n a n t a l r u n e e a u p e u f a v o r a b l e d l e u r c r o i s s a n c e .

L a d i f f 6 r e n c e t r o u v e u n e a u t r e e x p l i c a t i - o n s ' a p p u y a n t s u r l r e x i s t e n c e d ' u n e i n t e r a c t i o n m 6 t h o d e - 6 c h a n t i l l - o n . E n e f f e t , I ' a n p l i t u d e d e s 6 c a r t s o b s e r v 6 s e s t v a r i a b l e d . r u n 6 c h a n t i l l o n d I ' a u t r e e t c e l a d ' u n e m a n i d r e t r d s s i g n i f i c a t i v e . L e s v a r i a t i o n s d a n s l e s f r 6 q u e n c e s r e l a t i v e s d e s d i f f 6 r e n t e s e s p e c e s c l i m a t i q u e s ( l e s s i v a g e d e s s o l s p a r l a p l u i e ) o u 1 e s c a r a c t e r e s p h y s i c o - c h i m i q u e s d e 1 ' e a u , s o n t r 6 p e r c u t 6 e s s u r l e s r 6 s u l - t a t s p a r l a s 6 l e c t i v i t 6 p r 6 f 6 r e n t i e l l - e q u ' e x e r c e n t o b l i g a t o i r e m e n t f e s m 6 t h o d e s d e t i t r a g e s u r l e s d i v e r s e s e s p e c e s d e m i c r o o r g a n i s m e s .

4 - P r o p o r t i o n d ' E s c h e r i c h i a c o l i

L e s r 6 s u l t a t s d e s r e p i q u a g e s r 6 a l i s 6 s p o u r u n c e r t a i n n o m b r e d e c u p u - I e s p o s i t i v e s d e s e s s a i s n " 3 , 5 , 6 e t B ( c h i f f r e s s o u l i g n 6 s d r u n t r a i t

(12)

3 9 8 S c i e n c e s d e 1 ' e a u 7 , n o 4

p l e i n d a n s l e t a b l e a u 1 ) , e n v u e d e c o n f i r m e r I a p r 6 s e n c e a ' E S c h o S u L c l v L a C 1 , ( i s o n t c o n s i g n 6 s d a n s I e t a b l e a u 4 . S e f o n l e s 6 c h a n t i f l o n s , u n n o m b r e v a r i a b l e d e r 6 a c t i o n s " p r 6 s e n c e d e c o l i f o r m e s ' r n t a p a s 6 t 6 c o n f i r m 6 c o m m e 6 t a n t d 0 5 l a m u l t i p l i c a t i o n a e E . e O l - t , n a l g r 6 I a t e n r p 6 r a t u r e d r i n c u b a - t i o n s 6 l e c t i v e d e 4 4 o C . L e s q u a t r e p r o p o r t i o n s d e r 6 s u l t a t s c o n f i r m a n t

Ia pr6sence a, E.IC^WLC4,LA COIi ne peuvent pas 6tre consid6r6s conune

6 g a 1 e s . E n e f f e t , I a v a f e u r k h i - d e u x c a l c u l 6 e ' d p a r t i r d e s e f f e c t i f s o b - s e r v 6 s e t d e s e f f e c t i f s t h 6 o r i q u e s o b t e n u s a v e c I ' h y p o t h E s e d r 6 g a l i t 6 d e s p r o p o r t i o n s d e r 6 s u l t a t s c o n f i r m 6 s e s t 6 g a 1 e e 4 7 , 2 8 , o r l a l i m i t e s u p 6 r j _ e u r e d u c l o m a i n e d ' a c c e p t a t i o n a u s e u i l d e . p r o b a b i l i t 6 0 , 9 9 5 a v e c 3 d e g r 6 s d e l i b e r t 6 e s t 6 9 a l e a 1 2 , 8 ( t e s t t r E s s i g n i f i c a t i f ) '

Tableau 4

RdsuLtat des repiquages uisant d confirTnet La prdsence de Etche'n'Lchia" eoli

E c h a n t i l f o n n - 5 n o 5 n " 5 n " 8

N o m b r e t o t a l d e c u p u l e s

r o n i n r r 6 o c

1 0 5 1 0 5 1 0 0

9 2

cupules avec ElcLrc,l-Lchia coli

9 7 6 ' 7 6 Z

8 5

cupures sans Etchenichia coli

La proportion moyenne I de cupules contenant E.seheniclvLa coU a 6|'e estim6e par

X p . p = ;

oD n est l-e nombre d'6chantiflons consid6r6s et les p1 d6signent 1es proportions de r6ponses confirm6es pour chacun de ces 6chantillons. La variance de p a 6t6 obtenue par Ia re]ation :

3 8

n . . v \ } , / - / - \ - - - j - \ / ^

n ( n - 1 ) ' r i

I = I

pl' (cocHRAN, 1977)

A v a n t d ' e f f e c t u e r l e s c a l c u l s , I e s p r o p o r t i o n s p i o n t 5 t 6 e s t i m d e s d p a r t i r d ' u n m 6 m e e f f e c t i f d e c u p u l e s p o u r c h a q u e i n d i c e i . L e n o m b r e m i n i m a l 6 t a n t 9 2 , l e s d o n n 6 e s r e d o n d a n t e s d e s e s s a i s n " 5 , 6 e t 8 o n t 6 t 6 6 l i m i n 6 e s p a r t i r a g e a u s o r t d I ' a i c l e d , u n e t a b l e d e n o m b r e a u h a s a r d .

F i n a l e m e n t , I e s c a f c u l s r 6 a 1 i s 6 s a v e c l e s r a p p o r t s

# , # , L " , * # o n t d o n n 6 F = O,gZ5 et v (F) = 0,00555. L a p r o p o r t i o n m o y e n n e d e c u p u l e s

positives avec pr6sence de Esche"tich"La coXi est donc 6ga1e i :

8 2 , 5 % + 7 , 5 z p o u r l e t y p e d ' e a u 6 t u c l i 6 .

(13)

Nombz,e Le p7.us probable (N.p.p.) des col-Lfonnes en z,iuidt,e

C e n a n q u e a p p a r e n t d e s p 6 c i f i c i t 6 d e l a m 6 t h o d e n ' e s t p a s p r o p r e a u x t i t r a g e s e n r n i l i e u l i q u i d e c a r i I e s t g 6 n 6 r a l e m e n t a d m i s q u e l o r s d ' u n e c o l i m 6 t r i e s u r m i l i e u g 6 t o s 6 r a c t o s 6 e 4 4 " c e n v i r o n 5 I d e s c o l o n i e s

lactose + ne sont pas des ESc| WLeh,La. eou.

C e p e n d a n t , d ' a p r € s 1 e s p o u r c e n t a g e s o b t e n u s , i l s e m b l e q u e l e p h 6 n o - m e n e s o i t p r u s d i s c r e t s u r m i r i e u g 6 l o s 6 a d d i t i o n n 6 d ' i n h i b i t e u r q u , e n m i l i e u l i q u i d e d a n s l - e s c o n d i t i o n s d e n o s e s s a i s . E n o u t r e , l a p r o p o r - l i o n ! e r 6 p o n s e s p o s i t i v e s n e r 6 s u l t a n t p a s d e l a m u l t i p l i c a t i o n d e E . c o U 6 t a n t v a r i a b l e s e l o n 1 ' 6 c h a n t i l l o n , i I n ' e s t p a s p o s s i b l e d ' 6 t a - b l i r d e f a g o n p r 6 c i s e u n e c o r r 6 l a t i o n e n t r e l a p r o p o r t i o n d e " f a u x p o s i t i f s " e t f i m p o r t a n c e d e I a d i f f 6 r e n c e d e s t i t r a g e s e n t r e l e s d e u x m 6 t h o d e s u t i l i s 6 e s e u 6 g a r d a u t r o p f a i b l e n o m b r e d . , e x p 6 r i e n c e s .

Coruclus I ott

L r u t i l - i s a t i o n d ' u n t i t r a g e e n m i l i e u l i q u i d e a v e c 9 6 e n s e m e n c e m e n E s p a r d i l u t i o n e t d e 1 a m 6 t h o d e d u n o m b r e I e p l u s p r o b a b l e r e p r 6 s e n t e u n o u t i l a n a l y t i q u e e x t r E m e m e n t e f f i c a c e p o u r I ' a n a l y s e d e s e a u x . p l u s i e u r s

qualit6s peuvent 6tre d6gag6es :

. l e l o g a r i t h m e d u N . P . P . e s t n o r m a l e m e n t d i t r i b u 6 ,

. I o r s q u e 9 6 e n s e n e n c e m e n t s s o n t r 6 a 1 i s 6 s d c h a q u e n i v e a u d e d j . l u t i o n , l a p r 6 c i s i o n e s t b o n n e ( ! 1 3 % ) e t p r a t i q u e m e n t i n d 6 p e n d a n t e d e I a d e n s i -

t 5 1 . r : n f 6 r i a - - a

. p a r c o n s 6 q u e n t , f ' o u t i l a n a l y t i q u e u t i l i s 6 d a n s c e s c o n d i t i o n s e s t p a r f a i t e m e n t a d a p t 6 d 1 ' e x p l o i t a t i o n s t a t i s t i q u e e t d 1 ' 6 t u d e d e l a p o l - l u t i o n d e s e a u x ( M A I U L e t a L . , 7 9 8 2 ) -

L o r s d r u n e 6 t u d e c o m p a r a t i v e a v e c l a t e c h n i q u e c l a s s i q u e d e t i t r a g e , d e s c o l i f o r m e s s u r m i l i e u g 6 l o s 6 ( + lactose + T T C + t e r g i t o l ) i I a 6 t 6 m o n t r 6 q u e I a d i s t r i b u t i o n b a c t 6 r i e n n e r 6 p o n d a i t a u m o d € l e d e p o i s s o n . U n e d i f f 6 r e n c e d e 1 4 t 6 ? a 6 t 6 t r o u v 6 e e n t r e l e s r 6 s u l t a t s d e s t i t r a - g e s e n d 6 f a v e u r d e I a m 6 t h o d e s u r m i l i e u g 6 1 o s 6 , q u i p e u t s ' e x p l i q u e r p a r I e c a r a c t 6 r e m o i n s s t r e s s a n t e t l a m o i n d r e s 6 l e c t i v i t 6 d e l a n u m 6 - r a t i o n e n m i l i e u l i q u i d e . e c e t 6 g a r d l o r s d ' u n e n u m 6 r a t i o n d e s c o l i - f o r m e s t h e r m o t o l 6 r a n t s i 4 4 o C d a n s u n b o u i l l o n l a c t o s 6 2 8 2 , 5 + 7 , 7 % s e u l e m e n t d e s c u p u l e s l a c t o s e + c o n t e n a i e n t E t c l t e n L c L u L a . c o U .

D a n s l e s c o n d i t i o n s d r u t i l i s a t i o n p r o p o s 6 e s , I a t e c h n i q u e d ' i n o c u l a - t i o n e n m i l i e u l i q u i d e ( 9 6 ensemencements par dilution) e t I ' e s t i m a t i o n d e s c o l i f o r m e s e n r i v i € r e p a r l a m 6 t h o d e d u n o m b r e 1 e p l u s p r o b a b l e s o n t r 6 a l i s t e s ( l r e m p l o i d e p l a q u e s d e m i c r o t i t r a t i o n e n f a c i l i t e c o n s i d 6 r a - b l e m e n t l a m i s e e n o e u v r e ) . E l l e d o n n e u n e p r S c i s i o n a u s s i b o n n e , s i n o n

meilleure dans bien des cas, que Ia m6thode du comptage des unit6s forma-

t r i c e s i l e c o l o n i e s s u r m i l i e u g 6 1 o s 6 . D e p 1 u s , c ' e s t I a s e u l e m 6 t h o d e q u i a u t o r i s e u n e a u t o m a t i s a t i o n a u n i v e a u d e 1 a l e c t u r e e t d . u r e p i q u a g e d e s c u p u l e s . S o n i n t 6 r 6 t 6 v i d e n t d a n s I ' e s t i m a t i o n d e s c o l i f o r m e s d a n s I e s e a u x r e l a t i v e m e n t c o n t a r n i n 6 e s c o m m e f e s e a u x d e r i v i E r e n e n o u s f e r a c e p e n d a n t p a s o u b l i e r q u e , q u e l l e q u e s o i t l a m 6 t h o d e , l e s r 6 s u l - t a t s o b t e n u s n ' o n t q u r u n e v a l e u r r e l a t i v e e t n e s o n t i i 6 s a u n o m b r e d e b a c t 6 r i e s p r 6 s e n t e s d a n s I e m i l i e u q u e p a r d e s f a c t e u r s d e p r o p o r t i o n - n a 1 i t 6 m a l c o n n u s q u i d 6 p e n d e n t d I a f o i s d e s b a c t 6 r i e s r e c h e r c h 6 e s e t d e I a m 6 t h o d e u t i l i s 6 e ( D O U G H E R T Y , t964).

(14)

4 0 0 S c i e n c e s d e L t e a u 7 , n o 4

R E r E n E r u c r s B I B L I o G R A P H I o U E S

B E Y T O U T D . , L A V E F A N H . E t R . B N A U D M . P . . 1 9 7 5 , M 6 t h o d e p r a t i q u e d ' 6 v a l u a t i o n n u m 6 r i q u e a p p l i c a b l e a u x L e c h n i q u e s m i n j - a t u r i s 6 e s d e t i t r a g e e n p l a g e s . A n n . B i o L . C L i n . , t z , 3 7 9 - 3 8 4 .

B R E I T T M A Y E R J . P . e t G A U T H I E R 1 4 . J . , 1 9 7 9 , D 6 n o m b r e n e n t d e s b a c t 6 r i e s e n m i l i e u m a r i n : f a c t e u r s d e v a r i a t i o n e t d ' i n c e r - t i t u d e . A n n . M i e r s b t o l . ( I n s t . P a s t e u r ) ,

l 3 o a , 2 4 5 - 2 5 6 .

c o c H R A N v t . G . , 1 9 1 7 , S o n p L i n g t e c h n i q u e s 3 d 6 d j - t i o n ) W i l e y a n d S o n s P u b l i s h e r s , N e w - Y o r k .

D o U G H E R T Y R . l ' 1 . , 1 9 6 4 , A n i m a f v i r u s t i t r a t i o n s l n ? e c h n i q u e s i n e r p e r i m e n t a l t ' L r o L o g y , 1 6 9 - 2 2 3 , H a r r i s R . c . , e d i t . , A c a d e m i c P r e s s P u b l i s h e r s , L o n d r e s . E L - S H A A R W I A . H . , E S T E R B Y S . R . a n d D U T K A B . J . , 1 9 8 1 , B a c t e r i a l . d e n s j t y i n w a t e r d e t e m i n e d b y p o i s s o n o r n e g a t i v e b i n o m i a l d i s t r i b u t i o n s . A p p L . E n u i r o n . M i c n o b i o l . , 4 1 , l o 7 - 1 1 6 .

G R E E N B . L . a n d L I T S K Y t ^ I . , 1 9 8 0 , E v a l u a t i o n o f m e m b r a n e f i l t e r m e t h o d s f o r e n u m e r a t i o n o f f a e ( r a l c o l i f o m s f r o m m a r i n e w a t e r . Ma:r,ine Enuiron. Res , , 3 , 267 -276 . H A L V O R S O N H . O . a n d Z T E G L E R N . R . , ( 1 9 3 3 a ) , A p p l i c a t i o n o f s t a t i s t i c s t o p r o b l e m s i n b a c t e r i o l o g y . I - A m e a n s o f d e t e r m i n i n g b a c t e r i a l p o p u l a t i o n b y t h e d i l u t i o n m e t h o d . . J . B a c t e r i o l . , 2 5 , 1 o 1 - I 2 r . H A L V O R S O N H . O . a n d Z T E G L E R N . R . , ( 1 9 3 3 b ) , A p p l i c a t i o n o f s t a t i s t i c s t o p r o b l e n s i n l - , A . f F r i n l o d v I T T - A c o n S i d e r a t i o n o f t h e d i l u t i o n d a t a o b t a i n e d b y u s i n g s e v e - r a l d i l u t i o n s . J , t t a e L e n i o l . , 2 6 , 5 5 9 - 5 6 7 . I T U G U E S 8 . , 1 9 8 1 , N o u v e l l e u t i l i s a t i o n d e l a m 6 t h o d e d u n o m b r e I e p l u s p r o b a l f l e e n v i r o l o g i e - Application d 1 a n i s e e n 6 v i -

^ ^ h - 6 ^ + i 1 a d ! , r n + i r i : a t i o n d e S v i r u s

d a n s I e m i l i e u h y d r i q u e . T h d s e d e D o c t o r a t

d ' E t a t A s S c i e n c e s , U n i v e r s i t e d e M e t z ' K A P E R J . B . , M I L L S A . L ' A N d C C L W E L L R . R ' , 1 9 7 8 , E v a l u a t i o n o f t h e a c c u r a r y a n d p r e c i s i o n o f e n w e r a t i n g a e r o b i c h e t e r o -

trophs in water samples bY the spread

p l a t e m e t h o d . A p p L . E n ' t i r o n . M i c r o b i o l . ' 3 5 , 1 5 6 - 1 6 r .

M c C A R T H Y J . A . , D E L A N E Y J - E . a n d G R A S S O R . J . , 1 9 6 1 , C i t 6 p a r V E L Z C . J . , 1 9 7 0 -

M A U L A . ' D O L L A R D M ' A . e t B L O C K J ' c ' , 1 9 8 1 , A p p l i c a t i o n d u p r i n c i p e d u m a x i m u m d e v r a i s e m b l a n c e ( N . P . P . ) a l a n m 6 r a t i o n b a c t 6 r i e n n e s u r m i l i e u g 6 L o s 6 . J . F t : . H g d r o l . , 1 2 , 2 4 5 - 2 5 4 .

M A U L A . , D O L L A R D M . A . e t B L O C K J . C . ' 1 9 8 2 , E t u d e d e 1 ' h 6 t 6 r o g 6 n 6 i t 6 s p a t l o - t e m p o r e l l e d . e s b a c t 6 r i e s c o l i f o t m e s e n r i v i d r e . J . F r . H y d r o l . ' 1 3 , 1 4 1 ' 1 5 6 - P o O L E R . w . , 1 9 7 4 , A n i n t r o d u c t i o n t o q u a n t i t a t i o e e c o l o g A ' M c G r a w - H i l 1 P u b l i s h e r s , N e w - Y o r k .

P R O S T H . e t H U G U E S 8 . , 1 9 8 2 , D 6 n o m b r e - m e n t d e s m i c r o o r g a n i s m e s p a r l a t e c h n i q u e

d u n o n b f e l e p l u s p r o b a b l e ( i n d i c e N . P . P . ) : e m p l o i s t a t i s t i q u e d e c e t i n d i c e .

A n n . F a L s , E r , p . C h i m . , 7 5 , 1 a 5 - 2 O 7 . S N E D E C O R G . W . a n d C O C H R A N W . c . , 1 9 5 7 , S t a t i s L j c a l m e t h o d s ( 6 4 6 d i t i o n ) , I o w a S t a t e U n i v e r s i L y P r e s s . A n e s , I o w a . T H O M A S H . A . a n d W O O D W A R D R . L . , 1 9 5 5 , E s t i m a t i o n o f c o l i f o r n d e n s i t y b y t h e

membrane fi-lter and the fementation

t u b e m e t h o d s . J . P r a b l . H e a L t h . , 4 5 , 1 4 3 7 - t 4 3 7 .

V E L Z J . C . , 1 9 7 O , B a c t e r i a l e n m e r a t i o n , L n A p p t l a Q s L r e o J l l J a n t T ; a t t a q , 5 / 2 - 5 9 J 1 W i l e y I n t e r s c i e n c e P u b l r s h e r s , N e w - Y o r k .

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