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Détecteur à fluorescence Agilent Infinity 1260

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Academic year: 2022

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(1)

Agilent Technologies

Détecteur à fluorescence Agilent Infinity 1260

Manuel d'utilisation

(2)

Manuel d’utilisation du FLD Agilent 1260

Avertissements

© Agilent Technologies, Inc. 2010-2012, 2013

Conformément aux lois nationales et inter- nationales relatives à la propriété intellec- tuelle, toute reproduction totale ou partielle de ce manuel sous quelque forme que ce soit, par quelque moyen que ce soit, voie électronique ou traduction, est interdite sans le consentement écrit préalable de la société Agilent Technologies, Inc.

Référence du manuel

G1321-93014

Edition

05/2013

Imprimé en Allemagne Agilent Technologies Hewlett-Packard-Strasse 8 76337 Waldbronn

Ce produit peut être utilisé en tant que composant d'un dispositif de diagnos- tic in vitro, si ce dernier est enregistré auprès des autorités compétentes et est conforme aux directives corres- pondantes. Faute de quoi, il est exclu- sivement réservé à un usage général en laboratoire.

Garantie

Les informations contenues dans ce document sont fournies “en l'état” et pourront faire l'objet de modifica- tions sans préavis dans les éditions ultérieures. Dans les limites de la lég- islation en vigueur, Agilent exclut en outre toute garantie, expresse ou implicite, quant à ce manuel et aux informations contenues dans ce dernier, notamment, mais sans s'y restreindre, toute garantie march- ande et aptitude à un but particulier.

En aucun cas, Agilent ne peut être tenu responsable des éventuelles erreurs contenues dans ce document, ni des dommages directs ou indirects pouvant découler des informations contenues dans ce document, de la fourniture, de l'usage ou de la qualité de ce document. Si Agilent et l'utilisa- teur ont souscrit un contrat écrit dis- tinct dont les conditions de garantie relatives au produit couvert par ce document entrent en conflit avec les présentes conditions, les conditions de garantie du contrat distinct se sub- stituent aux conditions stipulées dans le présent document.

Licences technologiques

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(3)

Manuel d’utilisation du FLD Agilent 1260 3 Contenu de ce manuel

Contenu de ce manuel

Ce manuel concerne :

le détecteur à fluorescence Agilent Infinity 1260 (G1321B SPECTRA),

le détecteur à fluorescence Agilent Infinity 1260 (G1321C), et

le détecteur à fluorescence Agilent série 1200 (G1321A) (obsolète).

1 Présentation du détecteur à fluorescence

Ce chapitre présente le détecteur et son principe de fonctionnement.

2 Exigences et spécifications relatives au site

Ce chapitre fournit des informations concernant les exigences d'ordre envi- ronnemental, ainsi que les caractéristiques techniques et les performances.

3 Installation du module

Ce chapitre fournit des informations concernant la configuration de la pile de modules conseillée pour votre système et l'installation de votre module.

4 Utilisation du détecteur à fluorescence

Ce chapitre vous explique comment utiliser le détecteur.

5 Optimisation du détecteur

Ce chapitre fournit des informations concernant l'optimisation du détecteur.

6 Dépannage et diagnostic

Ce chapitre donne un aperçu des fonctions de dépannage et de diagnostic et des différentes interfaces utilisateur.

(4)

4 Manuel d’utilisation du FLD Agilent 1260 Contenu de ce manuel

7 Informations concernant les erreurs

Le chapitre suivant explique la signification des messages d'erreur et fournit des informations sur les causes probables et les actions recommandées pour revenir à un état de fonctionnement normal.

8 Fonctions de test

Ce chapitre décrit les fonctions de test intégrées du détecteur.

9 Maintenance

Ce chapitre fournit les informations générales concernant la maintenance et la réparation du détecteur.

10 Pièces pour la maintenance

Ce chapitre présente des informations sur les pièces utilisées pour la mainte- nance.

11 Identification des câbles

Ce chapitre fournit des informations sur les câbles utilisés avec les modules Agilent Infinity série 1200.

12 Informations sur le matériel

Ce chapitre décrit le détecteur de manière plus détaillée d'un point de vue matériel et électronique.

13 Annexe

Ce chapitre fournit des informations générales et des informations concernant la sécurité.

(5)

Manuel d’utilisation du FLD Agilent 1260 5 Sommaire

Sommaire

1 Présentation du détecteur à fluorescence 9

Présentation du détecteur

10

Fonctionnement du détecteur

12

Effet Raman

15

Unité optique

16

Informations analytiques découlant des données primaires

24

Présentation du système

29

Matériaux Bio-Inert

32

2 Exigences et spécifications relatives au site 35

Exigences relatives au site

36

Caractéristiques physiques

39

Caractéristiques de performance

40

3 Installation du module 51

Déballage du module

52

Optimisation de la configuration de la pile de modules

54

Informations sur l'évacuation des fuites et des déchets

59

Installation du module

63

Raccordements des liquides au module

66

4 Utilisation du détecteur à fluorescence 71

Gestion des fuites et déchets

72

Avant de commencer

73

Mise en service et vérification des performances du détecteur

74

Développement de méthodes

78

Exemple : Optimisation pour plusieurs composés

97

Acquisition de spectres en modes TOUS LES SPECTRES DU PIC et SPECTRES APEX UNIQUEMENT

107

Informations sur les solvants

111

(6)

6 Manuel d’utilisation du FLD Agilent 1260 Sommaire

5 Optimisation du détecteur 115

Généralités sur l’optimisation

116

Les caractéristiques de conception facilitent l’optimisation.

119

Détermination des meilleures longueurs d’onde

120

Détermination de la meilleure amplification du signal

122

Changement de la fréquence de la lampe-éclair au xénon

129

Sélection du meilleur temps de réponse

131

Réduction de la lumière parasite

134

6 Dépannage et diagnostic 137

Présentation des voyants et des fonctions de test du module

138

Voyants d'état

139

Interfaces utilisateur

141

Logiciel Agilent Lab Advisor

142

7 Informations concernant les erreurs 143

Qu'est-ce qu'un message d'erreur ?

144

Messages d'erreur généraux

145

Messages d’erreur du détecteur

154

8 Fonctions de test 161

Introduction

162

Schéma du trajet de la lumière

163

Test d'intensité de lampe

164

Test de signal sur bruit Raman ASTM

166

Utilisation du chromatogramme de test intégré

170

Vérification de la précision des longueurs d’onde et calibration

172

Test de précision de la longueur d’onde

175

Procédure de calibration en longueur d'onde

181

(7)

Manuel d’utilisation du FLD Agilent 1260 7 Sommaire

9 Maintenance 187

Introduction à la maintenance

188

Avertissements et mises en garde

189

Présentation de la maintenance

191

Nettoyage du module

192

Remplacement d'une cuve à circulation

193

Utilisation de la cuvette

197

Rinçage de la cuve à circulation

198

Élimination des fuites

199

Remplacement des pièces du système d'élimination des fuites

200

Remplacement de la carte d'interface

201

Remplacement du micrologiciel du module

202

Tests et calibrations

203

10 Pièces pour la maintenance 205

Présentation des pièces utilisées pour la maintenance

206

Kit de cuvette

207

Kit d'accessoires

208

11 Identification des câbles 211

Présentation générale des câbles

212

Câbles analogiques

214

Câbles de commande à distance

216

Câbles DCB

219

Câbles réseau CAN/LAN

221

Câble de contacts externes

222

Entre module Agilent et PC

223

12 Informations sur le matériel 225

Description du micrologiciel

226

Cartes d’interface optionnelles

229

Raccordements électriques

233

Interfaces

236

Réglage du commutateur de configuration 8 bits (sans LAN intégré)

243

Maintenance préventive

248

Structure de l’instrument

249

(8)

8 Manuel d’utilisation du FLD Agilent 1260 Sommaire

13 Annexe 251

Informations de sécurité générales

252

Directive sur les déchets d'équipements électriques et électroniques (DEEE) (2002/96/CE)

255

Informations sur les piles au lithium

256

Perturbations radioélectriques

257

Émissions sonores

258

Radiation UV (lampe UV seulement)

259

Informations sur les solvants

260

Agilent Technologies sur Internet

262

(9)

9 Manuel d’utilisation du FLD Agilent 1260

Agilent Technologies

1

Présentation du détecteur à fluorescence

Présentation du détecteur 10 Fonctionnement du détecteur 12 Effet Raman 15

Unité optique 16

Système de référence 23

Informations analytiques découlant des données primaires 24 Détection de fluorescence 24

Détection de phosphorescence 25 Traitement des données brutes 25 Présentation du système 29

Gestion des fuites et déchets 29 Matériaux Bio-Inert 32

Ce chapitre présente le détecteur et son principe de fonctionnement.

(10)

10 Manuel d’utilisation du FLD Agilent 1260

1

Présentation du détecteur à fluorescence Présentation du détecteur

Présentation du détecteur

Versions du détecteur

Le détecteur se caractérise par les plus hautes performances optiques, la conformité aux BPL (Bonnes Pratiques de Laboratoire) et une maintenance facile. Il possède les caractéristiques suivantes :

lampe-éclair pour une intensité maximale et des limites de détection très basses,

mode multi-canaux pour les spectres en ligne (G1321B SPECTRA),

acquisition de spectres et détection multi-canaux simultanées (G1321B SPECTRA),

cuvette en option pour les mesures hors ligne,

accès facile à la cuve à circulation par l'avant, pour remplacement rapide et

fonction intégrée de vérification de la précision de la longueur d'onde.

Tableau 1 Versions du détecteur

Version Description

G1321C Commercialisé en juin 2013 comme FLD Infinity 1260 mono-canal sans fonctionnalités de spectre. Fréquence d'acquisition maximale de 74 Hz.

Micrologiciel de l'instrument : A.06.54. Commandé par Instant Pilot avec micrologiciel B.02.16, pilote A.02.08, Agilent OpenLAB CDS ChemStation Edition C.01.05, OpenLAB EZChromEdition EE A.04.05, ICF A.02.01 et Lab Advisor B.02.04. La version G1321C ne peut pas être convertie en G1321A/B.

G1321B SPECTRA Commercialisé en juin 2010 comme FLD Infinity 1260 multi-canal avec fonctionnalités de spectre. Fréquence d'acquisition maximale de 74 Hz. La version G1321B peut être convertie en G1321A (mode émulation). Lors de la commercialisation du G1321C, la fréquence d'acquisition a été augmentée à 144,9 Hz au maximum ( micrologiciel de l'instrument A.06.54).

G1321A Commercialisé en août 1998 comme FLD série 1100 multi-canal avec fonctionnalités de spectre. Fréquence d'acquisition maximale de 18 Hz.

Devenu obsolète à la commercialisation du FLD G1321B.

(11)

Manuel d’utilisation du FLD Agilent 1260 11 Présentation du détecteur à fluorescence

1

Présentation du détecteur

Pour plus de détails sur les caractéristiques, voir « Caractéristiques de performance », page 40

Figure 1 Détecteur à fluorescence Agilent Infinity 1260

(12)

12 Manuel d’utilisation du FLD Agilent 1260

1

Présentation du détecteur à fluorescence Fonctionnement du détecteur

Fonctionnement du détecteur

Détection de la luminescence

La luminescence, ou émission de lumière, se produit lorsque des molécules retournent à leur état fondamental après avoir été excitées par un apport d'énergie. Les molécules peuvent être excitées par différentes formes d'énerg- ie, le processus d'excitation étant spécifique pour chaque forme d'énergie. Par exemple, lorsque l'énergie est apportée sous forme de lumière, le processus d'excitation est appelé photoluminescence.

Dans les cas simples, l'émission de lumière est le phénomène inverse de l'absorption (voir Figure 2, page 12). Pour le sodium gazeux, par exemple, les spectres d’absorption et d’émission correspondent à une simple ligne à la même longueur d’onde. Les spectres d’absorption et d’émission de molécules organiques en solution sont des raies et non des lignes.

Figure 2 Absorption de lumière en fonction de l’émission de lumière

Quand une molécule plus complexe passe de son état fondamental à un état excité, l’énergie absorbée est distribuée dans divers sous-niveaux vibration- nels et rotatoires. Lorsque cette même molécule revient à son état fondamen- tal, cette énergie vibrationnelle et rotatoire est d’abord perdue par relaxation

VWhdgei^dc

c^kZVj‚cZg\Zi^fjZ'

c^kZVj‚cZg\Zi^fjZ&

ajb^cZhXZcXZ c^kZVj

‚cZg\Zi^fjZ' c^kZVj

‚cZg\Zi^fjZ&

]

] k

k

(13)

Manuel d’utilisation du FLD Agilent 1260 13 Présentation du détecteur à fluorescence

1

Fonctionnement du détecteur

sans émission radiative. Ensuite, la molécule passe de son niveau d’énergie à l’un des sous-niveaux vibrationnels ou rotatoires de son état fondamental en émettant de la lumière (voir Figure 3, page 13). Le maximum d’absorption caractéristique d’une substance est λEX et le maximum d’émission est λEM.

Figure 3 Relation entre longueurs d'onde d'excitation et d'émission

Le terme photoluminescence regroupe deux phénomènes, fluorescence et phosphorescence, qui diffèrent l’un de l’autre sur un point caractéristique : le décalage de l'émission après l'excitation. Si une molécule émet de la lumière 10-9 à 10-5secondes après avoir été illuminée, le phénomène observé est la fluorescence. Si une molécule émet de la lumière plus de 10-3secondes après illumination, le phénomène observé est la phosphorescence.

La phosphorescence est un phénomène plus long car il y a changement de spin de l’un des électrons impliqué dans le rayonnement d’excitation, lors d’une collision avec une molécule de solvant, par exemple. La molécule excitée se retrouve alors à l'état triplet T (voir Figure 4, page 14).

&

H%

VWhdgei^dc ‚b^hh^dc

H igVch^i^dchVch

gVndccZbZci ä

(14)

14 Manuel d’utilisation du FLD Agilent 1260

1

Présentation du détecteur à fluorescence Fonctionnement du détecteur

Figure 4 Transitions d’énergie en phosphorescence

Avant de pouvoir retourner à son état fondamental, la molécule doit rétablir le spin antérieur. Comme la probabilité de collision avec une autre molécule ayant le spin nécessaire est faible, la molécule reste dans l’état triplet pendant un temps relativement long. Durant le deuxième changement de spin, la molé- cule perd plus d’énergie par relaxation sans émission radiative. Par consé- quent, la lumière émise par phosphorescence présente une énergie inférieure et une longueur d'onde supérieure à celle émise par fluorescence.

Formule : E = h x λ-1 Où :

E désigne l'énergie

h représente la constante de Planck λ désigne la longueur d'onde

X]Vc\ZbZciYZhe^c

E]dhe]dgZhXZcXZ I H

H

&

&

%

(15)

Manuel d’utilisation du FLD Agilent 1260 15 Présentation du détecteur à fluorescence

1

Effet Raman

Effet Raman

L'effet Raman se produit lorsque la lumière incidente excite, dans l’échan- tillon, des molécules qui diffusent ensuite la lumière. Si la majeure partie de cette lumière diffusée est à la même longueur d'onde que la lumière incidente, une partie est diffusée à une longueur d'onde différente. Cette diffusion iné- lastique de la lumière est appelée diffusion Raman. Elle découle de modifica- tions du mouvement de la molécule.

Figure 5 Raman

La différence d’énergie entre la lumière incidente (Ei) et la lumière diffusée par effet Raman (Es) est égale à l'énergie nécessaire pour modifier l’état vibra- tionnel de la molécule (c’est-à-dire l’énergie nécessaire pour que la molécule entre en vibration, Ev). La différence d’énergie est appelée décalage Raman.

Ev = Ei - Es

On observe souvent plusieurs signaux à décalage Raman différents, chacun associé à différents mouvements de vibration ou de rotation des molécules contenues dans l'échantillon. La molécule et son environnement déterminent les signaux Raman observés (le cas échéant).

Un tracé de l’intensité Raman en fonction du décalage Raman est un spectre Raman.

wX]Vci^aadc Ajb^ƒgZ^cX^YZciZ

9^[[jh^dcYZGVaZ^\]

b„bZadc\jZjgYdcYZ fjZaVajb^ƒgZ^cX^YZciZ

9^[[jh^dcYZGVbVc cdjkZaaZadc\jZjgYdcYZ

Ajb^ƒgZY^[[jh‚Z

(16)

16 Manuel d’utilisation du FLD Agilent 1260

1

Présentation du détecteur à fluorescence Unité optique

Unité optique

Tous les éléments du système optique illustrés dans la Figure 6, page 17, y compris la lampe- éclair au xénon, le condenseur d'excitation, la fente d'excita- tion, le miroir, le réseau d'excitation, la cuve à circulation, le condenseur d'émission, le filtre passe-bande, la fente d'émission, le réseau d'émission et le tube photomultiplicateur se trouvent dans un boîtier métallique à l'intérieur du détecteur. Le détecteur à fluorescence dispose d'un système optique de type réseau/réseau permettant la sélection des longueurs d'onde d'excitation et d'émission. La cuve à circulation est accessible par l'avant du détecteur à fluorescence.

(17)

Manuel d’utilisation du FLD Agilent 1260 17 Présentation du détecteur à fluorescence

1

Unité optique

Figure 6 Unité optique

La source de rayonnement est une lampe-éclair au xénon. L'éclair de 3 µs génère un spectre de lumière continu de 200 nm à 900 nm. La distribution de la lumière sortante peut être exprimée sous forme de pourcentages par inter- valle de 100 nm (voir Figure 7, page 18). Selon la sensibilité requise, la lampe peut être utilisée pendant environ 1 000 heures. En fonctionnement automati- que, vous pouvez économiser la lampe en paramétrant, à partir du clavier, des points de consigne tels que la lampe ne produise des éclairs que pendant l’ana- lyse. Vous pouvez utiliser la lampe tant qu’elle s’allume, mais le niveau de bruit risque d'augmenter avec le temps.

8VgiZYZaVaVbeZ"‚XaV^g :chZbWaZYZ

Y‚XaZcX]ZbZci AVbeZ"‚XaV^gVjm‚cdc

8dcYZchZjg:M

;ZciZ:M

B^gd^g

:chZbWaZYZg‚hZVj:M

8jkZ|X^gXjaVi^dc

:chZbWaZYZ g‚hZVj:B

;ZciZ:B

;^aigZ eVhhZ"WVcYZ IjWZe]did bjai^ea^XViZjg 8dcYZchZjg:B

9^dYZYZ g‚[‚gZcXZ

9^[[jhZjg

(18)

18 Manuel d’utilisation du FLD Agilent 1260

1

Présentation du détecteur à fluorescence Unité optique

La dégradation des UV (en particulier en dessous de 250 nm) est considérable- ment plus élevée que la dégradation dans le domaine visible. En général, l’uti- lisation de l'option "Lampe allumée pendant l'analyse" et du mode "économie"

prolonge la vie de la lampe d’un ordre de grandeur.

Figure 7 Distribution de l'énergie lumineuse (données du fournisseur)

Le rayonnement émis par la lampe est dispersé et réfléchi par le réseau du monochromateur d'excitation sur la fente d'entrée de la cuve.

Le réseau holographique concave constitue le principal élément du monochro- mateur chargé de disperser et de réfléchir la lumière incidente. Sa surface est parcourue par de nombreux sillons microscopiques (1 200 sillons par millimè- tre). Le réseau est de type échelette pour améliorer les performances dans le domaine visible.

>ciZch^i‚gZaVi^kZ

Adc\jZjgY»dcYZcb

(19)

Manuel d’utilisation du FLD Agilent 1260 19 Présentation du détecteur à fluorescence

1

Unité optique

Figure 8 Ensemble miroir

La géométrie des sillons est optimisée pour réfléchir la quasi-totalité de la lumière incidente dans le 1erordre et la disperser avec une efficacité d'environ 70 % dans le domaine ultraviolet. La plus grande partie des 30 % de lumière restants est réfléchie dans l'ordre zéro, sans dispersion. Figure 9, page 20 illustre le trajet optique à la surface du réseau.

G‚hZVj:M

|a^ci‚g^Zjg

B^gd^g

(20)

20 Manuel d’utilisation du FLD Agilent 1260

1

Présentation du détecteur à fluorescence Unité optique

Figure 9 Dispersion de la lumière par un réseau

Le réseau est entraîné en rotation par un moteur à courant continu sans balais à trois phases. La position du réseau détermine la longueur d'onde ou la gamme de longueurs d’onde de la lumière qui frappe la cuve à circulation. On peut programmer le réseau pour qu'il change de position (ce qui provoque un changement de longueur d'onde) au cours d'une analyse.

Pour l'acquisition de spectres et la détection multi-canal, le réseau tourne à la vitesse de 4 000 tours par minute.

Les réseaux d'excitation et d'émission sont de conception similaire, mais pré- sentent des longueurs d'onde d'échelette différentes. Le réseau d'excitation reflète la majeure partie de la lumière dans le 1er ordre dans le domaine ultra- violet aux alentours de 250 nm, tandis que le réseau d'émission réfléchit mieux dans le domaine visible autour de 400 nm.

Ajb^ƒgZgZ[aZX]^ZY^heZgh‚ZYVchaZ&ZgdgYgZ-%%cb

'%%cb

WaVcX

ajb^ƒgZgZ[aZX]^ZcdcY^heZgh‚ZYdgYgZ%

WaVcX ajb^ƒgZWaVcX]Z^cX^YZciZ

e^kdi

(21)

Manuel d’utilisation du FLD Agilent 1260 21 Présentation du détecteur à fluorescence

1

Unité optique

La cuve à circulation possède un corps en silice fondue massif et peut être sou- mise à une contre-pression maximale de 20 bar. Une contre-pression excessive entraîne la destruction de la cuve. Il est recommandé de faire fonctionner le détecteur à proximité de l’évacuation, la contre-pression y étant faible. Le corps comporte une fente.

Figure 10 Coupe de la cuve à circulation

La luminescence de l'échantillon présente dans la cuve à circulation est recueillie perpendiculairement à la lumière incidente par une deuxième len- tille et traverse une deuxième fente. Avant que la luminescence n'atteigne le monochromateur d'émission, un filtre passe-bande élimine les longueurs d’onde au-dessous d’un certain seuil afin de réduire le bruit dû à la diffusion dans le 1erordre et la lumière parasite dans le 2èmeordre (voir Figure 9, page 20).

(22)

22 Manuel d’utilisation du FLD Agilent 1260

1

Présentation du détecteur à fluorescence Unité optique

La longueur d'onde sélectionnée est réfléchie sur la fente d’entrée du photo- multiplicateur de l’unité optique. La bande passante de la lumière émise est de 20 nm.

Sur la photocathode (Figure 11, page 22), les photons incidents engendrent des électrons. Ces électrons sont accélérés par un champ électrique produit par plusieurs dynodes arquées. Selon la différence de tension entre les paires de dynodes, un électron incident peut provoquer l’accélération d’autres élec- trons. Il en découle un effet d'avalanche et en fin de compte le nombre d'élect- rons produits est tel que l’on peut mesurer un courant. L'amplification est fonction de la tension des dynodes. Elle est contrôlée par microprocesseur et peut être réglée à l'aide de la fonction Gain PMT.

Figure 11 Tube photomultiplicateur

Ce type de photomultiplicateur latéral est compact, ce qui garantit une répon- se rapide et préserve les avantages du trajet optique court illustré dans la Figure 6, page 17.

Les tubes photomultiplicateurs sont conçus pour des plages de longueurs d'onde spécifiques. Un PMT standard offre une sensibilité optimale entre 200 et 600 nm. Pour les longueurs d’onde supérieures, l’utilisation d’un PMT sensi- ble au rouge peut améliorer les performances.

Ajb^ƒgZ^cX^YZciZ

E]didXVi]dYZ

deVfjZ 6cdYZ

Ajb^ƒgZ^cX^YZciZ

9ncdYZhVgfj‚Zh

(23)

Manuel d’utilisation du FLD Agilent 1260 23 Présentation du détecteur à fluorescence

1

Unité optique

Système de référence

Une diode de référence (située derrière la cuve à circulation) mesure la lumière d'excitation (EX) transmise par la cuve, puis corrige les fluctuations de la lampe et les décalages d’intensité à long terme. La diode délivrant un signal non linéaire (en fonction de la longueur d'onde EX), les mesures sont normalisées.

Un diffuseur est situé devant la diode de référence (voir Figure 6, page 17). Ce diffuseur en quartz réduit la lumière et permet d’effectuer une mesure intégra- le de la lumière.

(24)

24 Manuel d’utilisation du FLD Agilent 1260

1

Présentation du détecteur à fluorescence

Informations analytiques découlant des données primaires

Informations analytiques découlant des données primaires

Nous savons maintenant comment sont acquises, dans l’unité optique, les don- nées primaires concernant votre échantillon. Mais comment utiliser ces infor- mations en chimie analytique ? Selon la chimie de votre application, la luminescence mesurée par le détecteur à fluorescence a des caractéristiques différentes. Vous devez décider, sur la base de votre connaissance de l’échant- illon, quel mode de détection vous voulez utiliser.

Détection de fluorescence

Quand la lampe produit un éclair, les composés fluorescents de l'échantillon émettent presque simultanément un rayonnement (voir Figure 12, page 24).

Le phénomène de luminescence étant très limité dans le temps, le détecteur à fluorescence n’acquiert des données que sur une courte période de temps après l'éclair de la lampe.

Figure 12 Mesure de fluorescence

Hj^kgZZibV^ciZc^g

IZbehP¥hR

>ciZch^i‚

6aajbV\Z

(25)

Manuel d’utilisation du FLD Agilent 1260 25 Présentation du détecteur à fluorescence

1

Informations analytiques découlant des données primaires

Détection de phosphorescence

Un jeu de paramètres approprié est utilisé dès que vous choisissez le mode détection de phosphorescence (points de consigne spéciaux dans Paramètres du FLD).

Figure 13 Mesure de phosphorescence

Traitement des données brutes

Si la lampe produit des éclairs à une longueur d’onde unique et à une puis- sance élevée, la fréquence d'acquisition de fluorescence est alors de 296 Hz.

Cela signifie que votre échantillon est illuminé 296 fois par seconde et que toute luminescence produite par les composants élués hors de la colonne est mesurée 296 fois par seconde.

En mode Économie ou Multi-canal, la fréquence des éclairs est de 74 Hz.

>ciZch^i‚

BZhjgZ

IZbehP¥hR wXaV^g

E]dhe]dgZhXZcXZ

(26)

26 Manuel d’utilisation du FLD Agilent 1260

1

Présentation du détecteur à fluorescence

Informations analytiques découlant des données primaires

Figure 14 LAMPE : Fréquence des éclairs, fluorescence et phosphorescence

Vous pouvez améliorer le rapport signal/bruit en désactivant le mode Économie.

La résolution des données est de 20 bits pour un temps de réponse de

4 secondes (temps de réponse par défaut équivalent à une constante de temps de 1,8 seconde et approprié dans des conditions chromatographiques stan- dard). Les signaux faibles peuvent entraîner des erreurs de quantification dues à une résolution insuffisante. Vérifiez le gain PMT que l’on vous propose.

S’il est très différent de la valeur de votre paramètre, changez de méthode ou vérifiez la pureté de votre solvant. Voir aussi « Détermination de la meilleure amplification du signal », page 122.

Vous pouvez utiliser le paramètre Gain PMT pour amplifier le signal. Un nom- bre d’électrons proportionnel au gain PMT est produit pour chaque photon qui atteint le photomultiplicateur. Vous pouvez quantifier les pics petits et grands sur un même chromatogramme en modifiant le paramètre Gain au cours de l’analyse dans un tableau de chronoprogrammation.

AVbeZ

wXaV^g

;ajdgZhXZcXZ

E]dhe]dgZhXZcXZ

IZbeh

REMARQUE Si le mode Économie est désactivé, la durée de vie de la lampe sera considérablement réduite. Prolongez la durée de vie de la lampe en l’éteignant après l’analyse.

(27)

Manuel d’utilisation du FLD Agilent 1260 27 Présentation du détecteur à fluorescence

1

Informations analytiques découlant des données primaires

Figure 15 Gain PMT : Amplification du signal

Vérifiez le gain PMT que l’on vous propose. Si le gain proposé s’écarte de plus de 2 du gain de la méthode, vous devez corriger la méthode.

Chaque pas de réglage du gain PMT (de 0 à 18) correspond approximativement à un doublement du signal. Pour optimiser l’amplification pour le pic avec l’émission la plus importante, augmentez la valeur du paramètre Gain PMT jusqu’à obtenir le meilleur rapport signal/bruit.

Une fois les photons multipliés et convertis en un signal électronique, le signal (analogique) est suivi et maintenu au-delà du photomultiplicateur. Ensuite, le signal est converti par un convertisseur A/N pour donner un point de données brut (numérique). Onze de ces points de données sont regroupés au cours de la première étape du traitement des données. Le groupement des données améliore le rapport signal/bruit.

Les données groupées, qui apparaissent sous forme de gros points noirs dans la Figure 16, page 28, sont ensuite filtrées à l’aide d’un filtre boxcar. Les don- nées sont lissées, sans être réduites, en prenant la moyenne d’un certain nom- bre de points. La moyenne des mêmes points moins le premier plus le suivant, et ainsi de suite, est calculée de sorte qu’il y ait autant de points groupés et fil- trés que de points groupés à l’origine. Vous pouvez définir la longueur de l’élé- ment boxcar à l’aide de la fonction Temps de Réponse : plus le temps de réponse est long et plus le nombre de points pour lequel la moyenne est calcu- lée est grand. Une augmentation d’un facteur quatre du paramètre Temps de réponse (par exemple, 1 s à 4 s) double le rapport signal/bruit.

<V^cEBI

;ajdgZhXZcXZ E]dhe]dgZhXZcXZ

(28)

28 Manuel d’utilisation du FLD Agilent 1260

1

Présentation du détecteur à fluorescence

Informations analytiques découlant des données primaires

Figure 16 Temps de Réponse : Rapport signal/bruit GVeedgiH$7[V^WaZ

Ed^cihYZYdcc‚Zh

\gdje‚h

IZbehYZg‚edchZ2&'*

[djgc^i(ed^cih eVgWdmXVg

;^aigZWdmXVg

Ed^cihYZ Ydcc‚Zh

[^aig‚h GVeedgiH$7‚aZk‚

(29)

Manuel d’utilisation du FLD Agilent 1260 29 Présentation du détecteur à fluorescence

1

Présentation du système

Présentation du système

Gestion des fuites et déchets

Les instruments Infinity série 1200 ont été conçus pour permettre une évacua- tion sans danger des fuites et des déchets. Il importe que tous les principes de sécurité soient bien compris et les consignes respectées.

(30)

30 Manuel d’utilisation du FLD Agilent 1260

1

Présentation du détecteur à fluorescence Présentation du système

Figure 17 Principe d'évacuation des fuites et des déchets (vue d'ensemble, exemple d'une configuration en pile classique)

&

'

(

)

*

+ ,

6

7

8

(31)

Manuel d’utilisation du FLD Agilent 1260 31 Présentation du détecteur à fluorescence

1

Présentation du système

Le compartiment à solvants (1) est conçu pour contenir un volume maximal de 6 L de solvant. Le volume maximal d'un flacon donné placé dans le comparti- ment à solvants ne doit pas dépasser 2,5 L. Pour de plus amples détails, consultez les recommandations d'utilisation pour les cabinets à solvants Agi- lent Infinity série 1200 (une copie imprimée de ces recommandations est expé- diée avec le cabinet à solvants et des copies électroniques sont accessibles sur Internet).

Le bac de récupération (2) (conçu sur mesure pour chaque module) dirige les solvants vers l'avant du module. Cela permet d'éviter tout écoulement de liquide sur les composants internes (p. ex. la cuve à circulation du détecteur).

Le capteur de fuites du bac de récupération arrête le système dès que le niveau de détection de fuite est atteint.

Le port de sortie du bac de récupération (3, A) dirige tout surplus de solvant d'un module à l'autre par l'intermédiaire de l'entonnoir de fuites du module suivant (3, B) jusqu'au tuyau d'évacuation souple (3, C). Le tuyau d'évacuation souple dirige le solvant vers le collecteur de fuites et le capteur de fuites du module d'en dessous.

Le tuyau d'évacuation du port de lavage de l'aiguille de l'échantillonneur (4) dirige les solvants vers l'évacuation.

La sortie du tuyau d'évacuation de condensation du refroidisseur de l'échan- tillonneur automatique (5) dirige les liquides condensés vers l'évacuation.

Le tuyau d'évacuation de la vanne de purge (6) dirige les solvants vers l'éva- cuation.

Le tuyau d'évacuation relié à la sortie du bac de récupération de chacun des instruments en bas de la pile (7) dirige le solvant vers un récipient à déchets approprié.

(32)

32 Manuel d’utilisation du FLD Agilent 1260

1

Présentation du détecteur à fluorescence Matériaux Bio-Inert

Matériaux Bio-Inert

Pour le système CPL Agilent Infinity Bio-Inert 1260, Agilent Technologies uti- lise des matériaux de qualité optimale pour le circuit (également appelés piè- ces mouillées). Ces matériaux sont largement acceptés par les biologistes car réputés pour leur inertie optimale par rapport aux échantillons biologiques et garantissant la meilleure compatibilité avec les échantillons et les solvants courants sur une large plage de pH. En clair, le circuit tout entier est dépourvu d'acier inoxydable et d'autres alliages contenant des métaux tels que le fer, le nickel, le cobalt, le chrome, le molybdène ou le cuivre, susceptibles d'interférer avec les échantillons biologiques. Le circuit en aval de l'introduction des échantillons ne contient aucun métal quel qu'il soit.

Tableau 2 Matériaux Bio-Inert utilisés dans les systèmes Agilent Infinity série 1260

Module Matériaux

Pompe quaternaire Agilent Infinity Bio-Inert série 1260 (G5611A)

Titane, or, platine iridié, céramique, rubis, PTFE, PEEK

Échantillonneur automatique haute performance Agilent Infinity Bio-Inert série 1260

(G5667A)

En amont de l'introduction des échantillons :

Titane, or, PTFE, PEEK, céramique En aval de l'introduction des échantillons :

PEEK, céramique Injecteur manuel Agilent Infinity Bio-Inert série 1260

(G5628A)

PEEK, céramique

Collecteur de fraction analytique Agilent Infinity Bio-Inert série 1260 (G5664A)

PEEK, céramique, PTFE

Cuves à circulation Bio-Inert :

Cuve à circulation standard bio-inert, 10 mm, 13 µL, 120 bar ( 12 MPa) pour MWD/DAD, comprend cuves de circulation BIO du kit de capillaires (réf.

G5615-68755) (G5615-60022)

(pour détecteurs à barrette de diodes DAD Agilent Infinity série 1260 G1315C/D)

PEEK, céramique, saphir, PTFE

(33)

Manuel d’utilisation du FLD Agilent 1260 33 Présentation du détecteur à fluorescence

1

Matériaux Bio-Inert

Cuve de type cartouche Max-Light Bio-inert ( 10 mm, V(s) 1.0 µL) (G5615-60018) et

Cuve de type cartouche Max-Light Bio-inert ( 60 mm, V(s) 4.0 µL) (G5615-60017)

(pour détecteurs à barrette de diodes DAD Agilent Infinity série 1200 G4212A/B)

PEEK, silice fondue

La cuve à circulation Bio-Inert, 8 µL, 20 bar (pH 1–12) comprend un kit de capillaires pour cuves à circulation BIO (réf. G5615-68755) (G5615-60005) (pour détecteur à fluorescence FLD Agilent Infinity 1260 G1321B)

PEEK, silice fondue, PTFE

Échangeur de chaleur Bio-Inert G5616-60050

(pour compartiment de colonne thermostaté Agilent Infinity série 1290 G1316C)

PEEK (revêtement acier)

Têtes de vanne Bio-Inert G4235A, G5631A, G5639A : PEEK,

céramique (à base de Al2O3)

Capillaires de connexion Bio-Inert En amont de l'introduction des

échantillons :

Titane

En aval de l'introduction des échantillons :

Agilent utilise des capillaires en PEEK recouverts d'acier inoxydable qui maintiennent le circuit à l'abri de l'acier et assurent la stabilité de la pression jusqu'à 600 bar au moins.

Tableau 2 Matériaux Bio-Inert utilisés dans les systèmes Agilent Infinity série 1260

Module Matériaux

REMARQUE Afin de garantir une biocompatibilité optimale de votre système CPL Agilent Infinity Bio-Inert 1260, n'intégrez pas de modules ou de pièces standard non inertes au circuit.

N'utilisez aucune pièce non étiquetée Agilent "Bio-Inert". Pour la compatibilité des solvants avec ces matériaux, reportez-vous à « Informations sur les solvants pour les pièces du système CPL 1260 Infinity Bio-Inert », page 111.

(34)

34 Manuel d’utilisation du FLD Agilent 1260

1

Présentation du détecteur à fluorescence Matériaux Bio-Inert

(35)

35 Manuel d’utilisation du FLD Agilent 1260

Agilent Technologies

2

Exigences et spécifications relatives au site

Exigences relatives au site 36 Caractéristiques physiques 39 Caractéristiques de performance 40

Ce chapitre fournit des informations concernant les exigences d'ordre environ-

nemental, ainsi que les caractéristiques techniques et les performances.

(36)

36 Manuel d’utilisation du FLD Agilent 1260

2

Exigences et spécifications relatives au site Exigences relatives au site

Exigences relatives au site

Un environnement adéquat est indispensable pour obtenir des performances optimales de l'instrument.

Remarques sur l’alimentation

L’alimentation du module a une plage de tolérance étendue. Elle accepte toute tension de secteur située dans la plage décrite dans le Tableau 3, page 39. Par conséquent, l’arrière du module ne comporte pas de sélecteur de tension. Le module d'alimentation intégrant des fusibles électroniques automatiques, il n'y a pas non plus de fusibles externes accessibles.

AVERTISSEMENT Il existe un danger d’électrocution ou de dégât matériel sur votre instrument si l’appareil est alimenté sous une tension de secteur supérieure à celle spécifiée.

➔Raccordez votre instrument à la tension spécifiée uniquement.

AVERTISSEMENT Le module est partiellement activé lorsqu'il est éteint, tant que le câble d'alimentation reste branché.

Certaines réparations sur le module peuvent occasionner des blessures, par exemple une électrocution, si le capot est ouvert lorsque le module est sous tension.

➔Débranchez toujours le câble d'alimentation avant d'ouvrir le capot.

➔Ne rebranchez pas le câble d'alimentation avant que les capots ne soient remis en place.

(37)

Manuel d’utilisation du FLD Agilent 1260 37 Exigences et spécifications relatives au site

2

Exigences relatives au site

Câbles d’alimentation

Différents câbles d’alimentation sont proposés en option avec le module.

L’extrémité femelle est la même pour tous les câbles. Elle se branche dans l'embase d'alimentation à l'arrière du module. L’extrémité mâle, destinée à être branchée à la prise de courant murale, varie selon le pays ou la région.

ATTENTION Accessibilité de l'embase d'alimentation.

En cas d'urgence, il doit être possible de débrancher à tout instant l'instrument du secteur.

➔Veillez à faciliter l'accès à la prise d'alimentation de l'instrument et le débranchement de ce dernier.

➔Laissez un espace suffisant au niveau de la prise d'alimentation de l'instrument pour débrancher le câble.

AVERTISSEMENT Absence de mise à la terre ou utilisation d'un câble d'alimentation non recommandé L'absence de mise à la terre ou l'utilisation d'un câble d'alimentation non

recommandé peut entraîner des chocs électriques ou des courts-circuits.

➔N'utilisez jamais une prise de courant sans mise à la terre.

➔N’utilisez jamais de câble d’alimentation autre que le modèle Agilent Technologies destiné à votre pays.

AVERTISSEMENT Utilisation de câbles non fournis

L'utilisation de câbles non fournis par Agilent Technologies risque d'endommager les composants électroniques ou d'entraîner des blessures.

➔Pour un bon fonctionnement et le respect des normes de sécurité et CEM (compatibilité électromagnétique), utilisez exclusivement les câbles fournis par Agilent Technologies.

(38)

38 Manuel d’utilisation du FLD Agilent 1260

2

Exigences et spécifications relatives au site Exigences relatives au site

Encombrement

Les dimensions et le poids du module (voir Tableau 3, page 39) vous permet- tent de le placer sur pratiquement n'importe quelle paillasse de laboratoire. Il requiert un espace supplémentaire de 2,5 cm des deux côtés et d'environ 8 cmà l'arrière pour la circulation d'air et les raccordements électriques.

Si la paillasse doit accueillir un système HPLC complet, assurez-vous qu'elle peut supporter le poids de tous les modules.

Le module doit fonctionner en position horizontale.

Condensation

AVERTISSEMENT Utilisation non prévue pour les câbles d'alimentation fournis

L'utilisation de câble d'alimentation à des fins non prévues peut entraîner des blessures corporelles ou endommager des équipements électroniques.

➔Ne jamais utiliser le câble d'alimentation qu'Agilent Technologies fournit avec cet instrument pour alimenter un autre équipement.

ATTENTION Condensation à l’intérieur du module

La condensation endommage les circuits électroniques du système.

➔Ne pas entreposer, transporter ou utiliser votre module dans des conditions où les fluctuations de température peuvent provoquer de la condensation à l’intérieur du module.

➔Si le module a été transporté par temps froid, ne la sortez pas de son emballage et laissez-la atteindre progressivement la température ambiante pour éviter toute condensation.

(39)

Manuel d’utilisation du FLD Agilent 1260 39 Exigences et spécifications relatives au site

2

Caractéristiques physiques

Caractéristiques physiques

Tableau 3 Caractéristiques physiques

Type Spécification Commentaires

Poids 11,5 kg

Dimensions

(hauteur × largeur × profondeur)

140 x 345 × 435 mm

Tension secteur 100 – 240 VAC, ± 10 % Plage de tensions

étendue Fréquence secteur 50 ou 60 Hz, ± 5 %

Puissance consommée 180 VA / 70 W / 239 BTU Maximum

Température ambiante de fonctionnement

0 - 40 °C (32 - 104 °F)

Température ambiante hors fonctionnement

-40 – 70 °C

Humidité < 95 % à 40 °C Sans condensation

Altitude de fonctionnement Jusqu'à 2000 m

Altitude hors fonctionnement Jusqu'à 4600 m Pour l'entreposage du module

Normes de sécurité : CEI, CSA, UL

Catégorie d'installation II, degré de pollution 2

Utilisation intérieure uniquement.

(40)

40 Manuel d’utilisation du FLD Agilent 1260

2

Exigences et spécifications relatives au site Caractéristiques de performance

Caractéristiques de performance

Tableau 4 Caractéristiques de performance du détecteur à fluorescence Agilent Infinity 1260 (G1321B)

Type Caractéristique Commentaires

Type de détection Détecteur à fluorescence multi-canal avec capacités rapides de balayage et d’analyse des données spectrales en ligne

Caractéristiques de performance

Fonctionnement mono-canal :

RAMAN (H2O) > 500 (bruit de référence mesuré au signal) Ex = 350 nm, Em = 397 nm, valeur d’obscurité 450 nm, cuve à circulation standard

RAMAN (H2O) > 3000 (bruit de référence mesuré à la valeur d'obscurité)

Ex = 350 nm, Em = 397 nm, valeur d’obscurité 450 nm, cuve à circulation standard

Fonctionnement à deux canaux : RAMAN (H2O) > 300 Ex 350 nm, Em 397 nm et Ex 350 nm, Em 450 nm, cuve à circulation standard.

voir la remarque sous ce tableau

voir Manuel d'entretien

Source de lumière Lampe-éclair au xénon, mode normal 20 W, mode économie 5 W, durée de vie 4000 h

Fréquence des impulsions 296 Hz en mode mono-canal 74 Hz en mode économie Fréquence d'acquisition

maximale

74 Hz, 145 Hz 145 Hz avec

micrologiciel A.06.54 ou supérieur

(41)

Manuel d’utilisation du FLD Agilent 1260 41 Exigences et spécifications relatives au site

2

Caractéristiques de performance

Monochromateur d'excitation

Plage : réglable de 200 nm à 1200 nm et d'ordre zéro

Bande passante : 20 nm (fixe)

Monochromateur : réseau holographique concave, F/1,6, de type échelette : 300 nm

Monochromateur d'émission

Plage : réglable de 200 nm à 1200 nm et d'ordre zéro

Bande passante : 20 nm (fixe)

Monochromateur : réseau holographique concave, F/1,6, de type échelette : 400 nm

Système de référence mesure d’excitation en ligne

Chronoprogrammation Jusqu’à 4 longueurs d’onde, temps de réponse, gain PMT, comportement de la ligne de base (modifié, libre, zéro), paramètres spectraux

Acquisition de spectres Spectres d’excitation ou d’émission Vitesse de balayage : 28 ms par point de données (p. ex. 0,6 s/spectre 200 – 400 nm, 10 nm pas)

Valeur du pas : 1 – 20 nm Spectres stockés : Tous Caractéristiques de

longueur d’onde

Répétabilité +/- 0,2 nm Précision +/- 3 nm par réglage

Tableau 4 Caractéristiques de performance du détecteur à fluorescence Agilent Infinity 1260 (G1321B)

Type Caractéristique Commentaires

(42)

42 Manuel d’utilisation du FLD Agilent 1260

2

Exigences et spécifications relatives au site Caractéristiques de performance

Cuves à circulation Standard : 8 µL volume et pression maximale de 20 bar (2 MPa), bloc de silice fusionné

En option :

Cuvette à fluorescence pour mesures spectroscopiques hors ligne à l'aide de la seringue de 1 mL d'un volume de 8 µL

Bio-Inert 8 µL volume et pression maximale de 20 bar (2 MPa), (pH de 1 à 12)

Micro : 4 µL volume et pression maximale de 20 bar (2 MPa) Contrôle et évaluation des

données

Agilent ChemStation pour CPL, Agilent Instant Pilot G4208A avec capacités d’analyse des données spectrales et d’impression de spectre limitées Sorties analogiques Enregistreur/intégrateur : 100 mV ou 1 V,

plage de sortie > 100 LU, deux sorties

100 LU est la plage recommandée, voir

"Échelle et conditions de fonctionnement du FLD"

Communications Bus CAN, RS-232C, LAN, APG Commande à distance : signaux prêt, démarrage, arrêt et mise hors tension Sécurité et maintenance Une assistance complète pour le

dépannage et la maintenance est fournie par Instant Pilot, Agilent Lab Advisor et le système de données

chromatographiques. Les fonctions de sécurité sont la détection des fuites, l'évacuation des fuites, le signal de détection des fuites pour arrêt du système de pompage et les basses tensions dans les zones de maintenance principales.

Tableau 4 Caractéristiques de performance du détecteur à fluorescence Agilent Infinity 1260 (G1321B)

Type Caractéristique Commentaires

(43)

Manuel d’utilisation du FLD Agilent 1260 43 Exigences et spécifications relatives au site

2

Caractéristiques de performance

Fonctionnalités BPL Maintenance préventive (EMF) pour le suivi continu de l'utilisation de l'instrument en matière de durée d'utilisation des lampes avec des limites réglables par l'utilisateur et des messages d'information. Enregistrement électronique des opérations de

maintenance et des erreurs. Vérification de la précision de longueur d’onde à l’aide de la bande Raman de l’eau.

Boîtier Utilisation exclusive de matériaux recyclables.

Environnement 0 – 40 °C température constante à une humidité < 95 % (sans condensation)

Dimensions 140 mm x 345 mm x 435 mm

(5,5" x 13,5" x 17".)

(hauteur x largeur x profondeur)

Poids 11,5 kg (25,5 lbs)

Tableau 4 Caractéristiques de performance du détecteur à fluorescence Agilent Infinity 1260 (G1321B)

Type Caractéristique Commentaires

(44)

44 Manuel d’utilisation du FLD Agilent 1260

2

Exigences et spécifications relatives au site Caractéristiques de performance

Tableau 5 Caractéristiques de performance du détecteur à fluorescence Agilent Infinity 1260 (G1321C)

Type Caractéristique Commentaires

Type de détection Signal mono-canal (excitation et émission)

Détecteur à fluorescence mono-canal programmable (excitation et émission) Caractéristiques de

performance

Fonctionnement mono-canal :

RAMAN (H2O) > 500 (bruit de référence mesuré au signal) Ex = 350 nm, Em = 397 nm, valeur d’obscurité 450 nm, cuve à circulation standard

RAMAN (H2O) > 3000 (bruit de référence mesuré à la valeur d'obscurité)

Ex = 350 nm, Em = 397 nm, valeur d’obscurité 450 nm, cuve à circulation standard

voir la remarque sous ce tableau

voir Manuel d'entretien

Source de lumière Lampe-éclair au xénon, mode normal 20 W, mode économie 5 W, durée de vie 4000 h

Fréquence des impulsions 296 Hz en mode mono-canal 74 Hz en mode économie Fréquence d'acquisition

maximale

74 Hz

Monochromateur d'excitation

Plage : réglable de 200 nm à 1200 nm et d'ordre zéro

Bande passante : 20 nm (fixe)

Monochromateur : réseau holographique concave, F/1,6, de type échelette : 300 nm

(45)

Manuel d’utilisation du FLD Agilent 1260 45 Exigences et spécifications relatives au site

2

Caractéristiques de performance

Monochromateur d'émission

Plage : réglable de 200 nm à 1200 nm et d'ordre zéro

Bande passante : 20 nm (fixe)

Monochromateur : réseau holographique concave, F/1,6, de type échelette : 400 nm

Système de référence mesure d’excitation en ligne

Chronoprogrammation Jusqu’à 4 longueurs d’onde, temps de réponse, gain PMT, comportement de la ligne de base (modifié, libre, zéro), paramètres spectraux

Caractéristiques de longueur d’onde

Répétabilité +/- 0,2 nm Précision +/- 3 nm par réglage Cuves à circulation Standard : 8 µL volume et pression

maximale de 20 bar (2 MPa), bloc de silice fusionné

En option :

Cuvette à fluorescence pour mesures spectroscopiques hors ligne à l'aide de la seringue de 1 mL d'un volume de 8 µL

Bio-Inert 8 µL volume et pression maximale de 20 bar (2 MPa), (pH de 1 à 12)

Micro : 4 µL volume et pression maximale de 20 bar (2 MPa) Contrôle et évaluation des

données

Agilent ChemStation pour CPL, Agilent Instant Pilot G4208A avec capacités d’analyse des données spectrales et d’impression de spectre limitées Sorties analogiques Enregistreur/intégrateur : 100 mV ou 1 V,

plage de sortie > 100 LU, deux sorties

100 LU est la plage recommandée, voir

"Échelle et conditions de fonctionnement du FLD"

Tableau 5 Caractéristiques de performance du détecteur à fluorescence Agilent Infinity 1260 (G1321C)

Type Caractéristique Commentaires

(46)

46 Manuel d’utilisation du FLD Agilent 1260

2

Exigences et spécifications relatives au site Caractéristiques de performance

Communications Bus CAN, RS-232C, LAN, APG Commande à distance : signaux prêt, démarrage, arrêt et mise hors tension Sécurité et maintenance Une assistance complète pour le

dépannage et la maintenance est fournie par Instant Pilot, Agilent Lab Advisor et le système de données

chromatographiques. Les fonctions de sécurité sont la détection des fuites, l'évacuation des fuites, le signal de détection des fuites pour arrêt du système de pompage et les basses tensions dans les zones de maintenance principales.

Fonctionnalités BPL Maintenance préventive (EMF) pour le suivi continu de l'utilisation de l'instrument en matière de durée d'utilisation des lampes avec des limites réglables par l'utilisateur et des messages d'information. Enregistrement électronique des opérations de

maintenance et des erreurs. Vérification de la précision de longueur d’onde à l’aide de la bande Raman de l’eau.

Boîtier Utilisation exclusive de matériaux recyclables.

Environnement 0 – 40 °C température constante à une humidité < 95 % (sans condensation)

Dimensions 140 mm x 345 mm x 435 mm

(5,5" x 13,5" x 17".)

(hauteur x largeur x profondeur)

Poids 11,5 kg (25,5 lbs)

Tableau 5 Caractéristiques de performance du détecteur à fluorescence Agilent Infinity 1260 (G1321C)

Type Caractéristique Commentaires

(47)

Manuel d’utilisation du FLD Agilent 1260 47 Exigences et spécifications relatives au site

2

Caractéristiques de performance

Tableau 6 Caractéristiques de performances du détecteur à fluorescence Agilent série 1200 (G1321A)

Type Caractéristique Commentaires

Type de détection Détecteur à fluorescence multi-canal avec capacités rapides de balayage et d’analyse des données spectrales en ligne

Caractéristiques de performance

Fonctionnement mono-canal :

RAMAN (H2O) > 500 (bruit de référence mesuré au signal) Ex = 350 nm, Em = 397 nm, valeur d’obscurité 450 nm, cuve à circulation standard

Fonctionnement à deux canaux : RAMAN (H2O) > 300 Ex 350 nm, Em 397 nm et Ex 350 nm, Em 450 nm, cuve à circulation standard.

voir la remarque sous ce tableau

voir Manuel d'entretien

Source de lumière Lampe-éclair au xénon, mode normal 20 W, mode économie 5 W, durée de vie 4000 h

Fréquence des impulsions 296 Hz en mode mono-canal 74 Hz en mode économie Fréquence d'acquisition

maximale

37 Hz

Monochromateur d'excitation

Plage : réglable de 200 nm à 1200 nm et d'ordre zéro

Bande passante : 20 nm (fixe)

Monochromateur : réseau holographique concave, F/1,6, de type échelette : 300 nm

Monochromateur d'émission

Plage : réglable de 200 nm à 1200 nm et d'ordre zéro

Bande passante : 20 nm (fixe)

Monochromateur : réseau holographique concave, F/1,6, de type échelette : 400 nm

Système de référence mesure d’excitation en ligne

(48)

48 Manuel d’utilisation du FLD Agilent 1260

2

Exigences et spécifications relatives au site Caractéristiques de performance

Chronoprogrammation Jusqu’à 4 longueurs d’onde, temps de réponse, gain PMT, comportement de la ligne de base (modifié, libre, zéro), paramètres spectraux

Acquisition de spectres Spectres d’excitation ou d’émission Vitesse de balayage : 28 ms par point de données (p. ex. 0,6 s/spectre 200 – 400 nm, 10 nm pas)

Valeur du pas : 1 – 20 nm Spectres stockés : Tous Caractéristiques de

longueur d’onde

Répétabilité +/- 0,2 nm Précision +/- 3 nm par réglage Cuves à circulation Standard : 8 µL volume et pression

maximale de 20 bar (2 MPa), bloc de silice fusionné

En option :

Cuvette à fluorescence pour mesures spectroscopiques hors ligne à l'aide de la seringue de 1 mL d'un volume de 8 µL

Bio-Inert 8 µL volume et pression maximale de 20 bar (2 MPa), (pH de 1 à 12)

Micro : 4 µL volume et pression maximale de 20 bar (2 MPa) Contrôle et évaluation des

données

Agilent ChemStation pour CPL, Agilent Instant Pilot G4208A avec capacités d’analyse des données spectrales et d’impression de spectre limitées Sorties analogiques Enregistreur/intégrateur : 100 mV ou 1 V,

plage de sortie > 100 LU, deux sorties

100 LU est la plage recommandée, voir

"Échelle et conditions de fonctionnement du FLD"

Tableau 6 Caractéristiques de performances du détecteur à fluorescence Agilent série 1200 (G1321A)

Type Caractéristique Commentaires

(49)

Manuel d’utilisation du FLD Agilent 1260 49 Exigences et spécifications relatives au site

2

Caractéristiques de performance

Communications Bus CAN, RS-232C, LAN, APG Commande à distance : signaux prêt, démarrage, arrêt et mise hors tension Sécurité et maintenance Diagnostics étendus, détection et

affichage des erreurs (par Instant Pilot G4208A et ChemStation), détection des fuites, évacuation des fuites, signal de sortie des fuites pour l'arrêt du système de pompage. Basses tensions dans les zones de maintenance principales.

Fonctionnalités BPL Maintenance préventive (EMF) pour le suivi continu de l'utilisation de l'instrument en matière de durée d'utilisation des lampes avec des limites réglables par l'utilisateur et des messages d'information. Enregistrement électronique des opérations de

maintenance et des erreurs. Vérification de la précision de longueur d’onde à l’aide de la bande Raman de l’eau.

Boîtier Utilisation exclusive de matériaux recyclables.

Environnement 0 – 40 °C température constante à une humidité < 95 % (sans condensation)

Dimensions 140 mm x 345 mm x 435 mm

(5,5" x 13,5" x 17".)

(hauteur x largeur x profondeur)

Poids 11,5 kg (25,5 lbs)

Tableau 6 Caractéristiques de performances du détecteur à fluorescence Agilent série 1200 (G1321A)

Type Caractéristique Commentaires

(50)

50 Manuel d’utilisation du FLD Agilent 1260

2

Exigences et spécifications relatives au site Caractéristiques de performance

(51)

51 Manuel d’utilisation du FLD Agilent 1260

Agilent Technologies

3

Installation du module

Déballage du module 52

Optimisation de la configuration de la pile de modules 54 Configuration en une seule pile 55

Configuration en deux piles 57

Informations sur l'évacuation des fuites et des déchets 59 Installation du module 63

Raccordements des liquides au module 66

Ce chapitre fournit des informations concernant la configuration de la pile de

modules conseillée pour votre système et l'installation de votre module.

(52)

52 Manuel d’utilisation du FLD Agilent 1260

3

Installation du module Déballage du module

Déballage du module

Emballage endommagé

Si l’emballage de livraison présente des signes de dommages externes, contac- tez immédiatement votre revendeur Agilent Technologies. Informez-en égale- ment votre ingénieur de maintenance Agilent.

ATTENTION Problèmes « Défectueux à l’arrivée »

Ne pas installer le module s’il présente des signes de dommages. Agilent doit effectuer une vérification afin de déterminer si l’instrument est en bon état ou endommagé.

➔Prévenez le revendeur et le service après-vente Agilent en cas de dommages.

➔Un technicien de maintenance Agilent inspectera l’instrument dans vos locaux et fera le nécessaire.

(53)

Manuel d’utilisation du FLD Agilent 1260 53 Installation du module

3

Déballage du module

Liste de contrôle de livraison

Assurez-vous que toutes les pièces et matériels ont été livrés avec le module.

La liste de contrôle de livraison est reproduite ci-après.

Pour connaître la désignation des pièces, consultez les tableaux et les illustra- tions à la section « Pièces pour la maintenance », page 205

Signalez toute pièce manquante ou détériorée à votre service commer- cial/après-vente Agilent Technologies.

Tableau 7 Liste de contrôle Détecteur

Description Quantité

Détecteur 1

Câble d'alimentation 1

Câble CAN 1

Cuve à circulation selon commande

Cuve à circulation/cuvette optionnelle selon commande

Manuel d'utilisation sur le CD Documentation (expédié avec la livraison ; commun à plusieurs modules) Kit d’accessoires (voir la section « Kit

d’accessoires standard », page 208)

1

(54)

54 Manuel d’utilisation du FLD Agilent 1260

3

Installation du module

Optimisation de la configuration de la pile de modules

Optimisation de la configuration de la pile de modules

Si votre module fait partie d'un chromatographe en phase liquide complet Agi- lent 1260 Infinity, vous pourrez obtenir une performance optimale en instal- lant les configurations suivantes. Ces configurations optimisent le circuit du système garantissant ainsi un volume de retard minimal.

(55)

Manuel d’utilisation du FLD Agilent 1260 55 Installation du module

3

Optimisation de la configuration de la pile de modules

Configuration en une seule pile

Une performance optimale est garantie en installant les modules du système Agilent 1260 Infinity LC dans la configuration suivante (voir Figure 18, page 55 et Figure 19, page 56). Cette configuration optimise le trajet de liquide, pour un volume mort minimum et une réduction de l'encombrement requis.

Figure 18 Configuration de pile recommandée pour le système 1260 Infinity (vue avant) Détecteur

Dégazeur à vide

Pompe

Échantillonneur automatique

Compartiment à colonnes

Compartiment à solvants

Instant Pilot

(56)

56 Manuel d’utilisation du FLD Agilent 1260

3

Installation du module

Optimisation de la configuration de la pile de modules

Figure 19 Configuration de pile recommandée pour le système 1260 Infinity (vue arrière) 6a^bZciVi^dc86

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