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Du bouc à la paillette : itinéraire d'un spermatozoïde

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Academic year: 2021

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L1

Du bouc à la paillette : itinéraire d’un spermatozoïde

F. BORDERES, J.L. POUGNARD

INRA, FERLUS équipe Ferticap - 86480 Rouillé - Sept. 2014

Florence.Borderes@lusignan.inra.fr – Jean-louis.Pougnard@lusignan.inra.fr

Le programme de sélection mis en place par CAPGENES France consiste à améliorer la production laitière et les caractères morphologiques des chèvres laitières. Ce programme repose en partie sur la reproduction par insémination artificielle pour la diffusion à grande échelle des gènes d’intérêt .

Dans le cadre de l’organisation de l’IA caprine, la semence est conservée dans l’azote liquide pour un stockage de longue durée avant mise en place par IA en élevages privés.

La collecte

Manchon Cône en

caoutchouc Tube de

15ml

Fourreau : fabrication artisanale

Le manchon est rempli d’eau à 40°C et l’ensemble des éléments du vagin artificiel sont maintenus à 37°C, dans l’étuve le temps des collectes.

Une femelle bout-en-train est installée en salle de collecte puis le mâle est mis en contact. Au moment du saut le pénis du mâle s’introduit dans le vagin artificiel et l’éjaculation se fait de façon quasi immédiate.

On définit « le comportement » du bouc (saut sans éjaculation, éjaculation sans saut, refus, urine…). L’éjaculat est transmis au laboratoire à proximité de la salle de collecte.

Le traitement de la semence

Refroidissement de 20°C à 4°C

Dilution à 500.10

6

spz/mL dans le milieu lait+14% glycérol

Équilibration 1h30 à 4°C

Conditionnement en paillettes de 0,25 mL

Congélation sur rampe horizontale suspendue 2 min à 16 cm puis 3 min à 4 cm de la surface d’azote

liquide

Immersion et stockage dans l’azote liquide à -196°C

Inséminations artificielles en élevages Re-suspension dans milieu à base de lait à

1.10

9

spz/mL

Élimination du surnageant Dilution dans KRPG

(1)

2 centrifugations de 15 min à 600g

en 3 fractions

espacées de 10 min Tube de

collecte

Volume

Concentration

Examens de la semence

Examens de la semence – tri des doses

La cryoconservation

0 Pas de déplacement des spermatozoïdes

1 Déplacement très lent ou pas de déplacement, tremblement du spermatozoïde, oscillation de la queue.

2 Déplacements lents, tremblements, mouvements inorganisés, quelques spermatozoïdes se déplacent plus rapidement.

3 Les spermatozoïdes effectuent des déplacements curvilinéaires sans tremblement dans le mouvement.

4 Déplacements rapides, quelques cellules avec une trajectoire rectiligne, d’autres avec une trajectoire courbe.

5 Déplacement rectiligne et rapide des spermatozoïdes.

(1)KRPG : solution saline , Kreps-Ringer-Phosphate-Glucose

(2) BISHOP M.N.H.,CAMPBELL R.C., HANCKOCK J.L.,1954, J. Agriculture Science,44, 227

L’examen est effectué au microscope optique par un examinateur expérimenté.

La première note donnée correspond au pourcentage de spermatozoïdes mobiles :

Mobilité de 0 à 100%

La deuxième note donnée correspond à la qualité du déplacement, elle est établie en fonction de l’échelle de Bishop

(2)

:

Motilité de 0 à 5

Examen de la semence

Echelle de Bishop :

Caractéristiques d’un éjaculat

Volume : 0,1 ml à 2,5 ml

Concentration : 0,5 à 10 milliards de spermatozoïdes par ml.

Éjaculat = spermatozoïdes + plasma

séminal .

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