Application d'un test d'inhibitionde luminescence bact6rienne e l'6tude toxicologiqued'effluents complexes et de substances chimiques

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f,evue frangalse dcs ScltilcEs DE L'tAU,2 (tS8gl 22t-297

l{ote technique T e c h n i c a l n o t e

Application d'un test d'inhibition

de luminescence bact6rienne e l'6tude toxicologique d'effluents complexes et de substances chimiques

U s e o f a b a c t e r i a l b i o l u m i n e s c e n c e a s s a y

f o r th e d e t e r m i n a t i o n o f to x i c i t y o f c o m p l e x e f f l u e n t s a n d c h e m i c a l s

J . F . F E R A R D * , P . V A S S E U R * , L . D A N O U X * , G . L A R B A I G T X *

R 6 s u m 6

u n t e s t d ' i n h i b i t i o n d e I u m i n e s c e n c e b a c t 6 r i e n n e ( t e s t M i c r o t o x ) a 6 t 6 u t i I i s 6 d a n s [ e c a d r e d e l . ' 6 t u d e d e L a t o x i c i t e d e 2 0 s u b s t a n c e s c h i m i q u e s d i f f 6 r e n t e s ( 6 c o m p o s 6 s m i n 6 r a u x e t ' 1 4 c o m p o s e s orginiqresl e t d ' e f f L u e n t s c o m p t e x e s in d u s t r i e I s e t u r b a i n s . U n e c a r t o g r J p n i " a "

L a t o x i c i t 6 d e s e a u x p r 6 L e v 6 e s a d i f f e r e n t s e n d r o i t s d , u n e - s t a t i o n d ' 6 p u r a t i o n a € t 6 d r e s s 6 e . L e s C E 5 0 ( b a c t 6 r i e s ) e t C I 5 0 ( d a p h n i e s ) o n t 6 t 6 c o m p a r 6 e s p o u r t e s e f f t u e n t s i n d u s t r i e t s . t a r e p r o o u c t i b i t i t 6 d e L a m e t h o d e , t ' i n f t u e n c e d e c e r t a i n e s m o d a I i t e s o p 6 r a t o i r e s t e L t e s q u e L a t e m p e n a t u r e d e l e c t u r e e t L e t e m p s d e c o n t a c t ont ete 6tudi6s.

E n f i n [ ' ' i n t e n c t e t [ ' a v a n t a g e d e c e t e s t s o n t d i s c u t e s d a n s r e c a d r e d ' 6 t u d e s n 6 c e s s i t a n t r a p i d e m e n t u n g r a n d n o m b r e d e r 6 o o n s e s .

S u m m a r y A I u m i n e s c e n c e

b a c t e r i a L t e s t ( " M i c r o t o x " t e s t ) h a s b e e n u s e d f o r t h e e c o t o x i c o I o g i c a L

- s t u d y o f 2 0 c o m p o u n d s . ( 6 m i n e r a l s a n O 1 + o . g u _ n i c s ) a n d c o m p I e x e f f r , u e n t s . o o m e s t i'c unJ- in.lr"t.i"r'ioiglnii i y " r l u a s t e H a t e r h a v e b e e n t e s t e d . T h e t o x i c . i t y of sewage coLiected-in a t r e a t ' n e n t p r a n t h a s b e e n e v a I u a t e d . E c 5 0 lbacte"iai

" n a r i i o - i a " p n - n i d s ) h a v e b e e n c o m p a r e d fo r i n d u s t r i a I w a s t e w a t e r s . R e p r o d u c t i b i _

L i t y a n d e f f e c t o f s o m e e x p e r i m e n t a L c o n d i t i o n s ( t e m p e r " i r . " , - " r p " _ s u r e t i m e ) h a v e b e e n s t u d i e d . T h e i n t e r e s t o f t h i s t e s t i s a i . i r r r " O f o r s t u d y r e q u i r i n g f a s t t y a g r e a t n u m b e r o f r e s u l t s _

L a b o r a t o i r e d e T o x i c o l - o g i e - C e n t r e d e s S c i e n c e s d e 1 ' E n v i r o n n e m e n r 1 , r u e d e s R 6 c o l l e t s 5 7 0 0 0 - \ E I Z

A g e n c e d e E a s s i n R h 6 n e l l 6 d i t e r r a n 6 e C o r s e - 3 1 , r u e J u L e s G u e s o e 6 3 3 , 1 O - P I t R R f B T N I T E

* *

2 2 2 Sciences de L'eau 2 no2

I rurnoouct r ou

S i I ' 6 c o t o x i c i t 6 d e s p r o d u i t s c h i m i q u e s p e u t 6 t r e d 6 t e r m i n 6 e d I ' a i d e d e d i f f 6 r e n t s o r g a n i s m e s ( C A B R T D E N C e t c H o u R o u l r N K o v , 1 9 7 7 ) , i I n ' e x i s t e p a r c o n t r e , p o u r 6 v a l u e r c e f l e d e s e f f t u e n t s , q u ' u n s e u l t e s t r e c o n n u a u n i v e a u n a t i o n a l , I e t e s t d a p h n i e a c o u r t t e r m e . C e t e s t c o n s t i t u e

en effet un des paranrdtres des redevances (mati€res inhibitrices) percues

p a r l e s a g e n c e s d e b a s s i n . I l e s t m a i n t e n a n t c o u r a m m e n t p r a t i q u 6 d a n s d e n o m b r e u x l - a b o r a t o i r e s , s a m 6 t h o d o l o g i e e s t b i e n d 6 f i n i e e t a 6 t 6 n o r m a l i s 6 e p a r l - t A F N o R ( N o r m e e x p 6 r i m e n t a l e T - 9 0 3 0 I , I 9 7 4 , h o m o l o g u 6 e e n 1 9 8 3 ) . P a r a i l l - e u r s s o n c o r f t r e s t e a s s e z 6 f e v 6 .

L a r e c h e r c h e d e t e s t s s e n s i b l e s , p l u s f a c i l e s e t r a p i d e s i r 6 a l i s e r a C o n d u i t c e r t a j _ n s a u t e u r s d s ' i n t e r e s s e r a u x p r o p r i 6 t 6 s l u m i n e s c e n t e s d e s b a c t 6 r i e s m a r i n e s i l u t y p e P h o t o b a c t e r i w n p h o s p h o r e u n . C t e s t a i n s i q u e B U L I C H ( 1 9 7 9 ) a d 6 c r i t u n t e s t d e t o x i c i t 6 d o n t l e p r i n c i p e c o n s i s t e i . m e s u r e r f a b i o l u r n i n e s c e n c e p h y s i o l o g i q u e d e s u s p e n s i o n s d e c e s b a c - t 6 r i e s e t d 6 v a l u e r l a d i m i n u t i o n d e l u m i n e s c e n c e q u i s e p r o d u i t l o r s d e f ' a d d i t i o n d e s u b s t a n c e s t o x i q u e s d a n s f e m i l i e u e x p 6 r i m e n t a l .

Photobacteriwn phosphoreutn esl une bact6rie ubiquiste des oc6ans ;

e t l e n ' e s t p a s p a t h o g d n e p o u r l ' h o m m e e t l e s r n a m m i f e r e s ; s a t a x o n o m r e e s t p r o c h e d e c e l l e d e s E n t e r o b a c t e t ' . L a l u m i n e s c e n c e e s t p r o d u i t e a u c o u r s d ' u n e n c h a i n e m e n t d e s r 6 a c t i o n s m 6 t a b o l i q u e s m e t t a n t e n leu un e n z ) . m e , l a l u c i f 6 r a s e , e t d . e s c o e n z l z m e s d ' o x y d o - r 6 d u c t i o n , p r i n c i p a l e - m e n t l - e F M N H 2 ( f i g u r e 1 ) . C e s r 6 a c t i o n s c o n d u i s e n t e n p r 6 s e n c e d ' o x y - g d n e e t d ' a l d E h y d e d l o n g u e s c h a i n e s a l i p h a t i q u e s d I a f o r m a t i o n d ' u n

S U B S T R A T O X Y D E

N A D

F M I

O U F H ,

v

P R O D U I T S

Figure 7

I[dcanisme biochinn que de La Tuminescence

7

Inhibition de Luminescence bactdtienne : test d.e tonicitd

c o m p l e x e a c t i v 6 q u i , I o r s d e s a d 6 g r a d a t i o n , 6 m e t d e s p h o t o n s r e s p o n - s a b l e s d u p h 6 n o m d n e d e l u m i n e s c e n c e ( N E A I S O N , 1919). Ce m6canisme est 6 t r o i t e m e n t l i 6 a u x p r o c e e s u s m 6 t a b o l i q u e s d e I a g l y c o l y s e e t d e l _ a r e s p i r a t i o n c e r r u r a i r e p a r f i n t e r m 6 d i a i r e d u N A D r 6 d u i t n E c e s s a i r e d

Ia r6duction du FMN en FMNH2, seule forme capable de r6agir avec fa

l u c i f 6 r a s e . T o u t e d i m i n u t i o n d u t a u x d e N A D r 6 d u i t , F M H H 2 e t d ' o 2 p e u t a i n s i e n t r a i n e r u n e b a i s s e d e I a l u m i n e s c e n c e .

C e t e s t d e t o x i c i t 6 b a s 6 s u r I ' i n h i b i t i o n d e l u r n i n e s c e n c e b a c t 6 r i e n n e e s t e n c o r e p e u u t i l i s 6 d 1 r 6 c h e 1 o n e u r o p 6 e n c a r s e s p e r f o r m a n c e s s o n t m a l c o n n u e s . A u s s i a v o n s - n o u s e n t r e p r i s d ' e n 6 t u d i e r l a s e n s i b i l i t 6 e t I a r e p r o d . u c t i b i l i t 6 l o r s d e I , 6 v a l u a t i o n d e 1 a t o x i c i t 6 a i g u 6 :

- d.e compos6s organiques et min6raux en solution,

- d ' e f f l u e n t s d o m e s t i q u e s - d'effluents i n d u s t r i e l s

Les r6sul,tats obtenus ont 6t6 compar6s i. ceux du test daphnie.

| v l n r E n r E L E T M E T H o D E S

L e p r i n c i p e d u t e s t c o n s i s t e d 6 v a l u e r l e p o u r c e n t a g e d e d i n i n u t i o n d e r a b i o l u m i n e s c e n c e e n r e g i s t r 6 a p r 6 s a d d i t i o n d e r a s o l u t i o n t e s t e e d I a s u s p e n s i o n b a c t 6 r i e n n e , p a r c o m p a r a i s o n d u n e s u s p e n s i o n t 6 m o i n r 6 a 1 i s 6 e s i m u l t a n 6 m e n t . L e t e s t e s t e f f e c t u 6 i t e m p 6 r a t u r e d 6 t e r m i n 6 e , c o m p r i s e e n t r e 1 0 o e t 2 5 " c ( g 6 n 6 r a r e m e n t 1 5 o c ) d a n s d e s c o n d i t i o n s d e s a r i n i t 6 s t r i c t e s ( 2 B en I'tacr) de fagon i rendre optimare 1 ' 6 m i s s i o n d e l u m i d r e q u e I ' o n m e s u r e d a n s 1 e s q u e l q u e s minutes qui suivent I e c o n t a c t t o x i q u e . L e t e m p s d e c o n t a c t p e u t € t r e d e 5 , 1 0 v o i r e 3 0 m i n u t e s s e r o n l - a s e n s i b i r i t 6 d e s b a c t 6 r i e s a u t o x i q u e . L a t o x i c i t 6 e s t e x p r i m 6 e p a r I a cE 50, ou concentration e f f e c t i v e 5 0 , q u i e s t f a c o n c e n t r a t i o n d e s u b s t a n c e t e s t 6 e , m a i s q u i p e u t 6 t r e a u s s i l e t a u x d e d i l u t i o n d ' u n e s o r u t i o n b r u t e , q u i e n t r a i n e u n e r 6 d u c t i o n d e 5 0 ? d e r , i n t e n s i t 6 r u m i -

|VlnrEnr El

L a m e s u r e s e f a i t d f ' a i d e d , u n p h o t o m d t r e i a f f i c h a g e n u m d r i q u e , a p p e 1 6 M I C R O T O X ( B e c k m a n , moddle 2055), comportant u n e c h a m b r e d ' i n c u - b a t i o n t h e r m o s t a t 6 e e t r 6 g r a b l e , m u n i e d ' u n s y s t d m e d e ventil-ation d o n t r e b u t e s t d ' 6 v i t e r f a f o r m a t i o n d e b u 6 e s u r r e s c u v e s d e rectufe. c e

photometre est rel-i6 i un enregistreur dont le trac6 fournit un pic de

hauteur proportionnell-e d Ia bj-oluminescence mesur6e au temps E.

L e r 6 a c t i f b i o l o g i q u e e s t c o n s t i t u 6 p a r u n e s u s p e n s i o n d e b a c t 6 r i e s

Photobacteriutn phosphoTaewn. ces bact6ries sont fournies sous forme lyo-

p h i l i s 6 e e n f l a c o n s i n d i v i d u e l - s ( r 6 a c t i - f B e c k m a n ) . A u m o m e n t d e 1 ' e m p l o i ,

2 2 4 Sciences de Lteau 2

I a s u s p e n s j . o n b a c t 6 r i e n n e e s t r e c o n s t i t u 6 e p a r a d d i t i o n d e I m 1 d ' H r O d i s t i l l 6 e . L a b i o l u m i n e s c e n c e d e c e t t e s u s p e n s i o n s ' a f f a i b l i t a v e c I e

temps, mais cette diminution est suffisanment lente pour permettre

l - ' u t i l i s a t i o n d u r 6 a c t i f p e n d a n t 4 d 6 heures.

L e s c o n p o s 6 s t e s t 6 s ( q u a l i t 6 N o n n a p u r , P r o l a b o ) s o n t :

- dans Ie cas des d6riv6s min6raux :

g 6 ( N O 3 ) 2 , 4 H 2 O

* 2 " t 2 O . j C u S O 4 , 5 H 2 O

- d.ans fe cas des d6riv6s o r g a n i q u e s : b e n z 6 n e , t o L u E n e , m - x y l d n e 6 t h y 1 - b e n z € n e , c h l - o r o b e n z d n e , p h 6 n o 1 , 3 , 5 - d i c h 1 o r o p h 6 n o 1 , 2 , 4 ' d l - n j - t r o p h 6 n o l , p o u r l e s h y d r o c a r b u r e s b e n z 6 n i q u e s e t l e s d 6 r i v 6 s p h 6 n o l i q u e s t c y c f o - h e x a n e , c y c l o h e x a n o n e , c y c l o h e x a n o l p o u r l e s a l c a n e s c y c l i q u e s e t d 6 r i - v 6 s : a i n s i q u e d i v e r s c o m p o s 6 s , t h i r a m , d i m 6 t h y l s u l f o x i d e ( D M S O ) ' a l c o o 1 b e n z y l i q u e .

C h a c u n d e c e s c o m p o s 6 s a 6 t 6 s o l u b i l i s 6 , 3 . c o n c e n t r a t i o n v a r i a b l e , d a n s u n e s o l u t i o n a l e N a C l d 2 z . C e r t a i n s d 6 r i v 6 s o r g a n i q u e s , d s a v o i r

1es hydrocarbures benz6niques, Ia cyclohexanone et le thiram ont 6t6

d i s s o u s p a r I ' i n t e r m 6 d i a i r e d ' u n s o l v a n t , I e d i m 6 t h y t s u l f o x i d e , u t i l - i s 6 d l a c o n c e n t r a t i o n d e o , 1 t : a c e t t e c o n c e n t r a t i o n I e s o l v a n t n r a f t d r e p a s I a b i o l u m i n e s c e n c e .

L e s e f f l u e n t s s o n t d e d e u x t y p e s :

- des effluents u r b a i n s p r 6 l e v 6 s i I a s t a t i o n b i o l o g i q u e d e I a v i l l e d e YiETZ.

- des effluents i n d u s t r i e l s c o m p o s 6 s e s s e n t i e l - l e m e n t d e p r o d u i t s d e s y n - t h d s e o r g a n i q u e ( c o l o r a n t s ) .

L e s s o l u t i o n s a t e s t e r d o i v e n t c o n t e n j - r 2 % d e N a C I . L e u r p r 6 p a r a t i o n a i n s i q u e l a d i l u t i o n d e s e f f l u e n t s s o n t e f f e c t u 6 e s i 1 ' a i d e d e s o f u t i o n

de NaCI de fagon a respecter cette concentration fj.nafe.

[v|ErHooes

Le mode op6ratoire peut se r6sumer comrne suit r 10 |.tI de la solution

b a c t S r i e n n e r e c o n s t i t u 6 e s o n t d ' a b o r d d i 1 u 6 s d a n s l e s t u b e s d e m e s u r e p a r 5 0 0 UI de solution s a l i n e ( N a c l 2 t). A p r C s u n t e m p s d ' i n c u b a t i o n d e c i n q m i n u t e s d a n s I ' e n c e i n t e t h e r m o s t a t 6 e p e r m e t t a n t d e Porter f e m i L i e u i I a t e m p 6 r a t u r e c h o i s i e , o n m e s u r e l a b i o l u m i n e s c e n c e d e s s u s - p e n s i o n s b a c t 6 r i e n n e s . L e s t u b e s p r 6 s e n t a n t u n e b i o l - u m j - n e s c e n c e v o i s i n e s o n t s 6 l e c t i o n n 6 s p u i s a d d i t i o n n 6 s r e s p e c t i v e m e n t d e 5 0 0 Ul de la sofu- t i o n s a l i n e a t e s t e r . L a b i o l u m i n e s c e n c e r 6 s i d u e l - f e d e s s u s p e n s i o n s b a c - t 6 r i e n n e s c o r r e s p o n d a n t a u x t u b e s t 6 m o i n s ( T t ) e t i n t o x i q u 6 s ( E t ) e s t m e s u r € e a p r d s u n t e m p s d e c o n t a c t d 6 t e r m i n 6 ( 5 o u 1 0 m i n u t e s s e f o n I a n a t u r e d e I r 6 c h a n t i f l o n d t e s t e r ) .

F e C f 3 ZnSOn, TH.O Pb (No3 )

2

r

Inhibition de Lum'Lnescence bact€t ien:ne : test de toricitA 2 2 5

L r 6 v a r u a t i o n d e s c E 5 o o u c o n c e n t r a t i o n s e n t r a i . n a n t 5 0 % d e d i m i n u t i o n d e f a b i o l u m i n e s c e n c e a p r d s u n t e m p s d e c o n t a c t t a I a t e m p 6 r a t u r e t o c p e u t 6 t r e r 6 a l i s S e p a r d e u x p r o c 6 d 6 s d i f f 6 r e n t s :

a) en calcul-ant Ie pourcentage de dimi-nution de lumidre, A ? qui repr6-

s e n t e l e r a p p o r t d e I a l u m i d r e p e r d u e d l a l u m i d r e i n i t i a l e ( B U L I C H , 1 9 ' 7 9 \ :

A % =

T + E o x _ - E t

To 1 0 0 3

o i E o = b i o l u m i n e s c e n c e d e l a s u s p e n s i o n b a c t 6 r i e n n e d I ' i n s t a n t t = o ( a v a n t ajout d u t o x i q u e )

E t = b i o l u m i n e s c e n c e d e 1 a s u s p e n s i o n b a c t 6 r i e n n e d I ' i n s t a n t t T o = b i o l - u r n i n e s c e n c e d e 1 a s u s p e n s i o n t 6 m o i n A l , ' i n s t a n t t = o T t = b i o l u m i n e s c e n c e d e 1 a s u s p e n s i o n t 6 m o i n d I , i n s t a n t t

A % est cafcul6 en pond6rant Eo par Ie rapport $ _{' I O} afin de tenir compte

d e 1 ' a f f a i b l - i s s e m e n t s p o n t a n 6 d e 1 a b i o l u r n i n e s c e n c e a u c o u r s d u t e m p s ,

ind6pendant- de tout ph6nomdne toxique.

Le cE50 est d6termin6e graphiquement en reportant res r6surtats sur

p a p i e r s e m i - r o g a r i t h m i q u e ( I e s concentrations 6 t a n t p o r t e e s s u r 1 ' 6 c h e 1 L e

logarithmique) .

b) en 6vafuant le rapport de fa furnidre perdue E la rumi6re resEance :

{ n o x f r j ) -E t

L e s v a l e u r s d e c e c o e f f i c i e n t g a m m a ( f ) s o n t p o r t 6 e s s u r p a p i e r l o g - f o g . L a d r o i t e d e r 6 g r e s s i o n t r a c 6 e g r a p h i q u e m e n t p e r m e t d e d 6 t e r m i n e r l a c E 5 o : c e t t e c o n c e n t r a t i o n p o u r l a q u e l l e 5 0 g d e 1 a r u m i d r e e s t p e r - d u e , c o r r e s p o n d d u n e v a l e u r d e I 6 g a 1 e a 1 ( J O H N S O N et aL., 7 9 - 1 4 ) . C ' e s t c e d e u x L d m e p r o c 6 d 6 de cafcul d e I a C E 5 O , q u e n o u s a v o n s a d o p t 6 L o r s q u ' e n r a i s o n d e f a f a i b l e t o x i c i t 6 d e s 6 c h a n t i l - r o n s t e s t 6 s , i r n ' e s t p a s p o s s i b l e d e d 6 t e r m i n e r l a C E 5 O , c o n r n e d a n s l e c a s d e 1,6tude c a r t o - g r a p h i q u e d e s e a u x d e l a statj.on d . 6 p u r a t i o n u r b a i n e , l e s r 6 s u l t a t s s o n t e x p r j . m 6 s par la valeur d u c o e f f i c i e n t A % . E n e f f e t , A B , q u i t r a - d u i t l a d i m i n u t i o n d e l a l u m i n e s c e n c e p a r r a p p o r t d l a v a l e u r i n i t i a r e , c o n s t i t u e u n e e x p r e s s i o n d e l a t o x i c i t 6 d i r e c t e m e n t e t p l u s r a p j _ d e m e n t e x p l i c i t e q u e I e c o e f f i c i e n t f

L e t e s t d a p h n i e a 6 t 6 r 6 a r i s 6 s e f o n r a m 6 t h o d e n o r m a l i s 6 e p a r | A F N O R ( T 90-301 , 1974) sv.r Daphnia rnagna (sEraus), s o u c h e I R C H A . L e s m i c r o c r u s - t a c 6 s s o n t 6 1 e v 6 s au laboratoire e n c r i s t a l l i s o i r s d e 2 1 . c o n t e n a n x 3 / 5 d . r e a u d e V o f v i c e L 2 / 5 d e m i l _ i e u L e f e v r e - C z a r d a ( L C ) , plac6s dans une s a l l e t h e r m o s t a t 6 e a 2 0 i l o c s o u s u n e l u m i d r e d e 8 O O l u x . L a n o u r r j _ t u r e d e s c l a p h n j - e s e s t c o n s t i t u 6 e p a r d e s a l g u e s ( C h L o r e L L a uulgaris) q u i l e u r s o n t f o u r n i e s A r a i s o n d e 5 x 1 0 " c e l _ l u l e s a l g a l e s p a r d a p h n i e et par h e u r e .

L e s d 6 t e r m i n a t i - o n s d e l a D C o e t d e s M E S d e s effruents o n t 6 t 6 e f f e c - t u 6 e s s e l o n I e s n o r m e s A F N O R r e s p e c t i v e m e n t N F 9 0 - 1 0 1 e t N F 9 0 * 1 0 5 .

F ^ v _Tt

'IO

D L

a a a S c t > e n c e s d e L t e a u 2 , n o 2

RE s u lrnrs

L ' 6 v a l u a t i o n d e l a t o x i c i t e d e d i v e r s c o m p o s 6 s o r g a n i q u e s e t m i n e r a u x SUr leS baCterieS Photobacteriun phosphoTeun a 6t6 r6alis6e en testant

d e s g a m m e s d e s o l - u t i o n s d e c o n c e n t r a t i o n s c r o i s s a n t e s d e c h a c u n d e s c o m - p o s 6 s a n a 1 y s 6 s .

A f i n d e d 6 t e r m i n e r I a r 6 p 6 t a b i l i t d d u t e s t d ' i n h i b i t i o n d e l u m i n e s - c e n c e r c h a q u e c o m p o s 6 a 6 t 6 t e s t 6 p l u s i e u r s f o i s e n u t i f i s a n t a c h a q u e e s s a i u n 6 c h a n t i l l o n d i f f 6 r e n t d e r 6 a c t i f b a c t 6 r i e n P h o t o b a c t e r i u m p h o s - phoreum.

L a t o x i c i t 6 d e s d 6 r i v d s o r g a n i q u e s , t e l s q u e h y d r o c a r b u r e s , h y d r o c a r - b u r e s b e n z 6 n i q u e s c h l o r 6 s e t h y d r o x y l 6 s , e t c . . . a 6 t 6 6 t u d i 6 e d 1 a t e m - p 6 r a t u r e d e 1 5 o a p r E s 5 e t 1 0 m i n u t e s d e c o n t a c t .

L e t a b l e a u n " 1 o r l s o n t r e p o r t 6 e s f e s C E 5 O d e c h a c u n d e c e s d 6 r i v 6 s f a i t a p p a r a i t r e q u e l a s e n s i b i l i t 6 d e s b a c t 6 r i e s e s t i m p o r t a n t e P o u r I e s d 6 r i v 6 s a r o m a t i q u e s c h l o r 6 s , L e s d 6 r i v 6 s p h 6 n o l i q u e s , s u b s t i t u 6 s o u n o n 1 ' 6 t h y f b e n z e n e e t s u r t o u t p o u r 1 e t h i r a m , f o n g i c i d e d e I a s 6 r i e d e s

dithiocarbamates .

TabLeau 7

CE50 (en MG/L) de di'oer's cotnposAs organiques dualudes d. L'aide du test de bioLuninescence

Temp6rature

Tenps de contact 10 MN

Nomlcre

d ' e s s a i s M o y e n n e rype

Benzene Toluene M-xyICne Ethyl Benzdne ChlorobenzCne Alcool Benzylique Ph6no1

3 .5 -Dichlorophdnol 2 .4-Dinitroph6nol Cyclohexane cyclohexanol Cyclohexanone DMSO Thirm

2 2

1 3 3 3 2 2 2 3

7 3 2 r

2 l a +

1 5 {

5 , 5 1

2 2 4 2

2 2 2 0 , 9

B 0 , 5

1 8 , 0 5 0

3 4

B 3 2 5 '71 4 , 5 2 6 , 6

9 3 4 2 , 5

Nonbre .- Ecart-

movenne d ' e s s a r s - E y p e

* n a q r l t 6 n a r t - t r r n e : n < 3

o , 4 5 o , 3 2 0 , 0 6

Inhibition de Lwnineseence bactdv:ienne : test de toricitA

I I N E

s e l o n q u e q u e .

s e m a n i f e s t e a u c u n e d i f f 6 r e n c e s i g n i f i c a t i v e d e s c e s r € s u f t a t s l a l e c t u r e e s t r 6 a l i s 6 e a p r d s 5 o u 1 0 m i n u t e s d e c o n t a c t t o x i -

E n c e q u i c o n c e r n e l e s d d r i v d s m i n 6 r a u x I a b i o l u m i n e s c e n c e n ' a 6 t 6 m e s u r d e q u ' a p r 6 s 1 0 m i n u t e s e n r a i s o n d e I a r 6 p o n s e m o i n s r a p i d e d e s b a c t 6 r i e s d c e s c o m p o s 6 s . P a r c o n t r e l e s e s s a i s o n t 6 t 6 r 6 a 1 i s 6 s d d e u x t e m p 6 r a t u r e s d i f f 6 r e n t e s , 1 5 " C e t 2 O o C . L e s r 6 s u f t a t s o b t e n u s ( t a b l e a u 2 ) m o n t r e n t I a s e n s i b i l - i t € 6 l e v 6 e d e s b a c t 6 r i e s v i s d v i s d e s s e l s d e p l o m b .

Tableau 2

CE50 (en MG/L) de dittez,s conposAs mindxanm 4ualwies

10 I,lN

2 0 0

Nombre -- Ecart-

sovenne c l ' e s s a l s - t y p e

5 t 2 , 9 3 , 5

4 3 3 1 3

4 0 , 5 8 o , o 7

1 | , 2 2 o , 2 9

3 0 , 0 8 0 , 0 3

d L'aide ds,L test dtinhibition de Lusnt'nescence bactdv'ienne

Temps de contact Tmperature

cd++ (nitrate) ga6+ lgishromte de

potass iw) C u * t ( s u t f a t e ) ps3+ lperchlorure) z n ( s u l f a t e ) P b + + ( n i t r a t e )

S i I ' o n e x c e p t e I e c a s d u c h r o m e h e x a v a l e n t , l e s C E 5 O s o n t d e l ' o r d r e d e 1 , 5 i 3 f o i s p l u s b a s s e s a 2 0 o C , c e q u i t r a d u i t I a s e n s i b i l i t 6 p l u s

importante du test a cette temp6rature, du moins pour ce type de subs-

^ , , r : r - t - - i ^ - ^ l ^

y u r r D q y r D r c * = d 6 r i v 6 s m i n 6 r a u x o u o r g a n i q u e s , I e s v a l e u r s d e s c o e f f i c i e n t s d e v a r i a t i o n q u i a f f e c t e n t 1 a m o y e n n e d e s C E 5 O d 6 t e r m j - n 6 e a p a r t i r d e 3 e s s a i s , o s c i l l e n t e n t r e 3 , 4 % e t 3 7 , 5 Z -

A I a s u i t e d e c e s e s s a i s r e l a t i f s i d e s s u b s t a n c e s c h i m i q u e s p u r e s

e n s o l u t i o n , d e s e f f l u e n t s u r b a i n s e t i n d u s t r i e l s o n t C t 6 t e s t 6 s .

L ' i n t 6 r 6 t p r 6 s e n t 6 p a r l e t e s t d ' i n h i b i t i o n d e b i o l u m i n e s c e n c e p o u r 6 v a l u e r I e t a u x d e p o l l u t i o n d e s e a u x d t u n e s t a t i o n d ' 6 p u r a t i o n e t I ' e f - f i c a c i t 6 d e c e t t e 6 p u r a t i o n , a 6 t 6 6 t u d i 6 s u r d e s p r d l C v e m e n t s e f f e c t u 6 s i I a s t a t i o n d e M e t z . D a n s c e t t e s t a t i o n b i o l o g i q u e ' f e s e f f l u e n t s u r - b a i n s a p r d s u n p r 6 t r a i t e m e n t ( t heure) passent s u c c e s s i v e m e n t d . a n s u n d 6 c a n t e u r p r i m a i r e ( 2 h e u r e s ) , u n a 6 r a t e u r ( 2 h e u r e s ) p u i s u n d e u x i d r n e d 6 c a n t e u r ( 2 heures) a v a n t d e q u i t t e r l a s t a t i o n . L ' 6 p u r a t i o n q u i s ' e f - f e c t u e i . c e s d i f f 6 r e n t s n i v e a u x a 6 t 6 c o n t r 6 l 6 e d I ' a i d e d e c e t e s t b a c - t 6 r i e n . L o r s d r e s s a i s p r 6 l j . m i n a i r e s , d e u x p r 6 l d v e m e n t s p o n c t u e l s o n t 6 t 6 r 6 a l - i s 6 s e n m a t i n 6 e d q u e l q u e s j o u r s d ' i n t e r v a l l e a u x p o i n t s s u i v a n t s : - entr6e de la station

- sortie d 6 c a n t e u r p r i m a i r e - sortie a S r a t e u r

- sortie d 6 c a n t e u r s e c o n d a i r e

Nombre .. Ecart-

sovenne d ' e s s a r s - t y p e

4 2 3 t 6 3 . 9

6 2 A , 5 7 , 4

4 0 , 8 0 o , o 8

3 t , 7 7 0 , 0 6

q 1 ? n o

228 Sciences de Lteau Z

C e s p r 6 l d v e m e n t s 1 e t 2 ( f i g u r e 2 ) o n t 6 t 6 t e s t 6 s a 1 5 o C a p r d s 5 m i -

nutes de contact, Ies premiers essais ayant montr6 que les rEsul_tats de

t o x i c i t 6 6 t a i e n t i d e n t i q u e s a p r d s 1 0 m i n u t e s , c e q u i s ' e x p l i q u e p a r l r e f f e t t o x i q u e t r e s r a p i d e d e c e t y p e d ' e f f l u e n t s s u r l e s b a c t 6 r i e s .

* J r O t ,

A \ !t,

1 O H E U R E S 1 0 H - 1 2 H - 1 6 H -

s z o H -

N U I T i n i 6 o r i 8 H -

E N T R E E s o R T t E D E C A N T E U R

I

S O R T I E S O R T I E

A E R A T E U R D E C A N T E U R t l

N I V E A U D E P R E L E V E M E N T

Figtne 2

Pottz,centage (A %) de dtninution d.e Lunrinescence produit paz, Les

eau:x prALeudes d diffdz,ents niueatur de La station dtdput,ation

c o n n e c e s e f f r u e n t s u n e f o i s d i r u 6 s n ' e n t r a i n e n t q u ' u n e f a i b l e v a r i a - t i o n d e r a b i o l - u m i n e s c e n c e b a c t 6 r i e n n e , i r s o n t 6 t 6 t e s t € s a f , 6 t a t b r u t

et leur toxicit6 a 6t6 6vafu6e en exprimant ra diminution de f intensit6

I u m i n e u s e p a r l a mesure du coefficient A ? .

L e s r 6 s u l t a t s o b t e n u s ( f i g u r e 2 ) m o n t r e n t q u e l e d 6 c a n t e u r p r i m a i r e , p r i n c i p a l e m e n t , e t I ' a 6 r a t e u r p a r t i c i p e n t a c t i v e m e n t d r a d 6 t o x i c a t i o n d e s e f f l u e n t s . L e p o u r c e n t a g e d e d i m i n u t i o n d e t o x i c i t 6 d e s e a u x p a r r a p p o r t a c e l - u i d e s e f f l u e n t s a l - ' e n t r 6 e d e l a s t a t i o n e s t r e s p e c t i v e m e n t d e 2 5 , 8 ? e t 7 8 ? pour 1es pr6ldvements 1 e t 2 e n s o r t i e d u d 6 c a n t e u r p r i m a i r e , e t d 6 p a s s e 9 1 B , d a n s f e s d e u x c a s , e n s o r t i e d t a 6 r a t e u r ( t a - b l e a u n o 3 ) .

c o m p t e - t e n u d e c e s r 6 s u r t a t s i n t d r e s s a n t s , n o u s a v o n s t e n t 6 d ' a f f i n e r c e t t e 6 t u d e e t d ' 6 t a b 1 i r u n e c o r r 6 l a t i o n 6 v e n t u e l l e e n t r e r a r 6 p o n s e d u t e s t b a c t 6 r i e n e t I e d e g r 6 d e p o l l u t i o n d e c e s e a u x .

- A cet effet p l u s i e u r s p r 6 l d v e m e n t s p o n c t u e l s a h e u r e p r 6 c i s e ( 1 2 h , 1 6 h , 2 0 h , I h ) et un pr6ldvement i n t 6 g r 6 s u r l a n u i t o n t 6 t 6 r 6 a l - i s 6 s

aux m6mes points que pr6c6derunent.

7

Inhibition de Luwinescence bactdrienne : test de toxicitti

- L a t o x i c i t 6 d e s d i f f 6 r e n t s 6 c h a n t i l l o n s , m e s u r 6 e a 1 5 " C a p r d s u n c o n t a c t d . e 5 m n , e s t r a p p o r t 6 e s u r l e t a b f e a u n o 3 . C o r n m e d a n s I e c a s d e s e s s a i s p r 6 l i m i n a i r e s o n c o n s t a t e a p r d s I e p r e m i e r d 6 c a n t e u r u n e

chute importante de la toxicit6, chute de 70 % en moyenne par rapport

3 . s a v a l e u r i n i t i a l e . L a t o x i c i t d e s t c o m p r i s e e n t T e 0 e t 3 , 8 % d a n s 1 ' a 6 r a t e u r s a u f d a n s l e c a s d u p r 6 l 6 v e m e n t ( 3 . E ) . P a r a i l l e u r s , i I a p - p a r a i t q u e c ' e s t e n t r e I h e t 1 5 h q u e l e s e a u x s e m o n t r e n t l e s p l u s n o c l - v e s .

Tableau 3

Pourcentage de dinrtrut"Jon de La toicitd des eaun aur dt|farents "niueaur

de La station dtdpuration par rdpport d celLe des eat'm dtentY:de

L E n t r d e ' L n , 100 % A E

lliveau de

p r 6 l d v e m e n t

1 0 H 1 0 H 1 2 H 1 6 H 2 0 H lnt69rE

n u i t

6 H

S o r t r e decanteur I

Sortre d6canteur

A E-ASDII AE

- x t u u

I I

1 0 0 A E-ASD1

- x AE

1 2 3 A 3 B 3 C 3 D 3 E

t q c

'7a B 4 a 2 , 6 3 1 , 8 1 0 0

5 2

1 0 0 9 1 , 6 8 9

7 9 , ' l 1 0 0

6 6

1 0 0

1 0 0 1 0 0 3 8 1 0 0 8 6

L e s r 6 s u l t a t s d r a n a l y s e d e s e a u x a y a n t t r a n s i t 6 l a s t a t i o n p e n d a n t c e s 2 4 h e u r e s n o u s o n t 6 t 6 f o u r n i s p a r I e s e r v i c e a n a l y t i q u e d e l a s t a - t i o n ( f i g u r e 3 ) . C e s r 6 s u l t a t s c o r r e s p o n d e n t d d r a u t r e s p r 6 l d v e m e n t s e f f e c t u 6 s p o n c t u e l l e m e n t a u x m 6 m e h e u r e s . S i l ' o n c o m p a r e l e s v a r i a t i o n s d e l a D C O e t d e s M E S E c e l l e s d e I a t o x i c i t 6 s w P h o t o b a e t e r i u m p h o s - p h o r , e u m , o n v o i t q u ' i I e x i s t e u n c e r t a i n p a r a l f 6 1 i s m e d a n s I ' 6 v o l u t i o n d e c e s p a r a m e t r e s a u c o u r s d u t r a n s i t , s e m a n i f e s t a n t p a r u n e r 6 d u c t j - o n i m p o r t a n t e d e l a n o c i v i t 6 r e s p e c t i v e d e c e s e f f l u e n t s a p r e s I e p r e m i e r d 6 c a n t e u r . L a p 6 r i o d e o r l l e s e a u x d ' e n t r 6 e s o n t I e p l u s c h a r g d e s , c o i n - c i d e a p p r o x i m a t i v e m e n t a v e c c e l l e o r l f a t o x i c i t 6 s u r l e s b a c t 6 r i e s e s t l a p l u s 6 1 e v 6 e ( 8 - 1 5 h ) .

L e s e s s a i s r 6 a l i s 6 s e n s u i t e s u r - l e s e f f l u e n t s i n d u s t r i e - Z s p r o v e n a n t d ' u n s i t e d e p r o d u c t i o n d e c o f o r a n t s , m o n t r e n t q u e c e s r e j e t s m a n i f e s -

tent une toxicit6 tr6s 61ev6s sur Photobacterium phosphr:reum, beaucoup

p l u s i m p o r t a n t e q u e c e l l e d e s e f f l u e n t s u r b a i n s ( t a b l e a u n o 4 ) . L e C E 5 0 m o y e n n e s v a r i e n t e n t r e 0 , 0 7 % e t 3 , 1 4 % . L e s c o e f f i c i e n t s d . e v a r i a t i o n ,

c a l c u l 6 s p o u r l e s e s s a i s a y a n t 6 t 6 r 6 p 6 t 6 s t r o i s f o i s a u m o i n s , p r 6 s e n t e n t d e s v a l e u r s c o m p r i s e s e n t r e 5 e t 4 5 e " , s o i t l 6 g d r e m e n t s u p 6 r i e u r e s d c e l 1 e s r e l e v 6 e s p r 6 c 6 d e m m e n t d a n s I e c a s d e s s u b s t a n c e s c h i m i q u e s p u r e s .

2 3 4 Sciences de Lteau 2, no2

M E S ( m g . l ' 1 1

300 200

e n t r 6 e

* - * s o r t i e d d c a r r t e u r I

a-a sortie

1 2 1 6 2 0 2 prdldvernerrt

heure de prdliventent

1 2 1 6 2 0 2 I heure de pr6lEvernerlt

Figuz'e 3

Conparaison de Ltdoolution de La toricit,i des efiluents uv'bains (erpr+mde en L %) a,sec ceLle de La DCO et des MES

0 0

0

fnhibition de Luninescence bactdz-Lenne Lest de torLcitd 2 3 1

TabLeau CE50 (en uoLune), dcart-type et des effluenl;s industt''Lels testds

de Lutnines cence bactdr+enne 4

coefficients de oartation auec Le test dtinhibition d 75o et apz,Ds 10 rwt

P16l-Cvements n o

Nombre de r6p6titions

C E 5 O m o y e n n e e n g C o e f f i c i e n t d e + 5 . e r t - f w h a v a r i a t i o n e n t

I ] I I I I

I V

V I I l r T t t

I X

x

C o e f f i c i e n t d e

0 , 1 3 + o , o 1 * 1 2 ? + 3 , L 4 x O , 4 7 o . 2 3 t o , o 3 0 , 1 6 r 0 , 0 7 0 . 3 1 r o , 0 2 o t 6 5 r o t 7 4

o ? q + *

o t 3 9 r . o , 1 7 moyen

2 2 2

3 5

3 2

variation

1 4 , 2 4 4 , 7 4 , 4 2 1 . 8

2 4 t 2

* n a e r l ' 6 n a r t - t v n e n i d e c o e f f i c i e n t d e v a r i a t i o n : n < 3

A f i n d e v o i r d a n s q u e l l e m e s u r e c e t t e v a r i a b i l i t d p o u v a i t 6 t r e d u e d I ' a c t i v i t 6 d u r 6 a c t i f b a c t 6 r i - e n , n o u s a v o n s d 6 t a i 1 1 6 s u r I e t a b l - e a u n o 5 f e s r 6 s u l t a t s d e s C E 5 O d 6 t e r m i n 6 e s d I ' a i d e d e d e u x s u s p e n s i o n s b a c t S - r i e n n e s d i f f 6 r e n t e s , A e t B . L a l e c t u r e d e c e t a b l e a u m o n t r e q u e s i I , u t i l i s a t i o n d e c e s d e u x r 6 a c t i f s s e m b l e 6 t r e i . 1 ' o r i g i n e d e I a v a r i a - b i l i t 6 i m p o r t a n t e e n r e g i s t r 6 e ( 4 5 % ) entre l e s e s s a i s V I e t X ' c e s m € m e s r S a c t i f s d o n n e n t p a r c o n t r e d e s r 6 s u l - t a t s c o n c o r d a n t s d a n s I e c a s d e s p r 6 l d v e m e n t s r V , V e t V I I . I f e s t d i f f i c i l e , d a n s c e s c o n d i t i o n s , d ' i m - p u t e r d l a s e u l e s e n s i b i l i t 6 d u r 6 a c t i f b a c t 6 r i e n , l a v a r j - a t i o n d e s r 6 s u l t a t s q u i p e u t 6 t r e d u e 6 g a l e m e n t a u x e r r e u r s d ' i m p r 6 c i s i o n q u i s r a t t a c h e n t d , l a p r d p a r a t i o n d e s s o l u t i o n s d i l u 6 e s n 6 c e s s a i r e s d l a d 6 t e r m i n a t i o n d e s C 8 5 0 .

I f n o u s a p a r u i n t 6 r e s s a n t d e c o m p a r e r l e s r 6 s u l t a t s d e c e t e s t i

ceux d.u test daphnie qui a 6t6 effectu6 simultan6ment sur les pr6l6ve-

M E N t ' S . L I I A X .

C e s r 6 s u l t a t s f i g u r e n t s u r l e t a b l e a u n o 6 q u i s o u l i g n e I a s e n s i b i l i t 6 6 e 4 1 f o i s p l u s 6 l e v 6 e d u t e s t d ' i n h i b i t i o n d e b i o l u n i n e s c e n c e p a r r a p - p o r t a u t e s t d a p h n i e p o u r c e t y p e d e r e j e t s .

D r a u t r e p a r t l a d i f f 6 r e n c e d e t o x i c i t € e x i s t a n t e n t r e l e s s o l u t i o n s p r 6 s e n t a n t l a n o c i v i t 6 l a p l u s 6 1 e v 6 e e t l a p l u s f a i b l e e s t d o n n S e p a r

Ie test bactdrien avec un 6cart plus important : Ia fourchette de r6ponses

d . e c e t e s t 6 t a n t d a n s u n r a p p o r t d e 2 0 ,

+ + = 1 9 , 6 ) . I o t = q u e c e l l e d u

U , I P

t e s t d a p h n i e e s t d a n s u n r a p p o r t d e 7

, ! = O , A l l .

J

232 Sciences de Lteau 2, no2

Tableau 5

Vaviabill:td des CES7 obtenues en fonction d.e deur Lots de rdactif bactdy,ien utilis/

Tableau 6

Tort'citd cornpctrde du test dnphnie et du test dtinhibition de Lwntnescence pou.I, diffdrents effluents industriels

Pr€levsent no Daphnie

c r 5 o - 2 4 h " o . " "

1 0 t 2 0 4 5 , 6 5 r 3 8 4 , 2 5 Z

L 2 * 1 0 r 1 5 , 5 0 I

Bact6rie c E - ^ . ^

) U - I U M I N U E C S

1 , 2 3 z 3 , r 4 * o , 2 3 z 0 , 1 6 r 0 , 3 1 r 0 . 6 5 I o , ' 1 2 \ 0 , 3 8 I

T i Y

IV v VI

\/II V I I I IX

x

Rapport

crso -o

f,u -b

8 , 1 6 , 4 2 4 , 6 1 8 ,8

1 a 1

1 8 , 5

t 2 0

4 0 , 8 Pr6levement no E s s a i n o F I a c o n

r e a c t i f "uto :l cEso moyenne

cEc^ movenne par rracon reacEar

V I I

x

1 2 3

J

a

8 9 1 0 1 1 L 2

1 3 L 4 1 5

L 7 1 8 t 9 2 0

B

B

J , z t

2 , 7 O

o , 2 2

3 , 3 0

, o q

o , 2 4 o , 2 L

0 . 1 1

o , 2 4

0 , 3 1

0 , 3 1

o , 2 3

o , o 9 I

0 , 1 0 i

l o , 1 4 I I

o , z z

o , 2 s l I

o , s : I

o , r o !

o , : o

o , : z ) I

0 , 1 6

0 , 3 1

o ' 2 3

| o , 2 4 o , 2 5

\ o ' 5 5

I o , 5 4

o , s : I

7

Inhibition de Lwinescence bactdriervte : test de toricift

P a r a i l l e u r s , s i I ' o n c l a s s e p a r o r d r e d e t o x i c i t 6 d 6 c r o i s s a n t e l e s d i f f 6 r e n t s 6 c h a n t i l l o n s , o n o b t i e n t f e c l a s s e m e n t s u i v a n t :

- avec Ie test d'inhibition d e l u m i n e s c e n c e b a c t e r i e n n e : V I > V > V I I > X > V I I I > I X > I I I > I V

- avec Ie test daphnie :

V I > V I I > V > I I I e t I X > V I I I > X > I V

O n c o n s t a t e q u e 1 ' o r d r e d e c l a s s e m e n t d e c e s 6 c h a n t i l l o n s e s t v o i s i n d a n s l e s d e u x c a s , s i I ' o n e x c e p t e l e s p r 6 l d v e m e n t s I I I e t x .

D r c u s s t o t r t E T C o N c L U s r o N

D a n s f a p r e m i d r e p a r t i e d e c e t t e 6 t u d e , n o u s a v o n s 6 v a l u 6 I a t o x i c i t 6

aigud d'une s6rie de compos6s organiques et minEraux sur PhotobactdrLun

phosphoz,eum. Certains auteurs ayant utilis6 fa m6me technique Pour tes-

t e r f ' u n e o u 1 ' a u t r e d e c e s s u b s t a n c e s , i l 6 t a i t i n t e r e s s a n t d e c o n f r o n - t e r e n t r e e u x t o u s c e s r 6 s u l t a t s . L e t a b l e a u n o 7 m o n t r e q u e l e s v a l e u r s d e c E 5 0 s o n t v o i s i n e s d a n s 1 a p l u p a r t d e s c a s , d l ' e x c e p t i o n d u t o l u 6 n e p o u r l e q u e l S A M A K e t N O I S E U X ( t g B O ) t r o u v e n t u n e C E 5 0 4 f o i s p l u s f a i - b l e , e t d . u c u i v r e d o n t I a C E 5 0 d 6 t e r m i n 6 e p a r B U L I C H ( 1 9 7 9 ) e s t 1 0 f o i s p . l u s 6 1 e v 6 e . I I f a u t s o u l j - g n e r q u e , f a u t e d r a v o i r r e n o u v e l 6 l e s e s s a i s , c e s a u t e u r s n e f o n t p a s 6 t a t d e s c o e f f i c i e n t s d e v a r i a t i o n , s a u f R O B R A

( 1 9 7 9 ) q u i t r o u v e p o u r Ie ph6nol et le cadmium un coefficient d e v a r i a - t i o n d e 1 5 e t 4 B r e s p e c t i v e m e n t . C e s v a l e u r s 6 t a b l - i e s d p a r t i r d ' u n n o m b r e d ' e s s a i a s s e z 6 l e v 6 ( 3 ( n ( 9 ) s o n t p l u s f a i b l e s q u e c e l 1 e s t r o u v 6 e s d a n s n o t r e 6 t u d e o r l l e s c o e f f i c i e n t s d e v a r i a t i o n 6 t a i e n t d e 2 3 , 5 z p o u r 1 e p h 6 n o l e t d e 1 6 , 5 ? p o u r l e c a d m i u m . A c e t 6 g a r d , B U L I C H e t a L ( 7 9 A O ) p r 6 c i s e n t q u ' e n f a i s a n t t e s t e r l e m d m e c o m p o s 6 , I e l a u r y l - s u l f a t e d e s o d i u m , p a r t r o i s t e c h n i c i e n s d i f f 6 r e n t s , d I ' a i d e d e p l u - s i e u r s l o t s d e r 6 a c t i f s , i 1 s o b t i e n n e n t s u r u n t o t a l d e 8 1 d 6 t e r m i n a t i o n s u n c o e f f i c i e n t d e v a r i a t i o n d e 7 8 , 2 z .

A f i n d e s i t u e r I a s e n s i b i l i t 6 d u t e s t d ' i n h i b i t i o n d e l u m i n e s c e n c e b a c t 6 r i e n n e p a r r a p p o r t 5 c e l l e d u t e s t d a p h n i e , f a t o x i c i t 6 a i g u 6 d e q u e l q u e s e f f l u e n t s i n d u s t r i e l s a 6 t 6 6 v a l u 6 e d I ' a i d e d e c e s d e u x m 6 - t h o d e s . L e s r 6 s u l t a t s o n t m o n t r 6 q u e l e t e s t b a s 6 s u r l a m e s u r e d e I ' i n - h j - b i t i o n d e l u m i n e s c e n c e e s t p l u s s e n s i b l e q u e l e t e s t d a p h n i e p o u r d e s r e j e t s c h a r g 6 s e n c o l o r a n t s d e s y n t h d s e o r g a n i q u e .

Nous avons 6galement compar6 les cE 5O d6termin6es pr6c6denunent sur

l e s c o m p o s 6 s o r g a n i q u e s e t m i n 6 r a u x d c e 1 l e s d e s C I 5 0 2 4 h e u r e s s u r l e s

daphnies et des cL 50 24 heures sur fe Bt'achydattio rerLo, 6va1u6s par

d ' a u t r e s a u t e u r s ( F R E A R e t B O Y D , 1 9 6 7 ; I R C H A , 1 9 8 1 ) . I I a p p a r a i t E l a l e c t u r e d e s t a b l e a u x I e t 9 q u e l a t o x i c i t 6 d e s d 6 r i v 6 s 6 t u d i 6 s e s t d u

m6me ordre de grandeur sur ces trois especes sauf dans fe cas du cadmium

e t d . u c h r o m e o r l l e t e s t b a c t 6 r i e n e s t m o i n s s e n s i b l e . P a r c o n t r e , c e t e s t e s t n e t t e m e n t p l - u s i n t e r e s s a n t d a n s I e c a s d u z i n c o u d e d 6 r i v 6 s o r g a n i q u e s c o m m e I ' 6 t h y l b e n z d n e .

Tableau 7

Compara.Lson de Cisa (en MG/L) obtenue d. L,aide du test dltnhibition de LwrLnescence par dr.ffdrents auteurs

Temps de contact

B e n z C n e ToluCne

Ph6nol 2 ,4-Dinitrophdnol

cyclohexanol Cyclohexanone

+i cd++

F E R A R D e, d l

2 1 8 . i 3 3 4 r 8 2 6 , 6 r 5 , 7 8 3 x 2 9

2 5 i 1 1

IO MN

3 , 7 O , 9 0 , 8 + 0 , 0 8

SAMAK et N O I S E U X

LEBSAK e t a L

CURTIS e t a L

DUTKA ET KWAN

BULICH e t a L

15 MN 15 MN 5 M N

2 5 8 0

4 8

4 2 4 0 . 2

1 5 , B 1 1 5

1 R 8 , 0

4 4 , 2 r I , 8

N h

cl O

$

oo

o s

s

N

s

Inhibition de Lwrtnescence bactdv,ienne : test de torLcitd

?ableau B

Sensibilitd conrparde du test d'inhtbition de Luminescence et du test daphnie pow diffdxents conposds oz'ganiques

Daphnies c r 5 o 2 4 H (en MGIL)

Benzene ToIuCne Ethylbenzene Ph6nol Dichloroph6nol Thirm DMSO

Compos€

7 3

2 r a

3 4 4 , 5 o , 4 5 7 7

8 4 ( A ) ( c )

I ( c )

7 2 ( c )

3 6 ( A ) ( c ) 3 , 4 ( B ) 0 , 1 8 s ( B ) ( c ) 1 9 . 2 5 x t o ' ( c )

( A l F R E A R D . E . H . e t B O Y D J . E .

I B J L a b o r a t o i r e d e T o x i c o l o g i e , C . S . E . , l l E T 7 ( C ) I . R . C . H . A .

Tableau I

Senszbilitd cornpatde de Photobacterium phosphoreum,

Daphnia magna et Brachydanio r^erio pou:t1 quelques ddtiuds nrLndratr:r

Cr6 +

Bacterie c E 5 o - z o " - t o

o n s

(en MG,/L)

Daphnie ct5o-24

, (en MGIL)

o , o ' 7 o , 2 4

o , o 4 0 . 1 1

Brachydanio rerio

"so-rn "

0 , 7 4 ( C ) 1 3 6 ( B )

( c )

6 9 ( c )

Cu

I B ) L a b o r a t o i r e d e T o x i c o l o g i e , C . S . E . , 1 4 E T Z

t c l r . R . c . H . A .

Bact6rie c E 5 O l 5 o - 5 M N

( en MG,/r )

236 Scienees de Lteau 2, no2

D r u n p o i n t d e v u e p r a t i q u e , c e t e s t b a c t 6 r i e n p r 6 s e n t e u n e s u p 6 r i o - r i t 6 i n c o n t e s t a b l - e p a r r a p p o r t a u x t e s t s d a p h n i e e t p o J - s s o n , d u f a i t d e s a r a p i d i t 6 e t d e s a f a c i l i t 6 d ' e x 6 c u t i o n . E n e f f e t , i f f a u t m o i n s d , u n e h e u r e p o u r d 6 t e r m i n e r I a C E 5 O d ' u n c o m p o s 6 c h i m i q u e o u d ' u n e f f l u e n t , c e t e m p s p r e n a n t e n c o m p t e , d ' u n e p a r t 1 a p r 6 p a r a t i o n d u r 6 a c t i f b a c - t 6 r i e n , e t d r a u t r e p a r t c e l l e d e s d i l u t i o n s a t e s t e r d o n t l a v a l _ e u r e s t 6 t a b l - i e e n f o n c t i o n d u r 6 s u ] t a t d e s e s s a i s c r 6 l i m i n a i r e s .

C e s a v a n t a g e s g a r a n t i s s e n t f a p r 6 c i s i o n d e s r 6 s u l t a t s p u i s q u , i l e s t f a c i f e d . e r e n o u v e l e r f e s t e s t s e t d e d 6 t e r m i n e r u n e C E 5 O m o y e n n e a f ' a i d e d e p l u s i e u r s e s s a i s , m 6 m e d . a n s I e c a d r e d ' e s s a i s d ' 6 c o t o x i c i t 6 e n s 6 r i e .

S i c e t t e r 6 p 6 t i t i o n d e s e s s a i s e s t p o s s i b l e a v e c 1 a d a p h n i e o u l e p o i s s o n l o r s q u ' i 1 s r a g l t d , 6 t u d e s o c c a s i o n n e f l e s , c e l f e - c i d e v i e n t i r - r 6 a l i s a b 1 e , p a r c o n t r e , d a n s I e c a s d e t e s t s e n s 6 r i e o i 1 ' o n e s t l i m i t 6 p a r l a q u a n t i t 6 d e m a t 6 r i e l b i o l o g i q u e d i s p o n i b l e e t p a r l a c h a r g e d e 1 ' e x p 6 r i n e n t a t i o n d u p o i n t d e w u e d u r 6 e , d l s p o n i b i t i t 6 d u p e r s o n n e f e t p a r v o i e d e cons6quence prix d e r e v i e n t .

A t i t r e d . ' e x e m p l e , u n 6 c h a n t i l - f o n d e b a c t 6 r i e s l y o p h i l i s 6 e s , u n e f o i s l a s u s p e n s i o n r e c o n s t i t u 6 e p a r 1 m l - d ' e a u b i d i s t i 1 l 6 e , p e r m e t d e r 6 a 1 j . s e r s a n s p r o b l d m e s , d o u z e e s s a i s , s o i t s i x t e s t s p r 6 l i m i n a i r e s e t s i x t e s t s d 6 f i n i t i f s o u e n c o r e d . e t e s t e r s i x s u b s t a n c e s c h i m i q u e s o u s i x e f f l u e n t s e n u n e d e m i j o u r n 6 e . C o m p t e - t e n u d u p r i x d e r e v i e n t d ' u n d c h a n t i l l o n d e r 6 a c t i f b a c t 6 r i e n ( e n v i r o n 2 5 0 E ) e t d e l a t a r i f i c a t i o n d ' u n t e s t d a p h n i e

( e n v i r o n 7 5 0 F ) o n v o i t q u e 1 e c o r f t d e c e t e s t d ' i n h i b i t j . o n d e t u m i n e s - c e n c e b a c t 6 r i e n n e e s t 1 8 f o i s p l u s f a i b f e q u e l e p r 6 c 6 d e n t . I l f a u t p r 6 - c i s e r t o u t e f o i s q u e c e t t e r e m a r q u e n e v a u t q u e s i l ' o n d i s p o s e d ' u n p h o - t o m e t r e t h e r m o s t a t 6 p e r m e t t a n t d e f a i r e f e s m e s u r e s d e l u r n i n e s c e n c e .

C e t r a v a i l - n e c o n s t i t u e q u ' u n e 6 t u d e p r 6 l i m i _ n a i r e d e v a l i d i t 6 d t u n t e s t b a s 6 s u r 1 a m e s u r e d e I ' i n h i b i t i o n d e l - u m i n e s c e n c e b a c t 6 r i e n n e e t n o u s sommes conscients d u c h a m p d ' i n v e s t i g a t i o n s q u i r e s t e i . r 6 a l i s e r p o u r q u e c e t e s t p u i s s e f i g u r e r p a r m i l a b a t t e r i e d e s e s s a i s d t 6 c o t o x i - c i - t 6 s t a n d a r d i s 6 s .

M G m e s i n o t r e c o n n a i s s a n c e d . e s p e r f o r m a n c e s d e c e t e s t e s t e n c o r e i n c o m p l € t e e t n o t r e e x p 6 r i e n c e e n c o r e t r o p r 6 c e n t e , i I n o u s e s t a p p a r u i n d i s c u t a b l e q u e c e t e s t b a c t 6 r i e n p r 6 s e n t e d e s a v a n t a g e s t r d s a p p r 6 - c i a b l e s p a r r a p p o r t a u x t e s t s d a p h n i e e t p o i s s o n - rapidit6, f a c i l j _ t 6 d ' e x 6 c u t i o n , c o 0 t r 6 d u i t - et ce pour une sensibilit6 c o m p a r a b l e .

L e s r 6 s u f t a t s e n c o u r a g e a n t s o b t e n u s a u n i v e a u d e s t a t i o n s d ' 6 p u r a t i o n d e s e a u x u s 6 e s u r b a i n e s e t s u r d e s r e j e t s i n d u s t r i e l s p e r m e t t e n t d e p r 6 -

juger favorablement de I'int6r6t de ce test dans Ie cad.re du contr6le

d e l a p o l l u t i o n d e s e a u x q u , e 1 l e s o i t d , o r i g i n e d o m e s t i q u e o u i n d u s - t r i e 1 l e . D a n s c e c o n t e x t e , d e s 6 t u d e s c o m p f 6 m e n t a i r e s s o n t n 6 c e s s a i r e s a f i n d e d r e s s e r u n e c a r t o g r a p h i e e x a c t e d e t a s e n s i b i f i t 6 d e c e s b a c - t 6 r i e s l u m i n e s c e n t e s , P h o t o b a c t e r i L m p h o s p h o r e u m , e t d ' u t i l i s e r j u d i - c i e u - s e m e n t c e t e s t d a n s l e s 6 t u d e s d e s c r e e n i n q d e t o x i c i _ t 6 l i 6 e d 1 a p o l l u -

f i n n h r r ^ - i n , r ^

7

Inhtbit'i-on de Luminescence bactdrienne : test de todeitd

Rrr4Enc r EMENTS

N o u s t e n o n s d r e m e r c i e r M o n s i e u r I e

tion de Ia Viffe de Metz de nous avoir

n 6 c e s s a i r e s a c e t t e 6 t u d e , e t d e n o u s a n a l v s e s f e s c o n c e r n a n t .

D i r e c t e u r d e I a S t a t i o n d r E p u r a - p r o c u r 6 l - e s 6 c h a n t i l - ] o n s d r e a u x

avoir communiqu6 Ie r6sultat des

R E r f n e u c e s B I B L I o G R A P H r o u E S

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