Typage par RAPD de souches de Trichinella

(1)

HAL Id: hal-00902267

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Submitted on 1 Jan 1994

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Typage par RAPD de souches de Trichinella

J Dupouy-Camet, F Robert, C Soulé

To cite this version:

(2)

D’autre

_part,

la

_présence

de différences

interspécifiques

touchant des sites de res-triction d’endonucléases

_paraît

_prometteur

pour

l’application

en

_{diagnostic (Gasser}

et

_al,

1994).

Toutefois,

l’absence de variation

intraspécifique

détectée semble

_indiquer

que cette

_région

de l’ADN

_ribosomique

pré-sente _{peu d’intérêt pour déceler}la

résis-tance aux

_{anthelminthiques.}

Références

Gasser RB, Chilton NB, Hoste H, Beveridge I (1993) Rapid sequencing of rDNA from _singleworms and eggs of parasitic helminths. Nucleic Acids Res 21, 1 , 2525-2526

Gasser RB, Chilton NB, Hoste H, Stevenson LA ₍₁₉₉₄₎

Species identification of _{trichostrongyle}nematodes

by PCR-linked RFLP. lnt J Parasitoi (sous presse)

Hoste H, Gasser RB, Chilton NB, Mallet S, Beveridge 1

(1993) Lack of intraspecific variation in the second internai transcribed spacer (ITS-2) of

Trichostron-gylus colubriformis ribosomal DNA. lnt J Parasitoi

23, 1069-1071

Typage

par RAPD de souches de

Trichi-nella. J J

_{Dupouy-Camet 1}

_Dupouy-Camet

₁

,

F Robert F Robert

1 ,

CC

Soulé

2 ! ! LaDoratoire ae _{paraslrologle,}owU

Cochin,

27,

rue du

_{Fbg-Saint-Jacques,}

75014

Paris;

2 Laboratoire

central de recherches

_{vétérinaires, CNEVA,}

94703

Maisons-Alfort,

France)

Le

_typage

des isolats de Trichinella _repose actuellement sur

_l’analyse

de

_plusieurs

sys-tèmes

_{isoenzymatiques.}

Ces

_techniques

sont

_longues

et nécessitent de

_grandes

quantités

de

_protéines,

mais elles ont

_permis

de définir récemment 5

_espèces

dans le

genre Trichinella

(T spiralis,

T

nelsoni,

T

pseudospiralis,

T nativa,

T

_britovi)

et 3

_types

isoenzymatiques (Trichinella

T5,

T6 et

_T8)

n’ayant

pas rang

d’espèce (Pozio

et

al,

1992).

Les

_techniques

_d’analyses

géno-miques

conventionnelles des isolats soit

nécessitent

_l’emploi

de

_grandes

_quantités

d’ADN et de sondes

_marquées

_(restriction

fragment length polymorphism),

soit ne sont

pas suffisamment résolutives

(polymerase

chain

_reaction).

Nous

_rapportons

ici l’utilisation d’une

technique

dérivée de la

PCR,

le

_RAPD,

_pour étudier 18 souches de Trichinella

_typées

par

analyse isoenzymatique

comme

appar-tenant aux 5

_espèces

mentionnées

ci-des-sus et au

_type

T5. Les ADN ont été extraits par une

_technique

_classique

et

_amplifiés

après adaptation

de la

_technique

RAPD décrite

_{par Williams et al (1990).}

Avec

cer-tains

_{oligonucléotides, plusieurs fragments}

d’ADN

_amplifiés

ont été obtenus et ont

per-mis de définir des

_{profils caractéristiques}

d’espèce

(Dupouy-Camet

et al,

1993).

La

comparaison

des différents

_profils

a été

effectuée par le calcul des coefficients de

similitude.

Cette

_{technique rapide, simple,}

utilisant de très faibles

_quantités

d’ADN,

est donc

une méthode d’avenir pour le

_typage

des

isolats de Trichinella. Elle autorise

_l’analyse

génomique

de larves

_{uniques :}

cela a

_permis

de montrer la

_présence

de 2

_espèces

sym-patriques

sur le même hôte

_(Bandi

et

al,

1993)

et d’identifier sur une

_biopsie

mus-culaire

_l’agent

causal de la récente

_épidémie

de trichinellose

_{d’origine équine}

comme

étant

_{T spiralis}

_{(Dupouy-Camet}

et al,

1994).

Références

Bandi C, La Rosa G, Comincini S, Damiani G, Pozio E

(1993) Random amplified polymorphic DNA

tech-nique for the identification of Trichinella species. Parasitology 107, 419-424

Dupouy-Camet J, Robert F, Soulé C ₍₁₉₉₃₎RAPD in the genus Trichinella. Parasitol Today9, 463-464 Dupouy-Camet J, Soulé C, Ancelle T (1994) Recent

news on trichinellosis: another outbreak due to hor-semeat consumption in France in 1993. Parasite 1, 99-103

Pozio E, La Rosa G, Murrell KD, Llchtenfels JR ₍₁₉₉₂₎ Taxonomic revision of the genus Trichinella. J

Para-sitol78, 654-659

Williams JGK, Kubelik AR, Livak KJ, Rafalski JA, Tingery

SV (1990) DNA polymorphisms amplified by

arbi-trary primers are useful as _geneticmarkers. Nucleic Acids Res 18, 6531-6535

ADN satellites :

structure,

fonction et